Микробиология. 1. Химический состав бактериальной клетки
 Скачать 1.8 Mb.
|
|
негативные колонии бактериофага. Число этих пятен соответствует количеству фаговых частиц в засеянной смеси. Количество пятнообразующих единиц в 1 мл исходной суспензии бактериофага называется его титром. 7.Описать рост культуры на скошенном агаре ПЛАН ОПИСАНИЯ ХАРАКТЕРА РОСТА НА СКОШЕННОМ АГАРЕ 1) Однородность – однородная, неоднородная 2) Поверхность – гладкая (Шигеллы), шероховатая, складчатая, морщинистая (микобактерии), бугорчатая, «шагреневая кожа» (Коринебактерии) (поверхность кажется шероховатой); 3) Прозрачность - непрозрачная, прозрачная, полупрозрачная; 4) Цвет (пигмент) - бесцветная или пигментированная (белая, желтая, золотистая, красная), выделение пигмента в среду; бесцветные (Shigella), красные (Escherichia) слаборозовые (Salmonella, серовар typhi), голубовато-дымчатые (Proteus), в виде капельки ртути (Bordetella), молочно-белые (Francisella), перламутровые (Listeria), мутные (Klebsiella), черные, синие, желтые или зеленые (Actinomyces). 5) Консистенция - плотная, мягкая, врастающая в агар, слизистая, тягучая, крошащаяся. 8.Оценить результат фагоидентификации бактериальной культуры( метод Отто) изложить принцип метода ФАГОИДЕНТИФИКАЦИЯ БАКТЕРИЙ ПО МЕТОДУ ОТТО (МЕТОД СТЕКАЮЩЕЙ КАПЛИ) • На чашку с МПА шпателем выполняется посев суточной бульонной культуры бактерий • Затем наносят каплю известного бактериофага и, наклонив чашку, дают капле несколько растечься по поверхности питательной среды • Через сутки наблюдают полную задержку роста в месте внесения диагностического фага 9)Назвать состав среды Плоскирева, описать колонии на среде Плоскирева, объяснить механизмы работы среды. Среда Плоскирева (бактоагар Ж) : питательный агар, натриевые соли желчных кислот, лактоза, бриллиантовый зеленый, индикатор (нейтральный красный), йод, сода кальцинированная. Выпускается в сухом виде. Эта среда является не только дифференциально-диагностической, но и селективной, так как подавляет рост многих микробов (кишечная палочка) и способствует лучшему росту некоторых болезнетворных бактерий (возбудители брюшного тифа, паратифов, дизентерий). Лактозоотрицательные бактерии образуют на этой среде бесцветные колонии, а лактозоположительные – красные 10)Назвать состав среды Эндо, описать колонии на среде Эндо, объяснить механизмы работы среды. Среда Эндо: высушенный питательный агар, индикатор (фуксин основной), лактоза 1% Выпускается в виде порошка. Перед употреблением определенную навеску порошка вносят в дистиллированную воду, кипятят, а затем разливают по чашкам Петри. Свежеприготовленная среда бесцветна или имеет бледно- розовую окраску. При росте лактозоположительных бактерий их колонии окрашиваются в темно- красный цвет с металлическим блеском Лактозоотрицательные бактерии образуют бесцветные колонии 11. Назвать состав среды Китта-Тароцци, описать характер роста, объяснить механизм работы среды. Китта Тароцци - жидкая элективная среда для анаэробов. Для ее приготовления нарезанную мелкими кусочками печень (мясо) заливают трехкратным количеством МПБ, рН 7,4 - 7,6, кипятят 30 мин, фильтруют. Просушенные кусочки печени раскладывают по 3 -4 г в пробирки и заливают 7-8 мл бульона. Стерилизуют при 120°С в течение 30 мин. Перед применением прогревают и заливают парафином или вазелиновым маслом для изоляции от доступа кислорода. Печень используется в качестве поглотителя свободного кислорода. Равномерное помутнение бульона будет свидетельствовать о росте бактерий. 12. Назвать состав среды Вильсона-Блера, описать характер роста, объяснить механизм работы среды. Для среды Вильсона-Блера базой является агар-агар с добавлением глюкозы, сульфита натрия и двуххлористого железа. Клостридии образуют на этой среде колонии чёрного цвета за счет восстановления сульфита до сульфид — аниона, который соединяясь с катионами железа (II) дает соль чёрного цвета. Как правило, черные на этой среде образования колонии, появляются в глубине агарового столбика. 13) метод Виньяла-Вейона Метод Вейон-Виньяля. В пробирку с 0,5% расплавленным и охлажденным до 40- 450С сахарным агаром вносят исследуемый материал и перемешивают. При необходимости материал разводят путём переноса в последующие 2-3 пробирки с расплавленным агаром. Содержимое пробирок набирают в пастеровские пипетки. После заполнения пипетки вытянутый конец запаивают, а противоположный конец закрывают стерильной ваткой и заливают парафином. Трубки помещают в термостат; через 2-3 суток в агаре вырастают глубинные колонии, видимые в проходящем свете, которые можно изолировать. Для этого трубку надрезают напильником выше уровня намеченной колонии, надламывают, а колонию извлекают петлёй и пересевают для накопления чистой культуры в соответствующую питательную среду. 14) метод Фортнера (метод культивирования анаэробов) Метод Фортнера. В чашку Петри наливают питательный агар с 1-2% глюкозы. Посредине чашки стерильным скальпелем вырезают канавку шириной приблизительно 1 см. Одну половину чашки засевают культурой аэробов (сарцина, кишечная палочка), вторую – культурой анаэробов или исследуемым на их наличие материалом. Засеянную чашку закрывают, герметизируют и помещают вверх дном в термостат. Быстрорастущие аэробы, поглощая кислород, создают тем самым благоприятные условия для роста анаэробных микроорганизмов. 15(пр). Назвать состав и принцип применения препаратов лечебно- профилактических бактериофагов. (см. 17 вопрос теории) |