1. Классификация микроорганизмов по морфологическим свойствам, и их расположение в мазке. Привести примеры. Шаровидныебактери и
 Скачать 265.13 Kb.
|
|
16. Дисбиоз. Фазы. Причины, ведущие к нарушениям в составе нормальных биоценозов. Препараты, используемые для коррекции нарушений в составе нормальной микрофлоры. Дисбиоз (дисбактериоз) — качественное и количественное изменение состава нормальной микрофлоры макроорганизма. Причины дисбактериоза: Острая и хроническая дизентерия, постдизентерийный колит, гельминтозы, хронический колит, энтерит, длительное применение антибиотиков, хар-р питания. Стадии дисбактериоза: I стадия дисбактериоза характеризуется умеренным уменьшением численности облигатных бактерийв полости кишечника. Симптомы болезни отсутствуют. II стадия дисбактериоза характеризуется критическим снижением численности бифидобактерийилактобациллкишечника. На этой стадии дисбактериоза появляются первые признаки нарушения работы кишечника:понос, боли в животе,метеоризм. III стадия дисбактериоза характеризуется воспалительным поражением стенок кишечника под влиянием патогенов. На этом этапе дисбактериоза понос приобретает стойкий хронический характер, а в каловых массахопределяются частички непереваренной пищи. IV стадия дисбактериоза представляет собой стадию, предшествующую острой кишечной инфекции. На этом этапе дисбактериоза облигатная флора кишечника присутствует в очень малых количествах. На этой стадии дисбактериоза возникает общее истощение организма, анемия, авитаминоз. Наиболее логичной коррекцией состава микрофлоры при дисбактериозе выглядит заместительная терапия живыми бактериями, населяющими толстый кишечник. Она проводится с помощью эубиотиков — препаратов, содержащих леофилизированные живые штаммы микроорганизмов — представителей нормальной микрофлоры. К наиболее известным в настоящее время такого рода препаратам относятся: бифидумбактерин; колибактерин; бификол; эубактерин; лактобактерин; энтерол; линнекс и др. 17. Плазмиды бактерий, виды и значение в медицинской микробиологии. Плазмиды - внехромосомные факторы наследственности бактерий, которые являются молекулами ДНК, имеющие способность к автономной репликации. Плазмиды не являются генетическими элементами, жизненно необходимыми для бактериальной клетки, поскольку они не несут информации о синтезе ферментов, участвующих в пластическом или энергетическом метаболизме. Вместе с тем они могут придавать бактериям определенные селективные преимущества, например резистентность к антибиотикам. Плазмиды физически либо не связаны с хромосомой (автономное состояние), либо встроены в ее состав (интегрированное состояние). И автономном состоянии они самостоятельно реплицируются. Плазмиды несут две функции — р е г у л я т о р н у ю и кодирующую. Первая состоит в компенсации нарушений метаболизма ДНК клетки хозяина. Например, при интегрировании плазмиды в состав поврежденного бактериального генома, не способного к репликации его функция восстанавливается за счет плазмидного репликона. Кодирующая функция плазмид состоит во внесении в бактериальную клетку новой информации, о которой судят по приобретенному признаку, например образованию пилей (F-плазмида), резистентности к антибиотикам (R-плазмида), выделению бактериоцинов (Со1- плазмида) и т.д. Плазмиды представляют собой двухцепочечные молекулы ДНК. Они кодируют не основные для жизнедеятельности бактериальной клетки функции, но придающие бактерии преимущества при попадании в неблагоприятные условия существования. Виды: Плазмиды могут обратимо встраиваться в бактериальную хромосому и функционировать в виде единого репликона. Такие плазмиды называются интегративными или эписомами. Бактериальные плазмиды способны передаваться из одной клетки в другую, принадлежащую иной таксономической единице. Такие плазмиды называются трансмиссивными (конъюгативными, син.) Мелкие плазмиды, не несущие tra-гены, не могут передаваться сами по себе, но способны к передаче в присутствии трансмиссивных плазмид, используя их аппарат конъюгации. Такие плазмиды называются мобилизуемыми. Особое значение в медицинской микробиологии имеют плазмиды, обеспечивающие устойчивость бактерий к антибиотикам- R-плазмиды. R-плазмиды содержат гены, детерминирующие синтез ферментов, разрушающих антибактериальные препараты.В результате наличия такой плазмиды бактериальная клетка становится устойчивой (резистентной) к действию целой группы лекарственных веществ, а иногда и нескольким препаратам. Ent-плазмида, определяющая синтез энтеротоксина Hly-плазмида, детерминирующая синтез гемолизина у Е. coli. Некоторые бактериальные клетки содержат плазмиды, детерминирующие синтез бактерицидных по отношению к другим бактериям веществ. Например, некоторые Е. coli владеют Col-плазмидой, определяющей синтез колицинов, обладающих микробоцидной активностью по отношению к колиформным бактериям. Значение: Они контролируют синтез различных факторов патогенности у многих видов бактерий, в том числе у возбудителей чумы, сибирской язвы, иерсиниозов, дизентерии, эшерихиозов и др. Наличие в природе плазмид, которые наделяют диареегенные кишечные палочки факторами адгезии, инвазии и способностью синтезировать термолабильные и термостабильные энтеротоксины, может стать реальной причиной образования новых вариантов патогенных бактерий. Плазмиды используются в практической деятельности человека, в частности в генной инженерии, при конструировании специальных рекомбинантных бактериальных штаммов, вырабатывающих в больших количествах биологически активные вещества. 18. Инфекция (инфекционный процесс): определение понятия и условия возникновения. Периоды инфекционного заболевания. Исходы инфекционного заболевания. Инфекция или инфекционный процесс, представляет собой совокупность физиологических и патологических адаптационных и репарационных реакций, которые возникают и развиваются в макроорганизме в процессе взаимодействия с патогенными микроорганизмами, вызывающими нарушения его внутренней среды и физиологических функций. Условия возникновения: 1. Инфицирующая доза заболевания – минимальное количество микробных клеток, способных вызвать инфекционный процесс. 2. Микроб должен попасть во входные ворота, т.е. орган в котором он может размножаться. 3. Патогенность - способность микроба вызывать инфекционный процесс у хозяина. 4. Степень патогенности – вирулентность – индивидуальный штаммовый признак. Стадии развития: 1.Инкубационный период — время, которое проходит с момента заражения до начала клинических проявлений болезни. Длительность зависит от вида микроорганизма, инфицирующей дозы, вирулентности, пути проникновения в организм и от состояния макроорганизма. Клинических проявлений заболевания обычно еще нет, поэтому в этой стадии больные выявляются редко. При большинстве инфекционных заболеваний возбудители не выделяются в окружающую среду, исключением является вирусный гепатит А и ВИЧ–инфекция. 2. Продромальный период — время появления первых клинических симптомов общего характера(недомогание, снижение аппетита, общая слабость, головная боль, температура).Возбудитель интенсивно размножается в месте его локализации, инвазирует ткани, продуцирует токсины и ферменты.Продолжительность продромального периода 1–3 сут, но может увеличиваться до 10 дней и зависит от этиологии инфекционного заболевания. 3. Период острых проявлений заболевания — разгар болезни. Типичные признаки инфекционной болезни -лихорадка, воспаление, поражение центральной и вегетативной нервной системы, нарушение функций сердечно-сосудистой системы и органов пищеварения. В период разгара возбудитель заболевания активно размножается в организме, выделяет токсины и ферменты, которые действуют на ткани.При легком течении заболевания в стадию разгара больные очень опасны как источники инфекции. 4. Период исхода заболевания. Возможные варианты исхода: 1. При благоприятном течении заболевания период разгара переходит в стадию выздоровления. 2. Переход заболевания в хроническую форму с периодами ремиссий и рецидивов. 3. В некоторых случаях после перенесенного заболевания развивается микробоносительство. 4. Выздоровление может сопровождаться остаточными явлениями повреждения органов и тканей. 5. Суперинфекция— заражение тем же видом микроорганизма до его полного выздоровления. 6. Вторичная инфекция — присоединение к развивающейся первичной инфекции другой инфекции, вызыванной новым видом возбудителя 7. Летальный исход. 19. Роль микроорганизмов в инфекционном процессе. Патогенность и вирулентность. Факторы патогенности микроорганизмов. Механизмы персистенции микроорганизмов. Инфекция- совокупность всех биологических явлений и процессов, возникающих в организме при внедрении и размножении в нем микроорганизмов, результат взаимоотношений между макро- и микроорганизмом в виде адаптационных и патологических процессов в организме т.е. инфекционного процесса. Инфекционная болезнь- наиболее выраженная форма инфекционного процесса. Основные этапы инфекционного процесса. 1.Адгезия- прикрепление микроорганизма к соответствующим клеткам хозяина. 2.Колонизация- закрепление микроорганизмов в соответствующем участке. 3.Размножение (увеличение количества- мультипликация). 4.Пенетрация- проникновение в нижележащие слои и распространение инфекта. 5.Повреждение клеток и тканей (связано с размножением, пенетрацией и распространением инфекта). Патогенность - потенциальная способность микроорганизма вызывать инфекционный процесс. По способности вызывать заболевания микроорганизмы можно разделить на: патогенные, условно- патогенные, непатогенные. Условно-патогенные микроорганизмы обнаруживают как в окружающей среде, так и в составе нормальной микрофлоры. В определенных условиях (иммунодефицитные состояния, травмы и операции с проникновением микроорганизмов в ткани) они могут вызывать эндогенные инфекции. К факторам патогенности относят способность микроорганизмов прикрепляться к клеткам (адгезия), размещаться на их поверхности (колонизация), проникать в клетки (инвазия) и противостоять факторам защиты организма (агрессия). Вирулентность – мера патогенности, её фенотипическое проявлении. Вирулентность может варьировать и может быть определена лабораторными методами. Персистенция микробов – способность микробов переживать в опасном для них мире. Она обусловлена их резистентностью к защитным реакциям хозяина. Механизмы персистенции микроорганизмов: 1. Факторы адаптации (конкуренция с нормальной микрофлорой): - Выделение бактериоцинов - Синтез индуцибельных ферментов - Локальное изменение рН 2. Адгезины – факторы прикрепления: - Пили - Белки и тейхоевые кислоты клеточной стенки (у грам+) - Капсульные полисахариды, белки наружной мембраны, ЛПС 3. Инвазины – факторы проникновения: - Механический фактор (жгутики, активная подвижность) - Биологическое проникновение (внутри макрофагов, с помощью переносчиков) - Химические вещества (ферменты): а) гиалуронидаза б) нейраминидаза в) фибринолизин и др. 4. Факторы подавления защитных сил организма: - Антифагоцитарные: а) капсула б) подавление слияния фагосомы с лизосомой в) продукция каталазы - Антисывороточные: а) капсульное вещество б) белок А стафилококков (связывает Ig) в) ферменты, разрушающие лизоцим, комплемент, Ig G, A и др.) - Антигенная изменчивость - Антигенная мимикрия 5. Факторы повреждения: - Экзотоксины - Эндотоксины - Ферменты-токсины. 20. Иммунитет. Определение. Виды иммунитета. Не специфические факторы защиты организма. Иммунитет-это совокупность биологических явлений, направленных на сохранение постоянства внутренней среды и защиту организма от инфекционных и других генетически чужеродных для него агентов. Виды инфекционного иммунитета: антибактериальный, антитоксический, противовирусный, противогрибковый, антипротозойный. Инфекционный иммунитет может быть: стерильным (возбудителя в организме нет, а устойчивость к нему есть); нестерильный (возбудитель находится в организме). Различают:1.Врожденный иммунитет,или видовой - имеется с рождения. передается но наследству. Пример: человек невосприимчив к чуме рогатого скота, к куриной холере, собаки невосприимчивы к туберкулезу. Видовой иммунитет неспецифичен, то есть одни и те же защитные механизмы действуют против разных видов микробов. Это наиболее прочный вид иммунитета. 2. Приобретенный- это невосприимчивость к антигену чувствительного организма человека, животных, приобретаемая в процессе онтогенеза в результате естественной встречи с этим антигеном организма.Он всегда индивидуальный. Пример: невосприимчивость к инфекции,возникающая после перенесенного заболевания. Может быть активным и пассивным. Активный формируется послеперенесенной инфекции; постинфекционный иммунитет может сохраняться в течение длительного времени, иногда в течение всей жизни. Пассивный формируется за счёт введения в организм уже готовых иммунореагентов, способных обеспечить обеспечить защиту от антигена. Ребенку с молоком матери передаются иммуноглобулины класса А и I. Неспецифические факторы естественной резистентности защищают организм от микробов при первой встрече с ними. Эти же факторы участвуют и в формировании приобретенного иммунитета К неспецифическим факторам противоинфекционной защиты относятся: кожа и слизистые оболочки; лимфатические узлы; лизоцим и другие ферменты полости рта и ЖКТ; нормальная микрофлора; воспаление; фагоцитирующие клетки; естественные киллеры; система комплемента; интерфероны. 21.Реакция агглютинации: ингредиенты, механизм, способы постановки, учѐт, применение. Агглютинацией -склеивание бактерий в результате взаимодействия с ними специфических AT. Для проведения РА необходимы три компонента: 1) АГ (агглютиноген); 2) AT (агглютинин); 3) раствор электролита (изотонический раствор хлорида натрия). В реакции агглютинации принимают участие только корпускулярные антигены (бактерии, эритроциты, нагруженные антигеном частицы латекса). Реакция агглютинации на стекле. На предметное стекло пипеткой наносят каплю диагностической сыворотки (разведение сыворотки 1:10 - 1:20). Бактериологической петлей берут чистую культуру исследуемого микроорганизма с поверхности скошенного агара, переносят в каплю сыворотки и перемешивают. Результат реакции учитывают невооруженным глазом через 3-5 мин. При положительной реакции в капле сыворотки отмечают появление хлопьев, хорошо видимых на темном фоне при покачивании предметного стекла. В случае отрицательной реакции жидкость остается равномерно мутной. Реакция агглютинации в пробирках. В ряд пробирок вносят по 1 мл физиологического раствора. В первую пробирку прибавляют равный объем исследуемой сыворотки крови. Готовят последовательные двукратные разведения сыворотки (титрование сыворотки), после чего в каждую пробирку вносят по 2 капли взвеси инактивированных бактерий (диагностикум). Пробирки помещают на 2 ч в термостат при 37 °С. Реакция протекает с образованием мелких хлопьев, невидимых невооруженным глазом. Интенсивность агглютинации учитывают по системе «четыре плюса»: полная агглютинация - 4+, частичная агглютинация - 3+ или 2+, сомнительный результат - +. За титр антител в исследуемой сыворотке принимают последнее разведение, в котором наблюдается агглютинация на 2+. Реакцию агглютинации в пробирках (развернутая реакция агглютинации) проводят для определения титра антител к возбудителям брюшного тифа и паратифов (реакция Видаля), бруцеллеза (реакции Райта), сыпного тифа (реакция Вейгля). 22. Мутации у бактерий, виды мутации Мутации – это изменения в последовательности отдельных нуклеотидов ДНК, которые ведут к таким проявлениям, как изменения морфологии бактериальной клетки, возникновение потребностей в факторах роста. По происхождению мутации можно условно подразделить на с п о н т а н н ы е и и н д у ц и р о в а н н ы е . Первые составляют естественный, или спонтанный, фон, величина которого колеблется в зависимости от типа мутации и вида микробной популяции. Они появляются в микробных популяциях in vitro и in vivo (в естественных биотопах организма человека) под влиянием самых разнообразных причин и событий, например ошибок в работе репарирующих ферментов (см. 6.6), или ДНК-полимеразы во время репликации ДНК. Мутации происходят в результате ошибочного включения в синтези- руемую дочернюю цепь вместо одного азотистого основания другого, некомплементарного имеющегося в родительской цепи, например иместо аденина, комплементарного тимину, гуанина или цитозина. Индуцированными называют мутации, которые получают в эксперименте под влиянием каких-либо мутагенов. По количеству мутировавших генов различают г е н н ы е и хромосомные мутации. Первые затрагивают один ген и чаще всего являются точковыми, вторые распространяются на несколько генов. Точковые мутации представляют собой замену или нставку пары азотистых оснований в ДНК, которая приводит к изменению одного кодона, вследствие чего вместо одной аминокислоты кодируется другая либо образуется бессмысленный кодон, не кодиру- ющий ни одну из аминокислот. Последние называют нонсенс мутациями. Мутации со вставками или выпадениями одной пары азотистых оснований ведут к изменению всех последующих кодонов. Такие мутации называются м у т а ц и я м и со с д в и г о м с ч и т ы н а н и я. Они также затрагивают один ген. У микроорганизма, несущего точковую мутацию в одном гене, может возникнуть вторичная мутация в этом же гене, в результате которого произойдет восстановление дикого фенотипа. При этом первичную мутацию, которая привела к.возникновению мутантного фенотипа, называют пр я м о й, а мутацию, обусловившую возврат к дикому фенотипу, — обратной. Хромосомные мутации носят характер крупных перестроек в отдельных фрагментах ДНК. Они возникают в результате выпадения меньшего или большего числа нуклеотидов (делеция), либо поворота участка ДНК на 180° (инверсия), либо повторения какого-либо фрагмента ДНК (дупликация). Один из механизмов образования хромосомных мутаций связан с перемещением Is-последовательностей и транспозонов из одного участка ДНК в другой или из репликона в репликон (из хромосомы в плазмиду и наоборот). В результате возникает мутация, так как функция гена при включении транспозируемого элемента нарушается. При перемещении они могут вызывать делеции или инверсии генетического материала, а при включении в новый участок ДНК — дупликации в 6-9 пар нуклеотидов. По фенотипическим последствиям мутации подразделяют на нейтральные, условно-летальные и летальные. Нейтральные мутации фенотипически не проявляются какими-либо изменениями признаков, поскольку они заметно не отражаются на функциональ- ной активности синтезируемого фермента. Мутации, которые приводят к изменению, но не к утрате функциональной активности фермента, называют условно-леталь- ным и. В зависимости от условий окружающей среды микроорга- низмы могут сохранять свою жизнеспособность или, наоборот, утра- чивать ее. |