1. Классификация микроорганизмов по морфологическим свойствам, и их расположение в мазке. Привести примеры. Шаровидныебактери и
 Скачать 265.13 Kb.
|
|
9. Влияние химических факторов на микроорганизмы. Группы антисептиков. Понятие асептики и антисептики. Противомикробным действием обладают галогены и их соединения, окислители, кислоты и их соли, щелочи, спирты, альдегиды, соли тяжелых металлов, фенол и его производные, поверхностно активные вещества, красители и многие другие химические вещества. Они разрушают важнейшие структурные элементы — клеточную стенку, цитоплазматическую мембрану, нуклеиновые кислоты и инактивируют ферменты. Антисептика — это система мер быстрого подавления патогенных и условно-патогенных микроорганизмов на коже и слизистых хирургов, оперируемых, раненых, персонала особо чистых производств. В принципе антисептика — это щадящая дезинфекция применительно к человеку. Главным методом антисептики является обработка химическими веществами с преимущественно микробостатическим действием (антисептиками)с учетом спектра их антимикробной активности и чувствительности конкретных возбудителей. Деконтаминация с помощью антисептиков предполагает подавление патогенных и условно-патогенных микроорганизмов при условии сохранения непатогенных видов. Исключение составляет антисептическая обработка рук оператора и операционного поля пациента, а также ран и слизистых оболочек иммунодефицитных лиц, когда необходимо более полное освобождение названных биотопов от всех микроорганизмов. Для антисептики применяют растворы кислородсодержащих препаратов. На основе перекисных соединений или перекиси водорода, спирты и другие вещества с дезинфицирующими свойствами. Конечно, концентрация антисептических растворов существенно ниже, чем при использовании в качестве дезинфектантов. Выделяют 16 групп химических антисептиков Группа галоидов: Йод, Повидон-йод, Хлорамин Б Соли тяжёлых металлов: Сулема, Нитрат серебра, Оксид цинка Спирты: Этиловый спирт Альдегиды: Формалин Красители: Бриллиантовый зелёный Кислоты: Борная кислота Окислители: Пероксид водорода, Перманганат калия Детергенты (поверхностно-активные вещества): Хлоргексидин Производные нитрофурана: Нитрофурал Производные 8-оксихинолина: Лоперамид Производные хиноксалина: Гидроксиметилхиноксилиндиоксид Дёгти, смолы Производные нитроимидазола Антисептики растительного происхождения Сульфаниламиды Щёлочи Асептика включает в себя совокупность прямых (стерилизация, дезинфекция, антисептика) и косвенных методов воздействия на микроорганизмы с целью создания безмикробной зоны или зоны с резко сниженной численностью микроорганизмов дляпроведения медицинских вмешательств и исследовательских манипуляций.Асептическая практика применяется в операционных, родильныхзалах, лабораторных и инфекционных боксах, в абактериальных палатахдля лиц с трансплантированными органами, в кювезах длянедоношенных детей, в биотехнологии и производстве многих лекарственныхпрепаратов. О прямых методах воздействия на микроорганизмыуже сказано выше. Косвенные, т.е. разделительные меры, заключаются в использовании герметичных перегородок в рабочих помещениях, специальной одежды и обуви, перчаток, системы воздушных бактериальных фильтров. 10. Понятие дезинфекции. Цель. Физические и химические методы дезинфекции. Дезинфекция — это мероприятия, направленные на уничтожение или резкое подавление численности патогенных и условно-патогенных микроорганизмов во внешней среде, в том числе на объектах и изделиях. Целью дезинфекции является предупреждениеили прерывание передачи возбудителей от инфицированного индивидуума к интактному через объекты внешней среды (факторы передачи). Используют следующие методы дезинфекции: — химический, — физический (кипячение, сжигание, ультрафиолетовое облучение), —механический (встряхивание, обработка пылесосом, влажная уборка, проветривание, стирка, мытье), — биологический. Применяют следующие основные группы дезинфектантов: — галоидсодержащие, в них активно действующим антимикробным началом являются хлор, бром или йод (хлорная известь, соли гипохлорита кальция, хлорамины, дихлорциануровая кислота и ее соли, аквасепт, йодонат, дибромантин); — кислородсодержащие на основе перекисныхсодинений или перекиси водорода (первомур, ПВК, перамин, виркон, дезоксон); — поверхностно-активные вещества на основе четвертично-аммониевых соединений и амфотерных поверхностно-активных соединений (аламинол, дюльбаль, санифект, велтолен, гермосепт, септодор); — гуанидины и их смеси с ПАВ (демос, катасепт, лизоформин, пливасепт); — спирты (на основе этанола); — альдегидосодержащие на основе глутарового или янтарногоильдегидов (гигасепт, сайдекс, глутарал, альдесол); Физическая дезинфекция: Тепловая дезинфекция. Температура 100°С в течение 5 минут убивает все вегетативные формы бактерий и большинство вирусов. Разновидностью тепловой дезинфекции является пастеризация – прогревание при температуре ниже 100ОС. Ультрафиолетовое облучение производится с помощью специальных бактерицидных ламп для обеззараживания воздуха, и поверхностей в помещениях. Действие ультрафиолетовых лучей приводит к разрушению ДНК микробов в результате образования тиминовых димеров. 11. Классификация бактерий по типам питания и способам получения энергии Источники углерода и типы питания. Все микроорганизмы по своей способности усваивать разнообразные источники углерода делятся на две группы — автотрофы и гетеротрофы. А в т о т р о ф ы (лат. autos— сам, trophe— питание) синтезируют все углеродсодержащие компоненты клетки из С 0 2 как единственного источника углерода. Г е т е р о т р о ф ы (лат. heteros— другой, ≪питающийся засчет других≫) не могут существовать только за счет ассимиляции. Они используют разнообразные органические углеродсодержащие соединения — гексозы (глюкоза), многоатомные спирты, реже углеводороды. Многие микроорганизмы в качестве источника углерода используют аминокислоты, органические кислоты и другие соединения. Источники энергии и доноры электронов. В зависимости от источников энергии и природы доноров электронов микроорганизмы подразделяют на ф о т о т р о ф ы (фотосинтезирующие), способные использовать солнечную энергию, и х е м о т р о ф ы (хемосинтезирующие), получающие энергию за счет окислительно-восстановительных реакций. К фототрофам относятся исключительно сапрофитные микроорганизмы. В патологии человека ведущую роль играют синтезирующие микроорганизмы. В зависимости от природы доноров электронов хемотрофы подразделяются на х е м о л и т о т р о ф ы (хемоавтотрофы) и х е- м о о р г а н о т р о ф ы (хемогетеротрофы) Источник азота. Для синтеза азотсодержащих соединений (аминокислот, пуринов, пиримидинов, некоторых витаминов) микроорганизмы нуждаются в доступном источнике азота. Одни из них способны усваивать молекулярный азот из атмосферы (азотфиксирующие бактерии) или неорганический азот из солей аммония, нитратов или нитритов. Другие ассимилируют только азотсодержащие органические соединения. Микроорганизмы, способные синтезировать все необходимые им органические соединения (углеводы, аминокислоты и др.) из глюкозы и солей аммония, называются п р о т о т р о ф а м и . В отличие от них микроорганизмы, не способные синтезировать какое-либо из указанных соединений, называют а у к с о т р о ф а м и . Они ассимилируют эти соединения и другие факторы роста в готовом виде из окружающей среды или организма хозяина (человека, животного). Ауксотрофами чаще всего являются патогенные или условно-патогенные для человека микроорганизмы. По типу питания микроорганизмы делятся на: Автотрофы – синтезируют все углеродсодержащие вещества из СО2; Гетеротрофы – в качестве источника углерода используют органические вещества. К ним относятся сапрофиты, которые питаются органическими веществами отмерших организмов и паразиты, которые живут за счет органических веществ живой клетки. Получение энергии: Фототрофы-Непосредственно солнечный свет Хемотрофы -Окислительно-восстановительные химические реакции с синтезом АТФ 12. Жгутики. Функции и типы. Методы определения жгутиков Жг у т и к и . На поверхности ряда бактериальных клеток располагаются жгутики. В их состав входит белок флагелин, который по своей структуре относится к сократимым белкам типа миозина. Жгутики прикрепляются к базальному телу, состоящему из нескольких дисков, вмонтированных в цитоплазматическую мембрану и КС. Количество и расположение жгутиков у разных бактерий неодинаково. Монотрихи имеют на одном из полюсов клетки только один жгутик, лофотрихи— пучок жгутиков, у амфитрихов жгутики расположены на обоих полюсах клетки, а у перитрихов — по всей ее поверхности. Активная подвижность бактерий обусловлена вращательными движениями жгутиков, подобно корабельному винту, либо пропеллеру (монотрихи, лофотрихи). Наряду с беспорядочным движением бактерии могут передвигаться направленно путем хемотаксиса, аэротаксиса, обусловленного разной концентрацией кислорода, и фототаксиса. Скорость движения бактерий связана с расположением жгутиков, составом и свойствами питательной среды. Жгутики обладают антигенными свойствами. Определяют методами раздавленной и висячей капли. Методы выявления жгутиков условно можно разделить на две группы: косвенные и прямые. 1. Косвенно жгутики можно выявить по факту подвижности бактериальных клеток. Для выявления подвижности бактерий готовят, например, препарат «раздавленная» (или «придавленная») капля. Для этого каплю бактериальной культуры – лучше, если эта культура будет при этом выращена на жидкой питательной среде – помещают на предметное стекло и накрывают покровным стеклом. Микроскопируют. 2. При прямом обнаружении жгутиков их непосредственно наблюдают в микроскоп. Для этого применяются специальные методы окраски. Например, метод Морозова основан на обволакивании жгутика тонким слоем солей серебра или ртути. При этом жгутик, не меняя своей формы, становиться чуть толще. Этого достаточно, чтобы структура, «перешагнув» нижнюю границу разрешающей способности иммерсионного микроскопа, стала видимой. 13. Понятие стерилизации. Цель. Методы стерилизации Стерилизация — освобождение объекта от всех микроорганизмов с помощью физических и/или химических способов. Основными целями стерилизации являются: 1) предупреждение заноса микробных клеток в организм человека при медицинских вмешательствах; 2) исключение контаминации питательных сред и культур клеток при диагностических и научных исследованиях, в процессе биотехнологического производства; 3) предупреждение микробной биодеградации материалов, в том числе диагностических и лекарственных средств. В медицинской практике стерилизации подвергают инструментарий, перевязочный, шовный материал, операционное белье, лекарственные препараты, питательные среды, лабораторную посуду, а при создании безмикробной среды — воздух операционных. Должны быть стерилизованы все изделия, которые соприкасались с раневой поверхностью, кожными покровами или слизистыми, контактировали с кровью или инъекционными препаратами. Различают следующие методы стерилизации: 1. Физические — термический, радиационный и механический. 2. Химические — растворами и газами. Выбор метода стерилизации зависит от свойств материалов, из которых состоят стерилизуемые изделия, их размера и других конструктивных особенностей, от обязательности или необязательности длительного сохранения стерильности и от других факторов. К физическим методам относятся: -тепловая стерилизация, -лучевая стерилизация, -стерилизация ультразвуком, -ультрафильтрация. Тепловая стерилизация основана на использовании высоких температур. Стерилизация паром под давлением - наиболее универсальный метод стерилизации. Проводится в автоклаве. Лучевая стерилизация осуществляется в специальных установках с помощью гамма-излучения. Инактивация микроорганизмов под действием гамма-лучей происходит в результате повреждения нуклеиновых кислот. Ультрафильтрация является широко используемым методом стерилизации растворов лекарственных препаратов. Жидкости пропускаются через мембранные фильтры с диаметром пор, через которые не проходят бактерии и вирусы. Химическая стерилизация проводится с использованием газов: оксида этилена, смеси ОБ (смеси оксида этилена и бромистого метила в весовом соотношении 1:2,5) и паров формальдегида. Эти вещества являются алкилирующими агентами, их способность в присутствии воды инактивировать активные группы ферментов, других белков, ДНК и РНК приводит к гибели микроорганизмов. 14. Опишите виды генетической рекомбинации у бактерий Микроорганизмам, как и клеткам высших организмов свойственны генетические рекомбинации, которые имеют свои особенности. Они определяются прежде всего способом размножения и закономерностями передачи генетического материала. Известно, что генетические рекомбинации у клеток эукариот совершаются в ходе процессов, сопровождающих половое размножение путем реципрокного (взаимного) обмена фрагментами хромосом. При таком обмене генетическим материалом из двух рекомбинирующих родительских хромосом образуются две рекомбинантные хромосомы. Применительно к данным клеткам это означает, что в результате рекомбинаций возникают две рекомбинантные особи. Прокариотам не свойственно половое размножение. Рекомбинация у них происходит в результате внутригеномных перестроек, заключающихся в изменении локализации генов в пределах хромосомы, или при проникновении в клетку реципиента части ДНК донора. Последнее приводит к формированию неполной зиготы — мерозиготы. В результате рекомбинаций в мерозиготе образуется только один рекомбинат, генотип которого представлен в основном генотипом реципиента с включенным в него фрагментом ДНК донора. Вследствие этого реципрокность генетических рекомбинаций у бактерий не может быть выявлена. Рекомбинации подразделяют на з а к о н н ы е и н е з а к о н н ы е. Законная рекомбинация требует наличия протяженных, комплементарных участков ДНК в рекомбинируемых молекулах. Она происходит только между близкородственными видами микроорганизмов. Незаконная рекомбинация не требует наличия протяженных комплементарных участков ДНК. Впервые она была описана Л.Б. Борисовым в 1965 г. между неродственными коли-фагами, лизирующими энтеропатогенные эшерихии серогрупп 0ІІІ и 026. Незаконная рекомбинация происходит при участии Is-элементов, которые имеют «липкие концы», обеспечивающие их быстрое встраивание в бактериальную хромосому. Существенное практическое значение имеют запрограммированные внутригеномные рекомбинации, при которых происходит только изменение локализации имеющихся генов. Они играют важную роль в изменении антигенной структуры микроорганизмов и тем самым эффективно противостоят факторам иммунной защиты. Это относится к боррелиям, трипаносомам, малярийному плазмодию и другим микробам. Для бактерий предложены специальные методы генетического анализа, позволяющие установить относительное расположение генов на хромосоме и их тонкую структуру. Однако в некоторых слу- чаях, когда анализу могут подвергнуться оба рекомбинирующих генома, реципрокность генетического обмена характерна и для бактерий, например при рекомбинациях между плазмидной и хромосомной ДНК. Генетические рекомбинации происходят при участии ряда ферментов в предела отдельных генов или групп сцеплений генов. Существуют специальные геогены, детермирующие рекомбинационную способность бактерий. Передача генетического материала (хромосомных генов) от одних бактерий к другим происходит путем трансфор мации, трансдукции и конъюгации, а плазмидных генов — путем трансдукции и конъюгации. Трансформация — непосредственная передача генетического материала (фрагмента ДНК) донора реципиентной клетке. Передача генетического материала от одних бактерий другим с помощью фагов называется трансдукцией. Конъюгация — перенос генетического материала из клеткидонора в клетку реципиента при их скрещивании. 15. Нормальная микрофлора организма человека и ее значение. Основные функции нормальной микрофлоры. Нормальная микрофлора представляет собой совокупность множества микробиоценозов (сообществ микроорганизмов), характеризующихся определенным составом и занимающих тот или иной биотоп (кожу и слизистые оболочки) в организме человека и животных, сообщающийся с окружающей средой. Организм человека и его микрофлора находятся в состоянии динамического равновесия (эубиоза) и являются единой экологической системой. В любом микробиоценозе следует различать так называемые характерные виды (облигатные, аутохтонные, индигенные, резидентные). Представители этой части микрофлоры постоянно присутствуют в организме человека и играют важную роль в метаболизме хозяина и защите его от возбудителей инфекционных заболеваний. Вторая составляющая нормальной микрофлоры - транзиторная микрофлора (аллохтонная, случайная). Представители факультативной части микрофлоры достаточно часто встречаются у здоровых людей, но их качественный и количественный состав непостоянен и время от времени меняется. Количество характерных видов относительно невелико, зато численно они всегда представлены наиболее обильно. Функции нормальной микрофлоры • Создание колонизационной резистентности. • Регуляция газового состава, редокс-потенциала кишечника и других полостей организма хозяина. • Продукция ферментов, участвующих в метаболизме белков, углеводов, липидов, а также улучшение пищеварения и усиление перистальтики кишечника. • Участие в водно-солевом обмене. • Участие в обеспечении эукариотических клеток энергией. • Детоксикация экзогенных и эндогенных субстратов и метаболитов преимущественно за счет гидролитических и восстановительных реакций. • Продукция биологически активных соединений (аминокислоты, пептиды, гормоны, жирные кислоты, витамины). • Иммуногенная функция. • Морфокинетическое действие (влияние на структуру слизистой оболочки кишечника, поддержание морфологического и функционального состояния желез, эпителиальных клеток). • Мутагенная или антимутагенная функция. • Участие в канцеролитических реакциях (способность индигенных представителей нормальной микрофлоры нейтрализовывать вещества, индуцирующие канцерогенез). |