Гистология. 1. Методы гистологических исследований световая, электронная микроскопия
 Скачать 2.37 Mb.
|
|
Гранулоциты. Нейтрофильные гранулоциты имеют диаметр в капле крови 7-8 мкм, в мазке — 12- 13 мкм. В цитоплазме гранулоцитов содержатся 2 вида гранул: 1) азурофильные (неспецифические, первичные), или лизосомы, составляющие 10-20 %; 2) специфические (вторичные), которые окрашиваются и кислыми, и основными красителями. Азурофильные гранулы (лизосомы) имеют диаметр 0,4-0,8 мкм, в них содержатся протеолитические ферменты, имеющие кислую реакцию: кислая фосфатаза, пероксидаза, кислая протеаза, лизоцим, арилсулфатаза. Специфические гранулы составляют 80-90 % всех гранул, их диаметр равен 0,2-0,4 мкм, окрашиваются и кислыми, и основными красителями, так как содержат и кислые и основные ферменты и вещества: ЩФ, щелочные белки, фагоцитин, лактоферрин, лизоцим. Лактоферрин 1) связывает молекулы Feи склеивает бактерии и 2) угнетает дифференцировку молодых гранулоцитов. Периферическая часть цитоплазмы нейтрофильных гранулоцитов не содержит гранул, там имеются филаменты, состоящие из сократительных белков. Благодаря этим филаментам гранулоциты выбрасывают ложноножки (псевдоподии), участвующие в фагоцитозе или в передвижении клеток. Цитоплазма нейтрофильных гранулоцитов окрашивается слабо оксифильно, бедна органеллами, содержит включения гликогена и липидов. Ядра нейтрофилов имеют различную форму. В зависимости от этого различают сегментоядерные гранулоциты, палочкоядерные, а также юные. Сегментоядерные нейтрофильные гранулоциты составляют 47-72 % от всех гранулоцитов. Называются они так потому, что их ядра состоят из 2-7 сегментов, соединенных тонкими перемычками. В состав ядер входит гетерохроматин, ядрышек не видно. От одного из сегментов может отходить спутник (сателлит), представляющий собой половой хроматин. Спутник имеет форму барабанной палочки. Спутники имеются только в нейтрофильных гранулоцитах женщин или гермафродитов по женскому типу. Палочкоядерные нейтрофильные гранулоциты имеют ядро в виде изогнутой палочки, напоминающей русскую или латинскую букву S. Таких гранулоцитов в периферической крови содержится 3-5 %. Юные нейтрофильные гранулоциты составляют от 0 до 1 %, самые молодые, содержат ядра бобовидной формы. Нейтрофилы выполняют ряд функций. На поверхности цитолеммы гранулоцитов имеются Fcи СЗ рецепторы, благодаря которым они способны фагоцитировать комплексы антигенов с антителами и белками комплемента. Белки комплемента — эта группа белков, участвующих в уничтожении антигенов. Нейтрофилы фагоцитируют бактерий, выделяют биооксиданты (биологические окислители), выделяют бактериоцидные белки (лизоцим), убивающие бактерий. За способность нейтрофильных гранулоцитов выполнять фагоцитарную функцию И. И. Мечников назвал их микрофагами. Фагосомы в нейтрофилах обрабатываются сначала ферментами специфических гранул, а после этого сливаются с азурофильными гранулами (лизосомами) и подвергаются окончательной обработке. В нейтрофильных гранулоцитах содержатся кейлоны, которые тормозят репликацию ДНК незрелых лейкоцитов и тем самым тормозят их пролиферацию. Продолжительность жизни нейтрофилов составляет 8 суток, из которых они 8 часов циркулируют в крови, затем через стенку капилляров мигрируют в соединительную ткань и там до конца своей жизни выполняют определенные функции. Эозинофильные гранулоциты. Их всего 1-6 % в периферической крови; в капле крови имеют диаметр 8-9 мкм, а в мазке крови на стекле приобретают диаметр до 13-14 мкм. В состав эозинофильных гранулоцитов входят специфические гранулы, способные окрашиваться только кислыми красителями. Форма гранул овальная, их длина достигает 1,5 мкм. В гранулах имеются кристаллоидные структуры, состоящие из пластин, наслоенных друг на друга в виде цилиндров. Эти структуры погружены в аморфный матрикс. В гранулах содержатся главный щелочной белок, эозинофильный катионный белок, кислая фосфатаза и пероксидаза. В эозинофилах имеются и более мелкие гранулы. Они содержат гистаминазу и арилсульфатазу, фактор, блокирующий выход гистамина из гранул базофильных гранулоцитов и тканевых базофилов. Цитоплазма эозинофильных гранулоцитов окрашивается слабо базофильно, содержит слабо развитые органеллы общего значения. Ядра эозинофильных гранулоцитов имеют различную форму: сегментированную, палочковидную и бобовидную. Сегментоядерные эозинофилы чаще всего состоят из двух, реже — из трех сегментов. Функция эозинофилов: участвуют в ограничении местных воспалительных реакций, способны к слабо выраженному фагоцитозу; при фагоцитозе выделяют биологические окислители. Эозинофилы активно участвуют в аллергических и анафилактических реакциях при поступлении в организм чужеродных белков. Участие эозинофилов в аллергических реакциях заключается в борьбе с гистамином. Эозинофилы ведут борьбу с гистамином 4 способами: 1) уничтожают гистамин при помощи гистоминазы; 2) выделяют фактор, блокирующий выход гистамина из базофильных гранулоцитов; 3) фагоцитируют гистамин; 4) захватывают гистамин при помощи рецепторов и удерживают его на своей поверхности. На цитолемме имеются Fc-рецепторы, способные захватывать IgE, IgG, IgM. Есть рецепторы СЗ и рецепторы С4. Активное участие эозинофилов в анафилактических реакциях осуществляется за счет арилсульфатазы, которая, выделившись из мелких гранул, разрушает анафилаксии, который выделяется базофильными лейкоцитами. Продолжительность жизни эозинофильных гранулоцитов составляет несколько суток, в периферической крови они циркулируют 4-8 часов. Увеличение количества эозинофилов в периферической крови называется эозинофилией, уменьшение — эозинопенией. Эозинофилия возникает при появлении в организме чужеродных белков, очагов воспаления, комплексов антиген-антитело. Эозинопения наблюдается под влиянием адреналина, адренокортикотропного гормона (АКТГ), кортикостероидов. Базофильные гранулоциты. В периферической крови составляют 0,5-1 %; в капле крови имеют диаметр 7-8 мкм, в мазке крови — 11-12 мкм. В их цитоплазме содержатся базофильные гранулы, обладающие метахромазией. Метахромазия — это свойство структур окрашиваться в цвет, не ха- рактерный для красителя. Так, например, азур окрашивает структуры в фиолетовый цвет, а гранулы базофилов окрашиваются им в пурпурный цвет. В состав гранул входят гепарин, гистамин, серотонин, хондроитинсульфаты, гиалуроновая кислота. В цитоплазме содержатся пероксидаза, кислая фосфатаза, гистидиндекарбоксилаза, анафилаксии. Гистидин-декарбоксилаза является маркерным ферментом для базофилов. Ядра базофилов слабо окрашиваются, имеют слабодольчатую или овальную форму, их контуры слабо выражены. В цитоплазме базофилов органеллы общего значения слабо выражены, окрашивается она слабо базофильно. Функции базофильных гранулоцитов проявляются в слабо выраженном фагоцитозе. На поверхности базофилов имеются рецепторы класса Е, которые способны удерживать иммуноглобулины. Основная функция базофилов связана с гепарином и гистамином, содержащимися в их гранулах. Благодаря им базофилы участвуют в регуляции местного гомеостаза. При выделении гистамина повышается проницаемость основного межклеточного вещества и стенки капилляра, повышается свертываемость крови, усиливается воспалительная реакция. При выделении гепарина снижается свертываемость крови, проницаемость капиллярной стенки и воспалительная реакция. Базофилы реагируют на присутствие антигенов, при этом усиливается их дегрануляция, т. е. выделение гистамина из гранул, при этом усиливается отечность ткани за счет повышения проницаемости стенки сосудов. Базофилы играют основную роль в развитии аллергических и анафилактических реакций. На их поверхности есть IgE- рецепторы к IgE. Агранулоцнты Лимфоциты составляют 19-37 %. В зависимости от размеров лимфоциты подразделяются на малые (диаметр менее 7 мкм), средние (диаметр 8-10 мкм) и большие (диаметр более 10 мкм). Ядра лимфоцитов чаще круглые, реже вогнутые. Цитоплазма слабо базофильна, содержит небольшое количество органелл общего значения, имеются азурофильные гранулы, т. е. лизосомы. При электронно-микроскопическом исследовании было установлено 4 разновидности лимфоцитов: 1) малые светлые, составляют 75 %, их диаметр равен 7 мкм, вокруг ядра располагается тонкий слой слабо выраженной цитоплазмы, в которой содержатся слабо развитые органеллы общего значения (митохондрии, комплекс Гольджи, гранулярная ЭПС, лизосомы); 2) малые темные лимфоциты, составляют 12,5%, их диаметр 6-7 мкм, ядерно-цитоплазматическое отношение смещено в сторону ядра, вокруг которого еще более тонкий слой резко базофильной цитоплазмы, в которой содержится значительное количество РНК, рибосом, митохондрий; другие ор- ганеллы отсутствуют; 3) средние составляют 10-12 %, их диаметр около 10 мкм, цитоплазма слабо базофильна, в ней со- держатся рибосомы, ЭПС, комплекс Гольджи, азурофильные гранулы, ядро имеет круглую форму, иногда имеет вогнутость, содержит ядрышки, имеется рыхлый хроматин; 4) плазмоциты, составляют 2 %, их диаметр 7-8 мкм, цитоплазма окрашивается слабо базофильно, около ядра имеется неокрашиваемый участок — так называемый дворик, в котором содержится комплекс Гольджи и клеточный центр, в цитоплазме хорошо развита гранулярная ЭПС, в виде цепочки опоясы- вающая ядро. Функция плазмоцитов — выработка антител. Функционально лимфоциты делятся на В-, Т- и О-лимфоциты. В-лимфоциты вырабатываются в красном костном мозге, антигеннезависимой дифференцировке подвергаются в аналоге бурсы Фабрициуса. Функция В-лимфоцитов — выработка антител, т. е. иммуноглобулинов. Иммуноглобулины В- лимфоцитов являются их рецепторами, которые могут быть сконцентрированы в определенных местах, могут быть диффузно рассеяны по поверхности цитолеммы, могут перемещаться по поверхности клетки. В- лимфоциты имеют рецепторы к антигенам и эритроцитам барана. Т-лимфоциты подразделяются на Т-хелперы, Т-супрессоры и Т-киллеры. Т-хелперы и Т-супрессоры регулируют гуморальный иммунитет. В частности, под влиянием Т-хелперов повышается пролиферация и дифференцировка В-лимфоцитов и синтез антител в В-лимфоцитах. Под влиянием лимфокинов, выделяемых Т-супрессорами, пролиферация В-лимфоцитов и синтез антител подавляются. Т-киллеры участвуют в клеточном иммунитете, т. е. они уничтожают генетически чужеродные клетки. К киллерам относятся К-клетки, которые убивают чужеродные клетки, но только при наличии к ним антител. На поверхности Т-лимфоцитов имеются рецепторы к эритроцитам мыши. О-лимфоциты недифференцированы и относятся к резервным лимфоцитам. Морфологически различить В- и Т-лимфоциты не всегда возможно. В то же время в В-лимфоцитах лучше развита гранулярная ЭПС, в ядре имеются рыхлый хроматин и ядрышки. Лучше всего Т- и В- лимфоциты можно различить при помощи иммунных и иммуноморфологических реакций. Продолжительность жизни Т-лимфоцитов составляет от нескольких месяцев до нескольких лет, В- лимфоцитов — от нескольких недель до нескольких месяцев. Стволовые клетки крови (СКК) морфологически не отличимы от малых темных лимфоцитов. Если СКК попадают в соединительную ткань, то они дифференцируются в тучные клетки, фибробласты и др. Моноциты. Составляют 3-11 %, их диаметр в капле крови равен 14 мкм, в мазке крови на стекле — 18 мкм, цитоплазма слабо базофильна, содержит органеллы общего значения, в том числе хорошо развитые лизосомы, или азурофильные гранулы. Ядро чаще всего имеет бобовидную форму, реже — подковообразную или овальную. Функция — фагоцитарная. Моноциты циркулируют в крови 36-104 часов, затем мигрируют через стенку капилляров в окружающую ткань и там дифференцируются в макрофаги — глиальные макрофаги нервной ткани, звездчатые клетки печени, альвеолярные макрофаги легких, остеокласты костной ткани, внутриэпидермальные макрофаги эпидермиса кожи и др. При фагоцитозе макрофаги выделяют биологические окислители. Макрофаги стимулируют процессы пролиферации и дифференцировки В- и Т-лимфоцитов, участвуют в иммунологических реакциях. Лейкоцитарная формула определенные процентные соотношения лейкоцитов. Число лейкоцитов у новорожденного увеличено и достигает 10 -30 х 10 9 /л. В течение 2 недель после рождения их число падает до 9-15 х 10 9 /л. Количество лейкоцитов достигает к 14-15 годам уровня, который сохраняется у взрослого. Соотношение числа нейтрофилов и лимфоцитов у новорожденного такое же, как и у взрослого 4,5 - 9 х 10 9 /л. В последующие сроки содержание лимфоцитов возрастает, а нейтрофилов падает, и таким образом, к 4ым суткам количество этих видов лейкоцитов уравнивается (первый физиологический перекрест). Дальнейший рост числа лимфоцитов и падение нейтрофилов приводит к тому, что на 1-2 году жизни лимфоциты составляют 65%, а нейтрофилы 25%. Новое снижение числа лимфоцитов и повышение нейтрофилов приводит к выравниванию обоих показателей у 4-летних детей (второй физиологический перекрест). Постепенное снижение содержания лимфоцитов и повышение нейтрофилов продолжается до полового созревания, когда количество этих видов лейкоцитов достигает нормы взрослого человека. 56. Взаимосвязь моноцитов и лимфоцитов в иммуногенезе. Тимусзависимые лимфоциты (Т-лимфоциты) составляют 70-75% всех лимфоцитов и включают следующие субпопуляции: Т-киллеры (убийцы) — обеспечивают клеточный иммунитет, т.е. уничтожают микроорганизмы, а также свои мутантные клетки (опухолевые, например); Т-киллеры распознают и контактируют с антигеном при помощи специфических рецепторов. После контакта Т-лимфоциты отходят от чужеродной клетки, но оставляют на поверхности этой клетки небольшой фрагмент своей цитолеммы — на этом участке резко повышается проницемость цитолеммы чужеродной клетки для ионов натрия и они начинают поступать в клетку, по закону осмоса вслед за натрием в клетку поступает и вода — в результате чужеродная клетка разбухает и, в конце концов, цитолемма не выдерживает и разрывается, клетка погибает. Т-хелперы (помощники) — участвуют в гуморальном иммунитете: идентифицируют «свое» или «чужое», посылают предварительный химический сигнал (индуктор иммуногенеза) В-лимфоцитам о поступлении в организм антигена, «списывают» информацию с поступившего антигена и через макрофагов передают ее В-лимфоцитам; Т-супрессоры (подавители) — подавляют чрезмерную пролиферацию В-лимфоцитов при поступлении в организм антигена и тем самым предотвращают гиперэргическую реакцию при иммунном ответе. Моноциты — крупные лейкоциты, диаметром 12-15 и более мкм. Ядро несегментировано, бобовидной или подковообразной формы с умеренно конденсированным хроматином. Цитоплазма пепельно- серого цвета, может содержать одиночные азурофильные гранулы. Под электронным микроскопом хорошо выражены лизосомы, много митохондрий. Клетка активно передвигается при помощи псевдоподий. В норме содержание в крови 6-8%. Функции: защитная путем фагоцитоза и переваривания микроорганизмов, инородных частиц и продуктов распада собственных тканей. Моноциты как и все остальные лейкоциты функционируют в тканях. Выходя из кровеносных сосудов в ткани моноциты превращаются в макрофаги (в организме насчитывается до 12 разновидностей макрофагов, они составляют макрофагическую систему); участие в гуморальном иммунитете — получают от Т-хелперов информацию об антигене и после переработки передают ее В-лимфоцитам; вырабатывают противовирусный белок интерферон и противомикробный белок лизоцим; вырабатывают КСФ (колониестимулирующий фактор), регулирующий гранулоцитопоэз. 57. Дифференцировка Т-лимфоцитов, их функциональное значение. Т-лимфоциты, или тимусозависимые лимфоциты, образуются из СК костного мозга, а созревают в тимусе. Они составляют 70% в популяции лимфоцитов. Для Т-клеток характерен низкий по сравнению с В- клетками уровень поверхностных иммуноглобулиновых рецепторов, способных распозновать и связывать антигены, участвовать в иммунных реакциях. Основная их функция – обеспечение рекций клеточного иммунитета и регуляция гуморального иммунитета (стимуляция или подавление дифференцировки В- лимфоцитов). Т-лимфоциты вырабатывают лимфокины, которые регулируют В-лимфоциты. В популяции Т- лимфоцитов выделяют: Т-киллеры, Т- хелперы и Т-супрессоры. Тк участвуют в реакциях клеточного иммунитета. Обеспечивают лизис чужеродных клеток и собственных измененных клеток. Тх стимулируют дифференцировку В-лимфоцитов, образование из них плазмоцитов и продукцию иммуноглобулинов. Т. о., их главная функция – распознование чужеродных антигенов, секреция интерлейкинов, стимулирующих В0лимфоциты в участии иммунных реакций. Тс способны ингибировать активность Тх, В-лимфоцитов и плазмоцитов. Они участвуют в аллергических реакциях, реакциях гиперчувствительности. Тс подавляют дифференцировку В-лимфоцитов. Родоначальником всех клеток иммунной системы является СКК. СКК в эмбриональном периоде локализуются в желточном мешке, печени и селезенке. Затем появляются в КМ и продолжают пролиферировать в постнатальной жизни. Из СКК в КМ образуется клетка-предшественница лимфопоэза (лимфоидная мультипотентная родоначальная клетка), которая генерирует 2 типа клеток: пре-Т-клетки и пре-Б-клетки. Пре-Т-клетки мигрируют из КМ через кровь в тимус. Еще в период внутриутробного развития в тимусе создается микроокружение, имеющее значение для дифференцировки Т-лимфоцитов. И мигрирующие в тимус пре-Т-лимфоциты приобретают способность реагировать на стимулы микроокружения. Пре-Т-клетки пролиферируют, трансформируются в Т-лимфоциты, несущие характерные антигены. Т-лимфоциты генерируют и поставляют в кровообращение и в тимусозависимые зоны 3 типа лимфоцитов: Тк, Тх, Тс. Специфическое взаимодействие с антигеном в периферических лимфоидных органах служит началом пролиферации и дифференцировки в зрелые, долгоживущие клетки (Т-клетки памяти), составляющие большую часть рециркулирующих Т-лимфоцитов. Но из тимуса мигрируют не все клетки, часть Т-лимфоцитов погибает там. 58. Мезенхима, пути развития, производные, морфофункциональная характеристика. Из первичной полоски выселяется группа клеток, которые выстилают изнутри трофобласт и окружают желточный и амниотический пузырьки. Эти клетки образуют внезародышевую мезодерму (мезенхиму). Мезенхима в теле зародыша является источником формирования многих структур – клеток крови и кроветворных органов, СТ, сосудов, гладкой мышечной ткани, микроглии. Так же она дает начало СТ внезародышевых органов – амниона, хориона, желточного мешка. СТ эмбриона и его провизорных органов характеризуется высокой гидрофобностью его межклеточного вещества, богатством мукопротеинов в аморфном веществе. СТ провизорных органов дифференцируется быстрее, чем в зачатках органов, что обуславленно потребностью в установлении связи зародыша СС материнским организмом и обеспечении их развития. Дифференцировка мезенхимы хориона наступает рано, но происходит не одновременно по всей поверхности. Наиболее активно процесс идет в области развития плаценты. Здесь же появляются и первые волокнистые структуры, которые играют важную роль в проыессе формирования и укрепления плаценты в матке. При развитии волокнистых структур стромы ворсин последовательно образуются аргирофильные преколлагеновые волокна, а затем коллагеновые. На 2ом месяце развития в зародыше человека раньше всего начинается дифференцировка скелетогенной и кожной мезенхимы, а ткаже мезенхимы стенки сердца и крупных кровеносных сосудов. Артериии мышечного и эластического типа эмбриона и артерии стволовых ворсин плаценты и их разветвлений содержат десминотрицательные ГМК, обладающие свойством более быстрого сокращения. На 7ой неделе развития зародыша в кожной мезенхиме и мезенхиме внутренних органов появляются мелкие липидные включения, а позднее на 8-9 неделях происходит формирование жировых клеток. Вслед за развитием СТ ССС дифференцируется СТ легких и пищеварительной трубки. Дифференцировка мезенхимы у зародыша на 2ом месяце равития начинается с увеличения количества гликогена в клетках. В этих участках также увеличивается активность фосфатаз, а в дальнейшем в ходе дифференцировки накапливаются ГП, синтезируются РНК и белки. В течение плодного периода формируется хрящевая ткань и появляются первые очаги окостенения. |