1. Образование антибиотиков в естественных и лабораторных условиях. Вещества предшественники для биосинтеза антибиотиков
 Скачать 0.99 Mb.
|
|
В-третьих, при оценке спектра действия того или иного антибиотика следует учитывать наличие или отсутствие защитных механизмов в клетках микроорганизмов. В настоящее время к основным защитным механизмам относят: 1) модификацию молекул-мишеней действия антибиотика; 2) продукцию ферментов, инактивирующих антибиотик; 3) наличие систем активного выброса антибиотика из клетки. Различают природную и приобретенную устойчивость к антибиотикам. При природной устойчивости у микроорганизмов отсутствует мишень для действия препарата. Например, микоплазмы, не имеющие клеточной стенки, устойчивы к действию β-лактамных антибиотиков. Под приобретенной устойчивостью понимают возникновение в пределах штамма клеток микроорганизмов с существенно более высокими значениями МИК антибиотика для них, чем для популяции в целом. Клиническая устойчивость штаммов заключается в неэффективности и невозможности лечения инфекционного заболевания данным антибиотиком, хотя микроорганизм-возбудитель и обладает мишенями для его действия. В этом случае в организме не может быть достигнута такая концентрация препарата, при которой происходит подавление роста микробных клеток. С точки зрения клинической медицины к штаммам микроорганизмов, чувствительным к данному антибиотику, относят те, рост которых подавляется при терапевтической концентрации препарата в крови. Умеренно чувствительными считаются штаммы, для подавления роста которых требуются максимально переносимые концентрации препаратов. К устойчивым относят те бактерии, для которых бактериостатический эффект может быть достигнут только in vitro при высоких концентрациях препарата, являющихся токсичными для человека. Проблема возникновения и распространения устойчивых к антибиотикам форм бактерий является фактором, ограничивающим использование ряда антибиотиков, и может быть выделена в самостоятельный раздел учения об антибиотиках. В настоящее время распространение устойчивых форм связывают со следующими факторами: • использованием ряда антимикробных препаратов для эмпирической терапии; • профилактическим применением антибиотиков при вирусных инфекциях; • использованием новейших препаратов широкого спектра действия по сомнительным показаниям; • неадекватными дозировками препаратов; • недостаточно длительным лечением, самолечением; • применением антибиотиков в сельском хозяйстве, особенно в качестве кормовых добавок; • широким распространением системы «быстрого питания»; • уменьшением грудного вскармливания. Все перечисленные моменты необходимо учитывать при проведении рациональной химиотерапии, общий принцип которой заключается в следующем: при введении антимикробного препарата в организм в крови должна создаваться такая его концентрация, которая превосходит МИК для возбудителя заболевания, но в то же время не вызывает выраженного токсического эффекта. Исходя из этого выделяют три основных параметра антибиотикотерапии: разовая вводимая доза препарата; временной интервал между введением препарата; общая продолжительность курса, которая зависит от нозологической формы, тяжести течения заболевания и состояния больного. 4. Рифамицины как ингибиторы активности РНК – полимеразы. Рифампицин специфически подавляет инициацию синтеза РНК, вероятно, за счет инактивации РНК-полимеразы и индукции в ней конформационных изменений. На первой стадии взаимодействия происходит быстрое связывание фермента и антибиотика, далее следует медленное мономолекулярное изменение конформации фермента, приводящее к проявлению ингибирующего действия антибиотика. Возможно взаимо-действие между ароматическими кольцами в молекуле антибиотика и ароматическими аминокислотами в активном центре фермента. Рифампицин мало влияет на образование первой фосфодиэфирной связи, но практически полностью подавляет образование следующей. Однако если образование второй и третьей связи все же произошло, то дальнейший процесс к антибиотику не чувствителен. Устойчивость к рифампицину может быть только хромосомальной и связана с изменением β-субъединицы РНК-полимеразы. Рифамицины были открыты в 1958 году, продуцентом является Nocardia mediterranei. Антибиотик активен в отношении грамположительных бактерий и микобактерий, через наружную мембрану грамотрицательных проникает плохо. Побочные эффекты от использования антибиотиков незначительны:аллергия, окрашивание тканевых жидкостей в красный цвет, плохое вса- сывание через желудочно-кишечный тракт. 7. Нерибосомный синтез антибиотиков.    8. Устойчивость клеток к действию аминогликозидных антибиотиков Устойчивость к аминогликозидам может быть обусловлена как мутациями, затрагивающими хромосомальные гены, так и наличием в клетке плазмид, и проявляется на нескольких уровнях: • модификации рибосом, которая выражается в изменении или отсутствии белков для связывания антибиотиков – rpsL-мутация (S12) и rrs-мутация (16S-рРНК); • снижение транспорта антибиотика в клетку, например, у анаэробных бактерий. В этом случае наблюдается одновременная устойчивость практически ко всем аминогликозидам; • синтез ферментов, инактивирующих антибиотики, как правило, детерминируемый плазмидными генами. Такие ферменты не выделяются в среду и локализованы на наружной поверхности цитоплазматической мембраны или в периплазме грамотрицательных бактерий, они требуют наличия кофакторов и нестабильны при выделении. Известны три типа таких ферментов: N-ацетилтрансферазы, О-фосфотрансферазы и О-аде- нилилтрансферазы. В каждом случае происходит взаимодействие фермента с конкретной группой в молекуле антибиотика: NH2-группа может быть замещена на ацетильный остаток (кофактор АсКоА); ОН-группа –на остаток фосфорной или адениловой кислот (кофактор АТФ). В молекуле аминогликозидов три функциональные группы подвергаются аце тилированию, шесть – фосфо- или аденилированию. Фосфотрансферазы (АРН) в зависимости от положения атакуемой группы делятся на пять подгрупп, обозначаемых А, B, C, D, E. Среди ферментов этих групп описаны несколько, обладающих бифункциональной активностью – фосфо- и ацетилтрансферазной. У исследованных штаммов стрептококков и стафилококков соотвествующий ген мог быть локализован как на конъюгативной, так и неконъюгативной плазмидах, а также хромосомально. Синтез ферментов такого рода обусловливают гены устойчивости в составе транспозонов Tn5, Тn1699, Tn 903 и др. Аденилилтрансферазы (ААВ или ANT) разделены на пять различных типов. Ацетилтрансфераз (ААС) известно четыре типа, они обнаруживаются только у грамотрицательных бактерий, гены имеют плазмидную или хромосомальную локализацию. Ацетилированию могут подвергаться только дезоксистрептаминовые антибиотики. Аминогликозиды относятся к препаратам с низким терапевтическим индексом, т. е. малым разрывом между терапевтической и токсической дозой или концентрацией. Такой эффект наиболее часто объясняют тем, что антибиотики являются поликатионами, а большинство биополимеров клетки – полианионы. In vitro показано взаимодействие аминогликозидов с фосфолипидами, липопротеинами, нуклеиновыми кислотами. Существует модель, согласно которой в нервной ткани аминогликозиды взаимодействуют с полифосфоинозитидами – компонентами мембран. Это приводит к изменению проницаемости для различных катионов. Ототоксический эффект аминогликозидов (влияние на восьмую пару черепно-мозговых нервов и сопутствующая глухота при длительном применении) связывают с конкуренцией между аминогликозидами и ка- тионами кальция за отрицательно заряженные фосфорные остатки. В не- которых случаях частота ототоксичности наблюдается в пределах 2–25 %. Ототоксический эффект не снимается при прекращении приема антибиотика, а его наличие зависит от индивидуальных особенностей и срока приема антибиотика. Нефротоксический эффект и нейромышечная блокада (курареподобное действие) обусловлены взаимодействием аминогликозидов с клетками почечных канальцев и с актином. Нефротоксический эффект может сниматься при прекращении приема антибиотиков. Наиболее нефротоксичным является гентамицин. Указанные факты, а также развитие аллергических реакций и высокая частота возникновения резистентных форм, ограничивают использование аминогликозидов в клинике. 9. Регуляция процесса образования антибиотиков. Фактор А и его роль в процессе образования антибиотиков. Вопрос о регуляции синтеза того или иного продукта сводится практически к вопросу о регуляции синтеза или изменению активности ферментов, участвующих в процессе. Ферменты, участвующие в синтезе вторичных метаболитов, обладают меньшей субстратной специфичностью, чем ферменты первичного метаболизма. Это связано с тем, что ошибки в специфичности работы последних скорее всего летальны для клетки, в то время как при биосинтезе вторичных метаболитов они могут быть даже полезны, если синтезируемое с их помощью соединение сохраняет биологическую активность. Ферменты, участвующие в биосинтезе антибиотиков, могут быть разделены на три группы: 1) образующие и модифицирующие промежуточные продукты метаболизма, которые являются исходными для синтеза данного антибиотика. Такие продукты образуются путем конденсации первичных предшественников, например АсКоА, который может быть превращен в мевалоновую кислоту, поликетидные структуры; 2) катализирующие образование первичных предшественников, например малоната, метилмалоната, их ацилированных производных; 3) образующие первичные метаболиты, которые затем включаются в синтез вторичных, например ферменты биосинтеза валина и цистеина, аминокислот, составляющих молекулу антибиотика. Относительно механизма, который обусловливает образование антибиотика именно в идиофазе, можно сказать, что синтез ферментов, ответственных за это в период трофофазы, подавлен, после ее окончания должна наступить дерепрессия их синтеза. Возможны несколько механизмов обеспечения данного процесса. Наиболее хорошо изученным является фактор А и его продукция и участие в процессах биосинтеза стрептомицина. Продукция данного вещества была обнаружена А. Хохловым в 1970-х годах. Изучение различных по активности мутантов показало, что при совместном выращивании ряда из них можно получить такой же выход антибиотика, как и при выращивании высокоактивного продуцента. В дальнейшем было обнаружено, что один из неактивных в отношении синтеза антибиотика мутантов нуждается в крайне небольшом количестве вещества, которое образуется малоактивным штаммом, причем это количество настолько мало, что оно не может рассматриваться как продукт промежуточного метаболизма: 0,001 мкг вещества А, прибавленного к нулевому мутанту, вызывает образование 1000 мкг стрептомицина, т. е. коэффициент индукции равен 106. Впоследствии было показано, что фактор А относится к неспецифическим регуляторам биосинтеза антибиотиков и других процессов. Молекулярная масса А-фактора – 342, представляет он собой 2S-изокапроноил-3S-оксиметил-γ-бутирлактон. Для фактора А в клетках существует специфический рецепторный белок, обозначенный как Arp A, который действует как репрессор во время ранних стадий роста. После внутриклеточного накопления фактора А и связывания его с Arp A белком последний высво- бождается от ДНК, где он связан с гипотетическим геном Х, который ре-гулирует экспрессию так называемых генов adp (А-фактор зависимые белки). Морфологические особенности определяет аdp В ген, в то время как другие гипотетически влияют на синтез стрептомицина. Размер белка Arp A – 24–29 кДа, также как и других белков такого типа (BarA и IM-2; гены barA и farA). Данные белки имеют примерно на 40 % сходный состав. На N-концевом участке имеется последовательность спираль – клубок – спираль, которая связывается с ДНК; на С-концевом участке – фрагмент с высокой специфичностью связывания с бутиролактонами. Arp A, Bar A и IM-2 являются транскрипционными регуляторами, которые предотвращают экспрессию определенных генов. После достижения (по мере роста культуры) критических концентраций факторов-лактонов они связываются с белками. Как неспецифический регулятор, фактор А принимает участие в образовании мицелия у Streptomyces griseus. Помимо неспецифических, известны и специфические регуляторы процесса образования антибиотиков. Это гены – регуляторы соответствующих оперонов, например биосинтеза стрептомицина (strR) и спектиномицина (srmR). Их белковые продукты связываются с ДНК в области промоторов и активируют структурные гены. 10. Природные и синтетические антибиотики, ингибирующие синтез предшественников НК: механизм действия и развитие резистентности. Антибиотики, относящиеся к этой группе, как правило, рассматриваются как потенциальные соединения при терапии опухолей и вирусных инфекций. Однако их не следует считать соединениями с избирательным действием, так как нуклеотиды участвуют во множестве клеточных процессов и их эффект достигается за счет совокупного действия на клетку. Для большинства антибиотиков данной группы механизм действия заключается в ингибировании ферментов на отдельных этапах пути синтеза нуклеотидов. Так, например, азасерин имеет большое сходство с глутамином, и при образовании связи с одним из ферментов пути био-синтеза пуринов ковалентная связь между SH-группой цистеина в молекуле фермента и азасерином более прочна, чем между глутамином и ферментом. По такому же механизму действует и диазооксонорлейцин. Ингибиторы конкретных реакций не имеют высокой специфичности и по этой причине ингибируют ряд реакций, в которых принимает участие глутамин. Аналогом аспарагиновой кислоты является хадацидин (Penicil-lium), который действует на стадии амидирования УМФ, причем его участие в реакции является достаточно специфичным. К веществам – ингибиторам синтеза пуринов относятся синтетические соединения из группы сульфаниламидов, триметоприм, метотрексат. Их действие основано на подавлении синтеза фолиевой кислоты на разных стадиях. Мишенью для действия сульфаниламидов является фермент дигидроптероатсинтаза (ДГПС); для триметоприма – дигидрофолатредуктаза (ДГФР), которая восстанавливает фолиевую кислоту в ди- и тетрагидрофолиевую. Последняя является донором одноуглеродных единиц на стадии синтеза пуринов и пиримидинов. Сульфаниламиды по структуре близки к парааминобензойной кислоте, и возможный механизм их действия заключается в подавлении включения ПАБК в фолиевую кислоту либо включение вместо ПАБК. Добавление фолиевой кислоты экзогенно не снижает ингибирующий эффект, поскольку она не в состоянии проникать в клетки бактерий. На клетки животных сульфаниламиды не действуют, так как они не синтезируют фолиевую кислоту. Резистентность определяется наличием ДГПС, устойчивых к сульфаниламидам. Кроме хромосомально локализованных генов их синтеза, имеются также и гены, локализованные на плазмидах и детерминирующие ДГПС I и ДГПС II. Ферменты характеризуются различной стабильностью при разных температурах, молекулярной массе и обладаютпри этом слабым сродством к сульфаниламидам, но не к ПАБК. Показано, что ферменты I типа обнаруживаются чаще всего у плазмидсодержащих штаммов энтеробактерий с множественной лекарственной резистентностью. Такие плазмиды являются конъюгативными. Ферменты II типа c интезируются клетками с неконъюгативными плазмидами IncQ групп несовместимости, имеющими дополнительно устойчивость к стрептомицину, обусловленную наличием фосфоаденилилтрансфераз. Считают, что оба типа ферментов синтезируются конститутивно, хотя их синтез и находится под контролем разных промоторов. Менее распро-страненной является устойчивость, связанная со снижением поступления антибиотика в клетку. Устойчивость к триметоприму, детерминируемая плазмидными генами, связана с образованием четырех типов ДГФР. Ферменты I и II типа определяют высокий уровень резистентности (200–1000 мкг/мл), а их синтез детерминируют гены, находящиеся в составе Tn7 и Tn702. Ферменты III и IV типа определяют средний (100 мкг/мл) и низкий (8 мкг/мл) уровень резистентности соответственно. Ферменты отличаются друг от друга и от хромосомально локализованных генов по молекулярной массе, оптимуму рН, стабильности, чувствительности к ингибиторам и т. д. Устойчивость, определяемая хромосомальными генами, связана с повышенной продукцией фермента (в 80–100 раз). Обычно в клинике оба препарата используются в комплексе (бисептол, сульфатон) для лечения урогенитальных инфекций и инфекций пищеварительного тракта (этазол, фталазол). Следует отметить, что используемые по отдельности препараты обладают бактериостатическим, а совместно – бактерицидным действием. Возможным побочным действием является кристаллурия: образование в печени нерастворимого ацетата сульфаниламида; изменение формулы крови, повышенная чувствительность к препаратам. 12. β – лактамазы, их характеристика и роль в развитии устойчивости к β – лактамным антибиотикам. Обнаруживаются β-лактамазы в цитоплазматической мембране как грамположительных, так и грамотрицательных бактерий. У первых они выделяются дополнительно в окружающую среду, у вторых – в пери- плазматическое пространство. Более высокая каталитическая активность β-лактамаз грамположительных бактерий объясняется строением клеточной стенки: пептидогликан непосредственно соприкасается с окружающей средой, и молекулы антибиотика могут быть инактивированы только β-лактамазами с высокой удельной активностью, работающими в большом объеме среды. У грамположительных бактерий хорошо изучены данные ферменты у стафилококков и бацилл. После индукции синтеза количество фермента может достигать 0,1 % от всего белка. У грамотрицательных бактерий β-лактамазы обнаруживаются, за небольшим исключением, в периплазматическом пространтстве. Известны лишь несколько случаев обнаружения внеклеточных β-лактамаз, например у нейссерий. Считается, что в периплазме β-лактамазы располагаются упорядоченно вокруг пориновых каналов, что усиливает эффективность их действия. Количество β-лактамаз у грамотрицательных бактерий – около тысячных долей процента. Характеризуя β-лактамазы с физико-химической точки зрения, сразу же отмечают их субстратный профиль: наиболее легко гидролизуемым субстратом является для них бензилпенициллин, и в большинстве случаев активность β-лактамаз по отношению к другим антибиотикам выражают в процентах от их активности к бензилпенициллину. Субстратный профиль определяют двумя способами – спектрофотометрически и иодометрически. В первом случае судят об уменьшении содержания антибиотика в реакционной смеси по скорости его гидролиза; во втором –выявляют продукты гидролиза, пенициллоиновые и цефалоспороиновые кислоты (по образованию окрашенных продуктов с иодом). Практически все β-лактамазы не имеют четвертичной структуры, т. е. состоят из одзованных на плазмидах, кодируемые ими ферменты активны в отношении более широкого круга соединений, вырабатываются в высоких концентрациях и являются общими для различных видов. Ферменты же, детерминируемые хромосомальными генами, гидролизуют либо пенициллины, либо цефалоспорины, вырабатываются в невысоких концентрациях, но индуцибельны, имеют тенденцию к видоспецифичности. Хромосомально локализованные гены синтеза β-лактамаз обнаружены практически у всех патогенных бактерий. β-Лактамазы могут про- дуцироваться как конститутивно (E. coli, Proteus, Shigella), так и индуци-бельно (Enterobacter, Serratia, Citrobacter, Pseudomonas). Индукторами синтеза служат β-лактамные антибиотики в субингибирующих концен- трациях (4–40 мкг/л), причем продукция β-лактамаз может увеличиваться в сотни и тысячи раз. В настоящее время рассматривают два возможных механизма индукции синтеза β-лактамаз антибиотиками: 1) первый заключается в том, что антибиотик взаимодействует с трансмембранным белком, С-концевой участок которого расположен на наружной стороне мембраны, имеет аминокислотные последовательности, сходные с β-лактамазой и ПСБ. Взаимодействие такого белка с ан-тибиотиками и служит сигналом к синтезу β-лактамаз. Белок такого типа, кодируемый геном blaR1, обнаружен у B. lichiniformes. Белок 53 Кда (ген ampG) Citrobacter freundii выполняет ту же функцию. Если клонировать структурный ген β-лактамазы ampC без гена ampG в E. coli, индукции синтеза β-лактамазы не наблюдается; 2) другим сигналом может быть накопление клеткой избытка предше-ственников клеточной стенки, которые образуются при действии β-лактам-ных антибиотиков. Это подтверждается тем, что при клонировании β-лак- тамазных генов их индукция наблюдалась только в нормальных клетках, а не в L-формах. Индуцибельные опероны расположены в клетках некоторых энтеро- бактерий и псевдомонад рядом с геном фумаратредуктазы. Между генами frd и ampC располагается регуляторный ген ampR. Эти гены транскрибируются в противоположных направлениях с перекрывающихся промоторов. В регуляции синтеза β-лактамаз принимает участие и ген ampD, продуктом которого является белок 25 кДа, репрессирующий синтез β-лактамаз. Продукт гена ampR связывается с промотором, прилегающим к гену ampC, и способствует его транскрипции. Продукт гена ampD либо разрушает индуктор, который после связывания с белком ampR связывается с ДНК, либо ampD белок образует комплекс с ДНК,который разрушается после действия индуктора. 13. Основные положения учения Эрлихом о химиотерапии инфекционных больных Основополагающими работами, которые использовали научный подход к проблеме химиотерапии инфекционных заболеваний, стали исследования П. Эрлиха, опубликованные в 1897 году, а в период с 1902 по 1912 год им были сформулированы почти все концепции, которые легли в основу последующего изучения антимикробных агентов. Его первые идеи возникли при работе с прижизненными красителями, избирательно поглощаемыми живыми клетками. Основываясь на работах Р. Коха о лечебном действии оксида мышьяка при терапии трипаносомоза, П. Эрлих синтезировал другие родственные соединения и исследовал их активность. В 1910 году им был создан лекарственный препарат сальварсан, получивший широкое применение в лечении сифилиса. П. Эрлихом был предложен и сам термин «химиотерапия» для обозначения химических соединений, с помощью которых можно бороться с инфекционными болезнями. Впоследствии были сформулированы ос-новные принципы этого научного направления. Во-первых, было посту-лировано, что лекарственные препараты должны связываться с опреде-ленными рецепторами, имеющимися на поверхности клеток. Данное по-ложение нашло свое отражение в современных представлениях о меха-низмах транспорта лекарств через клеточные мембраны. Во-вторых, было постулировано, что химиотерапевтическое соединение должно обладать двумя функциональными особенностями: иметь участок связывания, или «гаптофор», обеспечивающий взаимодействие с рецепторами клеток; и «токсофор» − токсичную группировку, обусловливающую воздействие на клетку. В-третьих, П. Эрлих установил важность количественных измерений соотношения между дозой соединения, достаточной для лечебного эффекта и оказывающей токсическое действие. Им были введены такие понятия, как максимально переносимая доза (ДТ), минимальная лечебная доза (ДС), а их соотношение (ДТ/ДС) получило название химиотерапевтического индекса. Малотоксичные и нетоксичные препараты имеют индекс больше 1; если эта величина равна или меньше 1, то препарат является токсичным или высокотоксичным. П. Эрлих предложил и стратегию поиска новых лекарственных препаратов. Один из подходов – проведение испытания большого числа различных химических соединений в относительно простом биологическом тесте для установления связи биологической активности с тем или иным типом химической структуры. Второй метод, предложенный ученым, заключался в направленном синтезе химических соединений, обладающих нужной антимикробной активностью. Любое улучшение антимикробных свойств (расширение спектра действия, снижение токсичности и др.) может быть использовано для получения наилучшей из возможных химических структур. П. Эрлих также считал, что соединения, действующие на возбудителей инфекции, не обязательно должны вызывать гибель последних. Вполне достаточным может быть предотвращение его размножения, а в дальнейшем природные защитные механизмы организма-хозяина (клеточные и гуморальные факторы иммунитета) справятся с чужеродными организмами. П. Эрлих обратил внимание и на проблему устойчивости микроорганизмов к химиотерапевтическим соединениям. На основании различной чувствительности трипаносом к гистологическим красителям был сделан вывод о наличии у клеток различных рецепторов для взаимодействия с ними. В случае устойчивости и меньшего накопления красителя внутри клеток происходит снижение сродства между рецепторами и красителем. Важность научных выводов П. Эрлиха и сформулированных им основных положений теории химиотерапии позволяет назвать данный этап периодом научной химиотерапии. В 1935 году появилось сообщение Г. Домагка об эффективности пронтозила красного (красный стрептоцид) при терапии бактериальных инфекций, вызванных грамположительными кокками. Оказалось, что в организме данное соединение распадается с образованием сульфаниламида, который и является эффективным антибактериальным агентом. В дальнейшем были синтезированы другие производные сульфаниламидов (этазол, фталазол), которые успешно используются до настоящего времени. Однако и сейчас достигнуто относительно мало в создании и использовании синтетических препаратов для терапии инфекционных заболеваний: синтетическими, например, являются производные 8-оксихинолина, нитрофурановые соединения и некоторые другие. Этот период развития иссследований, посвященный обнаружению синтетических антимикробных препаратов, получил название сульфаниламидотерапии и продолжался примерно до 1940 года, когда был получен в кристаллическом виде первый антибиотик – пенициллин. История открытия антибактериальных свойств пенициллина является увлекательной сама по себе и стала классическим примером для молодых исследователей. В 1929 году А. Флеминг обнаружил факт задержки роста стафилококков в присутствии плесени Penicillium notatum, и вещество, которое вызывало такой эффект, было названо пенициллином. Однако только в 1939−1940 годах Г. Флори и Э. Чейну удалось получить это вещество в неочищенном кристаллическом, но высокоактивном виде и продемонстрировать его активность in vitro. Данные исследования следует рассматривать как величайшие в медицине и биологии. Именно они послужили основой для возникновения такой отрасли знания, как учение об антибиотиках, заложили основы создания медицинской промышленности и промышленного получения антибиотиков. |