Билет 1 Элективные среды, их назначение
 Скачать 310.5 Kb.
|
|
Физические методы: 1. Анаэростат — создание вакуумных условий. 2. Аппарат Киппа — замена воздуха индифферентным газом (водородом). 3. Среда Китт-Тароцци — содержит кусочки печени, обладающие высокой адсорбционной способностью, 0.5% глюкозы. Перед посевом среду кипятят на водяной бане не менее 15 минут, сверху заливают слоем вазелиного масла, чтобы предохранить посев от проникновения кислорода, Химические методы 1. Прибор Омелянского — для поглощения кислорода используется пирогаллол. 2. Среда Вильсон — Блера. Биологический метод Фортнера Чашку Петри с толстым слоем агара делят на 2 половины на одну половину засевают облигатный аэроб — «чудесную» палочку, на другую половину чашки засевают исследуемую анаэробную культуру. Чашку заливают растопленным парафином. Через 24 — 48 часов в чашке вырастают аэробы, затем, когда запас кислорода исчерпывается, начинают размножаться анаэробы. БИЛЕТ №7 1. Тканевые питательные среды. К специальным тканевым питательным мредам относят среды Китта-Тароцци и среду Аристовского-Гельтцера.Среда Китта-Тароцци содержит МПБ, 0,5% глюкозы,кусочки печени или мясного фарша.Среда Аристовского-Гельтцера ссостоит из кроличьи сыворотки и кусочки мозга кролика.Эти среды применяются для культивирования анаэробных бактерий.Перед посевом среды прогревают в водяной бане 10-15 мин. для удаления воздуха.После посева заливают слоем вазелиного масла или парафина с целью изоляции от атмосферного воздуха. 2. Положительная и отрицательная роль нормальной микрофлоры организма человека. Нормальная микрофлора играет важную роль в защите организма от патогенных микробов, например стимулируя иммунную систему, принимая участие в реакциях метаболизма. В то же время эта флора способна привести к развитию инфекционных заболеваний. Большая часть инфекций, вызываемых представителями нормальной микрофлорой, носит оппортунистический характер. В частности, кишечные анаэробы (например, бактероиды) могут вызывать формирование абсцессов после проникновения в кишечную стенку в результате травм или хирургических вмешательств; основными возбудителями часто регистрируемых постгриппозных пневмоний считают микроорганизмы, обитающие в носоглотке любого человека. Число подобных поражений настолько велико, что возникает впечатление, что врачи чаше имеют дело с эндогенными, а не экзогенными инфекциями, то есть с патологией, индуцированной эндогенной микрофлорой. Отсутствие чёткого разграничения между условно-патогенными микробами и комменсалами даёт основание полагать, что неограниченная колонизация любым видом бактерий, способным выживать в организме человека, может приводить к развитию инфекционной патологии. Но это положение относительно — различные члены микробных сообществ проявляют патогенные свойства разного порядка (некоторые бактерии чаще вызывают поражения, чем другие). Нормальная микрофлора составляет конкуренцию для патогенной; механизмы подавления роста последней достаточно разнообразны. Основной механизм — избирательное связывание нормальной микрофлорой поверхностных рецепторов клеток, особенно эпителиальных. Большинство представителей резидентной микрофлоры проявляет выраженный антагонизм в отношение патогенных видов. Эти свойства особенно ярко выражены у бифидобактерий и лактоба-цилл; антибактериальный потенциал формируется секрецией кислот, спиртов, лизоцима, бакте-риоцинов и других веществ. Кроме того, высокая концентрация указанных продуктов ингибирует метаболизм и выделение токсинов патогенными видами (например, термолабильного токсина энтеропатогенными эшерихиями). Отрицательная роль микрофлоры Условно-патогенные представители нормальной микрофлоры могут стать источником эндогенной инфекции. В норме эти микроорганизмы неприятностей не вызывают, а при ослабление иммунной системы, например стафилакок – может вызвать гнойную инфекцию. Кишечная палочка – в кишечнике, а если окажется в мочевом пузыре – цистит, а если попадет в рану – гнойная инфекция. Под влиянием микрофлоры может увеличиваться выделение гистамина – аллергические состояния Нормофлора – хранилище и источник плазмид антибиотикорезистентности. 3. Действия на микроорганизмы дезинфектантов. Дезинфицирующие средства- это физические агенты и химические вещества, используемы для уничтожения возбудителей инфекционных заболеваний в окружающей среде. К физическим относят: пастеризация, тиндализация, кипячение, автоклавирование, горячий воздух, солнечные лучи, ультразвук, обжигание. К химическим: галоиды, фенолы и их производные, кислоты, щелочи, спирты и тд. Эти вещества должны непосредственно воздействовать на возбудителей. Диз средства можно разделить на 2 группы. 1. Дезинфектанты (для обработки неодушевленных преметов) и 2. Гермизиды ( для обработки как живых, так и неодушевленных предметов) По механизму действия: Окислители. Включает хлор, бром йодсодержащие соединения +КМнО4, Н2О2, озон. Ех: хлорсодержащие соединения обусловлены воздействием на микробную клетку кислорода и хлора. Активаторы увеличивают скорость химических процессов, что позволяет уменьшить концентрацию. Йодофоры – однохлористый йод, трихлоридиод, йодоформ. Основан на способности йода проникать в клеточную стенку М.о, нарушать структуру и синтез протеинов и нуклеиновых кислот, применяют для дезинфекции флаконов, предметов медицинского назначения. Бромантил – бром содержащий препарат, используется для обеззараживания воды в бассейнах Перекисные соединения, перекись водорода. Образование безгидроксильных радикалов, которые разрушают линиды мембраны, ДНК.. Группа дезинфицирующих средств, свертывающих белок. Фенолы- тимол, салол. Действуют как общий протоплазматический яд, разрушая стенку клетки, проникая внутрь клетки, вызывают осаждение клеточных белков. Крезолы – лизол. Используют для дезинфекции предметов обстановки, белья, туалетов Соли тяжелых ме – ртути, серебра меди, свинца цинка Соляная кислота – для дезинфекции вымытой фарфоровой посуды, питьевой воды. Спирты- проникают в микробную клетку, обезвоживают ее, свертывают белок. Для обработки рук, некоторых поверхностей. Дезинфицирующие средства, вызывающие набухание и растворение белка. Едкие щелочи- едкий натр- бактерицидное, противовирусное действие. Карбонат натрия – слабое бактерицидное действие. Для посуды, белья. Гидроксид аммония – слабое бактерицидное действие Негашеная известь – для обеззараживания поверхностей, выделений почвы Формалин. Используют как в жидком так и в газообразном состоянии. Обладает бактерицидными, противогрибковыми и противовирусными действиями. Механизм действия: инактивация микроорганизмов путем алкилирования амино- и сульфгидрильных групп протеинов и колец атомов азота в гетероцикле пуриновых оснований. Поверхностно – активные вещества ПАВ.- жирные кислоты, мыла, детергенты. Механизм их действия: высокая поверхностная активность, способность к растворению белков, липоидов, каротиноидов, диссоциация белковых комплексов. ПАВ используют для дезинфекции тканей, посуды, хирургических инструментов, кожи при хирургических манипуляциях. 4. Единицы измерения вирулентности. За единицу измерения вирулентности принята летальная доза- это наименьшее количество патогенных микроорганизмов или токсина, способное вызвать гибель определенного количества лабораторных животных. На практике применяют величины DL. DCL- количество микробов или токсина, вызывающие гибель 100% лабораторынх животных. LD50 - количество патогенных микроорганизмов, способное вызвать гибель 50% экспериментально зараженных лабораторных животных. Применяют так же величины 70, 75, 90 и тд. ЗАДАЧА В туб. Диспансер был направлен больной с подозрением на туберкулёз лёгких. Из мокроты больного была выделена чистая культура микобактерий туберкулёза. Каковы этапы исследования. Как проверить чистоту выделенной культуры Выделение чистой культуры микобактерии туберкулеза осуществляют посевом исследуемого материала на питательные среды. Следует при этом иметь в виду, что мокрота, кал и т. п., наряду с туберкулезными микобактериями, содержат множество других микробов, способных быстро размножаться и подавлять рост возбудителя туберкулеза проверка чистоты выделенной культуры: Чистота выделенной культуры микроорганизмов должна быть тщательно проверена. Это осуществляется обычно несколькими способами: визуальным, микроскопическим контролем и высевом на ряд питательных сред. При визуальном контроле просматривается рост микроорганизмов по штриху на поверхности скошенной агаризованной среды. Если рост по штриху неоднороден, культура загрязнена. Такой контроль возможен только для культур, способных расти на поверхности плотных сред. Чистоту культур микроорганизмов обязательно нужно контролировать под микроскопом. Для этого следует приготовить препарат фиксированных окрашенных клеток и просмотреть его с иммерсионной системой или препарат живых клеток и просмотреть его, используя фазово-контрастное устройство. БИЛЕТ №8 1.Специальные, синтетические питательные среды. Синтетические питательные среды представляют собой гигроскопические порошки,растворяющиеся в воде.Они обеспечивают азотистое ,углеродное и минеральное питание микроорганизмов.Например:среда Сотона используется для культивирования туберкулезных микобактерий,среда 199,среда Игл для культур клеток. 2.Формирование микробных биоценозов в различные возрастные периоды. Возникновение биоценоза начинается с появления первых организмов на лишенных жизни участках (лавовых потоках, вулканических островах, осыпях, обнажившихся горных породах, песчаных наносах и обсохших днищах водоемов). Заселение начинается со случайного заноса организмов с уже освоенных ими территорий и зависит от свойств субстрата. Этот участок для многих семян растений и проникших сюда животных может оказаться неподходящим для размножения. Как правило, успешно развиваются лишь немногие из занесенных растительных видов. Животные– консументы поселяются несколько позднее, так как их существование без пищи невозможно, но случайное посещение ими осваиваемых участков — довольно частое явление. Данная стадия развития биоценоза получила название пионерной. Хотя на этой стадии сообщество еще не сложилось (непостоянный видовой состав, разреженный растительный покров), оно уже оказывает влияние на абиотическую среду: начинает образовываться почва. Пионерная стадия сменяется ненасыщенной, когда растения начинают возобновляться (семенами или вегетативным путем),_а животные размножаться. В ненасыщенном биоценозе заняты не все экологические ниши. Постепенно темпы заселения участка возрастают за счет как увеличения числа особей пионерной растительности до образования зарослей, так и внедрения новых видов. Видовой состав такого сообщества пока неустойчив, новые виды внедряются довольно легко, хотя конкуренция начинает играть заметную роль. Эта стадия развития биоценоза группировка. При последующем развитии сообщества происходит дифференциация растительного покрова по ярусам и синузиям, устойчивое постоянство приобретают его мозаичность, видовой состав, пищевые цепи и консорции. В конечном итоге занятыми оказываются все экологические ниши и дальнейшее вселение организмов становится возможным только после – вытеснения или уничтожения старожилов. Данная, заключительная, стадия образования биоценоза получила название насыщенной. Однако дальнейшее развитие биоценоза не прекращается и случайные отклонения в видовом составе и взаимоотношениях как между организмами, так и с окружающей средой еще могут иметь место. 3.Механическая стерилизация фильтрация. стерилизация- обеспложивание, т.е. полное уничтожение вегетативных форм микроорганизмов и их спор в различных материалах. Физические методы стерилизации: Прокаливание в пламени спиртовки или газовой горелки( применяется для стерилизации бактериологических петель, пинцетов, препаровальных игл) Стерилизация кипячением(шприцы, мелкие хирургические инструменты, предметы и покровные стекла) Стерилизация сухим жаром или суховоздушная стерилизация в сушильном шкафу (печи Пастера). (стерилизуют стеклянную посуду: чашки Петри, пробирки, пипетки и др.) Стерилизация паром под давлением в втоклаве. Стерилизация текучим паром в аппарате хоха или автоклаве. (применяется в тех случаях, когда стерилизуемый материал не выдерживает высокой температуры, например питательные среды с витаминами, углеводами. Тиндализация (применяется для стерилизации легко разрушающихся при высокой температуре в-в (сыворотка крови, витамины и др.) Пастерилизация (пастеризуют напитки и пищевые продукты (вино, пиво, соки, молоко и др.) Стерилизация УФ-лучами Механическая стерилизация фильтрование): Данный метод основан на механической задержке микроорганизмов и их спор мелкопористыми фильтрами с определенным d пор. Фильтрование используют для стерилизации жидких материалов, не выдерживают нагревания (сыворотка крови, антибиотики, для получения бактериальных токсинов, фасов разных продуктов жизнедеятельности бактерий. Химические методы стерилизации: используют различные химические вещества обладающие бактерицидным свойством, но в лабораторной практике применяют ограниченно 4.Белковые токсины экзотоксины. Основные свойства и механизм действия. Токсические вещества по своей химической природе относятся к белкам (экзотоксины) и ЛПС (эндотоксины) Эндотоксины- ЛПС, которые содержатся в стенке грмм- бактерий. Они более устойчивы к температуре, менее ядовиты, малоспецифичны, слабо иммуногены. Некоторые бактерии способны одновременно синтезировать как эндотоксины, так и белковые токсины. Ех: возбудитель холеры, чумы сальмонеллеза. Экзотоксины- белковые токсины- описано выше 80 различных экзотоксинов, которые различаются по молекулярной массе, химической структуре. Они обладают высокой иммуногенностью, поэтому они могут вызывать иммунный ответ. По отношению к температуре различают термолабильные и термостабильные. Все экзотоксины состоят из 2х составных частей.1 является рецептором и служит для фиксации молекулы токсина, 2- собственно токсический фрагмент – проникает внутрь клетки , блокируя жизненно важные метаболические реакции. Высокая токсичность объясняется особенностью строения токсического фрагменты, имитирующего структуру гормонов, ферментов и нейромедиаторов. Специфичность токсического действия определяется избирательной фиксацией токсина на рецепторах клеток мишеней определенных тканей. Из них выделяют 4 группы: Цитотоксины - блокируют синтез белка насубклеточном уровне, выводят из сторя фермент трансферразу 2. + дермонекротоксины (поражают клетки кожи) и энтеротоксины (поражают клетки слизистой кишечника). Мембранотоксины- повышают проницаемость мембраны эритроцитов и лейкоцитов, вызывая их гибель. Функциональные блокаторы- активизируют клеточную аденилатциклазу, приводя к повышению проницаемости стенки тонкой кишки и увеличению выхода жидкости в ее просвет.(холероен)+ токсикоблокаторы (инактивируютаденилатциклазу.Ех.сибиреязвенной и чумныепалочки) + нейротоксины ( блокуруют передачу нервных импульсов) Эксфолиатины (золотистый стафиллоккок) и эритрогенины (скарлатинозный стрептоккок) влияют на процессы межклеточного взаимодействия. АНАТОКСИНЫ.Некоторые токсины (столбнячный, дифтерийный, ботулинистический, гангренозный) под действием формалина утрачивают свою ядовитость, сохраняя при этом иммуногенные свойства. ЗАДАЧА В инфекционную больницу поступил больной, у которого отмечалось повышение температуры и частый жидкий стул с примесью крови и слизи. Скажите, какие методы забора материала от больного с острыми кишечными заболеваниями Вы знаете Какие методы используются для стерилизации стеклянной лабораторной посуды Какие мероприятия нужно провести в очаге кишечного заболевания после госпитализации больного в стационар. Забор материала – кал на капрологию(слизь), кал на бакпосев, Для стерилизации лаб-ой посуды исп-т: Прокаливание в пламени спиртовки или газовой горелки( применяется для стерилизации бактериологических петель, пинцетов, препаровальных игл) Стерилизация кипячением(шприцы, мелкие хирургические инструменты, предметы и покровные стекла) Стерилизация сухим жаром или суховоздушная стерилизация в сушильном шкафу (печи Пастера). (стерилизуют стеклянную посуду: чашки Петри, пробирки, пипетки и др.) Стерилизация паром под давлением в автоклаве. Стерилизация текучим паром в аппарате хоха или автоклаве. (применяется в тех случаях, когда стерилизуемый материал не выдерживает высокой температуры, например питательные среды с витаминами, углеводами. Тиндализация (применяется для стерилизации легко разрушающихся при высокой температуре в-в (сыворотка крови, витамины и др.) Пастерилизация (пастеризуют напитки и пищевые продукты (вино, пиво, соки, молоко и др.) Стерилизация УФ-лучами Мероприятия: заключительная дезинфекция очага (проведение генеральной уборки дома у больного, приемного покоя больницы) Заключительная дезинфекция проводится в очаге после удаления из него источника инфекции (в инфекционном отделении — после выписки или смерти больного) с целью уничтожения возбудителей заболевания, которые, возможно, остались в помещении, где находился больной. В отличие от текущей дезинфекции, проводится однократно. |