Экзаменационные вопросы по дисциплине Микробиология, вирусология

• Название: Экзаменационные вопросы по дисциплине Микробиология, вирусология
• Дата: 04.04.2022
• Размер: 0.77 Mb.
• Имя файла: Mikra_ekzamen.docx
• Тип: Экзаменационные вопросы; #441709
• страница: 13 из 35

Методы исследований

1. 
   Глубинный посев - количественный метод определения бактерий и грибов. Вносят 1 мл воды в стерильную чашку Петри, затем наливают расплавленный агар до температуры 45 ⁰ С 10-12 мл и тщательно перемешивают. Результат оценивают по общему количеству выросших колоний на поверхности и в толще агара.
   
2. 
   Метод мембранных дисков - количественный метод определения СПМ. Мембранный фильтр помещают в воронку Зейтца, вмонтированную в колбу Бунзена, которая соединяется с вакуумным насосом. Воду фильтруют в объеме 500 мл. Затем фильтры помещают на поверхность среды Эндо в чашки Петри и после инкубации при 37° С в течение суток подсчитывают количество выросших колоний, типичных для бактерий группы кишечной палочки (БГКП). Из 2-3 колоний красного цвета готовят мазки, окрашивают по методу Грама и ставят оксидазный тест, позволяющий дифференцировать бактерии родов Echerichia от грамотрицательных бактерий рода Pseudomonas, обитающих в воде.
   
3. 
   Бродильный метод - качественный метод определения БГКП. 1 мл воды засевается на жидкую среду Кесслера (1мл дистиллированной воды, 10 г пептона, 50 мл бычьей желчи, 10 г лактозы, рН 7,4 -7,6; 4мл 1% водного раствора генцианового фиолетового). Разливают в пробирки с поплавками. Инкубируют при 43° С. Через 24 часа по изменению цвета среды и газообразованию судят о наличии БГКП.
   

5. Микрофлора человека, классификация (аутохтонная, аллохтонная и заносная). Факторы, определяющие количественный и качественный состав микрофлоры.

Организм человека в норме содержит более 500 видов микроорганизмов с общей численностью – 10¹⁴ клеток (вес – 2-4 кг); среди них преобладают бактерии, вирусы и простейшие представлены значительно меньшим числом видов.

Микробные биоценозы человека сформировались в процессе эволюции в результате селекции (отбора) особей, наиболее приспособленных к существованию в его организме.

Нормальная микрофлора организма человека (эумикробиоз) – это совокупность микроорганизмов всех биотопов тела человека. Биотопы организма человека заселены микрофлорой в различной степени. Наибольшее количество микроорганизмов находится на поверхности тела и в полостях, связанных с внешней средой. Основные отделы, заселяемые бактериями, – это кожные покровы, воздухоносные пути, желудочно-кишечный тракт, мочеполовая система. Полости, не сообщающиеся со внешней средой, - стерильны. В легких, мочевом пузыре, в полости матки нет микроорганизмов, и обнаружение их с большой долей вероятности свидетельствует о наличии инфекции. Выделение микроорганизмов из обычно стерильных тканей (кровь, спинномозговая жидкость или синовиальная) имеет диагностическое значение.

Естественную микрофлору любых биотопов подразделяют по происхождению на постоянную (резидентную, аутохтонную) и случайную (транзиторную, аллохтонную).

Аутохтонная (постоянная, резидентная) флора – совокупность микроорганизмов, для которых данный объект является основной средой обитания. Среди постоянной микрофлоры различают 2 фракции: облигатную и факультативную.

Облигатная (обязательная) микрофлора – совокупность аутохтонных микроорганизмов, которые встречаются у всех особей и постоянно; она составляет большинство в любом биотопе и противодействует заселению биотопа случайными микробами.

Факультативная (необязательная) микрофлора – совокупность аутохтонных микроорганизмов, которые встречаются у части особей и временно; она составляет меньшинство.

Аллохтонная (случайная, транзиторная, заносная) флора – это микроорганизмы-эмигранты из других биотопов хозяина или биотопов окружающей среды.

Заносная – иммигранты из биотопов среды, не способны к длительному существованию в организме.
Количество и качественный состав микрофлоры человека меняется в течение жизни и зависит от пола, возраста, характера питания, условия труда, травмы, стресс. Колебания в составе микрофлоры могут быть обусловлены возникновением заболеваний и применением лекарственных препаратов, прежде всего, антибиотиков.
6. Роль нормальной микрофлоры организма человека в нормальных физиологических процессах и патологии.
Нормальная микрофлора организма человека играет важную роль в его жизнедеятельности. Сложившиеся в процессе эволюции микробные биоценозы в разных системах организма поддерживают его нормальные физиологические функции. Положительная роль нормальной микрофлоры определяется следующими ее функциями:

1. Защитная функция – нормальная микрофлора защищает макроорганизм от патогенных микробов, при этом механизмы подавления их роста достаточно разнообразны:

Ø колонизационная резистентность – представители нормальной микрофлоры избирательно связывают поверхностные рецепторы клеток, особенно эпителиальных, препятствуя адгезии на них патогенных микроорганизмов;

Ø нормальная микрофлора продуцирует вещества (бактериоцины, лизоцим и др.), обеспечивающие антагонистическое воздействие на постороннюю микрофлору;

Ø кишечная палочка и молочнокислые бактерии ингибируют развитие патогенных микробов, закисляя среду продуктами метаболизма.

2. Иммуностимулирующая роль нормальной микрофлоры не менее важна:

Ø микроорганизмы стимулируют образование иммуноглобулинов класса А, выделяющиеся на поверхности слизистых оболочек (обеспечивают местную невосприимчивость к проникающим возбудителям);

Ø усиливают фагоцитарную активность макрофагов;

Ø активизируют цитотоксическую функцию естественных киллеров.

3. Синтетическая функция – нормальная микрофлора участвует в синтезе витаминов: К, Д, витаминов группы В (В1, В2, В6, В12), рибофлавина, фолиевой, пантатеновой и аскорбиновой кислот; кроме того, анаэробные микроорганизмы продуцируют жирные кислоты, участвуют в синтезе незаменимых аминокислот, гормоноподобных веществ и ферментов.

4. Пищеварительная функция – нормальная микрофлора принимает активное участие в пищеварении:

Ø усиливает перистальтику кишечника;

Ø способствует расщеплению белков, жиров, углеводов в тонком кишечнике и клетчатки – в толстом;

Ø обеспечивает процессы всасывания желчных кислот и некоторых гормонов.

5. Детоксикационная деятельность нормальной микрофлоры заключается в том, что кишечные бактерии принимают участие в инактивации токсических продуктов как экзогенного происхождения (например, микробные токсины ), так и экзогенного (например, такие продукты белкового распада, как индол, скатол).

6. Нормальная микрофлора участвует в поддержание водно-солевого баланса организма.

7. Способствует нормальному морфогенезу слизистых оболочек.

Роль нормальной микрофлоры в инфекциях

Большая часть инфекций, вызываемых представителями нормальной микрофлорой, носит оппортунистический характер. В частности, кишечные анаэробы (например, бактероиды) могут вызывать формирование абсцессов после проникновения в кишечную стенку в результате травм или хирургических вмешательств; основными возбудителями часто регистрируемых постгриппозных пневмоний считают микроорганизмы, обитающие в носоглотке любого человека. Число подобных поражений настолько велико, что возникает впечатление, что врачи чаше имеют дело с эндогенными, а не экзогенными инфекциями, то есть с патологией, индуцированной эндогенной микрофлорой. Отсутствие чёткого разграничения между условно-патогенными микробами и комменсалами даёт основание полагать, что неограниченная колонизация любым видом бактерий, способным выживать в организме человека, может приводить к развитию инфекционной патологии. Но это положение относительно — различные члены микробных сообществ проявляют патогенные свойства разного порядка (некоторые бактерии чаще вызывают поражения, чем другие). Например, несмотря на многообразие кишечной микрофлоры, перитониты, обусловленные прорывом бактерий в брюшную полость, вызывают лишь несколько видов бактерий. Ведущую роль в развитии подобных поражений играет не вирулентность самого возбудителя, а состояние защитных систем макроорганизма; так, у лиц с иммунодефицитами слабовирулентные или авирулентные микроорганизмы (кандиды, пневмоцисты) могут вызывать тяжёлые, часто фатальные поражения.

7. Микрофлора кожи здорового человека. Факторы, влияющие на количественный и видовой состав микрофлоры кожи.

Неповрежденная кожа непроницаема. На кожных покровах микроорганизмы подвержены действию бактерицидных факторов: УФ-излучения, сального секрета, повышающих кислотность (соответственно значение рН снижается), Ig A, G. В подобных условиях живут преимущественно Staphylococcus epidermidis, микрококки, сарцины, аэробные и анаэробные дифтероиды, грибы рода Candida. Другие виды — Staphylococcus aureus, а-гемолитические и негемолитические стрептококки — правильнее рассматривать как транзиторные. К механическим факторам защиты относится постоянно слущивающийся эпителий. Нормальная микрофлора быстро приспосабливается к факторам защиты и образует биопленку, которая препятствует адсорбции патогенных и УПО, тем самым, является фактором защиты

Основные зоны колонизации — эпидермис (особенно роговой слой), кожные железы (сальные и потовые) и верхние отделы волосяных фолликулов.
Особенно обильно заселены м/о те области кожных покровов, которые защищены от высыхания и солнечного света, это:
-кожные складки
-межпальцевые промежутки
-промежность
-паховые складки.
Первичная колонизация кожных покровов плода происходит при родах, но эта микрофлора (фактически флора родовых путей матери) в течение недели замещается вышеуказанными бактериями.

Обычно на 1 см² выявляют 10³— 10⁴ микроорганизмов; на участках с повышенной влажностью их число может достигать 10⁶. Соблюдение элементарных правил гигиены может уменьшить число бактерий на 90%.

8. 
   Микрофлора полости рта, пищевода и желудка, их роль в патологии. Микрофлора полости рта, пищевода и желудка, их роль в патологии. Факторы, определяющие количественный и качественный состав микрофлоры.
   

В ротовой полости имеются благоприятные условия для развития микроорганизмов:
-наличие питательных веществ,
-оптимальная температура,
-влажность.
В поддержании качественного и количественного постоянства нормальной микрофлоры полости рта главную роль играет слюна, имеющая щелочную реакцию и обладающая антибактериальной активностью за счет содержащихся в ней ферментов (лизоцима, лактоферрина, пероксидазы, нуклеазы) и секреторных иммуноглобулинов.

В ротовой полости обнаруживается 10¹⁰ КОЕ/мл УПМ, относящихся более, чем к 100 видам. Основная масса микроорганизмов полости рта локализуется на слизистых глоточных миндалин, у шейки зуба в десневой борозде, в межзубных промежутках и в зубных бляшках. 70 % объема зубного налета составляют микроорганизмы, а в 1 мг сухой массы зубного налета содержится около 250 млн микроорганизменных клеток.

Резидентную группу бактерий полости рта составляют стрептококки (10^6-7 КОЕ/мл), лактобактерии (10³ КОЕ/мл), непатогенные стафилококки (10³ КОЕ/мл), дрожжеподобные грибы рода Candida (10² КОЕ/мл), сапрофитные нейссерии, дифтероиды, бактероиды, фузобактерии, актиномицеты, микоплазмы, ротовая амеба.

Среди факультативных микроорганизмов встречаются энтеробактерии (роды Esherichia, Klebsiella, Enterobacter, Proteus), синегнойная палочка, спорообразующие бактерии (роды Bacillus, Clostridium), кампилобактерии (C. consicus, C. sputorum), сапрофитные трепонемы.

Индивидуальные колебания в качественном и количественном составе микрофлоры полости рта зависят от возраста, диеты, гигиенических навыков, резистентности слизистой оболочки, наличия патологических процессов в зубах и деснах.

Основными микроорганизмами зубного налета являются стрептококки и лактобактерии. Актиномицеты также входят в состав зубного налета и составляют строму поддесневого зубного камня. В пародонтальных карманах обнаруживаются облигатные анаэробы (бактероиды, фузобактерии, лептотрихии, спирохеты) и амебы.

Таким образом, среди микроорганизмов полости рта встречаются представители различных морфологических групп:

– Грам+ кокки: стрептококки (S. salivarius, S. mutans, S. sanguis, S. mitis), пептококки (P.asaccharolyticus, P. lanceolatus);

– Грам- кокки: вейлонеллы;

– Грам+ палочки: лактобактерии (L. acidophylus);

– Грам- палочки: бактероиды (B. melaninogenicus), фузобактерии (F. nucleatum), лептотрихии (L. buccalis);

– извитые Грам+: актиномицеты (A. viscosus);

– извитые Грам-: трепонемы (T. macrodentium, T. denticola, T. vincentii, T. buccalis), кампилобактерии (C. consicus, C. sputorum);

– микоплазмы: (M. orale);

– грибы рода Candida;

– простейшие (Entamoeba buccalis).

Заболевания полости рта (кариес, заболевания пародонта, зубо-альвеолярный абсцесс, зубной камень, актиномикозы, кандидоз) являются обычно эндогенными инфекциями, вызванными представителями постоянной микрофлоры. Поэтому мазок из зубного налета и подсчет уровня микроорганизмов в слюне могут быть полезны для определения потенциального риска развития этих заболеваний.

Онтогенез микрофлоры полости рта:

– - до рождения полость рта стерильна;
– - при прохождении через родовые пути в полость рта попадает влагалищная микрофлора матери (лактобактерии и Грам+ кокки);
– - к концу первой недели в ротовой полости новорожденных обнаруживаются стрептококки, лактобактерии, фузобактерии, дрожжеподобные грибы рода Candida;
– - во время прорезывания зубов появляются нейссерии, вибрионы, спириллы и облигатные Грам- анаэробы (бактероиды, вейлонеллы). Количественный и видовой состав микроорганизмов полости рта находится в зависимости от диеты и возраста ребенка;
– - у взрослых людей в полости рта доминируют анаэробы, также могут присутствовать актиномицеты и ротовая амеба;
– - в старости количество анаэробов уменьшается, начинают преобладать аэробы.

Микрофлора желудочно-кишечного тракта

В ЖКТ обитает более 60 % от общего количества микроорганизмов. Микроорганизмиоценоз ЖКТ составляют более 400 видов микроорганизмов, из них 98 % — облигатные анаэробы.

Пищевод. Микроорганизмы поступают в пищевод из полости рта и с пищей. Специфической микрофлоры пищевод не имеет.

Желудок. При нормальном функционировании желудка микрофлора в нем почти отсутствует (10^2-4 КОЕ/мл), вследствие кислой реакции желудочного сока и высокой активности гидролитических ферментов. В желудке могут быть обнаружены в небольшом количестве кислотоустойчивые виды — лактобактерии, грибы рода Candida, сарцины, хеликобактерии, энтерококки, бифидобактерии, E.coli.

9. Микрофлора респираторного тракта. Факторы, определяющие количественный и качественный состав микрофлоры.

При дыхании в организм человека из окружающего воздуха поступает огромное количество микроорганизмов. Большинство из них задерживается в верхних дыхательных путях благодаря защитной функции эпителия, деятельности макро- и микрофагов, бактерицидного действия лизоцима. Поэтому общее число бактерий в носоглотке невелико. Бронхи и альвеолы, как правило, не содержат микроорганизмов.

В состав микрофлоры входят: непатогенные стафилококки (Staph. epidermidis, Staph. saprophiticus) коринебактерии. Факультативная микрофлора представлена золотистым стафилококком (Staph, aureus) стрептококками Str.pyogenes, Str. pneumoniae) нейссериями, гемаглобинофильными бактериями.

Более многочисленная облигатная микрофлора содержится в носоглотке. Это стрептококки (Str. mitis до 80—90%), бактероиды (Bacteroides fragilis), а также нейссерии, вейлонеллы и др. Факультативная микрофлора может быть представлена условно-патогенными и патогенными бактериями, Neisseria meningitis, Str. pneumoniae, микобактериями.

На миндалинах обнаруживаются главным образом стрептококки, включая гемолитические, а также стафилококки и коринебактерии. Иногда встречаются энтеробактерии (рода Proteus и Klebsiella), синегнойная палочка (Pseudomonas aeruginosa), а также фузобактерии, спириллы и вибрионы.

Слизистая оболочка гортани, трахеи, бронхов и всех нижележащих отделов сохраняется стерильной благодаря активности их эпителия, макрофагов, а также продукции секреторного иммуноглобулина А. Несовершенство этих защитных механизмов у недоношенных детей, нарушение их функционирования в результате иммунодефицитных состояний или при ингаляционном наркозе приводит к проникновению микроорганизмов вглубь бронхиального дерева и, соответственно, может быть одной из причин тяжелых респираторных заболеваний.

10. Микрофлора мочевыделительного тракта. Категории чистоты влагалища.

Почки, мочеточники и моча в мочевом пузыре стерильны. В наружной части уретры у мужчин и женщин находятся в небольшом количестве коринебактерии, микобактерии (M.hominis), грамотрицательные бактерии кишечного происхождения, пептококки, пептострептококки, бактероиды, фузобактерии. Эти микроорганизмы обычно выявляются в нормальной моче в количестве 10²-10⁴ м.к./мл.

Бактериологическое исследование мочи показано при наличии признаков инфекции мочевыводящих путей, а также у больных с подозрением на системные инфекции и при лихорадках неясного генеза.

На наружных половых органах мужчин и женщин локализуются микобактерии смегмы (в секретах сальных желез в головке полового члена и малых половых губ), микоплазмы, сапрофитная трепонема, эпидермальные стафилококки, непатогенные нейссерии.

Микрофлора влагалища находится в прямой зависимости от возраста и гормонального статуса женского организма. Вскоре после рождения девочки во влагалищном содержимом появляются аэробные лактобациллы (палочки Додерляйна). Они обитают здесь, пока реакция среды остается кислой. Когда она становится нейтральной (до половой зрелости), развивается смешанная микрофлора (энтерококки, стрептококки, стафилококки, коринебактерии). После наступления половой зрелости (понижение рН влагалищного секрета до 4,0–4,2) вновь в больших количествах появляются лактобациллы, которые и поддерживают кислую реакцию среды путем образования кислоты из углеводов (гликогена). Этот важный механизм предупреждает колонизацию другими, потенциально патогенными микроорганизмами.

Различают несколько категорий чистоты влагалища здоровой женщины:

1. реакция среды кислая, большое количество палочек Додерляйна, других микроорганизмов нет.

2. реакция среды слабокислая, палочек Додерляйна мало, наличие кокков (стрепто- и стафило-), обнаруживаются единичные лейкоциты.

3. реакция среды нейтральная или слабощелочная, единичные палочки Додерляйна, превалируют кокки, лейкоцитов до 40 в поле зрения.

4. реакция среды щелочная, палочек Додерляйна нет, большое количество кокков и других микроорганизмов, лейкоциты в большом количестве.

В период менопаузы появляется смешанная микрофлора. Цервикальная слизь обладает антибактериальной активностью и содержит лизоцим. Полость матки, фаллопиевы трубы стерильны.

11. Микрофлора кишечника. Факторы, оказывающие губительные действия на микрофлору тонкого кишечника. Мукозная и просветная микрофлора.

Количество и состав микробов в тонком кишечнике меняется в зависимости от отдела кишечника. Общее количество микробов в тонком кишечнике составляет не более 10⁴–10⁵КОЕ/мл содержимого. Низкая концентрация микробов обусловлена действием желчи, наличием ферментов поджелудочной железы, кишечной перистальтики, обеспечивающей быстрое удаление микробов в дистальный отдел кишечника; выработкой иммуноглобулинов клетками слизистой оболочки, состоянием кишечного эпителия и слизи, выделяемой бокаловидными клетками кишечника, содержащими ингибиторы роста микробов. Микрофлора тонкого кишечника представлена преимущественно грамположительными факультативно-анаэробными и анаэробными бактериями (энтерококками, лактобактериями, бифидобактериями), дрожжеподобными грибами, реже встречаются бактероиды и вейлонеллы, крайне редко энтеробактерии. После приема пищи количество микробов в тонком кишечнике может значительно увеличится, но затем в короткие сроки оно быстро возвращается к исходному уровню. В нижних отделах тонкого кишечника (в подвздошной кишке) количество микробов увеличивается и может достигать 10⁷ КОЕ/мл содержимого.

В толстом кишечнике грамположительная флора меняется на грамотрицательную. Количество облигатных анаэробов начинает превышать число факультативных анаэробов. Появляются представители микробов, характерные для толстого кишечника.

Росту и развитию микробов в толстом кишечнике способствуют отсутствие пищеварительных ферментов, наличие большого количества питательных веществ, длительное нахождение пищи, особенности строения слизистой оболочки и, в частности, слизистые наложения толстого кишечника. Они обуславливают органный тропизм некоторых видов анаэробных бактерий, образующих в результате своей жизнедеятельности продукты, используемые факультативно-анаэробной флорой, которые в свою очередь создают условия для жизни облигатных анаэробов.

В толстом кишечнике человека присутствуют более 400 видов различных микробов, причем число анаэробов в 100–1000 раз превышает число факультативных анаэробов. Облигатные анаэробы составляют 90-95% всего состава. Они представлены бифидобактериями, бактероидами.

Облигатные анаэробы – 1-4%: лактобактерии, E.coli, энтерококки.

На долю других микроорганизмов приходится 0,1-0,01% это остаточная микрофлора: стафилококки, стрептококки, бациллы, грибы рода Candida. В кишечнике могут жить условно-патогенные амебы, трихомонады, некоторые виды кишечных вирусов.

В толстом кишечнике человека выделяют М-мукозную микрофлору – микробы, обитающие в толще слизистой оболочки. Количество микробов в толще слизистой составляет 10⁸ КОЕ на грамм ткани кишечника. Некоторые авторы называют мукозную микрофлору–«бактериальный дерн».

Микробы, живущие в просвете кишечника человека, называют П–микрофлора (просветная или полостная). Количество микробов в фекалиях человека достигает 10¹²КОЕ/г. содержимого и составляет 1/3 часть фекальных масс человека.

12. Микрофлора новорожденных. Факторы, влияющие на динамику микрофлоры ребенка.

Состав микрофлоры ребенка вариабелен и зависит от многих факторов: здоровья матери, механизма родов, совместного пребывания матери и ребенка, характера питания, возраста, воздействия экзогенных факторов.

Первичное заселение микробами организма ребенка происходит в процессе родов бактериями влагалища, где в норме преобладают лактобациллы и присутствует значительное количество бифидобактерий. Уже через несколько дней после рождения пищеварительный тракт, дыхательные пути, кожные покровы новорожденного настолько обильно колонизированы микрофлорой, что общее число микроорганизмов даже в норме может превышать число клеток макроорганизма. И у ребенка в возрасте нескольких дней вероятность развития инфекционного процесса за счет "бунта" эндогенной микрофлоры, при определенных обстоятельствах, чрезвычайно высока.

К факторам, отрицательно влияющим на формирование биоценоза экосистем новорожденных, относятся:

• 
  нарушение здоровья матери до беременности, во время беременности и после родов;
  
• 
  осложнения в родах (длительный, безводный период, затяжные роды, преждевременные роды и т.д.);
  
• 
  механизм родов (кесарево сечение);
  
• 
  бактериальный вагиноз и мастит у матери;
  
• 
  раздельное и длительное пребывание в родильном доме матери и ребенка;
  
• 
  проведение реанимационных мероприятий и низкая оценка по шкале Апгар при рождении;
  
• 
  перинатальное поражение ЦНС (снижается адаптация к условиям внешней среды);
  
• 
  физиологическая незрелость моторной функции кишечника;
  
• 
  позднее прикладывание к груди;
  
• 
  искусственное вскармливание;
  
• 
  инфекционные заболевания;
  
• 
  патология ЖКТ;
  
• 
  длительный прием или нерациональное назначение антибиотиков, гормонов и т.д.;
  
• 
  наследственные заболевания: целиакия, муковисцидоз, дисахаридазная недостаточность и др.
  

13. Дисбактериоз. Факторы, влияющие на его формирование. Классификация по этиологии, по степени компенсации. Бактериологическая диагностика дисбактериоза кишечника.

Дисбактериоз (дисбиоз, дисмикробиоценоз) кишечника – качественные и количественные изменения микрофлоры. Дисбактериоз сопровождается снижением облигатной анаэробной флоры (бифидо- и лактобактерии) и увеличением условно-патогенной микрофлоры, которые в норме отсутствуют или встречаются в небольшом количестве (стафилококки, псевдомонады, дрожжеподобные грибы, протеи и т. д.). Появление дисбактериоза может привести к иммунологическим нарушениям с возможным развитием желудочно-кишечных расстройств.

Классификация дисбактериоза по этиологии

• 
  Дисбактериоз у практически здоровых лиц:
  
  • 
    Возрастной дисбактериоз - изменения микрофлоры у людей пожилого возраста.
    
  • 
    Сезонный дисбактериоз - изменения микрофлоры в холодное время года.
    
  • 
    Нутритивный дисбактериоз - связанный с несбалансированным питанием.
    
  • 
    Профессиональный дисбактериоз - при различных профессиональных вредностях.
    
• 
  Дисбактериоз, сопровождающий различные заболевания органов пищеварения:
  
  • 
    Заболевания желудка, протекающие в гипо- и ахлорогидрией.
    
  • 
    Заболевания поджелудочной железы.
    
  • 
    Заболевания печени и желчевыводящих путей.
    
  • 
    Заболевания кишечника.
    
  • 
    Синдром мальабсорбции любого генеза.
    
• 
  Дисбактериоз при других заболеваниях:
  
  • 
    Дисбактериоз при инфекционных заболеваниях.
    
  • 
    Дисбактериоз при аллергических заболеваниях.
    
  • 
    Дисбактериоз при иммунодефицитных состояниях.
    
  • 
    Дисбактериоз при гиповитаминозах.
    
  • 
    Дисбактериоз при гипоксии и гипоксемии любого генеза.
    
  • 
    Дисбактериоз при эндогенных и экзогенных интоксикациях и при воздействии на организм человека радионуклидов.
    
  • 
    Лекарственный дисбактериоз (как следствие приема антибиотиков, сульфониламидов, туберкулостатиков, иммунодепрессантов, антацидов, антисекреторных, слабительныхс средств и других лекарственных препаратов).
    
  • 
    Стрессорный дисбактериоз (при длительном эмоциональном или физическом стрессе).
    

Классификация дисбактериоза по степени компенсации

• 
  Компенсированный дисбактериоз. Организм не реагирует патологическим процессом на нарушение нормального состава кишечной микрофлоры.
  
• 
  Субкомпенсированный дисбактериоз. Наблюдается развитие локального воспалительного процесса в кишечнике.
  
• 
  Декомпенсированный дисбактериоз. Развивается генерализация инфекционного процесса с очагами воспаления в различных органах с развитием интоксикации или сепсиса.
  

Посевы изучают на наличие патогенных микроорганизмов и на нарушение соотношения различных видов микробов. Результаты исследования следует считать объективными при анализе роста изолированных колоний в том случае, если можно изучить морфологию и подсчитать количество колоний на чашку Петри. После идентификации проводят пересчёт содержания микроорганизмов каждого вида на 1 г исследуемого материала. При обнаружении патогенной микрофлоры необходимо изучить ее чувствительность к антибактериальным препаратам и бактериофагам. При определении чувствительности следует отдавать предпочтение антибиотикам узкого спектра для возможно более направленного подавления патогенов.

К оценке результатов следует подходить осторожно, поскольку состав кишечной микрофлоры варьирует. Необходимо отличать истинный дисбактериоз от дисбактериальной реакций {сдвиги в составе микрофлоры незначительны, либо кратковременны и не требуют специфической коррекции). При истинном дисбактериозе нарушения микробного ценоза обычно коррелируют с клиническими проявлениями, и их нормализация достаточно длительна (20-30 сут). При оценке результатов следует указать наличие или отсутствие патогенной микрофлоры и дать состав присутствующих микроорганизмов.

Повторные исследования при дисбактериозе. Следует отразить положительную или отрицательную динамику изменения в составе микробных сообществ.

БАКТЕРИОЛОГИЧЕСКАЯ ДИАГНОСТИКА ДИСБАКТЕРИОЗА КИШЕЧНИКА

Цель. Определение состава фекальной микрофлоры: выделение чистой культуры фекальных микроорганизмов и идентификация.

Исследуемый материал – различные разведения фекалий в физиологическом растворе от 10¹ до 10¹¹.

1-й этап. Получение изолированных колоний фекальной микрофлоры.

Ход работы.

1.Делают посевы соответствующих разведений испражнения на среды:

-для выявления анаэробных бифидобактерий необходимо делать посевы фекалий в разведениях от 10⁶ до 10¹¹ глубоким уколом в пробирки с полужидкой средой Блаурококка (печеночно-МПА с цистеином и лактозой);

- для выделения E.сoli - на среду Эндо (Левина),

-для выделения патогенных энтеробактерий (сальмонелл, шигелл и др.) – на среду Плоскирева,

-для выделения Proteus vulgaris - посев по Щукеевичу в конденсационную воду скошенного МПА;

-для выделения стафилококков с лецитиназной активностью – на желточно-солевой агар,

-для выделения гемолитических бактерий - на кровяной агар,

-для выделения грибов рода Кандида - на среду Сабуро и др.

2.Все посевы помещают в термостат при 37°С на 18-24 часа, Блаурококка – 48 час., за исключением среды Сабуро (при 28-30°С на 3-5 дней).

2-й этап. Выделение чистой культуры.

Ход работы.

1. Подсчет колоний и макроскопическое описание их:

Выделение чистой культуры бифидобактерий является весьма трудоемким и практически необязательным, так как определение разведения, в котором обнаруживают бифидобактерий является вполне достаточным для оценки нормального или пониженного содержания их в фекалиях. Из посевов, в которых виден рост в виде помутнения всей среды или отдельных колоний, готовят мазки и окрашивают их по Граму. Обнаружение характерных грамположительных палочек с разветвлениями на концах в виде римской цифры V, с несколько утолщенными концами подтверждает их принадлежность к бифидобактериям.

-на среде Эндо: определение общего количества E.сoli, подсчет лактозонегативных (бесцветных) и со слабовыраженными ферментативными свойствами (розовые) колоний;

-на среде Плоскирева - бесцветных колоний патогенных энтеробактерий (сальмонелл, шигелл и др.);

-на скошенном МПА - рост Proteus vulgaris по всей поверхности;

-на желточно-солевой агаре - лецитиназная активность стафилококков проявляется в виде радужного помутнения вокруг колоний;

-на кровяном агаре – колонии бактерий, обладающих гемолитической активностью;

-на среде Сабуро – колонии грибов рода Кандида округлой формы, выпуклые, с гладкой поверхностью, ровными краями, матового цвета. Из подозрительной колонии готовят неокрашенный препарат. При его микроскопии должны быть почкующиеся овальные клетки - псевдомицелии (почкующиеся клетки располагаются в цепочку). Окрашиваются по Граму положительно.

2.Микроскопическое исследование колоний.

3.Пересев небольшой части колоний на скошенную среду.

4. Инкубация в термостате при 37°С в течение 18-24 часа.

3-й этап. Идентификация выделенной чистой культуры.

Ход работы.

9. 
   Макроскопическое определение роста микробов.
   
10. 
    Проверка на чистоту выделенной чистой культуры – микроскопическое исследование.
    
11. 
    Окончательная идентификация по ферментативной активности путем пересева на диференциально-диагностические среды и по др. признакам.
    

4-й этап. Учет результатов идентификации и оформление заключения о наличие и степени дисбактериоза.

14.Эубиотики (пробиотики, пребиотики, синбиотики). Природа, механизм действия. Бактериоцины. Практическое использование эубиотиков.

Пробиотики - живые микроорганизмы (молочнокислые бактерии, иногда дрожжи), которые относятся к обитателям кишечника здорового человека, оказывают положительное воздействие на физиологические, биохимические и иммунные реакции организма, через оптимизацию микрофлоры хозяина.

•  Бифидосодержащие препараты. Их действующим началом являются живые бифидобактерии, обладающие высокой антагонистической активностью против широкого спектра патогенных и условно-патогенных бактерий. Эти препараты повышают колонизационную резистентность, нормализуют микрофлору кишечника. Например, бифидумбактерин, который содержит живые лиофильно высушенные бифидобактерии - B. bifidum.

•  Лактосодержащие препараты. Действующим началом этих препаратов являются живые лактобактерии, обладающие широким спектром антагонистической активности в отношении патогенных и условно-патогенных бактерий, за счет продукции органических кислот, перекиси водорода, лизоцима; например, препарат ацилакт, содержащий 3 штамма L. acidophilus.

•  Колисодержащие препараты, например, колибактерин. Имеются также поликомпонентные препараты: бификол (содержит бифидобактерии и E. coli; линекс, содержащий B. infantis, L. acidophilus, E. faecium.

Пребиотики - препараты немикробного происхождения, не способные адсорбироваться в верхних отделах пищеварительного тракта. Они способны стимулировать рост и метаболическую активность нормальной микрофлоры кишечника. Чаще всего вещества, составляющие основу пребиотика, являются низкомолекулярными углеводами (олигосахариды, фруктоолигосахариды), содержащиеся в грудном молоке и в некоторых пищевых продуктах.

Синбиотики - комбинация пробиотиков и пребиотиков. Эти вещества избирательно стимулируют рост и метаболическую активность индигенной микрофлоры. Например, препарат биовестинлакто содержит бифидогенные факторы и биомассу B. bifidum, L. adolescentis, L. plantarum.

Бактериоцины– это вещества белковой природы или представленные белком в комплексе с липополисахаридами, но в любом случае за антибактериальную активность бактериоцина отвечает белок. Бактериоцины различаются по спектру действия, по физико-химическим, морфологическим и некоторым другим свойствам.