Главная страница
Навигация по странице:

  • О-АГ - липополисахарид клеточной стенки грамотрицательных бактерий.

  • Н-АГ

  • 5 изотипов

  • Метод решает следующие задачи

  • Терминология. Диагностическая сыворотка

  • Серологический метод исследования включает ряд реакций

  • ОЦЕНКА МЕТОДА

  • РА используют для

  • РПГА - реакция пассивной гемагглютинации

  • EvTeam all in the last night. Все способы оперативной неподготовке к колкам и прочее за какчество не ручаемся


    Скачать 378.5 Kb.
    НазваниеEvTeam all in the last night. Все способы оперативной неподготовке к колкам и прочее за какчество не ручаемся
    Анкорmikroby_2 (1).doc
    Дата04.09.2018
    Размер378.5 Kb.
    Формат файлаdoc
    Имя файлаmikroby_2 (1).doc
    ТипДокументы
    #24082
    страница3 из 7
    1   2   3   4   5   6   7

    14.

    Антигенная структура бактерий. Групповые, ввдовые, типовые антигены. Перекрестнореагируюшие антигены. Антигенная формула.

    Бактериальные антигены:

    • группоспецифические (встречаются у разных видов одного рода или семейства)

    • видоспецифические (у различных представителей одного вида);

    • типоспецифические (определяют серологические варианты - серовары, антигеновары внутри одного вида).


    О-АГ - липополисахарид клеточной стенки грамотрицательных бактерий. Состоит из полисахаридной цепочки (собственно О-Аг) и липида А. Полисахарид термостабилен (выдерживает кипячение в течение 1-2 часов), химически устойчив (выдерживает обработку формалином и этанолом). Чистый О-АГ является слабым иммуногеном. Проявляет вариабельность структуры и по нему различают много серовариантов бактерий одного вида. Например, для каждой группы сальмонелл характерно наличие определенного О-АГ (полисахарида) - у группы А

    - это фактор 2, у группы В - фактор 4 и т.д. У R-форм бактерий О-АГ теряет боковые цепи

    полисахарида и типоспецифичность.

    Липид А - содержит глюкозамин и жирные кислоты. Он обладает сильной адьювантной, неспецифической иммуностимулирующей активностью и токсичностью.

    В целом ЛПС является эндотоксином. Уже в небольших дозах вызывает лихорадку из-за активации макрофагов и выделения ими ИЛ1, ФНО и других цитокинов, дегрануляцию гранулоцитов, агрегацию тромбоцитов. Он может связываться с любыми клетками организма, но особенно с макрофагами. В больших дозах угнетает фагоцитоз, вызывает токсикоз, нарушение функции сердечнососудистой системы, тромбозы, эндотоксический шок. ЛПС некоторых бактерий входит в состав иммуностимуляторов (продигиозан,

    пирогенал). Пептидогликаны клеточной стенки бактерий обладают сильным адьювантным эффектом на клетки СИ.

    Н-АГ входит в состав бактериальных жгутиков, основа его - белок флагеллин. Термолабилен.

    К-АГ - это гетерогенная группа поверхностных, капсульных АГ бактерий.

    Они находится в капсуле. Содержат главным образом кислые полисахариды, в состав которых входят галактуроновая, глюкуроновая и идуроновая кислоты. Встречаются вариации в строении этих антигенов, на основании чего, например, различают 75 типов (серотипов) пневмококков, 80 типов клебсиелл и т.д. Капсульные антигены используются для приготовления вакцин менингококков, пневмококков, клебсиелл. Однако, введение высоких доз полисахаридных антигенов может вызвать толерантность.

    Антигенами бактерий являются также их токсины, рибосомы и ферменты.

    Некоторые микроорганизмы содержат перекрестнореагируюшие - антигенные детерминанты встречающиеся у микроорганизмов и человека/животных.

    У микробов различных видов и у человека встречаются общие, сходные по строению АГ. Эти явления называются антигенной мимикрией. Часто перекрестнореагируюшие антигены отражают филогенетическую общность данных представителей, иногда являются результатом случайного сходства конформации и зарядов молекул АГ. Например, АГ Форсмана содержится в эритроцитах барача, сальмонеллах и у морских свинок.

    Гемолитические стрептококки группы А содержат перекрестно реагирующие АГ (в частности, М-протеин), общие с АГ эндокарда и клубочков почек человека. Такие бактериальные антигены вызывают образование антител, перекрестно реагирующих с клетками человека, что приводит к развитию ревматизма и постстрептококкового гломерулонефрита.

    У возбудителя сифилиса есть фосфолипиды, сходные по строению с теми, которые имеются в сердце животных и человека. Поэтому кардиолипиновый антиген сердца животных используется для выявления антител к спирохете у больных людей (реакция Вассермана).

    Среди бактериальных антигенов выделяют гак называемые протективные или антигены главного действия, защитные антигены. Выработанные на них антитела защищают организм от данного микроба. Очищенные протективные антигены могут быть "идеальными" вакцинными препаратами.

    15.

    Антитела, структурно-функциональная организация молекулы, свойства. Моноклональньве антитела, принцип получения, применение. Антимдиотинические антитела.
    То- же что и в 16...
    16.

    Классы иммуноглобулинов, жарактеристика. Субклассы, аллотипы, изотипы, идиотины иммуноглобулинов.
    Антитела - иммуноглобулины, продуцируемые В-лимфоцитами (плазматическими клетками). Мономеры иммуноглобулинов состоят из двух тяжелых (Н-цепи) и двух легких (L-цепи) полипептидных цепей, связанных дисульфидной связью. Эти цепи имеют константные (С) и вариабельные (V) участки. Папаин расщепляет молекулу иммуноглобулина на два одинаковых

    антигенсвязывающих фрагмента - Fab (Fragment anligen binding) и Fc (Fragmenl crislalhzable).

    Иммуноглобулины подразделяют на классы в зависимости от структуры, свойств и антигенных особенностей их легких и тя­желых цепей. Легкие цепи в молекулах иммуноглобулинов пред­ставлены двумя изотипами—лямбда (λ) и каппа (κ), которые различаются по химическому составу как вариабельных, так и константных участков, в частности наличием модифицированной аминогруппы на N-конце х-цепи. Тяжелые цепи иммуноглобули­нов подразделены на 5 изотипов (γ, μ, α, β, ε), которые опреде­ляют их принадлежность к одному из 5 классов иммуноглобу­линов: G, M, A, D, Е соответственно. Они отличаются друг от друга физико-химическими особенностями и биологическими свойствами.

    Таким образом, в состав разных классов иммуноглобулинов входят легкие и тяжелые цепи, которые относятся к разным изотипическим вариантам иммуноглобулинов.

    Наряду с ними имеются аллотипические вари­анты (аллотипы) иммуноглобулинов, несущие индивидуаль­ные антигенные генетические маркеры. Это объясняется нали­чием в плазмоцитах аллельных генов, контролирующих синтез того или другого аллотипа иммуноглобулина. Каждая плазма­тическая клетка продуцирует антитела одного аллотипа.

    Наличием специфического для каждого иммуноглобулина антигенсвязывающего участка, образованного гипервариабель­ными доменами легкой и тяжелой цепи, обусловлены их различ­ные антигенные свойства. Эти различия положены в основу деления иммуноглобулинов на идиотипы. V-домены разных по своей специфичности иммуноглобулинов можно различить и по их антигенным свойствам (идиотипам). Накопление любых анти­тел, несущих в структуре своих активных центров новые для организма антигенные эпитопы (идиотипы), приводит к индукции иммунного ответа на них с образованием антител, получив­ших название антиидиотипических


    Свойства Ig

    Классы Ig

    IgG

    IgM

    IgA

    IgD

    IgE

    Молекулярная масса, тыс дальтон

    160

    900

    170-350

    160

    190

    Скорость седиментации, S

    7

    19

    7-13

    7

    8

    Количество мономеров

    1

    5

    1,2,4

    1

    1

    Период полураспада, сут

    21

    5

    6

    3

    2

    Термостабильность

    +

    +

    +

    -

    -

    Содержание в сыворотке крови г/л

    12

    1

    2.5

    0.03

    0.00025

    Скорость биосинтеза, мг/кг массы в день

    32

    7

    30

    0.4

    0.002

    Прохождение через плаценту

    +

    -

    -

    -

    -

    Связывание и активация комплемента по классическому пути

    +

    +

    -

    -

    -

    Нейтрализация токсинов

    +

    +

    +

    -

    -

    Агглютинация, преципитация АГ

    +

    +

    -

    -

    -

    Бактериолиз, опсонизация антигена

    +

    +

    -

    -

    -

    Цитофильность

    +-

    -

    +

    ?

    +



    17.

    Механизмы взаимодействия антигенов и антител. Специфичность. Фазы. Проявления. Афинность. Авидность.
    Антитела обладают способностью отличать один антиген от другого. Они взаимодействуют только с теми антигенами (за редким исключением), против которых они выработаны и подходят к ним по пространственной структуре. Эта способность антитела получила название комплиментарность. Специфичность антитела обусловлена химической структурой, пространственным рисунком антидетерминант. Она связана с первичной структурой (чередованием аминокислот) белковой молекулы антитела.

    Тяжелые и легкие цепи иммуноглобулинов обусловливают специфичность активного центра. В формировании комплекса антиген-антитело участвуют возникающие между ионными группами кулоновские силы и силы притяжения Ван-Дер-Ваальса, полярные силы и силы Лондона, межатомные ковалентные связи.

    Известно, что взаимодействуют они как целые молекулы. Поэтому на одну молекулу антигена приходится значительное количество молекул антител. Они создают слой толщиной до 30 А0. Комплекс антиген-антитело разъединим с сохранением первоначальных свойств молекул.

    Первая фаза соединения антитела с антигеном неспецифическая, невидимая, характеризуется абсорбцией антитела на поверхности антигена или гаптена. Протекает при температуре 37°С за несколько минут.

    Вторая фаза специфическая, видимая, завершается феноменом агглютинации, преципитации или лизиса. В этой фазе необходимо присутствие электролитов, а в некоторых случаях и комплемента. Несмотря на обратимость процесса, комплексообразование между антигеном и антителом играет положительную роль в защите организма, которая сводится к опсонизации, нейтрализации, иммобилизации и ускоренной элиминации антигенов.

    • Аффинность антител - сила связывания отдельной детерминаты (эпитопа)антигена с определенным активным центром- комбинаторным участком молекулы иммуноглобулина ( паратопом).

    • Авидность антител - кумулятивная сила связывания комбинаторных участков антител (паратопов) с антигенными детерминантами (эпитопами) сложного антигена.


    18.

    Серологический метод исследования. Задачи, этапы, оценка. Титр сыворотки, диагностический титр. Диагностикумы, диагностические сыворотки, применение. Характеристика серологического метода исследования
    Серологическим называют метод исследования, в основе которого лежит реакция специфического взаимодействия антигенов и антител. На основе ее специфичности возможно определение неизвестных антител при взаимодействии с известным антигеном или неизвестного антигена по связыванию с известным антителом.
    Метод решает следующие задачи:

    1. Серологическая диагностика инфекционных и иммунных заболеваний, основанная на обнаружении в сыворотке крови больных антител. Обоснованием для постановки диагноза является:

      • обнаружение антител к возбудителю болезни в диагностическом титре, т.е. в таком разведении сыворотки, в котором реакция может быть положительна только у больных и отрицательна у здоровых;

      • нарастание титра антител при повторном исследовании в динамике болезни, что позволяет отличить заболевание от поствакцинального или постинфекционного иммунитета.

    1. Серологическая диагностика инфекционных заболеваний, основанная на обнаружении в биологических жидкостях или тканях антигенов патогенных микробов.

    2. Серологическая идентификация неизвестных микробов, выделенных при бактериологическом методе диагностики инфекционных болезней. Обоснованием для отнесения микроба к определенной серофуппе, сероварианту или виду является:

      • взаимодействие микроба с адсорбированной моноспецифической сывороткой, содержащей антитела только к-специфическим для микроба антигенам (из таких сывороток в процессе их производства сорбируются антитела к групповым антигенам);

      • взаимодействие микроба с моноклональными антителами, полученными методом гибридомной техники, т.е. метода культивирования гибрида из плазматической клетки, синтезирующей антитела одной специфичности, с опухолевой клеткой, способной к длительному размножению в культуре ;

      • взаимодействие микроба с диагностической сывороткой в разведении, составляющем не менее половины титра этой сыворотки.

    1. Определение активности поствакцинального или постинфекционного индивидуального или коллективного иммунитета.

    2. Получение и определение титров иммунных диагностических, лечебных и профилактических сывороток, поли- и гамма-глобулинов.


    Терминология.

    Диагностическая сыворотка - иммунная сыворотка, содержащая антитела известной специфичностити в известном титре, и предназначенная для серологической идентификации микроба или для обнаружения антигенов в организме больного,

    Диагностикум - взвесь известных микробов или антигенов, предназначенных для серологической диагностики заболеваний по обнаружению антител в сыворотке больного.
    Серологический метод исследования включает ряд реакций:

    • агглютинации

    • преципитации

    • связывания комплемента

    • иммунофлюоресценции

    • иммуиоферментного и радиоиммунологического анализа.


    ОЦЕНКА МЕТОДА

    Достоинства:

    • высокая специфичность,

    • относительная простота,

    • доступность,

    • безопасность,

    • быстрота (от 10 мин. до 4 часов) получения результатов.

    Недостатки:


    19.

    Реакция агглютинации. Цели и методы постановки, учёт, оценка. Применение
    Реакция агглютинации (от лат. agglutinatio - склеивание) - склеивание корпускул (бактерий, эритроцитов и др.) антителами в присутствии электролитов - натрия хлорида.

    Реакция агглютинации проявляется в виде хлопьев или осадка, состоящих из корпускул (например,бактерий), "склеенных" антителами.
    РА используют для:

    • Определения возбудителя,

    • Определения антител в сыворотке крови больного


    Методы постановки:

    • Реакция агглютинации на стекле. К капле агглютинирующей сыворотки (разведение 1 : 20) добавляют взвесь бактерии, выделенных от больного. Образуется хлопьевидный осадок.

    • Развернутая реакция агглютинации с сывороткой крови. К разведениям сыворотки добавляют диагностикум.


    20.

    Реакция пассивной гемагглютинации, ингредиенты Методика постановки, учёт, оценка. Применение. Реакция обратной пассивной гемагглютииации. Реакция латексагглютинации
    РПГА - реакция пассивной гемагглютинации

    В РПГА выявляют антитела сыворотки крови с помощью антигенного эритроцитарного диагностикума, который представляет собой эритроциты с адсорбированными на них антигенами. Эритроциты (или частицы латекса) с адсорбированными на них антигенами взаимодействуют с соответствующими антителами сыворотки крови, что вызывает склеивание и выпадение эритроцитов на дно пробирки или ячейки в виде фестончатого осадка. При отрицательной реакции эритроциты оседают в виде пуговки.
    1   2   3   4   5   6   7


    написать администратору сайта