Акушерство. акушерство. Курс лекций по дисциплинеАкушерство и гинекология сельскохозяйственных животных составлен в соответствии с рабочей программой по данной дисциплине и предназначен для студентов 3 4 курсов. Специальность 65. 05. 01
 Скачать 1.76 Mb.
|
|
4.3. Факторы, способствующие оплодотворению Успех оплодотворения самок зависит от многих факторов. Наиболее важными, из которых являются: 1. Среда матки. 2. Качество спермиев, вводимых в матку. А это зависит и от наследственных характеристик производителя и главное от режима его использования. 3. Правильная организация использования осеменения. Заключается в точности соблюдения всех технологических процессов работы со спермой, начиная от получения и кончая введение ее в половые пути самки. Грубые манипуляции, связанные с введением пипетки, приводят к стрессовому состоянию, в результате чего снижается число спермиев, достигающих ампул яйцепроводов. 4. Полноценное кормление. Должно быть сбалансированным и по питательности, и по полноценности. Так если в рационе самок много концентрированных кормов то оплодотворяемость снижается вследствии дегенеративных процессов яичнмков. 5. Межпородное скрещивание. При искусственном осеменении сперму от 2 и более самцов смешивают и осеменяют самку. Поскольку может наступить оплодотворение нескольких яйцеклеток ( особенно у многоплодных самок) в период одного полового цикла, то такое оплодотворение называют множественным или суперфекундацией. 6. Иммунобиологическая совместимость- это наличие в жидкостях полового аппарата самок в охоте спериоагглютиннов, спермотоксинов и других антител. 7. Лечение самцов и самок с заболеваниями половых органов, профилактика этих заболеваний (А. П. Студенцов и др., 1999; Т.Е. Григорьева, 2005; Н.И. Полянцев, 2012;). 4.4. Научно-практическое значение избирательности оплодотворения Оплодотворение возможно только при условии осеменения животных своего вида. Порода животных при этом значения не имеет. При естественном осеменении практикуется коитус с двумя самцами и интервалом 10- 15 минут или искусственного осеменения самок спермой производителей другой породы. Это применяется в настоящее время в животноводческой практике не только для повышения оплодотворения, но повышения жизненности приплода. Целесообразность использования спермы производителя другой породы основана на феномене гетерозиса. В частности, во многих свиноводческих хозяйствах широко осуществляется осеменение (естественное или искусственное) свиней крупной белой породы спермой хряков породы дюрок или ландрас. Получаемое потомство отличается более высокой сохранностью, лучшими привесами и желательными качествами мяса. Получаемые гибриды(мулы и др. ) обладают уникальной выносливостью и поэтому их получают для практического использования в народном хозяйстве (А.П. Студенцов и др., 1999). 25 Вопросы для самоконтроля 1. Механизм продвижения спермиев. 2. Особенности продвижения яйцеклетки. 3. Сущность оплодотворения. 4. Особенности стадий оплодотворения. 5. Сроки переживаемости спермиев в половых органах самок 6. Что обеспечивает избирательность оплодотворения?. 7. Нейрогуморальная регуляция полового цикла. 8. Что такое суперфекундация? СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ Основная 1. Полянцев, Н.И. Акушерство, гинекология и биотехника размножения животных /Н.И. Полянцев, А.И Афанасьев.- Изд-во «Лань», 2012.- 400 с. Дополнительная 1. Григорьева, Т.Е. Физиология воспроизводства животных /Т.Е. Григорьева // Научно- обоснованная система животноводства ЧР до 2010 года.-Чебоксары, 2005.- 78 с. 2. Насибов, Ф. Н. Регуляция полового цикла и профилактика нарушений репродуктивной функции. / Ф. Н. Насибов, Ю. В. Конопелько, Е. А. Тяпугин, Е. У. Байтлесов, В. В. Власов, А. Г. Хмылов, Н. В. Осокина. – Методические рекомендации. – Вологда, 2006. – 32 с. 3. Нежданов, Г.А.Гормональный контроль за воспроизводством крупного рогатого скота/ Г.А. Нежданов, К.А. Лободин, Г.П. Дюльгер// Ветеринария. - 2008.- №1.- С. 3 - 7. 26 Лекция 5 ТРАНСПЛАНТАЦИЯ ЗИГОТ 5.1. Отбор доноров и реципиентов Трансплантация эмбрионов – новый биотехнический метод ускоренного воспроизводства высокопродуктивных животных, повышающий роль маточного поголовья, представляет собой составную часть программы селекции и является одним из способов интенсификации использования генетического потенциала коров – рекордисток, а также выдающихся быков, проверенных по качеству потомства и признанных улучшателями породы. В настоящее время центры по искусственному осеменению США, Канады, ФРГ, Англии, Франции примерно на 50% комплектуются бычками, полученных с помощью трансплантации эмбрионов от выдающихся родительских пар. Несмотря на высокую стоимость телят трансплантатов, данный метод находит все более широкое применение. Так в США методом трансплантации на протяжении ряда лет получают более 100 тыс. телят. В ФРГ – делают до 8200 пересадок в год. Собственно нет страны, где не занимались трансплантацией эмбрионов. В СССР в 1986 году получено 924 теленка. На 1.06.87 г. было создано 19 центров и 40 пунктов. Производили около 3 тыс. эмбриопересадок. Примерно 50% всех телят получали в ВИЖЕ. В настоящее время в России число пересадок существенно сократилось. Сотрудники кафедры акушерства и хирургии также занимались трансплантацией эмбрионов в условиях учебного хозяйства «Степное» Энгельсского района. В России накоплено около 480 млн. доз спермы и не вся она востребована, а ведь это капитал, который не должен лежать. Однако быстро и, главное, кардинально улучшить племенные качества скота можно только благодаря трансплантации эмбрионов на достаточно высокую стоимость эмбрионов (эмбрион (прижизненный) за рубежом стоит 1000-1300 долларов). В качестве доноров отбирают коров с продуктивностью не менее 7 тыс. кг, а разница с продуктивностью реципиента должна быть не менее 2000 кг. Возраст оптимальный для доноров 2-4 лактации (на стадии 7-8 лет). Устанавливают длительность полового цикла по 1-2 половым охотам, исследуют состояние яичников, матки, исключают гинекологические и другие незаразные заболевания. Много внимания уделяют вопросам кормления и содержания (особенно моциона). Реципиентами могут быть телки, не имеющие большой ценности 18 месячного возраста, достигшие 70% массы коров со среднесуточным привесом 850 гр. и являющиеся клинически здоровыми (без аномалий в половых органах, без туберкулеза, бруцеллеза, лейкоза и т.д.). Донорами настоящими могут быть только 15% коров. 5.2. Суперовуляция доноров Для вызывания суперовуляции чаще всего используют естественные гонадотропины (ГСЖК), продуцируемые плацентой кобылы в период 50-100 дня жеребости или очищенный гормон гипофизарного происхождения свиней, получаемый из гипофиза свиней с соотношением ФСГ и ЛГ 1:1; 1:2. Для ГСЖК длительность полураспада в крови составляет 5 суток, поэтому его вводят однократно в дозе 2500 МЕ внутримышечно коровам и 2000 МЕ для телок доноров с 8-10 день(на 10 – 11 день) при наличии в яичниках функционирующего желтого тела. При этом необходимо особенно точно фиксировать день охоты. 27 Через двое суток вводят простагландин 2 альфа или его аналоги (эстрофан, энзапрост, прозольвин), на 15-16 день – осеменяют животных, а вымывание эмбрионов осуществляют чаще на 7день после осеменения. В таком случае технологичный цикл подготовки донора от охоты до вымывания займет 22 – 23 дня. Поскольку остаточный сывороточный гонадотропин в крови обработанного животного из-за длительного периода его распада (5 суток) неблагоприятно действует на овуляцию созревающих фолликулов, вызывая образование кист, снижает жизнеспособность эмбрионов, то в момент 2-ого осеменения вводят антисыворотку, которая производится в основном во Франции. В настоящее время во Франции для вызывания у доноров суперовуляции у доноров чаще используют французский и американский вариант введения ФСГ, отличающийся только дозой препарата 32 и 40 мг. Можно при отсутствии ФСГ, ГСЖК, фоллигона использовать СЖК. Доза для телок 2500 МЕ и коров 3000 МЕ, однократно. В остальном схема аналогична использованию ГСЖК (Н. С. Сергеев, 2005; В. Н. Мадиссон, 2005). 5.3. Методы вымывания эмбрионов Вымывание зигот из матки выполняют двумя способами: - нехирургическим (парацервикальным); - хирургическим. Самым распространенным является нехирургический способ, как менее трудоемкий, дорогостоящий, а главное – позволяющий использовать доноров многократно. Вымывают эмбрионы на 6-9 день после осеменения. Животное жестко фиксируют в станке, освобождают прямую кишку, эпидурально вводят 5мл 2% -ного раствора новокаина для снятия напряжения половых органов и дефекации. Проводят туалет половых органов. Подсчитывают число желтых тел в яичниках через прямую кишку катетер (Кассо) со стилетом через влагалище вводят в шейку, а затем и в один из рогов матки (где больше желтых тел в яичнике) до его большой кривизны (поворота). В баллон нагнетают около 20 мл воздуха с целью фиксации положения и предупреждения обратного вытекания промывной жидкости, после чего стилет извлекают. Промывают рог средой Дюльбекко, вводят жидкость порциями по 50 мл с последующим удалением в колбу. На промывание рога требуется в среднем около 400-500 мл. Аналогично проводят манипуляцию во втором роге. По окончании вымывания жидкость переносят в стерильный бокс и выдерживают при температуре +37˚(а можно и при +22˚ не ниже комнатной) 30 минут. После этого надосадочную жидкость отсасывают и удаляют, а оставшиеся 150 мл жидкости разливают в чашки Петри, просматривают под лупой или микроскопом при малом увеличении. Выявленные эмбрионы пипеткой переносят в маленькие чашки Петри со средой Дюльбекко и 20%-ной фетальной сывороткой. Если эмбрионы хорошего и удовлетворительного качества, то их либо подвергают криоконсервации, либо используют для пересадки реципиентам (А.П. Студенцов и др.. 1999). 5.4. Методы пересадки эмбрионов Наиболее приемлимым в практических условиях является нехирургический метод трансплантации зигот. При пересадке зигот предварительно оценивают наличие желтого тела в яичнике, степень его развития. Для пересадки используют прибор Кассу. Инструмент осторожно вводят во влагалище, затем шейку матки и наконец в нужный рог под контролем руки через прямую кишку. 28 Затем зародыш вместе со средой выталкивают в просвет рога. Важнейшим условием высокой приживляемости является хорошая квалификация специалистов, тщательный подбор реципиентов, чистота в работе. Очень важно совпадение момента охоты у донора и реципиента, разница не должна превышать 12-24 часов. Несоблюдение этих сроков ведет к снижению приживляемости эмрионов. Отмечено, что приживляемость эмбрионов при хирургической пересадке резко варьирует и бывает несколько ниже чем от пересадки хирургическим способом. Зарубежные авторы объясняют это травматизмом слизистой матки, гиперлейкоцитозом, эндокринными и биохимическими нарушениями, снижающими возможность нормального развития эмбриона. Сущность хирургического способа вымывания эмбрионов заключается в следующем. Перед операцией доноров не кормят 1-1,5 суток, не поят 6 часов. После наркоза (рампун с последующим введением хлоралгидрата) вскрывают перитониальную полость по белой линии живота, подтягивают нужный рог матки к ране, вскрывают тело матки и вставляют катетор Фоллея. В баллон вводят 15-20 мл воздуха, а в верхушку через иглу вводят 60-120 мл промывной жидкости (дробно), которая отводится через катетор в стерильную колбу. Можно делать разрез в области голодной ямки или по боковой линии (в области бугра тазобедренного сустава), но при этом общее обезболивание уже не нужно. Более простые и дешевые операции менее опасны для жизни коров. Поиск, оценка эмбрионов проводится также как и при хирургическом вымывании. Для пересадки эмбрионов, как и при вымывании, получают доступ к рогам матки любым из способов. Подтягивают рог матки со стороны которого функционирующее будет желтое тело, прокалывают стенку и пипеткой вводят зиготу с небольшим количеством среды (Н. С. Сергев, 2005; В. Н. Мадиссон, 2005). 5.5. Методы хранения эмбрионов Существует два метода сохранения эмбрионов: - кратковременное; - длительное. Кратковременным является хранение эмбрионов в среде Дюльбекко с добавлением 20% -ной фетальной сыворотки (2мл:8мл) непосредственно после вымывания и при комнатной температуре до 1-2 суток при 37˚. Это в случаях, когда нужно убедиться в том что происходит дробление зиготы или дождаться более поздней стадии развития морулы. Самым перспективным следует считать сейчас глубокое замораживание эмбрионов с последующим их длительном хранении в жидком азоте. Для этого предварительно насыщают постепенно средой ДМСО. Сначала помещают эмбрион в 0,25% -ом растворе на 5мин, затем 0,5 м;0,75 м;1 м и в 1,5 м, где выдерживают 15 мин. После чего помешают эмбрион в пробирки и ставят в замораживатель. От +20˚С до -7˚С охлаждают со скоростью 1˚С в минуту. При -7˚С происходит искусственная кристаллизация. Затем от 7˚С до - 60-70˚С со скоростью 0,1˚С в минуту, после чего можно помещать в жидкий азот. Хранить эмбрионы в жидком азоте можно очень долго, многие годы. При размораживании контейнер с эмбрионами помещают в спиртовую баню (-50˚С) на 10 мин. при комнатной температуре. За это время температура повышается до -10˚С в минуту. Потом помещают в водяную баню +25˚ на 5мин. Затем снимают криопротектер с постепенной эквилибрацией в среде ДМСО, но в обратной последовательности и в самом конце помещают в среду Дюльбекко (В. Н. Мадиссон, 2005; Н. С. Сергеев, 2005; Н.И. Полянцев, 2012). 29 5.6. Перспективы использования трансплантации эмбрионов Трансплантация эмбрионов не только на сегодняшний день самый современный и самый эффективный метод повышения племенных и продуктивных качеств животных. Благодаря пересадке эмбрионов появляется реальная возможность в самые сжатые сроки получить высокоценное поголовье не зависимо от пола животных. Используя пересадку эмбрионов просто невозможно получить «плохое» потомство. Кроме того, можно не просто пересаживать несколько эмбрионов от донора нескольким реципиентам. Более того, уже достаточно давно разработаны методики делению одного эмбриона на несколько частей с последующей пересадкой нескольким реципиентам. Теоретически эмбрион можно разделит на 64 части. Пока делят на 4 - 6 частей. В России и за рубежом получены телята (5 голов) в пробирках. Аналогичные результаты получены и в медицине. За рубежом имеется специальная машина «Хепи Берс» («Счастливого рождения») по выращиванию плодов. Используя специальные питательные растворы, удается из эмбриона получить через 9 месяцев нормального теленка. К сожалению, стоимость такого теленка чрезвычайно высока для промышленного «производства» телят. Вопросы для самоконтроля 1. Требования, предъявляемые к донорам. 2. Что такое реципиент и какую функцию он выполняет при пересадке эмбрионов. 3. В чем преимущества пересадки зигот по сравнению с искусственным осеменением самок? 4. Методы вымывания эмбрионов. 5. Методы пересадки эмбрионов. 6. Особенности замораживания эмбрионов. 7. Правила оттаивания замороженных эмбрионов. 8. Каковы перспективы использования пересадки эмбрионов? СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ Основная 1. Полянцев, Н.И. Акушерство, гинекология и биотехника размножения животных /Н.И. Полянцев, А.И Афанасьев.- Изд-во «Лань», 2012.- 400 с. Дополнительная 1. Мадиссон, В.Н. Трансплантация эмбрионов /В.Н. Мадисон.- М., 2005.- 146 с. 2. Сергеев, Н.С. Актуальные проблемы трансплантации эмбрионов/Н.С. Сергеев.- М., Колос, 2005.- 187 с. 30 Лекция 6 ФИЗИОЛОГИЯ БЕРЕМЕННОСТИ 6.1. Развитие зиготы, эмбриона, плода Беременность - это особое физиологическое состояние организма самок в период плодоношения. Она начинается с момента оплодотворения и заканчивается рождением зрелого плода или абортом. В практике началом беременности считается день последнего (плодотворного) осеменения. Беременных коров принято называть стельными, кобыл – жеребыми, свиней – супоросными, овец и коз – суягными. Различают беременность первичную – у первородящих, вторичную – повторнородящих. Беременность может быть одноплодной ( коровы, кобылы и др.) и многоплодной (свиньи, овцы, козы) при развитии в матке соответственно одного или нескольких плодов. Плодовитость самок определяется количеством развивающихся плодов за одну беременность. Она может быть малоплодной, когда рождается плодов меньше нормативов плодовитости, установленных для вида, и многоплодной, когда рождается плодов больше, чем обычно. Так у коров мясных пород рождение двоен составляет 1%, у молочных 2%, а у некоторых пород – 3-4%. Тройни у коров регистрируются редко (0,1%), а 4-5 и особенно 6-7 телят – редчайшее явление. У кобыл двойни составляют 1 -1,5% . Причем, более половины всех двоен не донашиваются. От свиней за опорос получают 10 -12, а иногда 17 – 20 поросят и более. У овец двойни наблюдаются в зависимости от породы: у тонкорунных – 50 – 80%, у каракульских и курдючных -10-15 ( иногда до 40%), романовские овцы приносят 2 -3 ягненка (иногда 8-9 ягнят). У коз двойни встречаются в 67% случаев, тройни – в 13,5%, четверни – в 2%, пятерни – в 0,3% и шестерни – в 0,01% случаев. По течению различают беременность физиологическую, патологическую, добавочную, латентную и ложную. Физиологическая беременность характеризуется нормальным состоянием организма матери и рождением зрелого жизнеспособного плода. Патологическая беременность сопровождается нарушением физиологических процессов в организме матери и развивающегося плода и может закончиться прерыванием беременности ( аборт, мацерация и др.) Добавочная беременность (суперфетация) наблюдается у животных при эндокринных расстройствах, когда беременные самки приходят в охоту и после их вторичного осеменения оплодотворяются, и у них развивается один или несколько новых плодов. Добавочная беременность возможна только в начальном периоде первичной беременности. Она зарегистрирована у коров, кобыл, свиней, овец. В таких случаях наряду с рождением нормального плода изгоняется и второй, недоношенный плод. Тогда как у мясоядных, суперфетация считается нормальным явлением. Ложная беременность наблюдается у свиней, коз, плотоядных после полового цикла, не сопровождающегося осеменением или после неплодотворного осеменения. У животных, несмотря на отсутствие оплодотворения, появляются признаки беременности: увеличение молочных желез, молокообразование, самки подпускают приплод других матерей. У таких самок отмечены случаи скопления в матке большого количества слизи, что увеличивает размеры живота, вызывая наиболее характерный признак беременности. Беременность — физиологический процесс, но при этом в организме матери она обусловливает ряд изменений, граничащих с патологическим процессом, а иногда вызывает специфические болезни. 31 Наряду с этим некоторые явления свидетельствуют и о благоприятном влиянии беременности на развитие материнского организма. Происходит ускорение завершения зрелости тела у первобеременных, улучшение упитанности и др. При беременности плод никогда не вызывает ослабления или гибели вида, поскольку сам является представителем и продолжателем того вида, к которому относится мать. Процесс удовлетворения потребностей плода порождает взаимовлияние между плодом и материнским организмом. Это взаимовлияние и является движущим фактором, обусловливающим рост и развитие плода и его провизорных органов, стимулирует те изменения в материнском организме, которые необходимы для зародыша. Чем сильнее взаимовлияние между плодом и матерью, тем оно теснее и глубже ( Л.В. Маневич, 1965; М.П. Рязанский, 1974). Развитие плода зависит от его жизнеспособности, состояния матери и количества плодов, развивающихся в матке. Так, при многоплодной беременности, как правило, плацента мужских плодов развита сильнее, чем женских. Плоды мужского пола при многоплодной беременности бывают больше и по величине и по массе по сравнению с плодами женского пола. Всякое усиление или ослабление функций органов материнского организма, безусловно, оказывает коррелятивное влияние на состояние и развитие плода, и наоборот. Поэтому развитие зародыша находится в зависимости не только от наследственности, аккумулированной в яйце и спермиях, но и от функционального состояния материнского организма. При чрезмерной эксплуатации животных (доение до родов, использование на тяжелых работах, усиленный тренинг), при неполноценном кормлении, заболевании пищеварительной, сердечнососудистой и других систем никогда не удается получить высокоценный приплод даже от выдающихся производителей. Данное положение служит основанием, чтобы животноводы начинали заботу о молодняке не со дня рождения, а со дня подготовки родительских пар к осеменению ( П.В. Полетаев, 1972). Благодаря направленному воздействию на половые клетки, зиготы, эмбрионы и плоды можно научиться регулировать рост, массу, пол, интенсивность развития плода, повышать жизнеспособность приплода, улучшать старые и создавать новые наследственные качества и таким образом совершенствовать существующие и выводить новые породы животных с наиболее полезными для человека продуктивными качествами. В развитии нового организма различают четыре стадии или периода: 1. Стадия бластоцисты (пузырька), характеризующейся питанием бластоцисты за счет маточного молока и наличием у нее закладок, типичных для всех позвоночных. Бластоциста попадает в матку у коров, свиней, овец и коз через 2-4 суток в стадии 4-16 бластомеров, а кобыл – через 5-10 суток после оплодотворения. Продолжительность данной стадии у животных различна. Так у коров период зиготы продолжается 12 дней, у свиньи – 6 дней. 2. Эмбриональная (зародышевая) стадия. Происходит закладка и формирование признаков семейства животных, сопровождающееся интенсивным всасыванием маточного молока и ростом материнской части плаценты. Возникновение врожденных уродств органов и систем плода в основном связано с этой стадией. 3. Фетальная (плодная) стадия начинается после завершения процессов органогенеза и плацентации и до конца беременности: у коров - с 61 по 285 день, у кобыл – с 97 по 336 день, у свиней – с 39 по 114 день, у овец и коз - с 46 по 150 день. В эту стадию происходит рост органов, завершение оформления очертаний тела, свойственных данному виду и питание в результате обмена веществ между кровеносными системами матери и плода. В этот период у плода происходит основной прирост массы, а также важнейшие процессы, определяющие его переход в новое качественное состояние ( активность головного мозга, рефлекторные реакции, гемопоэз, продукция некоторых гормонов и др.). 4. Постфетальная стадия - от рождения до физиологической зрелости 32 Следует иметь в виду, что закладка органов происходит неодновременно. Поэтому в фетальный и постфетальный периоды в организме находятся органы различного возраста. Чем раньше произошла закладка органа, тем раньше заканчивается его рост в фетальный и постфетальный периоды жизни. Если беременные самки находятся в неблагоприятных условиях существования, то рост отдельных органов в фетальный период может задержаться, что может привести к нарушению гармонии в пропорциях организма (рождение эмбрионалов - большеголовые, низкорослые индивиды и др.). В норме рост органов плода зависит от времени и величины закладки органа. Поэтому рост одних органов почти заканчивается в фетальный период, другие же интенсивно растут и в постфетальный период. Так, исследования показали, что длина позвоночника новорожденных составляет 36,8—38,9 % длины позвоночника взрослых. Рост остальной части растягивается на целых 2 года постфетального периода. Длина трубчатых костей новорожденного ягненка достигает 50—60 % длины тех же костей взрослых животных. Так же быстро увеличивается и масса зародыша в эмбриональный и фетальный периоды. В отдельные фазы беременности суточный прирост массы зародыша может достигать 25—30 % его общей массы. Интенсивность прироста в значительной степени зависит от способности тканей плода усваивать воду, которая в отдельные фазы беременности составляет до 98 % массы плода (Н.И. Михайлов, 1973; Е.Н. Кватер, 1961). |