Микробиология. Лекции по частной медицинской микробиологии Майкоп 2012 Документ подписан простой электронной подписью
 Скачать 1.32 Mb.
|
|
Clostridium perfringens. Тяжелая раневая инфекция с общей интоксикацией и прогрессирующим омертвением тканей, сопровождающаяся их отеком и газообразованием. Второе название газовая анаэробная инфекция. Полимикробная инфекция, вызывается 7 видами клостридий. В 99% выделяется C. perfringens. Одновременно выделяют и представителей неспорообразующих анаэробов- Fusobacterium- тяжелое течение. Могут участвовать и Staphylococcus, если факультативно-анаэробный м/о обладает гнилостными свойствами. Длина – 3-9 мкм Диаметр – мкм Т оптимум 45°, диапазон - 20- 50°; рН 7,2-7,4, диапазон 5,0-8,5; Культуральные свойства - на жидких средах – диффузное помутнение, разлагают глюкозу – газ. - ферментирует лактозу, мальтозу, сахарозу - молоко створаживает через 3-5 часов (губчатый сгусток - гидролизует желатину - на КА – колонии 2-5 мм, с приподнятым центром и зоной гемолиза - на среде Китта – Тароци рост через 4-8 часов культивирования, образование мути и газа. Аг структура. 6 сероваров, все образуют ά- токсин (лецитиназу). Факторы патогенности. 1. Инвазии – гиалуронидаза и другие ферменты, разрушающие соединительную ткань и мышцы. 2. Токсины. различают 12 экзотоксинов и энтеротоксин. Главный фактор - экзотоксин, состоит из нескольких компонентов (6 сероваров) А, В, С, ДЕ. Каждый компонент обладает функцией - гемолитической - некротической - нейротоксической - лейкотоксической - летальной 23 Главный компонент – ά- лецитиназа С, разрушает мембраны клеток, особенно миоцитов. Серовары Аи С вызывают пищевые токсикоинфекции. Выделяют термолабильный токсин, разрушается при термической обработке пищевых продуктов, продуцируется при споруляции бактерий в толстой кишке, вызывает рвоту и диарею. Патогенез. - протекает без яркого воспаления, характерен прогрессирующий некроз тканей, отек, газообразование, отравление организма токсинами возбудителя и продуктами распада собственных тканей - это некропаразиты – опасны раны с обширными повреждениями, нарушением кровоснабжения, размозжением мышц, раздроблением костей, образованием слепых ходов. Клостридии быстро размножаются в глубине за счет повышенной инвазивности, проникают в здоровую ткань, поражая её токсинами и ферментами. Особенно бурное повреждение мышечной ткани, т.к. содержит гликоген (хорошая питательная среда. - действие токсина протекает в 2 стадии 1) под действием токсина происходит увеличение проницаемости кровеносных сосудов, отек, сдавливание тканей, поступление с отечной жидкостью токсина и поврежденные ткани доступны для размножения клостридий. 2) под действием ферментативной активности клостридий и некротического действия токсина происходит некроз мышечной и соединительной тканей. Токсин действует местно + интоксикация организма + отравление продуктами распада. Клинические формы газовой гангрены 1. анаэробную инфекцию мышечной ткани конечностей и таза 2. анаэробную инфекцию мозга 3. послеродовая анаэробная инфекция 4. анаэробная инфекция органов брюшной полости и брюшины 5. анаэробную инфекцию органов грудной полости 6. анаэробный остеомиелит. И.п. – от несколько часов до 5 дней Продолжительность болезни - 5 - 6 суток Letalis в I мировой войне - 60%. Иммунитет. Постинфекционный и поствакцинальный - антитоксический. Роль микробных АТ вторична. Материал для диагностики. - подкожные участки ткани - отечная жидкость - перевязочный, шовный материал - образцы одежды, почвы, пищи, испражнений. Лечение и профилактика (ИБП п. - своевременная обработка раны 24 - введение антитоксической противогангренозной поливалентной лошадиной сыворотки. Белковая фракция лошадей гипериммунизированных анатоксинами (токсинами) трех основных возбудителей газовой анаэробной инфекции (C. perfringens, C. novyi (эдематиенс), С. septicum). ИБП п. 2.13. для лечения 150 тыс. МЕ (по 50 тыс. МЕ каждого из 3 типов антител, в/в, медленно для профилактики – 30 тыс. МЕ (по 10 тыс. МЕ каждого из 3 типов антител, в/м. - антибиотикотерапия - гиперборическая оксигенация. Лекция № 3.2. Микробиология столбняка. Clostridium tetani. Столбняк - острая токсическая инфекция, характеризуется поражением нейротоксином двигательных клеток спинного и головного мозга, которая проявляется в виде судорог поперечно- полосатой мускулатуры. Болеют люди и животные (мелкий рогатый скот). Морфология. Грам (+) палочка, длина – 5 мкм, диаметр – 0,5 – 1,0 мкм Иногда образуют нити Почти всегда – перетрихи. Споры круглые, расположены терминально (барабанная палочка Капсула отсутствует. Культуральные свойства. Т оптимум – С, диапазон – С. На среде Китта-Тароци – диффузное помутнение, газообразование ±; На бульоне – гнилостный запах На КА – колонии 5 мм в диаметре, округлые, полупрозрачные, в виде переплетенных нитей (напоминает паучков, гемолиз +; В столбике агара – рост в виде комочка ваты, пушинок, чечевичек Протеолитические свойства слабые – медленно расщепляют белки и пептоны до аминокислот, ферментируют желатин, молоко свертывают к 4-7 дню (пептонизация); АГ структура. Имеются О и Н –Аг. По О-Аг различают 10 сероваров, все продуцируют идентичные тетаноспазмин и тетанолизин. Факторы патогенности. Экзотоксин – сильнейший яд. Dosa letalis менее 2 мг/кг. Состоит из 2 фракций - тетаноспазмин (нейротоксин); - тетанолизин – гемолитические, кардиотоксические, летальные свойства. Тетаноспазмин не проходит через клеточную стенку, выделяется при распаде клетки. Синтезируется в виде внутриклеточного неактивного протоксина, который после лизиса микробной клетки активируется бактериальной протеазой путем точечного гидролиза. Образуются 2 части - легкая цепь ά– собственно токсин - тяжелая цепь Н – акцепторная функция. Рецептором является сиалоганглиозид мембран аксонных окончаний. 25 Части связаны 2-мя дисульфидными мостиками. Из крови токсин поступает в ЦНС. Но из-за наличия ГЭБ так не проникает, а Н-цепь связывается с нервной клеткой в области мионервальных синапсов. ά– собственно токсин проникает в клеточную цитозоль путем рецептороопосредованного эндоцитоза. Передвижение по аксону – 1см/час. Продвижение токсина вверх по спинному и продолговатому мозгу происходит от нейрона к нейрону в области синапса, т.к. оболочка нейрона непроницаема для токсина. Токсин накапливается в ЦНС за исключением мозжечка и переднего мозга. Результат блокирует синапсы, тормозящие освобождение медиаторов (глицинацетилхолин ГАМК), развивается нервно - мышечная патология. Резистентность. Вегетативные формы неустойчивы во внешней среде Т С убивает их через несколько минут Споры - автоклавирование С – 40 минут - рабочие растворы дез.средств – 14-16 часов - в высушенном состоянии сохраняются более 10 лет. Резервуар. Почва, загрязненная испражнениями. Эпидемиология. Распространение – повсеместно Больной неопасен Входные ворота – раны, обморожения, ожоги, травмированные пути (после родов, абортов, натирания. Столбняк новорожденных - по обряду пуповину обрабатывают смесью золы и навоза. Letalis -85%. Патогенез и клиника. И.п. – 6-14 дней (от 2 дней до 1 месяца. Короткий и.п. – тяжелая клиника. Симптомы тоническое сокращение поперечно – полосатой мускулатуры, повышенное рефлекторное возбуждение от внешнего раздражения. У человека нисходящий столбняк- tetanus dessendens – тризм (спазм лицевых мышц сардоническая улыбка → спазм мышц туловища и конечностей. Часто развивается спазм разгибателей – ломаются кости. Оп ист ото ну с – тонико – клонические судороги, выгибается спина, больной в сознании, Т нормальная. Смерть от паралича СДЦ, cor, асфиксии (поражение мышц гортани, диафрагмы, дыхательной мускулатуры. У новорожденных – поза лягушонка. Letalis от столбняка после операций и абортов в 1 сутки – 90%. У животных восходящий столбняк - - tetanus ascendens – ригидность хвоста → зияющий анус → волочат ноги → подергивание мышц туловища → осиная талия. Иммунитет. Постинфекционный: стойкий, длительный, антитоксический. Обусловлен клетками иммунной памяти. Специфическая профилактика ( ИБП пп. 2.2, 2.5, 2.11) 1. плановая – АКДС с х месяцев жизни (ИБП п. 2.1); АС (ИБП п, АДС (ИБП 2.4) - анатоксины. 26 2. экстренная - иммуноглобулин противостолбнячный человека (ПСЧИ) (ИБП пили противостолбнячная лошадиная сыворотка (ПСС) (ИБП п. 2.9). Действующее начало – антитоксин. АТ сохраняются 2 недели, затем разрушаются и выводятся из организма - АС – анатоксин. Через 2 недели появляются собственные АТ, создается напряженный иммунитет. Лечение (ИБП п. Противостолбнячная лошадиная сыворотка – 100- 200 тыс. МЕ. Вводится в/м, в/в, в спинномозговой канал до исчезновения судорог. Лекция Микробиология ботулизма. Clostridium botulinum. Возбудитель - Clostridium botulinum. Лат. botulus – колбаса. - Гр (+) палочки, подвижные - капсула (-); - субтерминальное расположение спор - теннисная ракетка. В культурах споры появляются через 24-48 часовне размножаются при рН 3,0-4,0, при концентрации NaCl выше 10%; Образует 8 типов токсинов А, В, С, С, ДЕ. Отличаются по Аг свойствам. Различают 2 варианта возбудителя по гидролизу казеина и продукции Нс наличием протеолитических свойств – все штаммы А, часть Вине протеолитическая группа – входят все штаммы Е и часть В и F; - Д и С – промежуточное положение. Резистентность. А споры - переносят низкие температуры (до С - высушивание – 10-летия; - нагревание – С – 5 часов С – 20-30 минут (особенно тип А, некоторые штаммы остаются жизнеспособными в течение нескольких часов - устойчивы к дезсредствам; - 10% Н убивает через 1 час. Б токсины - не разрушаются протеолитическими ферментами ЖКТ; - устойчивы к рН 3,5-6,8; - разрушаются вне действуют высокие концентрации соли - при С погибают через 3 часа, при С – через несколько минут. - наиболее устойчив тип С. Факторы патогенности. Экзотоксины отличаются по Аг структуре, биологические свойства одинаковые. Токины всех типов продуцируются в виде промежуточных токсических комплексов. По константе седиментации, молекулярной массе и по структуре делятся на 3 группы 1. 12 S – (М-токсин) – состоит из нейротоксина, связанного с молекулой нетоксического белка не обладающего гемагглютинирующими свойствами 27 2. 16 S- (L- токсин) – состоит из М-комплекса, связанного с нетоксическим белковым комплексом, имеющим гемагглютинирующие свойства 3. 19 S – (LL – токсин) – нейротоксин+ нетоксический белок со свойствами гемагглютинина. Каждый тип токсина может продуцировать 1 вариант, или 2 и 3. Нетоксические белки – в составе комплекса стабилизируют нейротоксин; - защищают его от действия протеаз и НС ЖКТ. Нейротоксин - синтезируется в виде единой полипептидной цепи, не обладающей токсичексой активностью. Превращается в активный нейротоксин после разрезания бактериальной протеазой или протеазами ЖКТ. В результате точечного гидролиза образуются е цепи Ни, связанных дисульфидными мостиками. Н – отвечает за прикрепление нейротоксина к рецепторам мембран клетки L - блокирует холинергическую передачу возбуждения в синапсах. Также C. botulinum обладают лейкотоксической, гемолитической, лецитиназной активностью. Лейкотоксин подавляет фагоцитоз без разрушения лейкоцитов. Синтез ботулотоксина контролируется конвертирующими фагами при лизогенизации хромосом. Патогенез и клиника. DL – 1 нг/кг массы тела. Токсикоинфекция: действует токсин, содержащийся в пищевом продукте и токсин, который образуется в пищеварительном тракте при попадании туда возбудителя. Токсин всасывается в ЖКТ, попадает в кровь, действует на ядра продолговатого мозга и ганглиозидные клетки спинного мозга. И.п. – 2 часа – 10 дней (ч. Клиника офтальмоплегический синдром диплопия (двоение вглазах), анизокория (разные по размеру зрачки, птоз (опущение верхнего века, слепота. Парез мускулатуры языка афония, затруднение глотания. Парез мышц шеи, туловища, кишечника. Из кишечника выделяется слизь. Расстройство дыхания, letalis от паралича дыхания и сердца. Летальность 35- 85%. Иммунитет. Постинфекционный, типоспецифический, перекрестный не формируется. Диагностика. - бактериологический метод - биологическая проба на мышах с применением поливалентной и моновалентных антитоксических сывороток типов А, ВСЕ- РПГА с антительным эритроцитарным диагностикумом; - ИФА по обнаружению токсина - способность подавлять фагоцитоз. В присутствии антитоксина лейкотоксические свойства токсина нейтрализуются. Лечение см. ИБП 2.12). - по 10 тыс. МЕ антитоксической лошадиной сыворотки типов АСЕ и 5 тыс. МЕ типа В. до введения сыворотки следует взять кровь, мочу, промывные воды желудка для исследования на ботулотоксин. Профилактическая доза = ½ лечебной (контактным - для стимуляции выработки активного иммунитета вводят анатоксины 28 типов А, В, Си Е. После определения типа токсина вводят гомологичный анатоксин. Профилактика см. ИБП п. 2.10-2.12). - трианатоксин – смесь очищенных ботулинических анатоксинов типов А, В, Е, сорбированных на гидроокиси алюминия (см. ИБП 2.10).; - тетраанатоксин – смесь ботулинических анатоксинов типов А, В, Е и столбнячного анатоксина (см. ИБП 2.11).; - пентаанатоксин – ботулинические анатоксины типов А, В, Е + анатоксины Си- секстаанатоксин – содержит анатоксины С. botulinum типов А, ВЕС и C. novyi + С. tetani (столбняка. Лекция № 3.4. Бактериоиды. Культивирование анаэробов. Механический метод. 1. кипячение питательной среды на водяной бане 10-20 мин. Вытесняется кислород воздуха. Быстро охлаждают среду, чтобы не дать ей насытится воздухом и производят посев 2. для уменьшения диффузии О из воздуха, питательные среды сверху заливают стерильным вазелиновым маслом или парафином на 1-1,5 см. посев материала проводят через масло 3. добавление редуцирующих веществ – цистина, глюкозы, аскорбиновой кислоты. Поглощают кислород 4. добавление кусочков паренхиматозных органов для связывания кислорода ( среда Китта – Тароци с кусочками говяжей печени 5. в жидкие среды добавляют пористые вещества – вата, пемза, которые на своей поверхности адсорбируют пузырьки воздуха. Физический метод. 1. посев по Веньяль – Вейону. Двукратные разведения исследуемой культуры в 0,5% сахарном агаре, охлажденным до 40-45 С, набирают в пастеровскую пипетку. Вытянутый конец трубки запаивают. Через 2-3 суток инкубации в столбике агара появляются колонии м/о; 2. вакуум – анаэростат. Замена атмосферного воздуха газовой смесью 3. эксикатор со свечой. Химический метод. 1.произврдят посев на плотную среду на чашке Петри. На крышку чашку помещают химический поглотитель гипосульфит Na, щелочной пирагаллол; Биологический метод. совместное культивирование строгих анаэробов и аэробов на КА с глюкозой в запарафинированной чашке Петри. Сначала растут анаэробы, после снижения содержания О - анаэробы. В качестве строгих аэробов используют Bacterium prodigiosum (чудесная палочка, Serracia marcensens. Метод Фортнера. Бактероиды. Входят в состав нормальной микрофлоры кишечника. 29 Основной представитель - Bacteroides fragilis - неподвижны - хемоорганотрофы - имеют капсула Факторы патогенности. Нейроминидаза Гиалуронидаза Фибринолизин Эндотоксин супероксид дисмутаза – защита от фагоцитоза. Редко развиваются как моноинфекции, чаще – с анаэробными стрептококками. Основные поражения – абсцессы, часто органы брюшной полости. Забор материала производят аспирацией шприцом. Посев на КА, тиогликолевую среду, содержание СО в атмосфере 10%. Рост стимулируют добавлением в среды гемина и витамина К. Образуют желто-серые колонии. 30 Лекция № 4. Гнойно – воспалительные заболевания, вызываемые грамотрицательными палочками. Внутрибольничные инфекции. Внутрибольничные (нозокомиальные, ятрогенные, госпитальные) инфекции- заболевания, связанны с оказанием медицинской помощи, проявляются как в условиях ЛПУ, таки после выписки из него. Время возникновение заболевания равно минимальному инкубационному периоду болезни – 2-4 дня. Ятрогения (ятрос - врач, генус - происхождение. Я.И.- инфекционные процессы, обусловленные действием или бездействием, словесно или умолчанием медицинских работников Покровский В.И.). Причины нарастания числа ятрогенных инфекций 1. Широкое, нерациональное применение антибиотиков, что привело к распространению штаммов с множественной устойчивостью с АБ. 2. Широкое внедрение методов диагностики с нарушением целостности кожных и слизистых покровов, использование имплантантов (инвазивные манипуляции, расширение спектра и тяжести оперативных вмешательств разрушение естественных экологических барьеров. 3. Использование иммунодепрессантов. 4. Увеличением числа лиц пожилого и старческого возраста. 3. Увеличение циркуляции микроорганизмов в больничных учреждениях, формирование госпитальных штаммов. Свойства возбудителей ВБИ. 1. характеризуются множественной резистентностью к АБ. Применение высокоактивных антибиотиков способствует появлению более устойчивых м/о (порочный круг. 2. сниженной чувствительностью к антисептиками дезинфектантам. 3. высоким полиморфизм популяции. 4. высокой устойчивостью к конкурентному действию аутохтонной микрофлоры. 5. широкими вариабельным набором факторов вирулентности. 6. выраженной способностью к колонизации кожи и слизистых. 7. выраженной инвазивностью. 31 Пути передачи. 1. контактный, аэрозольный - проникновение возбудителя в операционные и перевязочные - носительство патогенного стафилококка медперсоналом - инвазивные лечебные и диагностические манипуляции - нанесение микротравм, особые способы стерилизации современной аппаратуры, нарушение асептики медперсоналом. 2. аутоинфицирование из мест носительства через дефекты кожи и слизистых (нос, носоглотка, кожа, промежность, руки, волосы. 3. эндогенный - занос представителей нормофлоры во внутреннюю среду организма через поврежденную кожу и слизистые. Этиология Широкий спектр возбудителей ВБИ: вирусы, бактерии, грибы, простейшие. Основные возбудители - стафилококки (60% всех ВБИ), респираторные вирусы, пневмококки, грамотрицательные энтеробактерии, псевдомонады, анаэробы, грибы рода Candida. Источники госпитальных инфекций. больные носители ( стаф. инфекция, ВГ В, С, Д, сальмонеллезы, шигеллезы) медработники (чаще бессимптомные носители, особая роль в распространении респираторных инфекций. лица, привлекаемые к уходу за больными (стаф-, стрептококки, энтеро- и капмилобактерии, возбудители вен. заболеваний, ротавирусы, ЦМВ, герпетовирусы, ВГ, пневмоцисты). посетители. Оппортунистические инфекции - вызываются любыми УПБ при нарушении целостности покровов и самое главное - при иммунодефицитном состоянии. Характерно хроническое течение. |