Микробиология. Лекции по частной медицинской микробиологии Майкоп 2012 Документ подписан простой электронной подписью
 Скачать 1.32 Mb.
|
|
НС. ХИШТОВА Лекции по частной медицинской микробиологии Майкоп 2012 Документ подписан простой электронной подписью Информация о владельце: ФИО: Задорожная Людмила Ивановна Должность: Проректор по учебной работе Дата подписания 05.09.2022 Уникальный программный ключ 2 МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РЕСПУБЛИКИ АДЫГЕЯ ГОУ ВПО МАЙКОПСКИЙ ГОСУДАРСТВЕННЫЙ ТЕХНОЛОГИЧЕСКИЙ УНИВЕРСИТЕТ МЕДИЦИНСКИЙ ИНСТИТУТ ЛЕЧЕБНЫЙ ФАКУЛЬТЕТ Хиштова НС. Лекции по частной медицинской микробиологии Майкоп 2012 3 УДК 579 (075. 8) ББК 52. 64 Х 53 Утверждено на совместном заседании учебно- методического совета медицинского института ГОУ ВПО Майкопский государственный технологический университет и Минздравсоцразвития РА протокол № 5 от 14 мая 2012 года) Рецензенты Лысенков С.П., д.м.н., профессор, директор Медицинского института Майкопского государственного технологического университета. Агиров АХ, д.м.н., профессор, руководитель Управления Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека по Республике Адыгея. Хиштова НС. Лекции по частной микробиологии / НС. Хиштова.- Майкоп ИП Магарин О.Г., 2012.- с. Лекции по частной медицинской микробиологии рекомендуется для подготовки к практическим занятиям студентов медицинских вузов. Сборник включает в себя наиболее современные сведения по патогенными условно- патогенным микроорганизмам, их идентификации, а также заболеваниям, которые они вызывают. Состоит из 20 лекций, объединенных в 3 главы, приведены контрольные вопросы для поготовки к итоговым занятиям. Даны современные методы диагностики многих инфекций. Сборник предназначен для студентов медицинских вузов, преподавателей и практикующих специалистов. УДК 579 (075. 8) ББК 52. 64 Хиштова НС, оформление, 2012 4 Содержание Список сокращений 6 Глава I. Кокковые и анаэробные инфекции, ГВЗ 7 1. Стафилококки 7 2. Стрептококки, пневмококки, менингококки 13 2.1. Род Streptococcus 13 2.2. Микробиология менингококковой инфекции. Neisseria men- ingitidis 18 3. Анаэробные инфекции 20 3.1. Микробиология газовой гангрены. Clostridium perfringens 22 3.2. Микробиология столбняка. Clostridium tetani 24 3.3. Микробиология ботулизма. Clostridium botulinum 26 3.4 Бактероиды 28 4. Гнойно-воспалительные заболевания, вызываемые грамотрицательными палочками. Внутрибольничные инфекции 30 4.1. Микробиология эшерихиозов. Esherichia coli 32 4.2. Микробиология клебсиеллезов. Klebsiella pneumonia 33 4.3. Микробиология протейной инфекции. Proteus vulgaris 34 4.5. Микробиология синегнойной инфекции. Pseudomonas aeru- ginosa 35 5. Заболевания, передающиеся половым путем 38 5.1. Микробиология гонореи. Neiseria gonorrhoe 38 5.2. Микробиология сифилиса. Treponema pallidum 42 Контрольные вопросы к итоговому занятию по теме «Кокковые и анаэробные инфекции 46 Глава 2. Кишечные инфекции. 49 6. Диареегенные эшерихии. Дисбактериоз 49 7. Микробиология дизентерии, иерсиниозов 54 7.1. Микробиология дизентерии. Род Shigella 54 7.2. Микробиология иерсиниозов. Род Yersinia 58 8. Род Salmonella. Возбудители брюшного тифа и паратифов 61 9. Пищевые отравления. Сальмонеллезы 64 10. Род Vibrio 68 10.1. Микробиология холеры. Vibrio cholerae 68 10.2. Вибриозы. Прочие патогенные виды Vibrio 75 11. Микроаэрофильные грамотрицательные палочки 76 11.1. Микробиология кампилобактериозов. Род Campylobacter 76 11.2. Микробиология хеликобактериозов. Род Helicobacter 78 Контрольные вопросы к итоговому занятию по теме Кишечные инфекции 79 Глава 3. Факультативно- анаэробные грамположительные палочки, особо опасные инфекции 82 12.1 Микробиология дифтерии. Род Corynebacterium 82 5 12.2 Микробиология коклюша. Род Bordetella. 87 13. Микобактерии 88 13.1. Микробиология туберкулеза. Mycobacterium tuberculosis 88 13.2. Микобактериозы 94 13.3 Микробиология лепры. Mycrobacterium leprae. 95 14. ООИ. Микробиология сибирской язвы. Bacillus anthra- cis 96 15. Особо опасные инфекции 101 15.1. Микробиология бруцеллеза. Род Brucella 101 15.2. Микробиология туляремии. Francisella tularensis 106 16. Микробиология чумы. Yersinia pestis 109 17. Микробиология риккетсиозов 113 Контрольные вопросы к итоговому занятию по теме Факультативно - анаэробные грамположительные палочки, особо опасные инфекции 118 18. Патогенные грибы 121 Литература 126 6 Список сокращений АГ - антиген АТ - антитело Б/В - биовар ГВЗ - гнойно- воспалительные заболевания ГЗТ - гиперчувствительность замедленного типа ГНТ - гиперчувствительность немедленного типа ГЭБ - гематоэнцефалический барьер ИФА - иммуноферментный анлиз КОА - ко- агглютинация ЛПС - липополисахарид Л/У - лимфотичексий узел М/О - микроорганизм МПА - мясопептонный агар МПБ - мясопептонный бульон МПК - минимальная подавляющая концентрация МФА - метод флуоресцирующих антител ОКИ - острая кишечная инфекция ООИ - особо-опасные инфекции ОФР - опсоно – фагоцитарная реакция ПЦР - полимеразная цепная реакция РА - реакция агглютинации РАГА - реакция агрегатгемагглютинации РИФ - реакция иммунофлуоресцирующих антител РЛА - реакция латекс- агглютинации РН - реакция нейтрализации РНаг - рекция нейтрализации антигена РНат - реакция нейтрализации антитела РНГА (РПГА) - реакция непрямой (пассивной) гемагглютинации РНИФ - реакция непрямой иммунофлуоресценции РНК - рибонуклеиновая кислота РСК - реакция связывания комплемента СМЖ - спинномозговая жидкость цАМФ - циклический аденозинмонофосфат ЦИК - циркулирующие иммунные комплексы 7 Глава № 1. Кокковые, анаэробные инфекции, ГВЗ. Лекция № 1. Стафилококки. Семейство - Micrococcaceae род - Staphilococcus - Micrococcus - Stomatococcus Морфология Гр (+) кокки споры, жгутики отсутствуют, в организме образуют капсулу (особенно St. aureus). В мазках - из исследуемого материала – в виде единичных клеток, - из чистой культуры - гроздья винограда (т.к. делятся во взаимно перпендикулярных плоскостях. Факультативные анаэробы (есть строгие- S. anaerobius), хемоорганотрофы, каталаза - положительны, оксидаза - отрицательны, чувствительны к действию лизостафина (ноне лизоцима. Культивирование Хорошо растут на простых питательных средах. на МПБ - равномерное помутнение, со временем образуется осадок. на МПА - круглые, выпуклые, непрозрачные, колонии с ровными краями. Пигмент - золотистый, желтый, белый, оранжевый (водонерастворимый липохромный, образуется только в присутствии кислорода и на средах, содержащих кровь, углеводы, молоко. Элективные среды – желточно - солевой агар, молочно- солевой агар с 5-10 % NaCl. Колонии вырастают через 2 суток, Т оптимум- СТ диапазон- С. Классификация. Стафилококки влючают в себя 31 вид бактерий, подразделяются на 2 группы КПС и КОС. Наибольшее медицинское значение имеют золотистый (S. aureus- КПС), эпидермальный (КОС) и сапрофитический КОС) стафилококки. В последнее время возрастает роль КОС в мед. патологии (S. capitis, S. hominis, S. haemoliticus, S.xylosus, S.warneri и др. У S.saprophiticus отмечен тропизм к слизистым МВП и сосудов. Внутрибольничные инфекции обусловлены метициллинрезистентными S. au- reus (MRSA), имеющими высокую вирулентность и устойчивость ко многим АБ. Полусинтетический антибиотик метициллин устойчив к дествию β- лактамазы. Обнаружено у стафилококков более 50 АГ, многие обладают аллергенными свойствами. АГ подразделяют на родовые, перекрестно-реагирующие (общие с изоантигенами эритроцитов, кожи и почек человека, видовые, типоспецифические (по РА разделяют более 30 серовариантов). АГ являются капсульный ПС, ПГ, белок А, протективный АГ КС, тейхоевые кислоты. Факторы патогенности. Факторы адгезии гидрофобность, капсульные ПС (адгезия к эндопротеазам), тейхоевые кислоты (адгезия на эпителиальных клетках, в т. ч. к слизистым оболочкам носовых ходов, белок А (связывается с 8 фибронектином базальных мембран клеток, соединительной ткани и с циркулирующем в крови фибриногеном - внутрисосудистые повреждения, эндокардит коллагеном. Белок А располагается поверхностно, тесно связан с ПГ, термолабилен, не разрушается трипсином, способен связываться с Fc- фрагментом Ig G, МА, что нарушает функцию системы комплемента и фагоцитов. Обладает АГ, аллергенными свойствами, индуцирует размножение Т- и В-лимфоцитов. КОС (S. epidermidis)- гомогликан- адгезия к синтетическим полимерам, образование на их поверхности биопленок с антифагоцитарными свойствами, S. saprophyticus- поверхностные полипептиды – адгезия к эпителию мочевого тракта. Факторы инвазии - ферменты «агресси»: гиалуронидаза, нейроминидаза, фибринолизин, ДНК-аза, лецитиназа, протеиназа, фосфотаза, лизоцимоподобный фермент. Лецитиназа растворяет лецитин клеточной оболочки, что способствует распространению стафилококка наличие фермента изучают на ЖСА по мутным зонам продуктов расщепления лецитина куриного желтка вокруг колоний. Фибринолизин – расщепляет слой фибрина вокруг микробного очага, что способствует распространению м/о в организме. Гиалуронидаза расщепляет гиалуроновую кислоту, что способствуют прохождению микроорганизма через соединительнотканные барьеры Липазы – облегчают адгезию и проникновение в ткани. Нейроминидаза разрушает нейраминовую кислоту - способствует проникновению внутрь эпителиальных клеток и длительному сохранению на слизистой оболочке передних отделов ВДП. Отмечено длительное внутриклеточное нахождение в непрофессиональных фагоцитах (эпителий протока молочных желёз. почечной ткани. Для S. aureus характерными ферментами являются плазмакоагулаза и ДНК- аза, остальные ферменты непостоянны. Факторы защиты а) микрокапсула (защита от фагоцитоза. б) фермент защиты- плазмакоагулаза. Существует в 2 видах свободно отделяется от клетки и циркулирует в крови адсорбируется на поверхности микробной клетки и переводит фибриноген в фибрин, образуя белковую капсулу - защита от фагоцитоза. ↑ концентрации коагулазы снижает свертываемость крови, нарушает гемодинамику, что ведет к гипоксии. РПК положительна только у St. aureus (видовой признак. в) β- лактомазы (пеницилиназы), разрушают β- лактамазное кольцо пенициллинов и цефалоспоринов, АБ теряет свою активность. Синтез контролируется R- плазмидой. г) АЛА. S. aureus устойчив к действию лизоцима. У S. aureus имеется мощный слой ПГ, но разрушения не происходит, т.к. действует фермент, разрущающий лизоцим. д) каталаза- защита от кислородзависимых механизмов фагоцитоза. 9 Факторы, подавляющие иммунитета) белок А - связывается си комплементом, блокирует их, уменьшает силу гуморального иммунитета. б) ПГ - мощный и поверхностно расположенный слой. Функции сильный АГ - вызывает пирогенную реакцию (меньше, чем эндотоксин враз- антифагоцитарное действие. в) тейхоевые кислоты Фукнции: -АГ -инактивирует комплимент обнаруживается в крови больных с тяжелыми септическими формами стафилококковой инфекции. г) капсульные ПС Функции - индуцируют синтез цитокинов, что ведет к образованию очагов воспаления и абсцессов подавляют активность фагоцитоза. 5. Факторы, повреждающие организм токсины и ферменты. Экзотоксины - белки, свободно выделяется из м/о во внешнюю среду. Характерна органоспецифичность. а) мембраноповреждающие (гемолизины) –ά,γ,β,δ. Разрушают эритроциты, лейкоциты, макрофаги, тромбоциты, мастоциты. Обладают свойствами - гемолитическим (гемолиз эритроцитов- ά- токсин вызывает изменение ионного состава, осмотическое набухание, лизис клетки и выход гемоглобина. Мембрана клетки - мишени не повреждается. - некротическим (в/к - некроз) - летальным (в/в- letalis)- ά- токсин действует на миокард и эндотелий коронарных сосудов, что ведет к отеку легких. - нейротоксическим - кардиотоксическим - лейкоцидин (разрушение лейкоцитов. Из гемотоксина готовят анатоксин, его используют для лечения и профилактики. б) эксфолиативные токсины А (синтез контролируется хромосомами) и В (плазмидами). Продуцируют S. aureus. Вызывает пузырьковое воспаление кожи новорожденных, буллезное импетиго (отслаивание- эксфолиация – эпителия кожи. Механизм- нарушение межклеточных контактов в эпителии в) истинный лейкоцидин - избирательно действует на лейкоциты, отличается от гемолизинов по АГ свойствам. г) экзотоксин, вызывающий синдром токсического шока (СТШ) - Т, ↓ АД, высыпания, лимфоцитопения, диарея, поражение печени, почек. Штаммы S. aureus, вызывающие СТШ, имеют слабую гемолитическую и высокую протеолитическую активность, вырабатывают особый экзотоксин. Различают менструальный использования адсорбирующих тампонов) и не менструальный (раневая, ЛОР - инфекция. Носители S. aureus – 50-60% женщин. Заселением о происходит влет, когда защитные силы 10 организма не сформированы. - способность стафилококка синтезировать этот тип токсина - СТШ проявляется у людей с ↓ иммунитетом и с ↓ содержанием Ig As (враз ниже нормы. - механизм «цитокиновый взрыв - гиперпродукция ИЛ, ИЛ- 2, ФНО фактор некроза опухоли- сильный аллерген. д) энтеротоксины А, В, С, С, СЕ типов Вызывают пищевые интоксикации, чаще всего типы Аи. Не все штаммы S. aureus и S. interme- dius вырабатывают этот токсин, синтез его кодируется плазмидой Е. Ведет к накоплению внутриклеточной цАМФ. Клиника тошнота, рвота, диарея развиваются при малых дозах токсина (от мкг. Энтеротоксины обладают следующими свойствами -термостабильны устойчивы к действию формалина (не превращаются в анатоксин) устойчивы к действию пищевых ферментов (не разрушается в ЖКТ) устойчивы в диапазоне рН 4-10 низкомолекулярные белки -суперантигены (индуцируют избыточный синтез IL-2, который вызывает интоксикацию) накапливаются в продуктах богатых углеводами, в атмосфере повышенного СО. Обнаружение энтеротоксина S. aureus: непрямой бактериологический метод- выделение из подозрительного продукта чистой культуры S. aureus; биологический - в/в введение бульонной культуры выделенного стафилококка или скармливание подозрительного продукта котятам. Наблюдается понос, рвота, letalis. серологический - в реакции преципитации в геле с помощью специфических антитоксических сывороток. Можно определить тип энтеротоксина. - ПЦР. Факторы межмикробного взаимодействия. а) бактериолизины - лизостафин (глицилглициновая эндопептидаза)- разрушает КС других стафилококков. Продуцент- S. simulans. - муромидаза (лизоцим, продуцент S. aureus, действует на гр (+) м/о кожных покровов и слизистых оболочек. б) бактериоцины (бактериоцидное действие на родственные бактерии. -лантибиотики (эпидермин)- повреждают ЦПМ клеток- мишеней. в) феромоны- молекулярные вещества, участвуют в обмене информацмией регуляторного типа (изменение скорости роста, выработка ферментов, токсинов, контроль плотности бактериальной популяции. Иммунитет - антимикробный (против белка А, тейхоевых кислот) - антитоксический (на экзотоксины) - антиферментный (т.к. ферменты обладают АГ свойствами. Пути передачи 11 - аутоинфекции – т.к. являются обитателями кожи и слизистых - экзоинфекции - контактно-бытовой - воздушно- капельный - воздушно- пылевой - алиментарный - вертикальный (вовремя родов) Источник инфекции а) здоровых носители - причина стафилококковых инфекции в медицинских учреждениях. Носители временные и резидентные. Стафилококки персистируют на слизистых зева и носа, причем у медперсонала обычно выделяются стафилококки устойчивые к большинству АБ. б больные. Резистентность. Устойчивы во внешней среде несколько месяцев, не утрачивая патогенности. Устойчивы к ↑ Т 80 С- 30 мин, сухой жар С – 2 часа Чувствительны к дез. средствам 1% р-р хлорамина -2-5 минут. Чувствительность к АБ и SA нужно определять для каждого штамма. Большинство штаммов S. aureus устойчивы к АБ, это связано с R- плазмидой. Высокая устойчивость связана с высокой вирулентностью. Устойчивость к АБ формируется постепенно, когда назначаются дозы АБ, при которых погибают не все штаммы, остаются единичные, нечувствительные к АБ. Происходит селекциям о руками врача. Нужно применять МПК, вызывающую 100% гибель мои постоянно контролировать чувствительность к АБ. Госпитальные штаммы устойчивы к АБ и антисептикам, способны длительно выживать во внешней среде и постоянно циркулируют в стационаре. Заболевания у человека(классификация по Дерябину): 1.Стаф. бактерионосительство 2.Стаф. инфекции кожи 3.ГВЗ мягких тканей 4. Стаф. инфекции внутренних органов 5. Состояния присутствия стафилококков в системном кровотоке - бактериемия первичная - вторичная бактериемия (наличие в/сосудистых ив сердечных очагов стаф. инфекции. - стаф. сепсис и септический шок 6. Синдромы токсического действия - пищевые токсикоинфекции - синдром токсического шока Более 150 нозологических форм заболеваний. Лабораторная диагностика Исследуемый материал зависит от локализации очага (гной, мазки со слизистых, мокрота, кровь. Бактериологический метод. При сепсисе - посев крови больного (мл) с соблюдением правил 12 асептики у постели больного на сахарный МПБ в соотношении 1:10. Надень при наличии роста пересев на КА, далее выделение чистой культуры и т. д. Посев крови инкубируют 10 суток. |