Микробиология. Лекции по частной медицинской микробиологии Майкоп 2012 Документ подписан простой электронной подписью
 Скачать 1.32 Mb.
|
|
ЭИКП – энтероинвазивные. Вхрдят 9 серогрупп. ФП: инвазии, кодируются хромосомными и плазмидными генами. Неподвижные, не ферментируют лактозу. Клиника напоминает шигеллезы: абдоминальные боли, профузный понос с кровью. Частые возбудители О, О- 144; - ЭГКП – энтерогеморрагические. Входят 4 серогруппы. ФП: адгезии (к клетками. Вызывает геморрагический колит, гемолитико – уремический синдром. Частые возбудители О, О. Часто letalis. - ЭАКП – энтероадгезивные (адгерентные). ФП: адгезия (к клеткам р - 2), нет цитотоксинов, нет факторов инвазии, плазмидного фактора адгезии. Эпидемиология. Механизм передачи - фекально- оральный Путь передачи - алиментарный, водный, контакт с животными. В закрытых коллективах – основной путь – контактно- бытовой. Природный резервуар неизвестен. Циркулируют в кишечнике животных (КСР). В слаборазвитых станах – основные возбудители гастроэнтеритов у детей младшего возраста. В развитых станах – причина диареи путешественников, гастроэнтеритов. В основном болеют дети 1 -3 лет, подростки и взрослые. Лабораторная диагностика. Бактериологический метод. 1 день Посев испражнений на дифференциально- диагностическую среду Эндо. Морфология, культуральные, биохимические свойства одинаковые с нормальной E. coli. Отличаются только по Аг структуре. 2 день. Через 24 часас чашки Эндо агглютинируют не менее 10 колоний с поливалентной сывороткой ОКА, содержащей АТ к 23 К-Аг. При # реакции остатки колонии отсевают на скошенный МПА для накопления и сохранения чистой культуры. РА см. стр 93-98 учебного пособия к практическим занятиям по общей микробиологии. 3 день С косяка МПА проводят агглютинацию на стекле с сывороткой ОКА (повторно, при #, с сыворотками ОКА, ОКВ, ОКС, ОКД, ОКЕ, входящими в состав ОКА. Если с одной из них реакция #, то агглютинируют с моновалентными адсорбированными сыворотками или иммуноглобулином, входящими в состав данной группы (содержат О- и К Ат. При # реакции ставят развернутую пробирочную реакцию агглютинации с живой и «гретой» культурой. К-Аг состоит из 3 фракций L – разрушается при С B – при С A – С 1 час Культуру в физ. растворе делят на 2 части. Первую часть кипятят 1 час, 53 чтобы разрушить Ни К-Аг, остается только О-Аг. Вторую часть не обрабатывают – есть все 3 Аг. Готовят кратные разведения агглютинируещей сыворотки в 2 радах пробирок. В первый ряд вносят «гретую» культуру, во второй – живую. Учет через 24 часа. С иммуноглобулинами ставят только реакцию агглютинации на стекле с живой культурой. Ставят пестрый ряд Гисса для изучения б/х свойств, чувствительность к антибиотикам, коли-протейному фагу (КПФ). 4 день. Реакция #, если в 1 ряду пробирок («гретая») есть агглютинация не менее, чем до половины титра, указанного на этикетке с сывороткой. Выдача ответа. 2. ПЦР. Серологический метод не применяется, т.к имеются перекрестные АТ с нормальными эшерихиями. Лечение. 1. КПФ, бактериофаг коли (ИБП п. 2.24-2.26); 2. Интестибактериофаг (ИБП п. 2.23). 3. Антибиотики с учетом резистентности 4. Дегидротационная терапия р-р Регидрона. Дисбактериоз – изменение качественного и количественного состава нормальной микрофлоры кишечника. Причины развития дисбактериоза - перенесенные кишечные инфекции - нерациональная антибиотикотерапия - применение химио- и радиолечения - нарушение нормального питания, в т.ч. диеты - пожилой возраст - соматические заболевания, особенно ЖКТ (панкреатит, гепатит, холецистит, гастрит, колит, ЯБЖ и ДК и др Состав микрофлоры толстого кишечника 1. строгие анаэробы не образующие спор грамположительные (бифидумбактерии) и грамотрицательные (бактероиды). На их долю приходится 96-99% всей микрофлоры 2. факультативные анаэробы – кишечная палочка, энтерококки, лактобактерии. Их доля составляет 1-4%; 3. остаточная микрофлора - стафилококки, протей, дрожжи, клостридии, синегнойная палочка. Составляют 0,01-0,001%; 4. различные представители семейства энтеробактерий - сальмонеллы, шигеллы, роди т.д. 54 Роль микрофлоры толстого кишечника 1. фактор естественной резистентности организма, т.к. проявляет антагонистическую, колонизационную активность к патогенным бактериям. Препятствует их размножению 2. формирует местный иммунитет, стимулирует развитие лимфоидной ткани 3. участвует в процессах пищеварения, обмене холестерина и желчных кислот 4. синтезирует витамины группы В (В, В, В, В, витамин К, никотиновую, пантотеновую, фолиевую кислоты. Принципы лечения дисбактериоза – ИБП стр. Препараты для коррекции кишечной микрофлоры (ИБП п. Лекция № 7. Микробиология дизентерии, иерсиниозов. Лекция № 7.1. Микробиология дизентерии. Род Shigella. Дизентерия – инфекционное заболевание, характеризующееся общей интоксикацией, поносом и язвено – некротическим поражением дистальных отделов толстого кишечника. Род Shigella выделили Кастелани и Чалмерс (1919). Назван в честь Киёси Шига. г – начал изучать Видаль; г - Григорьев А.В. выделил чистую культуру г – Шига изучил возбудитель и получил сыворотку г – Флекснер; г - Зонне; г – Штуцер и Шмитц; г – Лардж; г – Сакс; г – Бойд; г – Новгородская Э.М. Морфология. Короткие, неподвижные, грамотрицательные палочки, не образующие спори капсулу. Хорошо растут на простых питательных средах. Не растут на средах с цитратом и малонатом; Сероводород не образуют Реакция Фогес-Проскауэра (-); 55 Биохимически неактивны. Лактозу не ферментируют. Ферментируют глюкозу с образованием только кислоты (кроме некоторых б/в S. flexneri 6); Желатин не гидролизуют Каталаза (+); Лизин (-); Фенилаланин (ФА) (-); Факультативный анаэроб, температурный оптимум Свыше Сне растут, рН 6,7-7,2. Культуральные свойства. Рост колоний 1. на плотных средах - круглые, выпуклые, прозрачные, в случае диссоциации образуют шероховатые R- формы. На Эндо – Lac-. 2. на жидких средах – диффузный рост (помутнение. Шероховатые культуры дают осадок. S. sonne образуют колонии 2 типов - колонии I фазы - гладкие, выпуклые, вирулентные. Имеется плазмида. - колонии II фазы – шероховатые, плоские, крупные, авирулентные (плазмида утрачена. Классификация. Межвидовое различие определяется 1. б/х свойствами (отношение к манниту и глюкозе 2. АГ структурой. Существует 4 вида шигелл: Группа Ане ферментируют маннит) Группа В - S. flexneri Группа С - S. boydii Группа Д - S. sonne. Группы В-Д расщепляют маннит. S. sonne медленно, на 2-4 сутки ферментирует лактозу. S. disenteria - различают 12 сероваров. Наиболее патогенен серовар 1 (Григорьева – Шига), единственный, который продуцирует мощный экзотоксин серовар 2 – Штуцера-Шмитца; серовар 3 – Лардж – Сакса. S. flexneri – имеет сложное антигенное строение 6 типовых АГ (плюс X и Y) – подразделяются на серовары; 4 групповых АГ в разных составах - S. подразделяются на подсеровары. S. flexneri 6 ферментирует глюкозу с образованием КГ. S. boydii – по типовым АГ различают 18 сероваров. Иногда продуцируют индол. S. sonne – один вид. АГ строение одинаковое, на серовары не подразделяется или 1 серовар). Типирование. 1. По биохимической активности S. sonne подразделяется на 4 биохимических типа по ферментации рамнозы, ксилозы, мальтозы. S. flexneri наиболее биохимически активна. Подразделяется на 3 ферментативных типа по ферментации глюкозы, маннита и дульцита: Бойд 56 88, Манчестер, Ньюкастл. 2. Фаготипирование. 3. Колицинотипирование – определяют чувствительность шигеллы к определенным колицинам. Колициногенотипирование – определяют способность продуцировать определенный тип колицина. Резистентность. Устойчивы во внешней среде На х/б ткани и бумаге сохраняется до 36 дней В высохших испажнениях – 4-5 месяцев В почве – 4 мес Вводе от недель до 3 месяцев На фруктах, овощах – 2 недели В молоке и молочных продуктах – несколько месяцев Погибает при С через 15-20 минут Чувствительны к дезинфектантам. Факторы патогенности. Способны внедрятся в эпителиальные клетки, размножаться, вызывать их гибель. Определяют - в керато-конъюнктивальной пробе на морской свинке - при заражении культуры клеток – цитотоксическое действие - при заражении куриных эмбрионов – гибель - при интраназальном заражение белых мышей – пневмония. 3 группы факторов патогенности I. Взаимодействие с эпителием слизистых оболочек – факторы адгезии и колонизации – пили, ЛПС, белки наружной мембраны, ферменты патогенности – нейроминидаза, гиалуронидаза, муциназа; II. Устойчивость к гуморальными клеточным механизмам защиты, способность шигелл проникать в энтероциты, размножаться в них и макрофагах, оказывать цитотоксический и энтеротоксический эффект. Эти свойства контролируются плазмидой, кодирующей синтез наружной мембраны (инвазия) и хромосомными генами kcp A (кератоконъюнктивит), cyt (разрушение клеток. Защита от фагоцитоза – К-Аг; Аг -3,4; ЛПС. Липид А – иммуносупрессивное действие. III. Способность продуцировать токсины - эндотоксин (ЛПС) оказывает общую интоксикацию - токсин Шига (нейротоксин) оказывает прямое цитотоксическое действие- S. disenteria 1; - 2 типа шигаподных токсина (SLT-I и SLT-2). Повреждают поверхность эпителия с образованием эрозий и умеренного воспаления. - энтеротоксин (LT). Стимулирует активность аденилатциклазы, что ведет к накоплению цАМФ, нарушению водно-солевого обмена и диареи. Контролируется плазмидными генами. S. sonne имеют плазмиду, отвечающую за вирулентность и образование колоний I фазы. Эпидемиология. 57 Антропоноз. В эксперименте – заражение обезьян. Способ заражения – фекально-оральный; Пути передачи – водный, пищевой (молочные продукты, контактно- бытовой. S. disenteria 1 редко всречается с конца 30 гг. XX века. Сейчас имеются гиперэндемические очаги в Китае, Индии, Пакистане, Камбожди. Связывают с приобретением плазмиды вирулентности (Vi) и лекарственной резистентности (R). Для заражения требуется несколько клеток. Имеется сильнейший токсин S. flexneri - 1-10 тыс клеток S. sonne – свыше 10 тыс. клеток. Патогенез. И.п. 1-5 дней, иногда 6 часов. Формирование очага в толстом кишечнике носит циклический характер. Этапы размножения и взаимодействия Адгезия → колонизация → внедрение шигелл в цитоплазму энтероцитов их поражение и разрушение. Происходит отторжение клеток → выход возбудителя в просвет кишечника. Цикл повторяется. Его интенсивность зависит от концентрации возбудителя в пристеночном слое слизистой. Очаг воспаления увеличивается, образуются эрозии, которые соединяются. В испражнениях появляются кровь, слизисто-гнойные комочки, полиморфно- ядерные лейкоциты. Клиника. Начало острое, повышение Т, мышечные боли, общее недомогание, частый жидкий стул до 20-50 разв сутки - ректальный плевок, тенезмы – болезненные позывы приказного характера к дефекации. Большого кровотечения не бывает. Иммунитет. Постинфекционный, напряженный, прочный, длительный, обусловлен АТ, Т-лимфоцитами (киллерами, макрофагами. Большая роль местного иммунитета (IgA). Выраженный типоспецифический характер, перекрестного иммунитета не наступает. Лабораторная диагностика. Бактериологический метод посев на среды Эндо, Плоскирева, Левина. Отбор лактозонегативных колоний. Изучений биохимических свойств, Аг структуры в РА на стекле (иммуноиндикация), чувствительности к дизентерийному бактериофагу. Золотой стандарт. 2. Серологический метод. Определение титра антител в сыворотке крови. РПГА с эритроцитарными антигенными диагностикумами Флекснер 1-5; Флекснер 6; Зонне. Из-за короткого и.п. реакция отрицательна у больных вострой фазе болезни. Эффективна для обнаружения бактерионосителей и обследовании контактных лиц. 3. Аллергическая проба с дизентерином (вакцина Цуверкалова). В основе – ГЗТ. Положительная проба – отеки гиперемия d мм через 24 ч. в настоящее время не применяется. 4. ПЦР. Ответ через 6-8 часов. 58 Лечение. - этиотропная терапия АБ, СА; - бактериофаг дизентерийный поливалентный (ИБП п. 3.1-3.2), интестибактериофаг (ИБП п. 2.23). - симптоматическое восстановление водно-электролитного баланса. - патогенетическое. Профилактика Специфическая профилактика не разработана. Неспецифическая – соблюдения санитарно-эпидемиологического режима. Лекция № 5.2. Микробиология иерсиниозов. Род Yersinia. Иерсиниозы - группа заболеваний, возбудители которых относятся к семейству энтеробактерий, к роду Yersinia. Наука занялась кишечными иерсиниозами в 80гг. Выделяют 11 видов иерсиний, патогенные для человека 3 вида. - Y. pestis – возбудитель чумы Возбудители кишечных инфекций - Y. enterocolitica - Y. pseudotuberculosis Общая характеристика. I. морфология. 1. грам (-) палочки, мелкие, 2. неравномерно окрашиваются - биполярная окраска при окрашивании метиленовым синим 3. факультативные анаэробы, нетребовательны к питательным средам 4. споры (-); 5. образуют капсульное вещество (тонкое, окраска по Р-Г; 6. Т оптимум- С, , ниже чем Т человека диапазон от +2 до С, рН 6,6- 7,8. При низкой Т инкубации Си переносе в С наблюдается бурное размножение бактерий 7. слабоподвижны – 3-5 перитрихиальных жгутика II. сапрофитизация – способность длительное время выживать и размножаться во внешней среде при низких Т. Резервуар – вода и почва. 59 Имеются тепловые и холодовые ферменты. III. заражение через посредника (животные - грызуны, собаки, кошки, домашние сельскохозяйственные животные (свиньи рыба, ракообразные, птицы и членистоногие. IV. рост на среде Эндо – мелкие lac- колонии, используют среду Серова, фосфатно-буферный раствор. V. прототрофы: получают N и C за счет атмосферного аммиака и летучих соединений углерода (почвенный м/о), N - из неорганических соединений. Антигенная сруктура. Y. enterocolitica имеет О-соматический и Н-жгутиковый АГ. Дифференцируют по О-Аг, чаще встречаются серовары ООО, О. Y. pseudotuberculosis - имеют О- и Н- Аг. По О-Аг различают 10 сероваров, наибольшее значение II, III, IV. Факторы передачи. - овощи и фрукты, закладываемые для длительного хранения (капуста, корнеплоды, цитрусы, молочные и мясные продукты, обсемененные грызунами. Квашеная капуста и сок - максимальное размножение, индукция вирулентных штаммов. В капусте на 10 дней максимальный рост возбудителя, в капустном соке – к 20 дню- 1 млрд мкб. тел в1мл. - в молочных продуктах при С, 30 мин – не уничтожаются. Наибольшее значение – грызуны (обсемененная вода, почва. Больной человек является биологическим тупиком, возможно заражение человека человеком. Резистентность. вода С – 46 суток С – 225 дней - кипяченое молоко – 200 дней - мясо – 145 дней - кипяченая вода – 3 года - стерильная почва при С – более 10 лет - рассеянный солнечный цвет – 30 минут. Заболевания - спорадические - вспышки (в коллективах сорганизованным питанием. Сезонность январь- май (зимне-весенняя). Неблагополучным временем является и осень. Клинические формы. Патогенны для человека, животных, птиц – от бессимптомных форм до тяжелых с letalis. Y. pseudotuberculosis – полиформная клиника, различают формы - абдоминальная - желтушная - ангинозная - гриппоподобная - аппендикулярная (брыжеечный аденит) - скарлатиноподобная 60 - генерализованная Названы псевдотуберкулезом (pstbc) по сходству с туберкулезными (tbc) бугорками, гранулемами, обнаруженными во внутренних органах илу погибших. В г вспышка дальневосточной скарлатиноподобной лихорадки (Владивосток. Были изучены клиника, выделен возбудитель, нарастание титра АТ в 4 и более раза и этиотропное лечение в опыте самозаражения Знаменского- per os 300 и 500 млн. мкб. Y. enterocolitica. Клинические формы – ОКИ; - гастроэнтерит - аппендицит - мезентериит; - мезаденит; - энтероколит - реактивные артиты. Но обязательно поражается кишечник, т.к. имеется тропизм к слизистой кишечника. Вторичное поражение органов гепатит, панкреатит, сепсис, менингит, аллерго - септическое состояние. Факторы патогенности. - адгезии – ворсинки, пили, белки наружной мембраны - инвазии – белки наружной мембраны (к лимфоидным образованиям - макрофагам, что ведет к нарушению их функции - незавершенный фагоцитоз - эндотоксин - экзотоксин - Y. enterocolitica – термостабильный энтеротоксин Y. pseudotuberculosis - термолабильный. Определяют диарею. - аллергизирующее действие. Патогенез. 1. Заражение через рот, проникают в слизистую ротоглотки, затем в региональные л/у (шейный лимфоденит, фарингит, в желудок и тонкий кишечник. Происходит размножение в мезентериальных л/у, поступают в кровь лимфогенным путем (выделить возбудитель из гемокультуры трудно. Образуются вторичные патологические процессы в печени, легких, селезенке, иногда сепсис 2. Под действием бактерицидного действия крови высвобождается эндотоксин лихорадка, поражение ЦНС, вегетативные расстройства, токсическое поражение печени, почек, сердца, сосудов, органов кроветворения 3. энтеротоксигенность имеет небольшое значение 4. инвазивность - цитотоксичность; - незавершенный фагоцитоз (чем выше вирулентность, тем не эффективнее фагоцитоз 5. аллергические свойства крапивница, отек Квинке, артрит, узловатая эритема, синдром Рейдера (конъюнктивит, артрит, уреит); 61 6. выделят возбудитель из мочи, желчи, слизи из носоглотки, мокроты, брыжеечных л/у, аппендикулярного отростка. Иммунитет. Гуморальный и клеточный. Развивается медленно, большое количество рецидивов, обострений, волнообразное течение. АТ у некоторых больных не появляются (повторные заболевания. Диагностика. 1. Биологический метод – заражение морских свинок кровью больных людей 2. Бактериологический – подращивание в фосфатно- буферном р-ре при С, высев на среду Эндо, изучение биохимических свойств, подвижности ( при С +, при С -). Окончательный ответ через 21 день Неэффективен. Серологический РА, РПГА, диагностический титр 1: 200. Максимальный уровень АТ к концу 2 недели, сохраняется 8-12 дней, снижается через 6-8 мес. 4. Иммунологический ИФА РНАт 5. ПЦР - выделение ДНК из сыворотки крови, слюны, мочи, копрофильтратов, внутренних органов грызунов. Лекция № 8. Род Salmonella. Возбудители брюшного тифа и паратифов. S. typhi – палочка Эберта – Гаффки; S. paratyphi A – палочка Бриона – Кайзера S. paratyphi B – палочка Шотмюллера; S. paratyphi C – палочка Хиршфельдта. Признаки рода. Ферментируютглюкозу с образованием кислоты и газа (КГ, S. typhi- только до кислоты (+); Желатина (-); Индол (-); S. typhi и S. paratyphi A цитрат (-) (т.к. являются ауксотрофами и не утилизируют цитрат как единственный источник углерода, у остальных S. (+); Н S (+), кроме S. paratyphi A; S. typhi делят на 4 группы по ферментации ксилозы и арабинозы эпидемиологический маркер. |