Культуральные свойства. Аэробы, капнофилы. Требовательны к питательным средам, на простых питательных средах не растут, растут на сложных питательных средах (сывороточно-декстрозный и кровяной агар). Характеризуются медленным ростом на питательных средах, посевы инкубируют не менее 3 нед. В жидких средах вызывают равномерное помутнение с небольшим осадком, но без пленки на поверхности. На плотных средах формируют очень мелкие круглые выпуклые гладкие прозрачные голубовато-серые колонии. Гемолиза не дают, пигмента не образуют. Температурный оптимум роста 37 "С, оптимум рН 6,6—7,4. Под действием антибиотиков превращаются в L-формы. Хорошо культивируются в желточном мешке куриного эмбриона. Биохимическая активность очень низкая: бруцеллы содержат каталазу и оксидазу, нитраты редуцируют в нитриты, цитраты не утилизируют, реакция Фогеса—Проскауэра отрицательная, продуцируют сероводород, разлагают мочевину.
Факторы патогенности. Бруцеллы являются факультативными кпутриклеточными паразитами млекопитающих, включая человека. Обладают высокой инвазивной способностью, образуют фермент агрессии гиалуронидазу. Основными факторами вирулентности являются эндотоксин и капсула.
Лабораторная диагностика. Для диагностики используют методы: бактериологический, серологический, биологический, аллергологический. Серодиагностику и аллергические пробы проводят в базовых лабораториях, чистую культуру бруцелл выделяют и идентифицируют в специальных лабораториях с соблюдением правил техники безопасности. Материалом для исследования служат кровь, пунктат красного костного мозга, моча, молоко и молочные продукты, кусочки органов. Посев крови для выделения гемокультуры проводят в первые дни болезни при наличии лихорадки, при отрицательных результатах исследование многократно повторяют (бактериемия может наблюдаться в течение года и более). Учитывая медленный рост бруцелл, посевы выдерживают в термостате до 1 мес. Пунктат костного мозга засевают на те же среды; миелокультуру при бруцеллезе удается получить в 1,5—2 раза чаще, чем гемокультуру. Миелокультуры могут быть получены в остром, подостром и даже хроническом периоде заболевания. Мочу для выделения уринокультуры предварительно центрифугируют и из осадка делают посевы. Уринокультуры выделяют как при остром бруцеллезе, так и в период реконвалесценции. Биологический метод исследования используется для выделения бруцелл из материалов, контаминированных посторонней микрофлорой или содержащих небольшое количество возбудителей. Для биопробы используют белых мышей и морских свинок. Животных заражают кровью внутрибрюшинно, осадком мочи и молока — подкожно. Через 20—30 дней у зараженного животного берут кровь и ставят с ней реакцию агглютинации. Затем животных забивают, вскрывают и делают посевы крови из сердца, взвеси внутренних органов и лимфатических узлов. Выделенные чистые культуры бруцелл дифференцируют по способности роста при отсутствии повышенной концентрации углекислого газа, по выделению сероводорода, чувствительности к бруцеллезному фагу и бактериостатическому действию анилиновых красителей (фуксина и тионина). В сыворотке больных бруцеллезом накапливаются агглютинирующие (вначале IgM, затем IgG); неполные блокирующие (IgA, IgG) антитела. Для их выявления с диагностической целью используют реакцию Райта (развернутая агглютинация) и Хеддельсона (пластинчатая агглютинация), РПГА, ИФА, реакцию Кумбса. Реакция агглютинации — один из основных диагностических методов при бруцеллезе у людей и сельскохозяйственных животных. Агглютинины, как правило, появляются в крови в ранние сроки после заражения, поэтому наибольшую диагностическую ценность реакция агглютинации представляет при остром бруцеллезе. При остром бруцеллезе высокий титр антител определяется также в РПГА и ИФА. Реакция Кумбса рекомендуется в качестве диагностического метода при хронических и латентных формах бруцеллеза. В условиях массового обследования на бруцеллез применяют пластинчатую реакцию агглютинации Хеддельсона в сочетании с кожно-аллергической пробой Бюрне. Аллергологический метод применяют для выявления ГЗТ к бруцеллам, наблюдающееся у больных бруцеллезом, инфицированных бруцеллами лиц и привитых живой бруцеллезной вакциной. Ее ставят с 15—20-го дня болезни. Аллергическая реакция бывает положительной в течение многих лет после перенесенного заболевания и у привитых. Серологические реакции и кожноаллергическая проба по своему диагностическому значению неравноценны, вследствие чего не могут заменить друг друга. Это обусловливает необходимость применения комплексного сероаллергического метода, являющегося наиболее надежным способом диагностики бруцеллеза.
Кейс35
Мужчина был осмотрен венерологом. Жалобы боли в уретре, гнойные выделения. 2 дня назад был вступил в половой контакт с малознакомой женщиной.
ГОНОРЕЯ
Таксономия
|
Neisseriacea
Neisseria
Neisseria gonnorrhoeae
|
Морфология
|
Неподвижные грамотрицательные диплококки, образуют капсулу, характерен полиморфизм – в мазках встречают мелкие или крупные клетки, а также палочковидные формы. Образуют L формы, под действием пенициллина, неподвижны; спор не образует, в организме образует нежную капсулу, есть пили.
Хорошо окрашивается анилиновыми красителями.
|
Дакылдандыру
|
Гонококк – аэроб, требователен к питательным средам.
Используют-Сывороточный, асцитный, кровяной и шоколадный агар.
Неустоучивы во внешней середе, поэтому посев следует проводить сразу после збора материала от больного. Хорошо растут на свежеприготовленных питательных средах с добавлением нативных белков крови, сыворотки или асцитической жидкости. Оптимальная температура 37С. требует в атмосфере СО2 высокой концентрации (5-10%). На плотных средах гонококки, содержащие в клеточной стенке белок 2 образуют слегка мутные безцветные колонии с ровными краями. Гнококки лишенные белка 2 образуют мелкие круглые прозрачные колонии, напоминающие капли росы.
В жидких пит.средах растут диффузно и образуют поверхностную пленку, через несколько дней оседающую на дно.
|
Пат фак
|
Плазмиды – латентная плазмида. при потере плазмиды несущей ген В-лактамазы гонококки теряют устойчивость к пенициллину.
Способность к трансформации.
Капсула обладает иммуногенным и антифагоцитарными свойствами, препятствует прямому контакту бактерицидных веществ с клеточной стенкой.
Пили обеспечивают адгезию к клеткам эпителия.
ЛПС проявляют сильные иммуногенные свойства.
Токсин – термолабильный эндотоксин – проявляет сильные иммуногенные свойства
Белки клеточной стенки – Белок 1 – обеспечивает устойчивость к бактерицидным факторам слиз. оболочек, обеспечивает способность вызывать системные инфекции.
Белок 2 – являются первичными факторами верулентности гонококков, обеспечивают прикрепление к эпителию.
IgA – протеазы – облегчает прикрепление гоноккоков к рецепторам эпительальных клеток, а также защищают их от фагоцитоза..
|
Диагностика
|
Исследуемым материаломслужит гнойное отделяемое из половых путей – мазки.
Бактериоскопический метод – основан на наличии трех признаков – характера морфологии, внутриклеточного расположения бактерий и окраски по Граму. Также применяют методы прямой иммунофлюоресценции и реакцию непрямой иммунофлюоресценции.
Бактериологический метод – высеивают на свежеприготовленные среды – асцит – агар, среду с аутолизатами и сывороткой, кровяной агар. Характерная особенность – аутолиз колоний от центра к перриферии.
|
Кейс36
В Кызылординской области 14 летнего мальчика укусила блоха , после дней повысилась температура, увеличились шейные лимфоузлы. В биоптате определяется овальной формы, окрашены биполярно.
ЧУМА
|
Таксономия
|
Семейство:Enterobacteriaceae
Род:Yersinia
Вид:Y.pestis
|
Морфология
|
Грамотрицательная палочка овоидной формы. Для чумной палочки характерны морфологически обособленное ядро (наиболее хорошо видимое у инволюционных гигантских клеток) и отсутствие подвижности. Палочки склонны к полиморфизму, образуя нитевидные, колбовидные или шарообразные инволюционные формы (например, на средах с повышенным содержанием NaCI, в старых культурах и тканях разложившихся трупов).
|
Культивирование
|
Нетребовательны к питательным средам. На бульоне через 48 ч образуют нежную плёнку на поверхности со спускающимися вниз нитями и хлопьевидный осадок (среда остаётся прозрачной).
Также хорошо растут в желатине, не вызывая её разжижения.
Па плотных средах возбудитель чумы при 37 С образуют сероватые слизистые (за счёт капсулообразования) S- или R-колонии. Вирулентные штаммы чумы образуют R-колонии.
Температурный оптимум чумы 28-30 "С
|
Патогенный фактор
|
Чумная палочка содержит О-антиген (эндотоксин), токсичный для животных и человека.
Фракция 1 (F1-антиген чумы) представлена поверхностным пликопротеиновым антигеном (капсульным антигеном). Она предохраняет бактерии от поглощения фагоцитами и, не оказывая токсического действия, проявляет иммуногенные свойства.
Активатор плазминогена чумы — протеаза, активирующая лизис фибриновых сгустков, препятствующих диссеминированию возбудителя.
V/W (Vi)-антиген чумы состоит из белка (V-фракции) и липопротеина (W-фракции). Он проявляет антифагоцитарные свойства и способствует внутриклеточному размножению бактерий.
Мышиный токсин чумы — антагонист адренергических рецепторов, представлен белковоподобным веществом, локализованным внутриклеточно (также токсичен для крыс), вызывает шок и смерть лабораторных животных.
Бактериоциногения. Возбудитель чумы выделяет бактериоцины (пестинины), обладающие иммуногенными свойствами.
|
Диагностика
|
Исследуемым материалом служитотделяемое бубонов, содержимое язв, мокрота, слизь из зева, кровь, фекалии и ликвор.
Бактериоскопический метод-исследуют готовые мазки из изолированных колоний.
Бактериологическое исследование материал засевают на твердые пит.среды, при необходимости на жидкую среду накопления.
Серологические методы Антитела в крови больных выявляют посредством РНГА, ИФА, РНАТ.РА, РП, РИФ.
Биологическая проба – морских свинок заражают накожно, подкожно или внутрибрюшинно.
Чумной бактериофаг – ускоренная диагностика, используют для идентификации чумы – о положительном результате свидетельствует образование негативных колоний бактериофага.
Аллергическая проба – кожная пробв с пестином (белковый аллерген из культур возбудителя).
|
.
Кейс37
В Феврале месяце, 4 летнего мальчика госпитализировали со следующими симптомами :температура, головная боль, тошнота,рвота, ригидность затылочных мышц, на ногах имеются мелкие звездчатые высыпания. Из ликвора выделили грамотрицательные диплококи: Менингит
Таксономиясы
|
Семейство: Neisseriaceae
Род:Neisseria
Вид:N.meningitidis
|
Морфология
|
Менингококки имеют округлую форму диаметром 0,6-1,0 мкм, располагаются попарно. Поверхности, обращенные друг к другу, вогнутые или ровные.
Менингококки по Граму окрашиваются в красный цвет (грамотрицательные). В мазках часто наблюдается неравномерное окрашивание: молодые клетки окрашиваются интенсивно, а старые клетки воспринимают краситель очень слабо.
Менингококки не имеют жгутиков, спор не образуют. Они способны образовывать пили и капсулу
|
Культивирование
|
Менингококки являются строгими аэробами и капнофилами. Они очень требовательны к условиям культивирования и хорошо растут в присутствии 5-7% углекислого газа. На простых питательных средах менингококки не растут, для их культивирования используют среды, содержащие кровь, сыворотку крови, яичный желток, аминокислоты, витамины. Оптимальное значение рН среды составляет 7,2-7,4. Оптимальная температура выращивания 37°С.
На плотной питательной среде менингококки образуют полупрозрачные нежные колонии с ровными краями и блестящей поверхностью (S-форма) диаметром 0,5-1,5 мм.
На кровяном агаре формируются полупрозрачные сероватые колонии маслянистой консистенции без зоны гемолиза.
В столбике 0,1% полужидкого сывороточного агара менингококк вызывает интенсивное помутнение в верхней части столбика. В сывороточном бульоне менингококки вызывают гомогенное помутнение ближе к поверхности среды.
|
Патоген факторы
|
К факторам патогенности менингококков относятся пили, поверхностные белки, капсула, эндотоксин, гиалуронидаза, нейраминидаза, протеаза. Менингококки не продуцируют экзотоксинов.
Пили обеспечивают адгезию возбудителя к слизистой оболочке носоглотки
Поверхностные белки - белки мутности Ора и Орс также участвуют в адгезии. Белок Орс называют инвазином, так как он является основным фактором проникновения менингококков в клетки организма
Капсула полисахаридной природы защищает менингококки от фагоцитоза.
Эндотоксин (липоолигосахарид) оказывает выраженное пирогенное и сенсибилизирующее действие, участвует в развитии сосудистых поражений и кровоизлияний во внутренние органы. Результатом этого действия является экзантема в виде характерной геморрагической сыпи.
Гиалуронидаза и нейраминидаза способствуют распространению возбудителя по организму.
Протеаза (IgA-протеаза) расщепляет иммуноглобулин А в шарнирной области, защищая бактерии от действия антител
|
Диагностикасы
|
Исследуемым материалом отбирают носоглоточную слизь (от больных и носителей), ликвор, кровь, гной с мозговых оболочек, соскоб из элементов геморрагической сыпи на коже
Бактериоскопический метод- носоглоточная слизь микроскопически не исследуется, так как в ней присутствуют условно-патогенные нейссерии, морфологически сходные с менингококками
Бактериологическое исследование проводят с целью выделения и идентификации чистой культуры менингококка. По-возможности посев материала производят у постели больного. Бактериологическому исследованию подвергают носоглоточную слизь, кровь и ликвор. Посев материала для получения чистой культуры производят на плотные или полужидкие питательные среды, содержащие сыворотку крови, кровь или асцитическую жидкость
Серологические методы используют для обнаружения в исследуемых материалах бактериальных антигенов или антител в сыворотке крови. Для обнаружения антигенов применяют реакцию латекс-агглютинации, встречный иммуноэлектрофорез (ВИЭФ), реакцию непрямой гемагглютинации (РНГА) и другие методы.
Наиболее простым является метод латекс-агглютинации, позволяющий в течение 15 минут установить наличие или отсутствие в СМЖ специфических антигенов.
ВИЭФ является экспресс-методом, так как позволяет с помощью специфических антисывороток выявлять полисахаридный антиген возбудителя в СМЖ и в сыворотке крови больного.
РНГА является дополнительным методом лабораторного подтверждения генерализованной менингококковой инфекции и позволяет выявлять специфические антитела
|
Кейс38
Больной 26 лет, поступил в терапевтическое отделение городской больницы, жалобы: температура тела 39С, отдышка, боли в груди. Мокрота больного направлялась в бактериологическую лабораторию. При микроскопическом исследовании были обнаружены диплококки с грамположительной ланцетовидной капсулой.
Пневмония стрептококк
|
Таксономия
|
Семейство:streptococcaceae
Ррд:streptococcus
Виды:st.pyogenes,pneumoniae,faecalis,agalactiae
|
Морфология
|
Грамположительные кокки, овальные или ланцетовидные кокки, распологаются парами,окружены толстой капсулой ,неподвижны,спор не образуют.
|
Дақылдандыру
|
Анаэроб. Растет в средах,обогащенных углеводной,кровью,сывороткой, асцитовой жидкостью.Колонии мелкого серого цвета в плотных питательных средах. Образуют Осадок в жидкой среде.
Стрептококки - факультативные анаэробы. На агаре крови дают альфагемолиз (зеленоватость) и бетта-гемолиз (полнота), гамма-гемолиз (невооруженным глазом)., в кровяной и сывороточной среде, обогащенной 0, 1% глюкозой.
Равномерно загрязняет жидкую среду и оседает, как снег. На плотной среде прозрачный, край плоский 1 мм. Колония не совмещаются. в кровяном агаре Альфа-гемолиз и окруженный зеленью. Каталазаотрицательный.
Для выделения ставят пробу с оптохином, подавляют рост.
|
Патогенный фактор
|
Вирулентный фактор-капсула
)микрокапсула
2) компонент клеточного стенки
3) фермент агрессии О,S стрептолизин,гиалуронидаза,ДНК-аза,НАД-аза,стрептокиназа
4)токсины-эритрогенин,м белок
Фимбрилярный белок и М белок
|
Диагностика
|
Материалы- Мокрота, бронхиальный смыв, абсцесс легких, плевральная жидкость.
Используют биопробу для получения чистой культуры: заражение голубым мясом белой мыши.
1) экспресс методы - ИФА, КОАФ, ПЦР
2) бактериологический материал:кровь(эндокардит,сепсис) с кремовым налетом(принт,скарлатина) с выделением раны,гноя,выделения из влагалища.
3) серологические
+ бактериоскопия и биологическая
|
|
Скачать 0.69 Mb.