Рабочая тетрадь микробиология, 2 часть. Методическое пособие Рабочая тетрадь по микробиологии

• Название: Методическое пособие Рабочая тетрадь по микробиологии
• Анкор: Рабочая тетрадь микробиология, 2 часть.doc
• Дата: 12.12.2017
• Размер: 1.61 Mb.
• Имя файла: Рабочая тетрадь микробиология, 2 часть.doc
• Тип: Методическое пособие; #11142
• страница: 4 из 6

Тема: ГНОЙНОСЕПТИЧЕСКИЕИНФЕКЦИИ. ВОЗБУДИТЕЛИАНАЭРОБ­НЫХИНФЕКЦИЙ. ПРОФИЛАКТИКАГСИ.
Цель: Изучить особенности возбудителей анаэробных инфекций и вызываемых ими заболеваний. Ознакомиться с принципами профилактики ГСИ.
Основные вопросы, разбираемые на занятии:

1. 
   Биологические свойства клостридий.
   

2. 
   Газовая гангрена: этиология, патогенез, особенности клиники и эпидемиологии; лабораторная диагностика, принципы лечения и профилактики.
   
3. 
   Столбняк: этиология, патогенез, особенности клиники и эпидемиологии; лабораторная диагностика, принципы лечения и профилактики.
   
4. 
   Принципы профилактики ГСИ.
   

При подготовке к занятию повторить тему "Методы культивирования анаэробов".
ГАЗОВАЯ ГАНГРЕНА
1. Этиология: Cl.perfringens, Cl.novii, Cl.septicum, Cl.hystoliticum, Cl.oedematiens и др.
2. Морфологические свойства.

Cl.perfringens Окраска по Граму. Увеличение х

3. Культуральные свойства.

Рост Cl.perfringens на:

среде Вильсона-Блер	среде Цейсслера

4. Факторы вирулентности Cl.perfringens:

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________
5. Источник инфекции - _____________________________________________
6. Механизм передачи - ______________________________________________
7. Факторы, способствующие развитию заболевания: ____________________________________________________________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________
8. Механизм действия экзотоксина Cl.perfringens - ____________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________
9. Основные клинические проявления: ______________________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________
10. Препараты для специфической терапии:



Противогангренозная сыворотка - ____________________________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________
11. Препараты для специфической профилактики:



Гангренозные анатоксины - содержат - _______________________________;

получены ___________________________________________________________

____________________________________________________________________

входят в состав комплескного препарата – секстанатоксин.

СТОЛБНЯК
1. Этиология: Cl.tetani

2. Морфологические свойства.

Cl.tetani Окраска по Граму. Увеличение х

3. Факторы вирулентности Cl.tetani:

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________
4. Источник инфекции - _____________________________________________
5. Механизм передачи - ______________________________________________
6. Факторы, способствующие развитию заболевания: ____________________________________________________________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________
7. Механизм действия экзотоксина Cl.perfringens - ____________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________
8. Основные клинические проявления: ______________________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________
9. Препараты для специфической терапии:



Противостолбнячная сыворотка - _____________________________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________
10. Препараты для специфической профилактики:



Заблаговременная профилактика:

Столбнячный анатоксин - содержит - _________________________________;

получен ____________________________________________________________

____________________________________________________________________

входит в состав комплескных препаратов - секстанатоксин, АДС, АКДС, TABte.
Экстренная профилактика:

а) столбнячный анатоксин;

б) противостолбнячная сыворотка.
Объясните, почему для экстренной профилактики столбняка одновременно приме­няют анатоксин и антитоксическую сыворотку?

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________
ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА АНАЭРОБНЫХ ИНФЕКЦИЙ
1.Бактериоскопический метод
Исследуемый материал: ______________________________________________
Метод окраски препарата: ______________________________________________

Увеличение х

2.Бактериологический метод
Исследуемый материал: ________________________________________________
1 этап.

Обогащение.

Посев исследуемого материала на ________________________________________
2 этап.

Выделение чистой культуры.

Высев со среды _______________________ на среду _________________________
Инкубация посевов в _______________________________________________
3 этап.

Изученние культуральных, морфологических свойств.

Учет кульуральных свойств на среде _________________________________

Микроскопия мазка по _____________________________________________
Откол колонии на _________________________________________________

4 этап.

Изучение свойств, необходимых для идентификации культуры (биохимические свойства, токсигенность).
5 этап.

Идентификация выделенной культуры.
ПРОФИЛАКТИКА ГНОЙНОСЕПТИЧЕСКИХ ИНФЕКЦИЙ.
1. Контроль качества дезинфекции.

Исследуемый материал: смывы со стен, мебели, посуды, инструментов и т.д.

Этап исследования	Исследование на:
	БГКП	стафилококки
1 день. Взятие смыва с объекта (смыв с поверхности объек­та площадью 100 см2 берут с помощью ватного тампона, увлажненного питатель­ной средой) После этого тампон погружают в среду.	Среда Кесслер (МПБ + лактоза + желчь + генцианвиолет)	Солевой бульон
2 день. Высев на плотную пита­тельную среду	Среда Эндо	ЖСА
3 день Учет роста на плотной пи­тательной среде, микроскопия мазков и откол колоний для дальнейшей идентифи­кации
4 день Окончательная идентифи­кация выделенной культуры

Вывод: ______________________________________________________________ ____________________________________________________________________
2. Контроль стерильности инструмента и перевязочного материала.

Посев исследуемого материала на питательные среды для выделения аэробных и облигатно анаэробных микроорганизмов.

Результат	бикс № 1	бикс № 2	бикс № 3
Среда
Среда

Вывод: ______________________________________________________________ ____________________________________________________________________


3. Выявление бактерионосителей S.aureus.
Исследуемый материал - мазки из носовых ходов.
1 день.

Посев исследуемого материала на ____________________________________
2 день.

Учет результатов. Откол колоний на МПА для выделения чистой культуры.
3-4 дни.

Постановка и учет тестов для идентификации выделенной кульуры.
Результат: ________________________________________________________ ____________________________________________________________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________
Заключение: ________________________________________________________ ____________________________________________________________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________


Занятие № 6 Дата______________
Тема: ВОЗДУШНО-КАПЕЛЬНЫЕИНФЕКЦИИ. МЕНИНГОКОККОВАЯИН­ФЕКЦИЯ, ПНЕВМОКОККОВАЯИНФЕКЦИЯ, СКАРЛАТИНА, КОКЛЮШ, ДИФТЕРИЯ, ТУБЕРКУЛЕЗ.
Цель: Ознакомиться с понятием воздушно-капельные инфекции. Изучить биологи­ческие свойства возбудителей менингококковой и пневмококковой инфекций, скарлатины, коклюша, дифтерии и туберкулеза.
Основные вопросы, разбираемые на занятии:

1. 
   Этиология воздушно-капельных инфекций.
   
2. 
   Пневмококки. Биологические свойства, роль в патологии человека.
   
3. 
   Скарлатина. Биологические свойства возбудителя. Особенности патогенеза, клиники, лабораторной диагностики.
   
4. 
   Менингококки. Биологические свойства, роль в патологии человека. Особенности пато­генеза, клиники, лабораторной диагностики вызываемых ими заболеваний.
   
5. 
   Коклюш. Биологические свойства возбудителя. Особенности патогенеза, клиники, ла­бораторной диагностики.
   
6. 
   Биологические свойства возбудителя дифтерии.
   
7. 
   Дифтерия и ее лабораторная диагностика.
   
8. 
   Биологические свойства возбудителя туберкулеза.
   
9. 
   Туберкулез и его лабораторная диагностика.
   

СРАВНИТЕЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ВОЗБУДИТЕЛЕЙ НЕКОТОРЫХ БАКТЕРИАЛЬНЫХ ВОЗДУШНО-КАПЕЛЬНЫХ ИНФЕКЦИЙ.

	Пневмококовая инфекция	Менингококовая инфекция	Скарлатина
Возбудитель
Морфологические св-ва
Метод окраски
Кислотоустойчивость
Питательные среды
Восприимчивость: боле­ют чаще дети; болеют дети и взрослые
Токсигенность
Устойчивость во внеш­ней среде
Препараты для специ­фической профилактики

ПНЕВМОКОККОВАЯ ИНФЕКЦИЯ
1. Этиология: ____________________________________________________
2. Морфологические и тинкториальные свойства возбудителя: _________ __________________________________________________________________

____________________________________________________________________
3. Культуральные свойства возбудителя: ____________________________

__________________________________________________________________

____________________________________________________________________
4. Роль в патологии человека: ______________________________________

__________________________________________________________________

____________________________________________________________________
ДИАГНОСТИКА ПНЕВМОКОККОВОЙ ПНЕВМОНИИ
Исследуемый материал: Мокрота
1. Бактериоскопический метод

Пневмококк в мокроте Окраска по Граму Увеличение х

2. Бактериологический метод
1 этап.

Посев на кровяной агар с диском мономицина
2 этап.

Учет культуральных свой­ств, подсчет и откол подозрительных колоний.

Рост пневмококков на кровяном агаре

3 этап.

Идентификация выделен­ной культуры по чувстви­тельности к желчи, оптохину и антигенным свойствам
3. Биологический метод
Внутрибрюшинное с заражение мышей с последующим выделением чистой культуры возбудителя и ее идентификацией

Пневмококк в органах мыши Окраска по Граму

Трактовка результатов исследования:

Пневмококки являются условно патогенными микроорганизмами и широко распро­странены среди здоровых людей. Поэтому одного факта обнаружения пневмококков в мокроте недостаточно для окончательного этиологического диагноза. Диагноз ставит врач-клиницист с учетом выделения пневмококков из других видов исследуемого материа­ла (кровь, плевральный экссудат), количества пневмококков в мокроте (не менее 10⁶ кл./мл), наличия или отсутствия сопутствующей микрофлоры, многократных находок пневмококков при повторных исследованиях и т.д.
МЕНИНГОКОКОККОВАЯ ИНФЕКЦИЯ.
1. Этиология: ____________________________________________________

2. Источник инфекции - _____________________________________________

3. Механизм передачи - ______________________________________________

4. Клинические формы менингококковой инфекции:

1. 
   бактерионосительство;
   
2. 
   назофарингит;
   
3. 
   менингит;
   
4. 
   сепсис (менингококцемия).
   

ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА МЕНИНГОКОККОВОГО МЕНИНГИТА
Исследуемый материал - __________
1. Бактериоскопический метод

Менингококк в ликворе. Окраска по Граму Увеличение х

2. Бактериологический метод
1 этап.

Посев на сывороточный агар с мальтозой, кровяной агар. Инкубация посевов в атмосфере СО₂
2 этап.

Выделение чистой культуры и ее идентификация:
1. по биохимическим свойствам

	Окс	Глю	Лак	Мал	Сах
N.meningitidis
N.gonorrhoeae

2. по антигенным свойствам

РА с сыворотками против 4 основных (А, В, С, D) и несколь­ких дополнительных (Е, F, G) серогрупп.
ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА МЕНИНГОКОККОВОГО БАКТЕРИОНОСИТЕЛЬСТВА.
Исследуемый материал и особые меры предосторожности при обращении с ним: ______________________________________________________________

__________________________________________________________________

____________________________________________________________________
Принцип метода:

Посев исследуемого материала на сывороточный агар с мальтозой и ристомицином, с по­следующим выделением чистой культуры и ее идентификацией.

СРАВНИТЕЛЬНАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ВОЗБУДИТЕЛЕЙ НЕКОТОРЫХ БАКТЕРИАЛЬНЫХ ВОЗДУШНО-КАПЕЛЬНЫХ ИНФЕКЦИЙ.

	Коклюш	Дифтерия	Туберкулез
Возбудитель
Морфологические св-ва
Метод окраски
Кислотоустойчивость
Питательные среды
Восприимчивость: боле­ют чаще дети; болеют дети и взрослые
Токсигенность
Устойчивость во внеш­ней среде
Препараты для специ­фической профилактики

КОКЛЮШ И ПАРАКОКЛЮШ.
1. Этиология: ____________________________________________________

2. Источник инфекции - _____________________________________________

3. Механизм передачи - ______________________________________________

ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА КОКЛЮША.
а) Бактериологический метод.
Исследуемый материал - мазок; метод кашлевых пластинок
1 этап

Посев на среду Борде-Жангу (крахмал + глицерин + кровь + агар-агар) или казеиново-угольный агар - КУА (гидролизат казеина + активированный уголь + агар-агар) с пени­циллином.
2 этап

Инкубация посевов при 35-36 °С в течение 5 дней с ежедневным просмотром посевов с по­мощью лупы.
3 этап

Ориентировочная идентификация с помощью реакции агглютинации и микроскопии маз­ка по Граму. Откол подозрительных колоний на среду КУА или Борде-Жангу.
4 этап

Окончательная идентификация путем серотипирования, а при необходимости, дополни­тельно, по биохимическим свойствам.
б) Серодиагностика
РСК, РНГА.
Специфическая профилактика коклюша - ______________________________, входит в состав _____________________________________________________
ДИФТЕРИЯ

1. Этиология: ____________________________________________________

2. Источник инфекции - ____________________________________________

3. Механизм передачи - _____________________________________________

4. Клинические формы дифтерийной инфекции: _____________________

_________________________________________________________________

_________________________________________________________________

___________________________________________________________________
5. Главный фактор вирулентности возбудителя дифтерии - ___________

_________________________________________________________________
6. Механизм действия дифтерйного экзотоксина - __________________

_________________________________________________________________
7. Основные клинические проявления и возможные осложнения:

_________________________________________________________________

_________________________________________________________________

___________________________________________________________________
ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА ДИФТЕРИИ.
а) Бактериологический метод.
Исследуемый материал - __________
1 день.

Посев исследуемого материала на среду Клауберга (МПА + гемолизированная кровь + теллурит калия + глицерин)

2 день.

а) Просмотр посевов.

Рост возбудителя дифтерии на среде Клауберга.

C.diphtheriae. Окраска по Нейссеру	C.diphtheriae. Окраска по Граму

б) Микроскопия мазков из подозрительных колоний.
в) Откол подозрительных колоний на: скошенный сывороточный агар - для выделения и сохранения чистой культуры; среду Пизу - для определения цистиназы;
г) Посев для определения токсигенности.
3 день.

а) Учет токсигенности.

Принцип метода:__________________________________________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________

Результат: токсигенны культуры №____________ нетоксигенны культуры № ____________

б) Определение цистиназы.

Состав среды Пизу: МПА + цистин + индикатор на сероводород.

цистиназоположительная культура

цистиназоотрицательная культура

При выделении цистиназоположительной токсигенной культуры выдается окончательный ответ, в противном случае проводится идентификация культуры с сывороточного агара по биохимическим свойствам.
СПЕЦИФИЧЕСКОЕ ЛЕЧЕНИЕ ДИФТЕРИИ.
Антитоксическая противодифтерийная сыворотка. Содержит _______________,

получена путем ______________________________________________________
СПЕЦИФИЧЕСКАЯ ЗАБЛАГОВРЕМЕННАЯ ПРОФИЛАКТИКА ДИФТЕРИИ
Дифтерийный анатоксин. Содержит _____________________________________,

получен путем ______________________________________________________,

входит в состав комплексных препаратов ________________________________,

применяется для создания ____________________________________________

Эффективнось прививки можно проверить путем постановки внутрикожной имму­нологической пробы Шика или РИГА.
ТУБЕРКУЛЕЗ.

1. Этиология: _____________________________________________________

2. Источник инфекции - _____________________________________________

3. Механизм и пути передачи - _______________________________________

____________________________________________________________________
4. Основные клинические формы: ____________________________________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________
ЛАБОРАТОРНАЯ ДИАГНОСТИКА ТУБЕРКУЛЕЗА
а) Диагностика открытых форм туберкулеза.

Исследуемый материал - __________________________________________________

1. 
   Бактериологический метод.
   

1 способ (продолжительность исследования 1,5-2 месяца)
1) Посев мокроты (гомогенизированной и обработанной 2% серной кислотой) на среду Левенштейна-Иенсена.

Состав среды Левеншейна-Иенсена: МПА + желток + глицерин + бриллиантовый зеленый.

2) Инкубация 2-4 недели при 37°С

3) Учет результатов: культуральные св-ва; тинкториальные и морфологические свойства

4) Определение чувствительности к антибиотикам методом серийных разведений на среде Левенштейна-Иенсена

	Концентрация препарата, мкг/мл
	1	10	100
Стрептомицин
ПАСК

МПК_{стрептомицина}

МПК_паск
2 способ (продолжительность исследования 7-8 дней)
1) Посев мокроты (гомогенизированной и обработанной 2% серной кислотой) по Прайсу (лизированная кровь с глицерином)

2) Микроскопия препарата, окрашенного по Цилю-Нильсену

2. Биологический метод

Подкожное заражение мор­ских свинок с последующим макро- и микроскопическим исследованием органов по­гибших животных.

Продолжительность исследования 1 -3 месяца
3. Бактериоскопический метод.
а) Концентрация возбудителя путем флотации.

б) Приготовление, окраска и микроскопия мазков.

Мазок мокроты в иммерсионном микро­скопе окраска по Цилю-Нильсену	Мазок мокроты в люминесцентном микроско­пе, окраска аурамином

Вывод: (укажите, почему применение люминесцентного микроскопа позволяет по­высить чувствительность бактериоскопического исследования) ___________

____________________________________________________________________

____________________________________________________________________
б) Диагностика закрытых форм туберкулеза.
1. Серодиагностика.

Серодиагностика туберкулеза в РНГА.

Название метода _________________________________________________

Исследуемый материал ____________________________________________

Диагностический препарат _________________________________________
Результат реакции:

Больные	Разведения сывороток
	1/4	1/8	1/16	1/32	1/64	1/128	Кд
А
Б

Диагностический титр 1/8
2. Аллергодиагностика.

Название реакции _________________________________________________

Диагностический препарат ___________________________________________

Положительный результат ____________________________________________
Кроме диагностики туберкулеза проба ________________________________

используется для ____________________________________________________

Специфическая заблаговременная профилактика:

____________________________________________________________________

________________________________________________________________________________________________________________________________________

____________________________________________________________________

Занятие № 7 Дата______________