Объект изучения микробиологии
 Скачать 6.2 Mb.
|
|
Культуральные свойства. Вacillus anthracis хорошо растёт на обычных питательных средах. В жидких средах растёт в виде ватных хлопьев, не вызывая помутнения среды. При посеве уколом в желатину даёт характерный рост в виде «перевёрнутой ёлочки». На твёрдых средах сибирская язва образует шероховатые, неровные, серовато-белые, волокнистые R-колонии диаметром 2-3 мм. При малом увеличении колонии напоминают «голову Медузы» или «львиную гриву». В аэробных условияхпалочка сибирской язвы образует центрально расположенные споры. Споры отличает высокая устойчивость к внешним воздействиям Биохимические свойства. Сибирская язва образует кислоту без газа на средах с глюкозой, фруктозой, мальтозой и декстрином. Гидролизует крахмал; образует ацетоин и лецитиназу. Антигенная структура. Выделяют три группы основных антигена ( Аг ) bacillus anthracis, две из них (капсульные Аг и токсин) кодируются плазмидами. Отсутствие одной или обеих групп делает бактерии авирулентными. Токсин состоит из трёх термолабильных компонентов и включает протективный Аг; летальный фактор и отёчный фактор. По отдельности компоненты не способны проявлять токсическое действие. Патогенность: рямо зависит от капсуло- и токсинообразования; штаммы, непроявляющие подобные свойства, обычно авирулентны. Капсула защищает возбудителя сибирской язвы от действия вне- и внутриклеточных продуктов фагоцитов и препятствует поглощению бактерий. Токсин возбудителя сибирской язвы опосредует проявление признаков и симптомов сибирской язвы. Аккумуляция токсина сибирской язвы в тканях и его воздействие на ЦНС приводят к летальному исходу на фоне лёгочной недостаточности и гипоксии. Клинические проявления. Продолжительность инкубационного периода сибирской язвы составляет 2-6 сут. Клинические проявления сибирской язвы зависят от пути заражения. Выделяют кожную, лёгочную и желудочно-кишечную формы сибирской язвы. Микробиологическая диагностика. Для микробиологической диагностики сибирской язвы берут содержимое пустулы, гнойное отделяемое из карбункула, кровь, мочу, мокроту, испражнения и рвотные массы. При патологоанатомическом исследовании забирают кусочки органов или целые органы. Выделение возбудителя. Проводят окраску материала по Граму и посев на обычные питательные среды. Затем определяют подвижность микроорганизмов из выросших колоний, изучают их биохимические и культуральные свойства. Серологические исследования проводят для распознавания больных и реконвалесцентов. Возбудитель можно выявлять AT, меченными флюоресцеинами (особенно в смешанных культурах), диффузией в геле, в РСК, РИГА и ИФА. Кожные пробы применяют для ретроспективной диагностики при эпидемиологических исследованиях. Проводят внутрикожное введение 0,1 мл бактериального аллергена (антраксина). Реакция термопреципитации по Асколи позволяет идентифицировать возбудителей сибирской язвы при отрицательных результатах бактериологических исследований. Фаготипирование. Для дифференциальной диагностики предложены высокоспецифические литические сибиреязвенные бактериофаги «ВА-9» и «Саратов». Биологическая проба. Заражение лабораторных животных проводят одномоментно с посевом на питательные среды. Материал можно вводить белым мышам, кроликам и морским свинкам. У павших животных исследуют печень, селезёнку, лимфатические узлы, почки, кровь из полостей сердца и места введения заразного материала. Затем проводят посев исследуемого материала на питательные среды. Лечение. Основа антибактериальной терапии сибирской язвы — пенициллин (при непереносимости — тетрациклин); внутривенные вливания больших доз антибиотиков дают хороший терапевтический эффект. Профилактика. Иммунопрофилактика. Для профилактики зоонозов животных иммунизируют живой вакциной СТИ, приготовленной из некапсулированного штамма В. anthracis, или протективным Аг, преципитированным гидроокисью алюминия. Ветеринарно-санитарные меры профилактики сибирской язвы. • Изоляция больных и подозрительных животных • Сжигание трупов погибших животных, заражённых объектов (подстилка, навоз) и обеззараживание мест стоянок больных животных и водопоев. Санитарный надзор.. Важен санитарный надзор за предприятиями, занятыми переработкой животного сырья. Всё поступающее сырьё проверяют в реакции термопреципитации по Асколи. 89) Возбудитель столбняка. Таксономия. Свойства. Патогенез вызываемых поражений. Микробиологическая диагностика. Профилактика и лечение. Столбняк — тяжелое заболевание, опосредованное нейротоксическим действием бактериального экзотоксина. Источник инфекции — почва. Заражение человека — следствие бытовых и производственных травм. Грам+палочки с закругленными концами. Подвижны. В мазках располагаются одиночно или цепочками. Образуют споры, круглой формы, расположенные терминально,поэтому напоминают «теннисные ракетки». Культуральные свойства. Clostridium tetani — строгий анаэроб, отличается высокой чувствительностью к кислороду. На МПА и желатине возбудитель столбняка растёт медленно и образует тонкие прозрачные колонии двух типов: гладкие, прозрачные S-колонии и серовато-жёлтые, шероховатые R-колонии. S-колонии столбняка образуют отростки, придающие им паукообразную форму. Позднее отростки сливаются, образуя «сеточку» на поверхности среды. При посеве столбиком в полужидкий агар через 24-48 ч S-колонии столбняка имеют вид пушинок с плотным коричневым центром; R-колонии столбняка имеют вид чечевичек. Антигенная структура столбняка У С. tetani выявляют О- и Н-Аг. Все серовары столбняка продуцируют идентичные по своим антигенным свойствам тетаноспазмин и тетанолизин. Биохимические свойства. Большинство штаммов инертно к углеводам. С. tetani проявляет слабые протеолитические свойства и медленно расщепляет белки и пептоны до аминокислот. Бактерии столбняка образуют желатиназу и рениноподобный фермент, опосредующий появление затемнённых зон вокруг колоний С. tetani на молочном агаре. Патогенез поражений. Основные факторы патогенности — тетаноспазмин и тетанолизин. Тетаноспазмин — полипептид с дистантным механизмом действия, так как бактерии редко покидают пределы первичного очага инфицирования. Токсин фиксируется на поверхности отростков нервных клеток, проникает в них (за счёт лигандопосредованного эндоцитоза) и посредством ретроградного аксонного транспорта попадает в ЦНС. • Механизм действия тетаноспазмина связан с подавлением высвобождения тормозных нейромедиаторов в синапсах. • Первоначально тетаноспазмин действует на периферические нервы, вызывая местные тетанические сокращения мышц. Тетанолизин (тетаногемолизин) проявляет гемолитическое, кардиотоксическое и летальное действие. В патогенезе заболевания играет менее важную роль. Клинические проявления столбняка. Ведущие проявления — судорожный синдром, включающий болезненные сокращения мышц (тетанус) и длительное напряжение мышц. К характерным признакам столбняка относят опистотонус — тетанический спазм, когда позвоночник и конечности согнуты, больной лежит на спине и опирается на затылок и пятки. Микробиологическая диагностика. Бактерии столбняка обычно обнаруживают в месте проникновения в организм больного. В некоторых случаях исследуют слизистое отделяемое из носа, бронхов, глотки, налёт с миндалин, а также выделения из влагалища и матки (при послеродовом столбняке или аборте). При бактериологическом исследовании трупов для анализа забирают кровь и кусочки печени и селезёнки. Выделение возбудителя.Исследованию подлежит материал от больного или трупа, перевязочный и шовный хирургический материал, а также почва, пыль и воздух. Биологическая проба. вместе с проведением бактериологического анализа проводят обнаружение столбнячного анатоксина в биологической пробе на мышах. Для этого материал измельчают, добавляют двойной объём физиологического раствора, инкубируют в течение часа при комнатной температуре, фильтруют; часть фильтрата смешивают с противостолбнячной сывороткой из расчёта 0,5 мл сыворотки на 1 мл экстракта и инкубируют в течение 40 мин. Затем одной группе животных - вводят экстракт без предварительной инкубации с сывороткой, а другой группе — проинкубированную смесь; при наличии С. tetani у животных первой группы развиваются симптомы столбняка. Лечение столбняка. Для специфической терапии столбняка используют иммуноглобулин противостолбнячный человека либо противостолбнячную лошадиную очищенную сыворотку,перед введением проводят десенсибилизацию (внутримышечно или внутривенно). Введение начинают при появлении первых симптомов и продолжают до исчезновения судорог. Одновременно проводят антибиотикотерапию (пенициллин, цефласпорин). Профилактика. Иммунопрофилактика: Проводят плановые и экстренные мероприятия. Плановая иммунизация. Начинают с 3-5-месячного возраста столбнячным анатоксином, чаще всего в комбинации с другими микробными Аг — в составе АКДС-вакцины (содержит столбнячный и дифтерийный анатоксины и коклюшные палочки). Экстренная иммунизация . Проводят при травмах, ранениях. В зависимости от предшествующей вакцинации проводится либо пассивная иммунизация (однократное введение 3000 ME антитоксической сыворотки) либо активно-пассивная иммунизация (вводят столбнячный анатоксин и через 30 мин в другое место вводят 3000 ME антисыворотки или 950 ME иммуноглобулина). 90)Возбудители газовой анаэробной инфекции.Таксономия. Свойства. Патогенез вызываемых поражений. Микробиологическая диагностика. Профилактика и лечение. Газовая гангрена — раневая инфекция, характеризующаяся крепитацией окружающих тканей из-за пузырьков газа, некрозом тканей в результате уменьшения или полного отсутствия кровоснабжения и общими септическими проявлениями. Род Clostridium. Вид C. perfringens, C. novyi, C. Septicum. C.histolyticum, C. Sordellii, C. Fallax, C. Bifermentans. Морфология: Грам+палочки, крупные. Неподвижные. In vivo образуют капсулы. Бактерии возбудителя газовой гангрены хорошо окрашиваются анилиновыми красителями. Споры крупные, овальные, расположены центрально (у С. perfringens типа А — также субтерминально). Спорообразование обычно происходит в почве и кишечнике организма-хозяина. Свойства. По способности образовывать четыре главных токсина (а-, р-, e- и i-) микроорганизмы Clostridium perfringens разделяют на шесть сероваров — А, В, С, D, Е и F. Основной возбудитель заболеваний человека — бактерии типа А. Эпидемиология. бактерии выделяют из воды, почвы и сточных вод. Также они колонизируют кишечник животных и человека (выделяют у 25-35% здоровых лиц). У человека возбудитель газовой гангрены вызывает два типа поражений — газовую гангрену и пищевые токсикоинфекции. Культуральные свойства. На плотных средах бактерии возбудителя газовой гангрены образуют S- и R-колонии. На агаре Цейсслера через 12-18 ч образуют гладкие сероватые колонии с ровными краями и плотным возвышением в центре. Колонии окружены зоной гемолиза. На желточном агаре бактерии возбудителя газовой гангрены образуют колонии, окружённые зоной перламутрового преципитата (фосфорилхолин). На средах, содержащих глюкозу, рост происходит очень бурно с образованием Н, и СО. Первые признаки роста на среде Китта-Тароцци могут проявляться уже через 1—2 ч и проявляются помутнением и появлением пузырьков газа из-под кусочков печени при встряхивании. Антигенная структура. Выделяют 6 сероваров (A-F) clostridium perfringens, различающихся по антигенным свойствам продуцируемых экзотоксинов. Биохимические свойства. Бактерии возбудителя газовой гангрены ферментируют углеводы с образованием кислоты и газа. От прочих клостридий clostridium perfringens отличает способность восстанавливать нитраты, расщеплять лактозу, образовывать лецитиназу. Протеолитическая активность слабая. Интенсивно створаживают молоко с образованием крупноячеистого губчатого сгустка, напоминающего пену на волнах. Это феномен известен как «штормовая реакция». Патогенность. Clostridium perfringens типов А, С и D вызывают газовую гангрену, некротический энтерит и пищевые токсикоинфекции у человека и животных. Бактерии типов В, С, D и Е вызывают аналогичные заболевания только у животных. Токсины. Clostridium perfringens образуют как минимум 12 идентифицированных токсинов (ферментов) и энтеротоксин. Клинические проявления. Развивается при попадании С. perfringens на раневые поверхности, где бактерии активно размножаются в условиях пониженного содержания кислорода. Микроорганизмы, а чаще их споры могут быть занесены в рану из внешней среды, а также с кожи или из ЖКТ пациента. Для поражений характерны некроз тканей и образование газа с гнилостным запахом. Диагностика газовой гангрены. Материалом для исследований служат биоптаты поражённых тканей (включая участки, примыкающие к очагам некроза, и отёчную жидкость), перевязочный и шовный материал, одежда, образцы почвы; при пищевых токсикоинфекциях — испражнения и продукты. Основу диагностических мероприятий составляют выделение и идентификация возбудителей и их токсинов. Микроскопия материала позволяет обнаружить крупные грамположительные палочки. Выделение и идентификация возбудителей. Для выделения используют жидкие и плотные среды. Идентификацию микроорганизма осуществляют набором стандартных тестов (подвижность, серологические реакции и др.).
Токсинообразование. Для обнаружения токсинов проводят заражение белых мышей вытяжкой из исследуемого материала, фильтратами бульонных культур или кровью больных. Идентификацию токсинов проводят в РН со специфическими антитоксическими антисыворотками. Профилактика анаэробной инфекции (газовой гангрены) заключается в своевременной и полноценной первичной хирургической обработке ран. При этом должны неукоснительно соблюдаться принципы первичной хирургической обработки: полное удаление всех инородных тел, размозженных и нежизнеспособных тканей, рассечение или дренирование глубоких карманов. Лечение анаэробной инфекции оперативное: рассечение и иссечение пораженных тканей, часто ампутация. Во время операции и в послеоперационном периоде проводят интенсивную инфузионную терапию с введением больших доз антибиотиков, чаще из группы пенициллина( + канамицин и сульфаниламиды). 91. Возбудитель ботулизма- тяжелая, часто фатально заканчивающаяся пищевая токсикоинфекция. Таксономия: отдел firmicutes, род Clostridium, вид C.botulinum. Морфология: подвижная грам+ палочка с закругленными концами, имеются перитрихи, хорошо окрашивается анилиновыми красителями, капсулу не образует, при неблагоприятных условиях образует эндоспоры, располагающиеся терминально или субтерминально. В мазках одиночно или в виде коротких цепочек располагаются. Культуральные свойства: строгий анаэроб. На кровяномагаре с глюкозой палочки образуют очень мелкие колонии сероватые или желтоватые, окруженные с зонами гемолиза. На печеночномагаре образуют звездчатые колонии, на желатине-сероватые с зоной гемолиза. Хорошо растут на жидких средах(Китта-Тароцци), вызывая помутнение среды и газообразование, иногда запах прогорклого масла, но этот признак не постоянен. Антигенные свойства:H-,O-антигены. Выделяют 7 сероваров:A,B,C,D,E,F,G. Наиболее распространены A,B,E. Биохимические свойства: выделяют 4 группы по активности: I группа: проявляют протеолитические свойства, гидролизуют желатину, ферментируют мальтозу и лактозу, проявляют липазную активность на яичном агаре. II группа: проявляют сахаролитическую активность но лишены протеолитической. III группа: липазная активность и гидролизуют желатину. IVгруппа: гидролизуют желатину, не проявляя сахаролитической активности. Факторы патогенности: главный фактор патогенности- экзотоксин. Смертельная доза 0,3мкг.Оказывает нейротоксическое, гемагглютинирующее действие. Резистентность: высокая устойчивость к высоким температурам, кислой реакции, повышенной концетрации поваренной соли, замораживанию, пищевым ферментам. Эпидемиология: распространена инфекция повсеместно, но больше всего в странах с умеренным и теплым климатом. Источник инфекции-почва и животные. Путь заражения- алиментарный. Патогенез:попадает в пищевой тракт, всасывается токсин через стенку кишечника в кровь, происходит длительная токсинемия. Токсин связывается с нервными клетками и блокирует передачу импульсов через нервно-мышечные синапсы. В результате развивается паралич гортани, глотки, дыхательных мышц, нарушение дыхания, зрения, как следствие. Иммунитет не формируется. Диагностика:материал для исследования-промывные воды желудка, кровь, испражения, рвотные массы, остатки пищи. Биологическая проба на мышах. Заражают 5 мышей. Проводят реакцию нейтрализации, выживает только то животное, которое получило антитоксическую сыворотку. Идентификация- РПГА с антительнымдиагностикумом. Испражнения засевают на питательные среды- кровяной агар при температуре 25-35 градусов. Среда для накопления-Китта-Тароцци. Идентификация- среды Гисса. Серологических реакций не проводят. Лечение: соответствующая антитоксическая сыворотка. Для установления типа-поливалентная лошадиная сыворотка. Вводят ежедневно до появления клинического эффекта. После выявления типа вводят сыворотку против данного типа. |