Объект изучения микробиологии
 Скачать 6.2 Mb.
|
|
2.Лабораторная диагностика. Материал: выделяют из носоглоточных смывов, крови, мочи, кала, в культуре клеток. Экспресс- диагностика заключается в обнаружении под световым микроскопом гигантских многоядерных клеток- симластов с внутриядерными включениями в мазках- опечатках из высыпаний, окрашенных по Романовскому- Гимзе, а также специфического антигена в РИФ с моноклональными антителами. Выделяют вирус в культуре клеток, идентифицируют с помощью РН (при положельном результате культура клеток выживает) и РИФ. Для серодиагнстики используют РН, ИФА, РСК (при положительном результате образуются иммунные комплексы) 3.Специфическое лечение и профилактика. Первоочередной задачей профилактики является защита беременных от внутриутробного инфицирования плода. Наиболее эффективный метод профилактики приобретенной и врожденной краснухи — применение живых вакцин из аттенуированных штаммов. Вероятность заболевания во время беременности высока в группах риска — у медицинских работников, педагогов, работников детских дошкольных учреждений. В национальный календарь профилактических прививок включена вакцинация против краснухи детей в возрасте 12-15 мес, ревакцинация детей в 6 лет и иммунизация девочек в 13 лет. Иммунитет у привитых сохраняется в течение 20 лет. Лечение симптоматическое. № 105. Вирус простого герпеса Семейство – Herpesviridae Морфология. Вирус овальной формы. Покрыты оболочкой с гликопротеиновыми шипами.Вирион содержит ДНК. Двунитевая ДНК состоит из двух фрагментов-короткого и длинного.Капсид икосаэдрической формы. Между капсидом и оболочкой содержатся вирусные белки. Резистентность. Вирус чувствителен к УФ-лучам, жирорастворителям, детергентам.Длительно сохраняется при низких t. Культивирование. При культивировании на курином эмбрионе на оболочке образуются мелкие плотные бляшки. В культуре клеток ВПГ вызывает цитопатический эффект-появление гигантских многоядерных клеток с внутриядерными включениями. Эпидемиология. Источник инфекции-больной и носитель. Вирусы передаются контактным путем (ВПГ-1)(с везикулярной жидкостью, при поцелуях – со солюной) половых контактах(ВПГ-2) ,через предметы обихода, при рождении ребенка. Возможна реактивация вируса при снижении иммунитета. Патогенез. Входные ворота-кожа и слизистые оболочки.Чаще вирус вызывает бессимптомную инфекцию.Различают первичный и рецидивирующий ПГ. При первичной инфекции появ-ся везикулы с дегенерацией эпителиальных клеток. Пораженные ядра клеток содержат тельца Каудри.Верхушка везикулы вскрывается,образуется язвочка, кот. покрывается корочкой, наступает заживление. После этого инфекция переходит в латентную форму. Реактивация вызывается различными факторами, снижающими иммунитет (переохлаждение,лихорадка, травма) Клиническая картина. Болезнь начинается с появления на пораженных участках зуда,отека и пузырьков,заполненных жидкостью. После подсыхания пузырьков и отторжения корочек рубцы не образуются. ВПГ поражает кожу,слизист.обол. рта , глотки(стоматит), печень, глаз(кератит), ЦНС(энцефалит). Иммунитет. В основном клеточный. Организм человека реагирует на гликопротеины вируса, продуцируя цитотоксические Т-лимфоциты. Микробиологическая диагностика. Материал для исследования:содержимое везикул,слюна, соскобы с роовой оболочки глаз,кровь,СМЖ. В мазках окрашенных по Романовскому-Гимзе,наблюдают гигантские многоядерные клетки,клетки с увеличенной цитоплазмой. Для идентификации вируса исп-ют ПЦР.Вирус выделяют заражая культуры клеток.Цитопатический эффект виден через 1 сутку. Заражают также куриные эмбрионы.Вирус идентифицируют в РИФ и ИФА. Серологич. диагностику проводят с помощью ИФА,РН по нарастанию титра с парными сыворотками. Лечение. Используют противовирусные химиотерапевтич. препараты (ацикловир, фамцикловир,видаробин, теброфеновую и флореналевую мазь),препараты ИФН Профилактика. Специф. проф. осуществляется многократным введением инактивированной культуральной герпетической вакцины из штаммов ВПГ-1 и ВПГ-2. №106. Возбудитель клещевого энцефалита. Таксономия. Сем. Flaviviride, род Flavivirus/ Морфология. Сложноорганизованый вирус сферической формы. Геном состоит из однонитевой плюс — РНК, окруженный капсидом с кубическимтипом симметрии. Культивирование. Вирусы культивируют во многих первичных перевиваемых культурах клеток, а так же путем заражения куриных эмбрионов на ХАО и в желточный мешок. Универсльной моделью вируса является интрацеребральное заражение новорождённых белых мышей, вызывающие у них развитие паралича. Устойчивость. Небольшая устойчивость вируса к действию физических и химических факторов, в организме переносчиков он сохраняет жизнеспособность в широком диапазоне температур от 150 до 30, что способствует его широкому распространению. Вирус проявляет высокую резистентность к действию кислых значений рН, что важно при алиментарном пути заражении. Эпидемиология. Клещевой энцефалит вызывает нейротропный вирус клещевого энцефалита, основными переносчиками и резервуаром которого являются иксодовые клещи (Ixodes persulcatus и Ixodes ricinus). Во всех природных очагах вирус циркулирует между клещами и дикими животными (главным образом грызунами и птицами), которые являются дополнительным резервуаром. В антропургических очагах резервуаром могут служить и домашние животные— козы и коровы. Вирус клещевого энцефалита может передаваться клещами трансовариально— через яйцеклетки их потомству. Заражение человека происходит трансмиссивным путём через укусы клеща. Возможна алиментарная передача инфекции при употреблении в пищу сырого молока и молочных продуктов инфицированных коз и коров. Риск возникновения клинически выраженных форм болезни возрастает при длительном кровососании клещом. Возбудитель хорошо сохраняется при низких температурах и легко разрушается принагревании выше 70 °C. Клещевой энцефалит имеет сезонный характер, соответствующий активности клещей. Патогенез и клиническая картина. Вирус проникает в кровь при укусе клеща и поражает клетки мозга. Заболевание начинается остро, после инкубационного периода около 2 нед, с подъема температуры до 40°С и менингеальных явлений: судорог, рвоты, головной боли, гиперестезий. Состояние тяжелое в течение 5—12 дней. Затем появляются вялые параличи, чаще верхних конечностей. Летальность высокая — до 25%. После выздоровления могут оставаться стойкие параличи мышц шеи и плечевого пояса. Иногда течение клещевого энцефалита может быть легким, в виде стертых и абортивных форм. Иммунитет. Стойкий. Диагностика. Материал. Кровь, цереброспинальная жидкостью, Идентификацию вируса в суспензиях мозга мышей и культурально жидкости проводят в РТГА, РСК, а в монослое культур клеток — РИФ. Генотипирование проводят с помощью реакции ПЦР. Проводится путем выделения вируса. Белым мышам или обезьянам вводят кровь больных (на 1-й неделе заболевания) или кусочки мозга умерших. Антитела в крови переболевших можно обнаружить в РНА на мышах или в РСК. Лечение.
Прфилактика. 1) Специфическая профилактика включает в себя вакцинацию от клещевого энцефалита. Существуют насколько вакцин: культуральная инактивированная (Россия), Энцевир (Россия), Энцепур взрослый и детский (Германия), ФСМЕ-иммун-инжект (Австрия). Это плановая профилактика, прививаться нужно с осени (сентябрь-октябрь 2)Неспецифическая профилактика – использование репеллентов, акарицидов, ношение специальной защитной одежды (или как минимум штаны заправить в носки плюс длинный рукав с плотной резинкой на конце), самоосмотр во время и после посещения лесов, употребление в пищу кипяченого молока. №107.ВОЗБУДИТЕЛЬ ГЕПАТИТА В Таксономия. Вирус гепатита В (ВГВ) относится к семейству Нерadnaviridae, роду Оrthohaepadnavirus. Морфология. ВГВ — сложноорганизованный, ДНК-содержащий вирус сферической формы, диаметром 42-47 нм. Он состоит из сердцевины (соге), построенной по кубическому типу симметрии, включающей 180 белковых частиц (сердцевинный НВс-антиген, диаметром 28 нм), и липидной оболочки. Внутри сердцевины находятся ДНК-полимераза, протеинкиназа и концевой белок НВе-антигена. ДНК-полимераза является полифункциональным ферментом, она вовлекается во многие функции жизненного цикла вируса: способна синтезировать новые цепи ДНК, на матрице как ДНК, так и РНК, обладая как полимеразной, так и ревертазной активностью. Нуклеазная активность деградирует РНК цепь в гибриде РНК-ДНК. Антигенная структура. ВГВ обладает сложной антигенной структурой. В оболочке вируса находится НВs-антиген, в формировании которого участвуют 3 полипептида в гликированной форме. HВs-антиген обнаруживается в крови не только в составе вириона, но и в виде самостоятельных пустых фрагментов сферической или филаментозной формы, которые неинфекционны, но высокоим-муногенны и индуцируют анти-HВs-нейтрализующие антитела. Присутствие НВs-антигена в крови свидетельствует об инфицированности организма вирусом. HВs-антиген обладает гетерогенностью, подразделяясь на 4 антигенных подтипа. Защита против одного подтипа обеспечивает защиту и против других, за счет наличия общей детерминанты. Сердцевинный HВс-антиген никогда не присутствует в свободной форме в крови, являясь внутренним компонентом вирусной частицы. Его можно обнаружить в зараженных вирусом гепатоцитах.. HВе-антиген также является сердцевинным антигеном, производным HВс-антигена; его также называют растворимым антигеном. Появление НВе-антигена в крови связано с репликацией вируса. Геном представлен двунитевой ДНК кольцевой формы. Культуральные свойства. ВГВ не культивируется на куриных эмбрионах, не обладает гемолитической и гемагглютинирующей активностью. Культивируется только в культуре клеток, полученной из ткани первичного рака печени без оказания цитопатического и цитолитического эффектов и с малым накоплением вирионов. К вирусу чувствительны приматы: гориллы, шимпанзе, африканские зеленые мартышки. Эпидемиология. Гепатит В — антропонозная инфекция. Заболевание поддерживается стабильной циркуляцией ВГВ в человеческой популяции. Резервуаром вируса в природе являются носители. Заражение происходит при попадании вируса в кровь различными путями: при парентеральном вмешательстве, гемотрансфузии, половым (через поврежденные слизистые оболочки и кожные покровы), через плаценту, материнское молоко, при трансплантации органов, укусах клопов. Источником инфекции являются больные всеми формами инфекции и носители. Риск заражения от матери-носителя ребенку составляет 60%, а в случае свежего заболевания — 90%. Вирус устойчив к факторам окружающей среды. Сохраняет инфекционность при 0-20 °С в течение 15 лет, при комнатной температуре — 1ч, при 100 °С — 20 мин, при сухом жаре 160 °С — 1 ч. В высушенной плазме 25 лет. Устойчив к фенолу, УФ-облучению, спирту. Чувствителен к формалину, эфиру. 1-2% раствор хлорамина Б действует 2 ч. Патогенез. Вирусы проникают в кровь парентерально, с кровью переносятся в печень и размножаются в клетках печени – гепатоцитах. Проникнув в клетку, вирусный нуклеокапсид достигает ядра, где вирусный геном высвобождается. В ядре ДНК-полимераза достраивает брешь плюс-цепи ДНК, в результате формируется двунитчатая, суперспирализованная циркулярная молекула ДНК, после чего возможно развитие 2 типов инфекции: продуктивной и интегративной. Клиническая картина. Инкубационный период составляет 2-6 мес. Клиническая картина характеризуется симптомами поражения печени, в большинстве случаев сопровождающимися желтухой. Острый гепатит переходит в хронический в 5-10% случаев с последующим развитием цирроза и носительства ВГВ. Иммунитет. Инфекционный процесс сопровождается развитием иммунитета, выработкой антител. Свыше 5% случаев гепатита В заканчивается носительством HBs-антигена, являющегося основным показателем перенесенной хронической инфекции и носительства. Диагностика. Материал для исследования – кровь больного, в которой определяются антигены вируса и антитела против них – анти-НВs, анти-НВс и анти-НВе классов IgM и IgG. Для этого применяют серологические реакции: ИФА, РИА, РНГА. В будущем важное место займет метод ДНК-гибридизации, позволяющий определять ДНК вируса в крови и клетках печени. Также применяют ПЦР. Профилактика и лечение. Для профилактики гепатита В введена рекомбинантная вакцина. Она состоит из НВs-антигена ВГВ, главным образом 5-белка, синтезированного генно-инженерным путем в дрожжевых клетках, который после очистки сорбируется на гидроокиси алюминия или фосфате алюминия в качестве адъювантов. Вакцинации в первую очередь должны подвергаться новорожденные, дети и лица, составляющие группу риска заражения вирусом ВГВ (в первую очередь работники здравоохранения). Предложенная схема иммунизации состоит из 3 инъекций, с интервалом между 1-ми 2-м введением — 1 мес, а между 2-м и 3-м — 4-6 мес (т.е. 0-1-4-6). Третья инъекция очень существенна, так как она вызывает возрастание титра антител от 10 до 100 раз. Продолжительность иммунитета — 5-7 лет. Большое значение имеет неспецифическая профилактика, направленная на предупреждение попадания вируса при парентеральных манипуляциях и переливании крови. Лечение. Современный метод лечения сводится к применению иммуномодуляторов, в частности интерферона-реаферона, полученного методом генной инженерии. Вирус гепатита D Таксономия. Вирус гепатита D не классифицирован; является сателлитом ВГВ и представляет собой дефектный вирус, не имеющий собственной оболочки. Относится к семейству Deltavirus. Морфология. Вирион имеет сферическую форму (диаметр 36 нм), состоит из однонитчатой негативной цепи РНК кольцевой формы и нуклеокапсидного НD-антигена. В качестве внешней оболочки для защиты генома ВГО использует HВs-антиген ВГВ. Дельта-антиген представлен в нуклеокапсиде в виде 60 копий и является единственным белком, синтез которого кодируется вирусной РНК. Репликация вирусного генома выполняется клеточной РНК-полимеразой-П без помощи ВГВ. Различают 3 генотипа вируса. Все генотипы относятся к одному серотипу. Культивирование. Вирус не культивируется на известных клеточных линиях. Экспериментальной моделью являются шимпанзе и лесные сурки, которые заражаются ВГО соответственно вместе с ВГВ и вирусом гепатита лесных сурков. Эпидемиология. Резервуаром ВГО в природе являются носители ВГВ. Заражение ВГО аналогично инфицированию ВГВ. Одновременное инфицирование ВГВ и ВГО (коинфекция) приводит к развитию умеренной формы болезни. Инфицирование ВГБ больных хронической формой гепатита В утяжеляет течение инфекции, приводя к развитию острой печеночной недостаточности и цирроза печени. Микробиологическая диагностика. Осуществляется серологическим методом путем определения антител к ВГО методом ИФА. В биоптатах печени с помощью ПЦР в гепатоцитах можно обнаружить РНК вируса. Профилактика и лечение. Для профилактики гепатита D введена рекомбинантная вакцина. Она состоит из НВs-антигена ВГВ, главным образом 5-белка, синтезированного генно-инженерным путем в дрожжевых клетках, который после очистки сорбируется на гидроокиси алюминия или фосфате алюминия в качестве адъювантов. Вакцинации в первую очередь должны подвергаться новорожденные, дети и лица, составляющие группу риска заражения вирусом ВГВ (в первую очередь работники здравоохранения). Предложенная схема иммунизации состоит из 3 инъекций, с интервалом между 1-ми 2-м введением — 1 мес, а между 2-м и 3-м — 4-6 мес (т.е. 0-1-4-6). Третья инъекция очень существенна, так как она вызывает возрастание титра антител от 10 до 100 раз. Продолжительность иммунитета — 5-7 лет. Большое значение имеет неспецифическая профилактика, направленная на предупреждение попадания вируса при парентеральных манипуляциях и переливании крови. Для лечения используют препараты ИФН. Вакцина против гепатита В защищает и от гепатита D. №108. Возбудитель бешенства(рабдовирус) Бешенство-вирусное зоонозное заболевание с контактным механизмом передачи через слюну зараженного животного,поражение ЦНС с летальным исходом. Таксономия семейство Rhabdoviridae,род Lyssavirus.Существуют уличные и вакцинные штаммы вируса.Поражает всех теплокровных животных. Морфология и антигенные свойства сложно устроенный вирус,в форме пули или палочки.Состоит из сердцевины и оболочки липопротеиновой с гликопротеиновыми шипами.Геном- 1 нить -РНК.Репродукция просиходит в цитоплазме клетки,где образуют тельца Бабеша-Негри.Фиксированный штамм не патогенен для человека. Культивирование внутримозговое заражение лабораторных животных.В кудьтурах клеток под агаровым покрытием вирус образует бляшки.Обладает геммаглютинирующим свойством. Резистентность сравнительночувствителен к физико-хим воздействиям,но сохраняется пр и низкой температуре(-60) ЭпидемиологияИсточник инфекции в природе-дикие животные,также кошки и собаки,которые заражаются от диких.Механизм передачи-контактный,через слюну больного животного.Заражение при укусах или аэрогенно,при пересадки донорных органов.От человека к человеку не передаётся. |