Объект изучения микробиологии
 Скачать 6.2 Mb.
|
|
Вопрос 121 МАЛЯРИЙНЫЙ ПЛАЗМОДИЙ – PLASMODIUMMALARIAE Включает более 100 видов, 4 из которых патогенны – vivax(трехдневная малярия), malariae (четырёхдневной), falciparum (тропическая малярия), ovale(возбудитель малярии овале). Возбудители паразитируют в эритроцитах и других клетках. По Романовскому-Гимзе цитоплазма окрашивается в голубой цвет, ядро - в красно-фиолетовый. Жизненный цикл В организме человека происходит бесполая стадия – шизогония, в организме комаров – половая стадия (спорогония). Спорогония происходит в клетках эпителия ЖКТ комара, её продолжительность 1-3 недели. Происходит многократное деление ооцист с образованием веретенообразных спорозоитов – подвижных клеток, диссеминирующих по всему организму насекомого. Тканевая шизогония происходит в гепатоцитах и продолжается 1-2,5 нед. Уже через час после укуса комара спорозойты проникают с кровотоком в клетки печени, где происходит их размножение и деление. В рез-те деления образуются мерозойты, разрушающие гепатоциты и проникающие в кровоток. Эритроцитарная шизогония происходит после проникновения мерозоитов в эритроциты путём эндоцитоза, где образуется псевдовакуоль. Затем мерозоиты превращаются в трофозоиты (бесполые формы), утилизирующие гемоглобин. Юныетрофозоиты содержат ядро с одним хроматиновым зерном и внешне напоминают кольцо. Незрелыетрофозоиты имеют амёбовидную форму, а трофозоитыvivax способны передвигаться внутри эритроцитов. У зрелыхтрофозоитов ядра делятся, образуются многоядерные шизонты, дающие новое поколение мерозоитов. Выход мерозоитов из эритроцита сопровождается его разрушением. Цикл развития для вида malariae – 72 часа, для других видов – 48 часов. Vivax–полувзрослый трофозоит подвижен, имеет в эритроците форму амёбы с псевдоподиями. Содержит мелкую кирпично-красную зернистость. На 3-4 день болезни в крови больных появляются гамонты. Ovale– эритроциты увеличиваются в размерах, деформированы. Слабее воспринимают окраску. Один конец вытягивается и становится бахромчатым. Такие эритроциты имеют крупную и редкую зернистость Джеймса. Malariae– в эритроците 1 трофозоит в стадии кольца. Полувзрослыйтрофозоит имеет лентовидную форму. 6-12 мерозоитовраспологаются упорядоченно вокруг пигмента, обычно в виде розетки. Falciparum– в пораженных эритроцитах единичные крупные розово-фиолетовые пятна (Мауэра).В периферической крови – кольцевидные трофозоиты в виде полулуний. Факторы патогенности: Апикальный комплекс, способствующие инвазии; поверхностные антигены для адгезии; специфическая протеаза гемоглобина. Эпидемиология Основной механизм – трансмиссвный, через укусы самки комаров рода Anopheles. Человек - промежуточный, а комар – окончательный хозяин паразита. Восприимчивость высокая. Тропический и субтропический климат. Иммунитет – нестойкий видоспецифический, нестерильный. Возможны повторные заболевания. Патогенез, клиника Массовая гибель эритроцитов. Ведущий симптом заболевания – лихорадка. Главные патогенетические механизмы – гемолиз, анемия, гиперкоагуляция. Длительность инкубационного периода – от 6-40 суток до 6 месяцев и даже нескольких лет. Продромальный период – недомогание, слабость, головная боль - 2-3 дня. Лихорадка характеризуется повышением температуры тела до 38-41 гр. Злокачественные формы малярии: церебральная форма, черноводная лихорадка, алгидная форма. Частое осложнение – разрыв селезёнки. Микробиологическая диагностика Основа диагностики – микроскопия препаратов тослтой капли и мазков из крови, окарешенных по Романовскому-Гимзе или по Райту. При этом эритроциты разрушаются. Если паразиты не обнаружены в крови, через каждые 8 часов исследования мазков крови повторяют. Серологический метод используют лишь со второй недели заболевания – непрямая РИФ, ИФА, РПГА. Для обнаружения ДНК паразита – ДНК-гибридизация и ПЦР. Экспресс-диагностика – исследование препаратов толстой капли (препараты окрашивают без фиксации). Лечение Антибиотики и химиопрепараты. Производные 4-аминохинолина (хлорохин, гидроксихлорохин), 8-аминохинолина (примахин), хинин, сульфаниламиды. Профилактика Эффективные средства вакцинопрофилактики отсутствуют. Их замещают химиопрофилактикоймефлохин, саварин, хлорохин, примахин. Применяют до въезда в очаг и в течение 4 недель после выезда из него. Использование средств индивидуальной защиты – репелленты, сетки и др. Вопрос 122 АМЁБИАЗ – ENTAMOEBAHYSTOLYTICA Выделяют инвазивные (большая вегетативная и тканевая) и неинвазивные формы. Неинвазивная просветная форма – основная форма существования паразита, выделяемая у больных хроническим амебиазом. У больных острой формой её не выделяют. Движение замедленное, ложноножки мелкие. Для идентификации возбудителя необходимо исследование образцов, полученных после глубоких промываний, или обследование последней порции испражнений после приёма слабительных средств. Инвазивная большая вегетативная форма (патогенная) – проникает в стенку в стенку толстой кишки, вызывая специфические поражения. Форма представлена крупными клетками с чётко различимыми экто- и эндоплазмой. Имеет псевдоподии, может фагоцитировать эритроциты. Обычно возбудитель выделяют в свежих испражнениях при остром амебиазе. Цисты – неподвижные круглые прозрачные образования. Иногда в них заметны палочковидные или хроматойдные тельца. Цисты окрашивают раствором Люголя., выявляя 4 окрашенных ядра в виде колец. Жизненный цикл Пассивно передвигаясь с кишечным содержимым, организмы при определенных условиях образуют цисты. Цисты попадают в воду и с ней проникают в организм человека. В тонкой кишке оболочка цист растворяется, каждое ядро делится и образуется восьмиядерная амёба, дающая начало дочерним особям. Внекишечный амебиаз развивается при проникновении амёб с током крови в печень, лёгкие, головной мозг и др. органы. Эпидемиология Ист инфекции – человек. Болеют люди старше 5 лет. Механизм – фекально-оральный. Пути – алиментарный, водный, контактно-бытовой. Распространению цист способствуют мухи и тараканы. Иммунитет нестойкий. Антитела образуются только к тканевым формам. Патогенез Вирулентность возбудителя нестабильна. Выделяют некротоксин, вызывающий коагуляционный некроз прилежащих тканей. Некротизированные ткани распадаются, образуя язвы с подрытыми краями. Из лимфо- и кровотока возбудитель может проникать в печень и др. органы. Характерны сильные боли в животе, лихорадка и диарея с примесью крови и слизи. Характерный признак – жидкий стул, полностью окрашенный кровью. Микробиологическая диагностика Материал - испражнения, содержимое абсцессов. Препараты окрашивают по Хайденхайну. При выявлении цист – раствором Люголя. Специфические антитела выявляются в РИФ, РГА, ИФА. ПЦР позволяет определить в фекалиях участки ДНК. Лечение Метронидазол, тинидазол, хлорохин, эметин, мексаформ. В тяжёлых случаях проводят коррекцию водно-электролитного баланса и переливание донорской крови. Профилактика Выявление цистовыделителей и носителей амёб. Общесанитарные мероприятия. 125. Исследование воздуха аптек Пробы воздуха отбирают в следующих помещениях:
Методика исследования воздуха. Доставленные чашки с посевами на питательном агаре и желточно-солевом агаре инкубируют при 37°С в течение 24 часов, посевы на среде Сабуро инкубируют при 22 - 28°С в течение 4 суток. Для определения:
126. Исследование посуды, пробок, прокладок Аптечную посуду для розлива инъекционных растворов и глазных капель отбирают в момент приготовления их, в количестве трех штук одинаковой ёмкости. Флаконы доставляют в лабораторию в укупоренном виде, используя при этом пробки и прокладки, для отпуска лекарственных средств. Пробки (корковые, полиэтиленовые) и прокладки отбирают в момент приготовления инъекционных растворов и глазных капель пинцетом и помещают по пять штук в широкогорлые стерильные колбы или банки с последующим закрытием стерильными ватно-марлевыми пробками и бумажными колпачками. Фильтровальные воронки, пипетки, мерные колбы, цилиндры, используемые для приготовления инъекционных растворов, контролируют путём ополаскивания их 10 см³ стерильной водопроводной воды. Подготовка к исследованию: три одноимённых флакона ополаскивают в 10 см³ стерильной водопроводной воде. (Воду из флакона во флакон переливают над пламенем горелки). Определение в смывной жидкости:
Интерпретация результатов бактериологических исследований:
127. Исследование воды для приготовления лек средств Отбирают в количестве 500 см³ в стерильные бутылки, с последующим закрытием ватными пробками и бумажными колпачками. Пробы отбирают из бюретки, конец которой предварительно обжигают ватой, смоченной спиртом. При неудовлетворительных результатах анализа пробы проводят из приёмника. При наличии в аптеке трубопровода для дистиллированной воды, отбор проб осуществляют из бюретки над столом ассистента и дефектара. Определение количества мезофильных аэробных и факультативных анаэробных бактерий в 1 см³: исследуемую воду вносят по 1 см³ в две параллельные чашки Петри, которые затем заливают питательным агаром и выдерживают 24 часа при температуре 37°С и 24 часа при комнатной температуре. Затем подсчитывают число выросших колоний как на поверхности, так и внутри питательного агара. (При вычислении результатов анализа выводят среднее арифметическое из числа колоний, выросших на обеих чашках.); Определение количества колоний плесневых и дрожжевых грибов: исследуемую воду засевают на поверхность двух чашек Петри по 0,5 см³ со средой Сабуро. Инкубируют при температуре 20 - 22°С в течение 3 – 4 суток. Затем подсчитывают число колоний плесневых и дрожжевых грибов на обеих чашках. Результаты оценивают по общему количеству непатогенных микроорганизмов, путём суммирования числа бактерий, выросших на чашках с питательным агаром и на среде Сабуро. 128.Источники и пути загрязнения лек.средств. Объектами фарм анализа являются не только медикаменты, но и лекарственное сырье,используемое для изготовления различных фармаевтических препаратов, от степени чистоты которого зависит качество лек. Средств. Погчти все лек.вещества содержат те или иные примеси посторонних веществ. Загрязнение лекарственных веществ различными примесями может не только снижать его терапевтический эффект, но и вызывать Нежелательное побочное действие лекарства. Особенно опасны ядовитые примеси которые могут вызывать отравление организма. Причины возникновения примесей в лек.веществах могут быть различныи носят вполне закономерный характер. Это и плохая очистка исходного сырья и побочные продукты синтеза, и механическипе загрязнения(остатки фильтрующих материалов – ткань, фильтровальная бумага, асбет и т.д.), остатки растворителей (спирт, вода и др.). источником загрязнения лек.веществ могут быть примеси материалов, из которых сделана аппаратура, применяемая для изготовления препарата. Металлическая аппаратура может служить источником таких опасных примесей в лекарственном веществе, как свинец (из посуды), железо, медь, иногда цинк и самая опасная примесь – мышьяк. Примеси могут возникнуть и при нарушении необходимых условий хранения лекарств. Так, например, при нарушении правил хранения хлороформа для наркоза(на свету, с доступом воздуха) происходит его окисление; продукты окисления – фосген и хлороводородная кислота – не только снижают его наркотическое действие, но могут привести к отравлению больного фосгеном. Некоторые препараты требуют таких условий хранения, при которых исключалась бы возможность появления влажности , так как влажность может привести к гидролитическому распаду или к появлению микроорганизмов. Например, препараты, представляющие по структуре сложные эфиры, в условиях влаги могут гидролизоваться, при этом не только снижается лечебный эффект препарата, но иногда продукты гидролиза могут быть токсичны. Например, есть препараты в которых для проявления необходимого действия должна обязательно содержаться влага, например сульфат магния  (слабительное средство)Очень важно соблюдать определенные условия хранения для тех препаратов , которые содержат кристаллизационную воду, особенно для препаратов, в состав которых входят ядовитые вещества (мышьяк, ртуть и др.) так, если в препарате мышьяка натрия арсенате  *7 Oвыветрится кристаллизационная вода, а дозировка делается в расчете на 7 молекул в оды в молекуле препарата, то при той же дозировке больной получит большее количество мышьяка, чем это нужно для лечебного эффекта в результате чего может произойтиотравление организма.Многие из перечисленных источников загрязненных лекартсвенных веществ могут обусловить наличие в них нелетучих примесей с большим содержанием неорганических веществ (зольный остаток). Так как зола в большинстве случаев не содержат таких вредных примесей, как тяжелое металлы, мышьяк, которые рекомендуется проверять при анализе лекарственного вещества. Государственной фармакопеей допускается для каждого лекарственного вещества определенной предел зольности. Для определениядопустимого предела примесей в препарате в ГФ введены так называемые эталонные растворы. |