Определение группы крови, резуспринадлежности, типирование антител
 Скачать 1.68 Mb.
|
|
ПРОБА НА ИНДИВИДУАЛЬНУЮ СОВМЕСТИМОСТЬ ЭРИТРОЦИТОВ ДОНОРА И СЫВОРОТКИ РЕЦИПИЕНТА ПО СИСТЕМЕ АВ0 Проба на индивидуальную совместимость проводится на плоскости при комнатной температуре, учет реакции через 5 минут. Для исследования используют белую пластину со смачиваемой поверхностью, на пластине пишут фамилию, инициалы и группы крови больного, а также ФИО, группу крови донора и номер флакона с кровью. На пластину наносят 2-3 капли сыворотки больного, а затем стеклянной чистой сухой палочкой переносят маленькую каплю крови донора в соотношении 1 : 10 ( маленькую каплю крови берут из большой, которую предварительно спускают из флакона через иглу на бортик пластины), кровь перемешивают с сывороткой сухой стеклянной палочкой, слегка покачивают пластину, затем оставляют на 1-2 минуты в покое и снова покачивают, наблюдая за ходом реакции. Окончательный учет проводят через 5 минут от начала реакции. Если в смеси сыворотки больного и крови донора наступила агглютинация в виде мелких, затем укрупняющихся конгломератов, а жидкость почти полностью обесцвечивается, это означает несовместимость крови донора и реципиента. Кровь донора не может быть перелита данному больному. При несовместимости крови донора и реципиента по системе АВО обычно реакция агглютинации наступает в течение первой минуты, но при слабо выраженных антигенах (типа А2) агглютинация, наступает значительно позже, поэтому реакцию нужно учитывать через 5 минут. Если агглютинации по истечении 5 минут нет, жидкость остается равномерно окрашенной, то это означает совместимость крови донора и реципиента. Она может быть перелита больному. При некоторых заболеваниях, сыворотка больного приобретает способность вызывать неспецифическое склеивание эритроцитов в «монетные столбики», похожие на агглютинаты, что затрудняет чтение реакции при определении совместимости крови донора и реципиента. В таких случаях следует повторить определение групповой принадлежности крови донора и больного. Если на этом этапе ошибки нет, и кровь донора выбрана правильно, то далее повторяют пробу на индивидуальную совместимость. Результат реакции в этом случае учитывают под микроскопом при подогревании и добавлении физиологического раствора. Если при добавлении 1-2 капель. Физиологического раствора и подогревании до 37°С «монетные столбики» расходятся и эритроциты располагаются в виде гомогенной массы, то кровь донора и реципиента можно считать совместимой в отношении групп крови системы АВО. ПРОБА НА ИНДИВИДУАЛЬНУЮ СОВМЕСТИМОСТЬ ПО РЕЗУС - ФАКТОРУ С ПРИМЕНЕНИЕМ ЖЕЛАТИНЫ Проба проводится в пробирке при температуре 46-48°С в течение 10 минут. На пробирке подписывают ФИО, группу крови больного, а также ФИО, группу крови донора и номер флакона с кровью. На дно пробирки помещают одну маленькую каплю крови донора, затем 2 капли подогретой жидкой желатины в виде 10% раствора и 2-3 капли сыворотки больного (желатина не должна иметь хлопьев, помутнения). Содержимое пробирки встряхивают и помещают на водяную баню при 46-480С на 10 минут. Далее пробирку вынимают из водяной бани и добавляют 5-8 мл физиологического раствора, подогретого на той же водяной бане. Содержимое пробирки переворачивают 1-2 раза и смотрят на свет невооруженным глазом или через лупу с двукратным увеличением. Если в пробирке имеется агглютинация, то видны мелкие или крупные конгломераты на фоне просветленной жидкости, что означает несовместимость крови донора и больного по системе резус. Если агглютинация отсутствует, то содержимое пробирки равномерно окрашено, не имеет хлопьев, иногда дает эффект «муара», что означает совместимость крови донора и реципиента по системе резус. Пробы на совместимость по системе АВ0, проводимые при комнатной температуре, могут выявлять также несовместимость, связанную с присутствием в сыворотке больного холодовых анти - М и анти - N антител, активных в тех же условиях, что и антитела АВ0. Равно при проведении проб на совместимость по резус (D) фактору можно выявить несовместимость, связанную с неполными антителами к другим факторам системы резус (С, Е, с, е), а иногда и к антигенам других систем. В этом случае наиболее чувствительной является непрямая проба Кумбса, с помощью которой выявляются неполные антитела ко всем антигенам системы резус, системы Келл, Даффи, Кидд. НЕПРЯМАЯ ПРОБА КУМБСА ДЛЯ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ИНДИВИДУАЛЬНОЙ СОВМЕСТИМОСТИ КРОВИ ДОНОРА И РЕЦИПИЕНТА Непрямая проба Кумбса выявляет неполные антитела, присутствующие в сыворотке крови больного, способные присоединиться к эритроцитам донора. Непрямая проба Кумбса на совместимость переливаемой крови проводится в два этапа. На 1 этапе в пробирке соединяют эритроциты донора и сыворотку реципиента (больного) и инкубируют в течение 45 минут при 37°С для фиксации искомых неполных антител на эритроцитах донора. На втором этапе после отмывания эритроцитов добавляют антиглобулиновую сыворотку, которую получают путем иммунизации животного белками сыворотки крови человека, и после инкубации при комнатной температуре в течение 20 минут реакцию, проводимую на плоскости, учитывают. Если наступает агглютинация, то кровь донора и реципиента несовместимы, кровь этого донора не должна быть перелита данному больному. Отсутствие реакции агглютинации означает совместимость крови донора и реципиента по системе резус и другим системам, свидетельствует об отсутствии каких-либо неполных антител у больного. В результате, если кровь донора совместима с кровью реципиента по системе АВО, резус, и в анамнезе у больного нет указаний на риск сенсибилизации к другим групповым антигенам, то приступают к переливанию крови, при этом обязательно проводят биологическую пробу. БИОЛОГИЧЕСКАЯ ПРОБА Пробу проводят путем струйного переливания крови или ее компонентов (эритроцитарной массы, плазмы) в количестве 10-15 мл, затем наблюдают 3 минуты за состоянием больного. При отсутствии признаков несовместимости процедуру повторяют, переливают струйно еще 10-15 мл крови, вновь наблюдают 3 минуты за больным. Если изменений состояния больного нет, то в последний раз переливают струйно 10-15 мл крови. Таким образом, струйное переливание по 10-15 мл проводят трехкратно с интервалом в 3 минуты. Признаками несовместимости при проведении биологической пробы являются беспокойство больного, жалобы на чувство жара, боли, стеснение в груди, в пояснице, животе, одышка, тахикардия, падение кровяного давления, сначала покраснение, затем побледнение лица, цианоз, В этом случае переливание крови или ее компонентов следует немедленно прекратить. Искусственно созданная «кровяная» химера по различным системам Состояние, когда в организме человека присутствуют две и более популяции эритроцитов, отличающихся по групповым антигенам, получило название «кровяной химеры». Впервые было отмечено как врожденное явление у близнецов. Состояние «химеры крови» встречается при гемотрансфузиях. В связи с большим разнообразием групповых различий после любой трансфузии крови в кровяном русле реципиента циркулируют эритроциты донора и реципиента, отличающиеся по тем или иным групповым признакам. «Кровяная химера» по системе АВ0 «Кровяная химера» по системе АВ0 встречается в основном при переливании иногруппной, но совместимой крови. Она выявляется при обычном определении группы крови на плоскости и проявляется в том, что на красном фоне различной интенсивности видны отдельные группы склеенных эритроцитов. В этих случаях следует выяснить, какова была групповая принадлежность перелитой крови. Динамическое наблюдение за таким пациентом позволяет установить постепенное изменение картины крови в зависимости от его истинной групповой принадлежности, ввиду того, что эритроциты донора элиминируются из кровяного русла реципиента. Несколько иначе обстоит дело у новорожденных, естественные агглютинины которых могут вообще отсутствовать или бывают слабо выраженные. «Кровяная химера» по системе Резус «Кровяная химера» по антигенам системы Резус может встречаться у реципиентов как при переливании резус-отрицательной крови резус- положительному реципиенту, так и при переливании резус-положительной крови резус-отрицательному реципиенту. Состояние химеризма может продолжаться длительное время, до 2-3 месяцев, создавая тем самым условия для появления антител к различным антигенам системы Резус. Последующие переливания крови могут бытъ несовместимыми и явиться причиной тяжелого посттрансфузионного осложнения. «Кровяная химера» по антигенам системы Резус может быть выявлена всеми методами, используемыми в лаборатории. Изосерологнческая картина крови будет постепенно меняться в зависимости от истинной резус-принадлежности его крови. В случае выявления у реципиента искусственно созданной «кровяной химеры» по различным системам при необходимости следует переливать кровь с индивидуальным подбором. Подбор крови Основным фактором безопасности гемотрансфузионной терапии является обеспечение иммунологической совместимости донора и реципиента. Пациенты, которым показаны подборы крови, относятся к категории «опасный» реципиент: 1. Пациенты, имеющие антиэритроцитарные антитела. 2. Пациенты с отягощенными трансфузионным и акушерско-гинекологическим анамнезами: - многократные гемотрансфузии; - массивные гемотрансфузии; - гемотрансфузии с посттрансфузионными реакциями негемолитического типа; - беременности, закончившиеся рождением ребенка с ГБН, мертворождением или выкидышем. 3. Пациенты после гемотрансфузионных гемолитических осложнений. 4. Пациенты, которым предполагаются частые или массивные гемотрансфузии. 5. Пациенты, с кровью которых при нммуносерологическом исследовании, возникли затруднения. 6. Пациенты, с кровью которых возникли затруднения при проведении проб на совместимость. 7. Новорожденные дети (т.е. дети в возрасте до 4-х месяцев). Подборы крови проводятся в специализированных лабораториях на станциях переливания крови (СПК). Выделяют специальные и индивидуальные подборы крови в зависимости от установления формы и специфичности антиэритроцитарных антител. Специальный подбор крови проводится категории «опасный» реципиент при отсутствии у него антиэритроцитарных антител или при их наличии с установленной специфичностью. Специальный подбор заключается в выборе донорской крови, идентичной по антигенному составу крови пациента. Индивидуальный подбор крови донора проводится в тех случаях, когда у пациента выявлены аллоиммунные антитела, но установить их специфичность невозможно После каждого проведенного подбора крови выдается заключение о возможности переливания подобранных гемотрансфузионных сред пациентам. Подбор крови и наличие заключения не освобождает врача ЛПУ от проведения иммуносерологических исследований при переливаниях гемотрансфузионных сред (Приказ МЗ РФ от 25 ноября 2002 года № 363). |