Иммунология,ответы на тесты. Тесты коллоквиум 2 Верно Возможный ответ Неверно Выберите характеристики, относящиеся к ртга (рзга)
 Скачать 2.49 Mb.
|
Реакция нейтрализации широко используется в вирусологической практике.Компонентами реакции во 2-м варианте постановки служат: исследуемый вируссодержащий материал, диагностическая (известная), нормальная (отрицательная) и исследуемая сыворотки крови, тест-объект. Этот вариант позволяет идентифицировать исследуемый вирус и определить индекс нейтрализации (ИН) специфических и исследуемых сывороток. Для постановка РН готовят постоянные разведения специфической и нормальной сывороток (обычно 1:10) и три ряда 10-кратно убывающих разведении вируса по 0,5 мл. Последнее разведение вируса, взятого в опыт, должно превышать его биологический титр, так как в противном случае будет невозможно рассчитать индекс нейтрализации: например, если титр вируса 107 ЕД5о> то в опыт следует брать вирус до разведения 10-8 В пробирки первого ряда добавляют специфическую сыворотку (1:10) по 0,5 мл, во второй ряд — нормальную сыворотку по 0,5 мл, в третий — физиологический раствор по 0,5 мл. Объем сыворотки и вируса должен быть одинаковым. Пробирки встряхивают и оставляют на контакт. Продолжительность этого периода и температуру варьируют в зависимости от вируса, с которым проводится работа. После инкубации смесь сыворотки с разведениями вируса в объеме по 0,2 мл вводят в чувствительную тест-систему, начиная с разведения 10-8. Затем проводят учет реакции (табл.11). Таблица 11. Схема реакции нейтрализации для идентификации вируса
Учет реакции. Если происходит нейтрализация вируса (нет изменений в чувствительном объекте), значит, антитела диагностической сыворотки специфичны исследуемому вирусу. Все это дает возможность определить вид вируса. При учете результатов РН по этому варианту пользуются методом определения индекса нейтрализации по Риду и Менчу. Индекс нейтрализации представляет собой отношение дозы вируса в смеси с нормальной сывороткой, вызывающей изменения у 50% чувствительных объектов, к дозе вируса, вызывающей те же изменения в смеси с иммунной сывороткой. Или, другими словами, это число, показывающее, во сколько раз специфическая сыворотка снижает титр вируса по сравнению с нормальной. В нашем примере (табл.11): ИН = Т 1/ Т 2 = 107 / 102 = 105 где Т1 — титр вируса в присутствии нормальной сыворотки; Tg — титр вируса в присутствии специфической сыворотки. Индекс нейтрализации до 10 указывает на отсутствие вируснейтрализующих антител в сыворотке, от 11 до 49 считается сомнительным, а 50 и выше — положительным. | |||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||