Билеты Микробиология. 1. Бактериофаги (фаги)
 Скачать 0.53 Mb.
|
|
Выделение того или иного пути передачи инфекционных заболеваний достаточно условно, но тем не менее среди них выделяют следующие: воздушно-капельный - он характерен для ветряной оспы, туберкулеза, коклюша, гриппа; фекально-оральный, в котором иногда выделяют водный - характерный, например, для холеры, и алиментарный - характерный, например, для дизентерии; трансмиссивный путь - связан с передачей возбудителя через укусы кровососущих насекомых (клещевой энцефалит, лошиный и вшивый сыпной тиф); контактно-бытовой, который, в свою очередь делится на: прямой контакт - (от источника к хозяину) - в том числе заболевания, передающиеся половым путем, включая ВИЧ-инфекцию; косвенный контакт - (через промежуточный объект) - это могут быть руки (при раневой инфекции, кишечных инфекциях) или различные предметы, в том числе и медицинского назначения (при гнойно-воспалительных заболеваниях и парентеральных гепатитах). В последнее время, как отдельный, очень часто выделяется искусственный (артифициальный) путь распространения инфекционных заболеваний, связанный, в первую очередь, с врачебными манипуляциями. При этом он может моделировать как трансмиссивный (парентеральные и особенно внутривенные инъекции), так и контактно-бытовой путь передачи (различного рода лабораторные обследования с использованием приборов медицинского назначения - бронхоскопов, цистоскопов и т. д.). В соответствии с преобладанием того или иного пути передачи - по эпидемиологическому принципу - все инфекционные болезни делятся на: кишечные; воздушно-капельные, или респираторные; трансмиссивные; инфекции кожных покровов. Близка к этой классификации существующая клиническая классификация инфекционных заболеваний в зависимости от поражаемой системы органов. Выделяют: кишечные инфекции, респираторные инфекции, менингоэнцефалиты, гепатиты, инфекции мочеполовой сферы (урогенитальные), инфекции кожных покровов. По биологической природе возбудителя все инфекционные заболевания делятся на: бактериальные инфекции; вирусные инфекции; грибковые инфекции; протозойные инфекции. По числу возбудителей, вызывающих инфекционное заболевание, они делятся на: моноинфекции; смешанные (ассоциированные) - микст инфекции. От последних надо отличать вторичную инфекцию, при которой к основной, первоначальной уже развившейся. Присоединяется другая, вызываемая новым возбудителем, хотя в некоторых случаях вторичная инфекция может по своей значимости для больного превышать, и значительно, первичную инфекцию. По длительности течения инфекционные заболевания делятся на: острые; хронические. По происхождению возбудителя инфекционные заболевания делятся на: экзогенные; эндогенные, включая аутоинфекцию. Экзогенная инфекция - это инфекция, возбудителями которой являются микроорганизмы, поступающие из окружающей среды с пищей, водой, воздухом, почвой, выделениями больного человека или микробоносителя. Эндогенная инфекция - инфекция, возбудителями которой являются микроорганизмы - представители собственной нормальной микрофлоры человека. Она часто возникает на фоне иммунодефицитного состояния человека. Аутоинфекция - разновидность эндогенной инфекции, которая возникает в результате саморазмножения путем переноса возбудителя из одного биотопа в другой. Например, из полости рта или носа руками самого больного на раневую поверхность. Входными ворогами инфекции называют лишённые физиологической защиты органы и ткани, через которые микроб проникает в организм. Такими воротами могут быть: • кожные покровы (например, для возбудителей малярии, сыпного тифа, кожного лейшманиоза); • слизистые оболочки дыхательных путей (для возбудителей гриппа, кори, скарлатины и др.); • слизистые оболочки ЖКТ (например, для возбудителей дизентерии, брюшного тифа); • слизистая оболочка мочеполовых органов (для возбудителей гонореи, сифилиса и др.); • стенки кровеносных и/или лимфатических сосудов, через которые возбудитель поступает в кровь или лимфу (например, при укусах членистоногих и животных, инъекциях и хирургических вмешательствах). Входные ворота могут определять нозологическую форму заболевания. Так, внедрение стрептококка в области миндалин вызывает ангину, через кожу — рожу или пиодермию, в области матки — эндометрит. Гепатиты а Впервые частицы вируса гепатита В были обнаружены Д. Дейном в 1970 г. и впоследствии названы частицами Дейна. Структура и химический состав. Вирионы, или частицы Дейна, имеют сферическую форму диаметром 42 нм. Сердцевина вириона - нуклеокапсид в форме икосаэдра - состоит из 180 капсомеров. Снаружи он окружен липосодержащей внешней оболочкой. В состав вириона входят ДНК, белки, ферменты липиды и углеводы. Структура генома HBV необычна Он состоит из кольцевой двунитевой молекулы ДНК, которая в отличие от ДНК других вирусов имеет однонитевой участок. Его длина непостоянна и составляет 15-60% длинной цепи. Кольцевая молекула ДНК может принимать линейную форму. В изолированном виде она не обладает инфекционными свойствами. В составе вирусного генома обнаружено около 6 генов, которые контролируют образование антигенов, структурных белков и не менее двух ферментов (ДНК полимераза, протеинкиназа). Антигены В составе вируса гепатита В обнаружено 4 антигена: HBs, HBc, Нве и НВх. HBs-антиген (ранее именовался австралийским антигеном) представляет собой гликопротеин с липидным компонентом, который содержится во внешней оболочке вириона. В его составе обнаружено два полипептидных фрагмента. Один из них (preS2) является полиглобулиновым рецептором, ответственным за адсорбцию вируса на аналогичных рецепторах гепатоцитов. Он связывается с сывороточным альбумином, который при полимеризации превращается в полиальбумин. Таким образом, в составе внешней оболочки вируса гепатита В имеются те же полиальбумины, которые содержатся в сыворотке крови человека. Второй фрагмент (preS1) обладает выраженными иммуногенными свойствами. Этот пептид, полученный генноинже-нерными методами, может быть использован для приготовления вакцины. HBs-антиген обнаруживается в крови. НВс-антиген является нуклеопротеином. Он содержится в сердцевине вирионов, находящихся в ядрах гепатоцитов и не поступает в кровь. НВе-антиген отщепляется от НВс-антигена при его прохождении через мембрану гепатоцитов, вследствие чего обнаруживается в крови. НВх-антиген наименее изучен. Возможно, он имеет отношение к раковой трансформации гепатоцитов. В организме больных гепатитом В синтезируются антитела к трем антигенам HBs, HBc, НВе. Репродукция Вирус гепатита В не репродуцируется в культурах клеток и куриных эмбрионов. Репликация и транскрипция вирусного генома происходит в ядрах гепатоцитов. При этом короткая цепь в кольцевой молекуле ДНК достраивается по длинной цепи с помощью вирусной ДНК-полимеразы, после чего начинается репликация обеих нитей. Необычным является возможность транскрибирования с вирусной ДНК молекулы РНК, выполняющей функцию матрицы для синтеза вирусной ДНК путем обратной транскрипции. Это происходит при участии вирусиндуцированной обратной транскриптазы. Данный процесс, понятный в случае РНК-содержащих вирусов, которые с помощью обратной транскрипции получают возможность встроить свой геном (ДНК-транскрипт) в хромосому клетки хозяина, остается загадочным для ДНК-содержащего вируса гепатита В. Одновременно с вирусного генома транслируется информация для синтеза на рибосомах гепатоцитов НВс- и HBs-антигенов, вирусоспецифических ферментов и капсидных белков. Синтезированные нити ДНК собираются в нуклеокапсиды. При выходе из клетки они приобретают внешнюю оболочку с HBs- и НВс-антигенами. Патогенез и иммунитет Поскольку входными воротами инфекции при гепатите В являются кровеносные сосуды, вирус сразу же попадает в кровь, с которой разносится по всему организму, фиксируясь прежде всего на гепатоцитах. Однако репродукция вируса не сопровождается цитолизом данных клеток. Это свидетельствует о том, что вирус гепатита В не обладает прямым цитопатическим действием, а патологический процесс в печени возникает не с момента внедрения возбудителя в гепатоциты, а только после распознавания иммуноцитами его антигенов на наружной мембране этих клеток. Таким образом, поражение клеток печени при гепатите В является иммунообусловленным. Многообразие патогенетических форм данного заболевания (острые, подострые, хронические или персистирующие) определяется антигенами возбудителя и характером его взаимодействия с гепатоцитами, в результате которого развивается продуктивная или интегративная инфекция, с одной стороны, формой иммунного ответа и выраженностью иммунопатологических процессов - с другой. При острых формах гепатита В подавляется активность Т-хелперов, при хронических - в процесс вовлекаются Т-супрессоры. При стабильном подавлении клонов Т-супрессоров формируются условия для развития аутоиммунных реакций направленных против собственных клеточных антигенов и прежде всего печеночного липопротеина. При ингибировании Т-хелперов нарушается распознавание вирусных антигенов, что в конечном итоге приводит к подавлению антителообразования. Гепатит В Вирус гепатита В (ВГВ) принадлежит к семейству Hevadnaviridae. Он представляет собой собой сферической формы сложноорганизованных вирус диаметром до 42 нм. Внешне вирус покрытой белково-липидной суперкапсидною оболочкой. Капсид построен по кубичным типом симметрии, состоит из 180 капсомеров. Сердцевина вируса содержит ДНК, состоящую из 3200 нуклеотидных оснований, ковалентно связанную с полипептидом, ДНК-полимеразу, протеинкиназу. ДНК имеет форму кольца, один из цепей которой дефектный. В процессе репродукции вирусов ДНК-полимераза достраивает дефектную ДНК. Вирус гепатита В имеет несколько антигенов. Поверхностный антиген (HBsAg) высокоустойчив к действию физико-химических факторов. Его обнаруживают практически во всех биологических жидкостях больных. Сердцевинный антиген (HBcAg) входит в состав нуклеокапсида вируса гепатита В. Этот антиген присутствует в ядрах гепатоцитов больных людей. HBeAg мыститься между HBcAgi HBsAg. Его можно обнаружить в цитоплазме и ядрах гепатоцитов людей, инфицированных вирусом. Некоторые исследователи высказывают предположение о существовании еще одного антигена - HBxAg, который может иметь отношение к раковой трансформации гепатоцитов. Вирусы гепатита В имеют высокую резистентность к действию разнообразных факторов внешней среды. В частности, они выдерживают кипячение в течение 15-20 мин, а при 60 ° С - до нескольких часов. Автоклавирования при 121 ° С инактивирует вирус в течение ЗО мин, сухой жар (160 ° С) - за 60 мин, а при 180 ° С - за 40 мин. В связи с тем, что вирус гепатита В не размножается ни в культурах тканей, ни в куриных эмбрионах, можно выделить два основных направления лабораторных исследований - серологычну и экспресс-диагностическую. Экспресс-диагностика Экспресс-диагностика направлена на выявление в крови больного антигенов вируса гепатита - HBsAg, HBeAg и HBeAg. В рутинной лабораторной практике чаще всего определяют HBsAg. Он зьявляехься в крови больных еще в течение инкубационного периода, за несколько недель до появления основных клинических симптомов болезни и повышение активности печеночных ферментов трансаминаз. Как правило, в сыворотке крови поверхностных антигенов в несколько сотен или тысяч раз больше, чем самих вирусов. Разработано несколько методов, позволяющих выявить в сыворотке больного человека или вирусоносителя эти антигены: реакция преципитации в геле, реакция обратной непрямой гемагглютинации, встречный имуноелектрофорез, РИА, ИФА. Последние две реакции по своей чувствительности значительно превышают предыдущие. HBeAg можно обнаружить с помощью ИФА, РНГА, РНЗГА, РСК, a HBeAg - ИФА, РИА и других. Серологические исследования С этой целью исследуют сыворотку крови больных на наличие антител против различных антигенов вирусов гепатита В. Современные серологические методы позволяют определить в крови антитела против различных вирусных антигенов: анти-HBs, анти-НВс и анти-НВе. Найзручнышы методы, используемые, - ИФА, РИА. Однако антитела против HBSsAg можно знаиты еще с помощью реакции преципитации в геле, реакции не-HBsAg гемагглютинации подобное. Определение взаимосвязи между вирусными антигенами, которые появляются в крови больных или вирусоносителей, и соответствующими антителами IgM и IgG, которые накапливаются в сыворотке крови, является крайне важным с диагностической точки зрения, поскольку позволяет следить за динамикой болезни и прогнозировать ее течение. Эти антигены и антитела названы маркерами вирусного гепатита В. К ним, таким образом, относятся в первую очередь HBsAg, HBcAg, HBeAg, анти-HBs, анти-НВе, анти-HBs IgM и суммарный пул антител против этого антигена. HBsAg обнаруживается в организме примерно через 3-5 недель после заражения. О выздоровлении после острого гепатита В свидетельствует полное исчезновение HBsAg и появление антител (анти-HBs) в сыворотке крови. Последние могут храниться в течение всей жизни. Однако антитела против поверхностного HBsAg появляются не сразу после его исчезновения, а через некоторый промежуток времени (от 2-4 недель до 1 года). В этот период маркером гепатита выступают антитела к HBcAg и, в частности, IgM, а сам этот период называется коривським окном (от англ. Core - сердцевина). Эти антитела существуют в сыворотке не только при острой форме гепатита, но и при хронической. Не менее важным маркером является анти-НВс антитела, которые относятся к классу IgG. Эти иммуноглобулины вторичного иммунного ответа могут быть найдены в крови человека в течение всей жизни. Другим диагностическим маркером острого периода болезни является наличие HBeAg, который может циркулировать в крови до 7 недель. Его считают маркером репликации ДНК вируса гепатита В или антигеном инфекционности, потому что находят его чаще всего вместе с ДНК-полимеразой и ДНК вируса гепатита В. Хотя концентрация этих антигенов в крови ниже, чем HBsAg, они есть почти у всех больных. При остром гепатите В HBeAg можно обнаружить в крови в течение 6-8 недель. Позже там накапливаются антитела против них (анти-НВе), а они сами исчезают. Если при соответствующих исследованиях у больного выявляют HBeAg после 9-10 недели от начала заболевания, это может рассматриваться как свидетельство хронизации процесса. В таких случаях этот энзимный антиген циркулирует в крови в течение нескольких лет. Тщательное изучение антигенной строения вируса гепатита В и системы генов, которые его кодируют, привлекло внимание к вирусным полипептидов (антигенов), которые кодируются геном env, в частности, его зонами пре-S 1 и npe-S2. Считают, что наличие npe-S2 антигена в крови свидетельствует о ее высоких инфекционные свойства. В то же время у больных, которые выздоровели, в крови присутствуют антитела к этому антигену. Пре-S 1 антигены также свидетельствуют инфекционность крови, репликацию вирусов в организме, а также достаточно высокий риск возможности вертикальной передачи вируса гепатита В от матери к ребенку. Возбудители гепатитов А и Е. Таксономия. Характеристика. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика. Острая инфекционная болезнь, с лихорадкой, поражением печени. Антропоноз. Таксономия, морфология, антигенная структура: Семейство Picornaviridaeрод Hepatovirus. Типовой вид —имеет один серотип. Это РНК-содержащий вирус, просто организованный, имеет один вирусоспецифический антиген. Культивирование: Вирус выращивают в культурах клеток. Цикл репродукции более длительный, чем у энтеровирусов, цитопатический эффект не выражен. Резистентность: Устойчивостью к нагреванию; инактивируется при кипячении в течение 5 мин. Относительно устойчив во внешней среде (воде). Эпидемиология. Источник-больные. Механизм заражения — фекально-оральный. Вирусы выделяются с фекалиями в начале клинических проявлений. С появлением желтухи интенсивность выделения вирусов снижается. Вирусы передаются через воду, пищевые продукты, руки. Болеют преимущественно дети в возрасте от 4 до 15 лет. Патогенез: Обладает гепатотропизмом. После заражения репликация вирусов происходит в кишечнике, а оттуда через портальную вену они проникают в печень и реплицируются в цитоплазме гепатоцитов. Повреждение гепатоцитов возникает в результате иммунопатологических механизмов. Клиника. Инкубационный период - от 15 до 50 дней. Начало острое, с повышением т-ры и тошнотой, рвотой). Возможно появление желтухи на 5-й день. Клиническое течение заболевания легкое, без особых осложнений. Продолжительность заболевания 2 нед. Хронические формы не развиваются. Иммунитет. После инфекции - стойкий пожизненный иммунитет, связанный с IgG. В начале заболевания в крови IgM, которые сохраняются в организме в течение 4 месяцев и имеют диагностическое значение. Помимо гуморального, развивается и местный иммунитет в кишечнике. Микробиологическая диагностика. Материал для исследования - сыворотка и испражнения. Диагностика основана главным образом на определении в крови IgM с помощью ИФА, РИА и иммунной электронной микроскопии. Этими же методами можно обнаружить вирусный антиген в фекалиях. Вирусологическое исследование не проводят. Лечение. Симптоматическое. Профилактика. Неспецифическая профилактика. Для специфической пассивной профилактики используют иммуноглобулин. Иммунитет сохраняется около 3 мес. Для специфической активной профилактики – инактивированная культуральная концентрированная вакцина. Рекомбинантная генно – инженерная вакцина. Гепатит Е Антропоноз, фекально – оральным механизмом передачи. Таксономия: семейство Caliciviridae. Недавно переведен из семейства в группу гепатит Е-подобных вирусов. Структура. Вирион безоболочечный, сферический.. Геном — однонитевая плюс-РНК, которая кодирует РНК-зависимую РНК-полимеразу, папаинподобную протеазу и трансмембранный белок, обеспечивающий внедрение вируса в клетку. Эпидемиология, клиника. Основной путь передачи — водный. Инкубационный период 2—6 недели. Поражение печени, интоксикацией, желтухой. Иммунитет. После перенесенного заболевания стойкий. Микробиологическая диагностика: 1) серологический метод — в сыворотке, плазме крови с помощью ИФА определяют: антитела к вирусу (анти-HEV IgM, анти-HEV IgG); 2) молекулярно-генетический метод — применяют ПЦР для определения РНК вируса (HEV RNA) в кале и в сыворотке крови больных в острой фазе инфекции. Лечение. Симптоматическое. Беременным рекомендуется введение специфического иммуноглобулина. Профилактика. Неспецифическая профилактика - улучшение санитарно-гигиенических условий и снабжение качественной питьевой водой. Созданы неживые цельновирионные вакцины, разрабатываются рекомбинантные и живые вакцины. Возбудители гепатитов В, С, D. Таксономия. Характеристика. Носительство. Лабораторная диагностика. Специфическая профилактика. Вирус гепатита В - семейство Hepadnaviridae род Orthohepadnavirus. Морфология: ДНК-содержаший вирус сферической формы. Состоит из сердцевины, состоящей из 180 белковых частиц, составляющих сердцевинный НВс-антиген и липидсодержащей оболочки, содержащей поверхностный HBs-антиген. Внутри сердцевины находятся ДНК, фермент ДНК-полимераза, обладающая ревертазной активностью, и концевой белок НВе-антиген. Геном представлен двунитевой ДНК кольцевой формы. Культуральные свойства. Не культивируется на куриных эмбрионах, не обладает гемолитической и гемагглютинирующей активностью. ВГВ культивируется только в культуре клеток. Резистентность. Высокая к факторам окружающей среды и дезинфицирующим веществам. Вирус устойчив к длительному воздействию кислой среды, УФ-излучению, действию спирта, фенола. Антигенная структура. Сложная. В суперкапсиде вируса находится HBs-антиген, который локализован в гидрофильном слое на поверхности вириона. В формировании HBs-антигена участвуют 3 полипептида в гликозилированной форме:preSl — большой полипептид; preS2 — средний полипептид; S — малый полипептид. Эпидемиология: Развитие инфекционного процесса при попадании в кровь. Заражение происходит при парентеральных манипуляциях (инъекциях, хирургических вмешательствах), переливании крови. Патогенез и клиника заболевания. Инкубационный период 3—6 месяцев. Инфекционный процесс наступает после проникновения вируса в кровь. ВГВ из крови эндоцитозом проникает в гепатоцит. После проникновения вируса происходит достраивание плюс-нити ДНК ДНК-полимеразой до полноценной структуры. Клиническая картина характеризуется симптомами поражения печени, в большинстве случаев сопровождается развитием желтухи. Иммунитет. Гуморальный иммунитет, представленный антителами к HBs-антигену, защищает гепатоциты от вируса, элиминируя его из крови. Клеточный иммунитет освобождает организм от инфицированных гепатоцитов благодаря цитолитической функции Т-киллеров. Переход острой формы в хроническую обеспечивается нарушением Т-клеточного иммунитета. Микробиологическая диагностика. Используют серологический метод и ПЦР. Методами ИФА и РНГА в крови определяют маркеры гепатита В: антигены и антитела. ПЦР определяют наличие вирусной ДНК в крови и биоптатах печени. Для острого гепатита характерно обнаружение HBs антигена, НВе антигена и анти-HBc-IgM антитела. Лечение. Использование интерферона, интерфероногенов: виферона, амиксина, ингибитора ДНК-полимеразы, препарата аденинрибонозида. Профилактика. Исключение попадания вируса при парентеральных манипуляциях и переливаниях крови (применением одноразовых шприцев, проверкой на гепатит В по наличию HBs-антигена в крови доноров крови). Специфическая профилактика осуществляется вакцинацией рекомбинантной генно-инженерной вакциной, содержащей HBs-антиген. Вакцинации подлежат все новорожденные в первые 24 часа жизни. Длительность поствакцинального иммунитета — не менее 7 лет. Вирус гепатита Сотносится к семейству Flaviviridaeроду Hepacivirus. Морфология. Сложноорганизованный РНК-содержащим вирус сферической формы. Геном представлен одной линейной «+» цепью РНК, обладает большой вариабельностью. Антигенная структура. Вирус обладает сложной антигенной структурой. Антигенами являются: 1. Гликопротеины оболочки 2. Сердцевинный антиген НСс-антиген 3. Неструктурные белки. Культуральные свойства. ВГС не культивируется на куриных эмбрионах, не обладает гемолитической и гемагглютинирующей активностью. Резистентность. чувствителен к эфиру, УФ-лучам, нагреванию до 50С. Эпидемиология. Заражение ВГС аналогично заражению ВГВ. Наиболее часто ВГС передается при переливаниях крови, трансплацентарно, половым путем. Клиника: Часто встречаются безжелтушные формы, течение инфекции в острой форме, в 50 % случаев процесс переходит в хроническое течение с развитием цирроза и первичного рака печени. Микробиологическая диагностика: Используются ПЦР и серологическое исследование. Подтверждением активного инфекционного процесса является обнаружение в крои вирусной РНК ПЦР. Серологическое исследование направлено на определение антител к NS3 методом ИФА. Профилактика и лечение. Для профилактики – тоже, что и при гепатите В. Для лечения применяют интерферон и рибовирин. Специфическая профилактика – нет. Вирус гепатита D - дефектный вирус, не имеющий собственной оболочки. Вирион имеет сферическую форму, который состоит из однонитчатой РНК и сердцевинного HDc-антигена. Эти белки регулируют синтез генома вируса: один белок стимулирует синтез генома, другой — тормозит. Различают три генотипа вируса. Все генотипы относятся к одному серотипу. Резервуаром BFD в природе являются носители ВГВ. Заражение BFD аналогично инфицированию ВГВ. Микробиологическая диагностика осуществляется серологическим методом путем определения антител к BFD методом ИФА. Профилактика: все те мероприятия, которые используют для профилактики гепатита В. Для лечения используют препараты интерферона. Вакцина против гепатита В защищает и от гепатита D. 33. Методы выделения чистых культур |