Билеты Микробиология. 1. Бактериофаги (фаги)
 Скачать 0.53 Mb.
|
|
Чистой культурой называется популяция бактерий одного вида или одной разновидности, выращенная на питательной среде. Многие виды бактерий подразделяют по одному признаку на биологические варианты — биовары. Биовары, различающиеся по биохимическим свойствам, называют хемоварами, по антигенным свойствам — сероварами, по чувствительности к фагу — фаговарами. Культуры микроорганизмов одного и того же вида, или биовара, выделенные из различных источников или в разное время из одного и того же источника, называют штаммами, которые обычно обозначаются номерами или какими-либо символами. Чистые культуры бактерий в диагностических бактериологических лабораториях получают из изолированных колоний, пересевая их петлей в пробирки с твердыми или, реже, жидкими питательными средами. Колония представляет собой видимое изолированное скопление особей одного вида микроорганизмов, образующееся в результате размножения одной бактериальной клетки на плотной питательной среде (на поверхности или в глубине ее). Колонии бактерий разных видов отличаются друг от друга по своей морфологии, цвету и другим признакам. Чистую культуру бактерий получают для проведения диагностических исследований — идентификации, которая достигается путем определения морфологических, культуральных, биохимических и других признаков микроорганизма. Морфологические и тинкториальные признаки бактерий изучают при микроскопическом исследовании мазков, окрашенных разными методами, и нативных препаратов. Культуральные свойства характеризуются питательными потребностями, условиями и типом роста бактерий на плотных и жидких питательных средах. Они устанавливаются по морфологии колоний и особенностям роста культуры. Биохимические признаки бактерий определяются набором конститутивных и индуцибельных ферментов, присущих определенному роду, виду, варианту. В бактериологической практике таксономическое значение имеют чаще всего сахаролитические и протеолитические ферменты бактерий, которые определяют на дифференциально-диагностических средах. При идентификации бактерий до рода и вида обращают внимание на пигменты, окрашивающие колонии и культуральную среду в разнообразные цвета. Например, красный пигмент образуют Serratia marcescens, золотистый пигмент — Staphylococcus aureus (золотистый стафилококк), сине-зеленый пигмент — Pseu-domonas aeruginosa. Для установления биовара (хемовара, серовара, фаготипа) проводят дополнительные исследования по выялвениб соответствующего маркера – определению фермента, антигена, чувствительности к Фанам. Методы выделения чистых культур бактерий. Универсальным инструментом для производства посевов является бактериальная петля. Кроме нее, для посева уколом применяют специальную бактериальную иглу, а для посевов на чашках Петри — металлические или стеклянные шпатели. Для посевов жидких материалов наряду с петлей используют пастеровские и градуированные пипетки. Первые предварительно изготовляют из стерильных легкоплавких стеклянных трубочек, которые вытягивают на пламени в виде капилляров. Конец капилляра сразу же запаивают для сохранения стерильности. У пастеровских и градуированных пипеток широкий конец закрывают ватой, после чего их помещают в специальные пеналы или обертывают бумагой и стерилизуют. При пересеве бактериальной культуры берут пробирку в левую руку, а правой, обхватив ватную пробку IV и V пальцами, вынимают ее, пронося над пламенем горелки. Удерживая другими пальцами той же руки петлю, набирают ею посевной материал, после чего закрывают пробирку пробкой. Затем в пробирку со скошенным агаром вносят петлю с посевным материалом, опуская ее до конденсата в нижней части среды, и зигзагообразным движением распределяют мате риал по скошенной поверхности агара. Вынув петлю, обжигают край пробирки и закрывают ее пробкой. Петлю стерилизуют в пламени горелки и ставят в штатив. Пробирки с посевами надг писывают, указывая дату посева и характер посевного материала (номер исследования или название культуры). Посевы «газоном» производят шпателем на питательный агар в чашке Петри. Для этого, приоткрыв левой рукой крышку, петлей или пипеткой наносят посевной материал на поверхность питательного агара. Затем проводят шпатель через пламя горелки, остужают его о внутреннюю сторону крышки и растирают материал по всей поверхности среды. После инкубации посева появляется равномерный сплошной рост бактерий. Формы инфекции Формы инфекции, или инфекционного процесса, чрезвычайно разнообразны и носят различные наименования в зависимости от природы возбудителя, его локализации в макроорганизме, путей распространения и других условий. Экзогенная инфекция возникает в результате заражения человека патогенными микроорганизмами, поступающими из окружающей среды с пищей, водой, воздухом, почвой, выделениями больного человека, реконвалесцента и микробоносителя. Эндогенная инфекция вызывается представителями нормальной микрофлоры - условно-патогенными микроорганизмами самого индивидуума. Она часто возникает при иммунодефицитных состояниях организма. Аутоинфекция - разновидность эндогенной инфекции, которая возникает в результате самозаражения путем переноса возбудителя (обычно руками самого больного) из одного биотопа в другой. Например, из полости рта или носа на раневую поверхность. В зависимости от локализации возбудителя различают очаговую инфекцию, при которой микроорганизмы локализуются в местном очаге и не распространяются по организму. Например, при фурункулезе стафилококки находятся в волосяных фолликулах, при ангине стрептококки обнаруживаются в миндалинах, при конъюнктивитах возбудитель локализуется на конъюнктиве глаза и т.д. Однако очаговая инфекция при малейшем нарушении равновесия между макро- и микроорганизмами может перейти в генерализованную форму, при которой возбудитель распространяется по организму лимфогенным или гематогенным путем. В последнем случае развивается бактериемия или вирусемия. Кровь в таких случаях является механическим переносчиком возбудителя, поскольку последний в ней не размножается. Наиболее тяжелой генерализованной формой инфекции является сепсис. Это состояние характеризуется размножением возбудителя в крови при резком угнетении основных механизмов иммунитета. При сепсисе или септицемии главным местом размножения микроорганизмов является кровь. Близким к сепсису является циклическое размножение в крови некоторых простейших (малярийный плазмодий, трипаносомы) при соответствующих протозойных инвазиях. При возникновении гнойных очагов во внутренних органах начинается септикопиемия, а при массовом поступлении в кровь бактерий и их токсинов развивается бактериальный или токсико-септический шок. Моноинфекция вызывается одним видом микроорганизмов, в то время как смешанная инфекция - двумя или несколькими видами. Наиболее тяжело протекают смешанные инфекции. Они могут быть вызваны разными бактериями: стафилококком, протеем, синегнойной палочкой, как это часто наблюдается при внутрибольничной хирургической инфекции. К смешанным (микст) инфекциям относятся многие респираторные заболевания, вызванные бактериями, вирусами, микоплазмами в разнообразных сочетаниях . От смешанных инфекций следует отличать вторичную инфекцию, при которой к первоначальной, основной, уже развившейся болезни присоединяется другая, вызываемая новым возбудителем. Например, при заболевании брюшным тифом может возникнуть пневмония, вызванная другими бактериями или вирусами. Реинфекцией называют заболевание, возникающее после перенесенной инфекции в случае повторного заражения тем же возбудителем, например реинфекции при дизентерии, гонорее, при других болезнях, перенесение которых не завершается образованием напряженного иммунитета. В тех случаях, когда инфицирование макроорганизма тем же возбудителем происходит до выздоровления, возникает суперинфекция. Рецидивом называют возврат клинических проявлений болезни без повторного заражения за счет оставшихся в организме возбудителей, например рецидивы при рожистом воспалении, остеомиелите, возвратном тифе. По продолжительности взаимодействия возбудителя с макрооргазмом, а также по клиническим и патогенетическим признакам различают острые и хронические инфекции. Острые инфекции фотекают в сравнительно короткие сроки. Они характеризуются определенными для данного заболевания патогенезом и клиническими симптомами. В ряде случаев острые инфекции переходят в хронические, продолжительность которых колеблется от нескольких месяцев до многих лет. Хронические инфекции характеризуются длительным пребыванием микроорганизмов в организме, или персистенцией. При острых инфекциях возбудитель вскоре после выздоровления обычно исчезает из организма. При хронической инфекции он находится в организме в течение более длительных сроков и может выделяться в окружающую среду. Состояние, при котором выделение возбудителя продолжается после клинического выздоровления больного, называют микробоносительством (бактерионосительство, вирусоносительство). Чаще всего эти состояния формируются при слабой напряженности постинфекционного иммунитета, например, после перенесения кишечных инфекций (брюшной тиф, дизентерия и др.). Микробоносительство может развиваться также у здоровых лиц, контактировавших с больными или носителями соответств Инфекция – это совокупность биологических реакций, которыми макроорганизм отвечает на внедрение возбудителя. Диапазон проявлений инфекций может быть различным. Крайними формами проявления инфекций являются: 1) бактерионосительство, персистенция, живая вакцинация; 2) инфекционная болезнь; имеются клинические проявления инфекции, эти реакции могут привести к летальному исходу. Инфекционный процесс – ответная реакция коллектива популяции на внедрение и циркуляцию в ней микробных агентов. 1.Экзогенная инфекция возникает в результате заражения человека патогенными микроорганизмами. Поступающими из окружающей среды с пищей. Водой. Воздухом. Почвой, выделениями больного человека, реконвалесцента и микробоносителя. 2.Эндогенная инфекция вызывается представителями нормальной микрофлоры – условно – патогенными м/о самого индивидуума. Она часто возникает при иммунодефицитных состояниях организма. Иногда болезнь может протекать без клинических признаков вследствие наступившего равновесия между макро- и микроорганизмом. При таком течении заболевания часто возможет возврат симптомов той же болезни. Такое явление называют рецидив, а периоды между рецидивами называют ремиссия. Рецидивы характерны для инфекционной анемии лошадей, сальмонеллезов и других инфекционных заболеваний. 3.Реинфекция (от ре... и инфекция), повторное заражение человека или животных возбудителем инфекционного заболевания. От Р. отличают обострение болезни после кажущегося выздоровления, что имеет значение для медицинской тактики в эпидемическом очаге .В некоторых случаях макроорганизм переболевает какой-либо инфекционной болезнью, освобождается от возбудителя, но не приобретает стойкого иммунитета. При повторном попадании микроорганизма возникает повторное заболевание, в таком случае говорят о реинфекции. 4.Суперинфекция-повторное заражение новым инфекционным заболеванием в условиях незавершившегося инфекционного заболевания, вызванное другим микроорганизмом, обычно устойчивым к лекарственному веществу, которое применялось для лечения первичной инфекции. Возбудителем новой инфекции может быть один из тех микроорганизмов, которые в норме являются безвредными обитателями человеческого организма, но становятся патогенными при удалении других микроорганизмов в результате приема лекарственных веществ; или же он может являться устойчивой разновидностью возбудителя первичной инфекции.Повторное заражение организма, у которого не закончилось основное заболевание, называют суперинфекцией. Суперинфекция встречается при многих инфекционных болезнях, протекающих в острой или хронической форме Периоды развития инфекционной болезни. 1.инкубационный, это промежуток времени от момента проникновения микробов в организм до проявления первых признаков болезни (продолжительность составляет от нескольких дней, месяцев до нескольких лет); 2.продромальный(предвестника болезни) это появление первых, не всегда специфических для данной болезни симптомов (продолжительность от нескольких часов до нескольких дней); 3.период развития основных клинических признаков (разгара болезни) появляются основные признаки, характерные для данной болезни (афты при ящуре, параличи при бешенстве, расслабление мышц при ботулизме), а также угнетение, высокая температура, нарушение дыхания, пищеварения и т.д. 4.выздоровления (реконвалесценции) – постепенное восстановление физиологических функций организма. Клиническое выздоровление при многих инфекционных болезнях не совпадает по времени с освобождением организма от возбудителя. Онкогенные вирусы РНК-содержащие: семейство Retroviridae. ДНК-содержащие: семейства Papillomaviridae,Polyomaviridae,Adenoviridae12, 18, 31,Hepadnaviridae,Herpesviridae,Poxviridae Семейство Retroviridae включает 7 родов. Онковирусы являются сложноорганизованными вирусами. Вирионы построены из сердцевины, окруженной липопротеиновой оболочкой с шипами. Размеры и формы шипов, а также локализация сердцевины служат основой для подразделения вирусов на 4 морфологических типа (А, В, С, D), а также вирус бычьего лейкоза.Капсид онковирусов построен по кубическому типу симметрии. В него заключены нуклеопротеин и фермент ревертаза. Ревертаза обладает способностью транскрибировать ДНК. Геном – 2 идентичные цепи РНК. Культивирование вирусов: не культивируются на куриных эмбрионах, культивируются в организме чувствительных животных, в культурах клеток. Репродукция вирусов: проникают в клетку путем эндоцитоза. 3 этапа: синтез ДНК, на матрице РНК; ферментативное расщепление матричной РНК; синтез комплементарной нити ДНК на матрице первой нити ДНК. К семейству Retroviridae относится примерно 150 видов вирусов, вызывающих развитие опухолей у животных, и только 4 вида вызывают опухоли у человека:HTLV-1,HTLV-2, ВИЧ-1,ВИЧ-2. Вирусы Т-клеточного лейкоза человека К семейству Retroviridae родуDeltaretrovirus относятся вирусы, поражающиеCD4 Т-лимфоциты, для которых доказана этиологическая роль в развитии опухолевого процесса у людей:HTLV-1 иHTLV-2 Вирус HTLV-1является возбудителем Т-клеточного лимфолейкоза взрослых. Он является экзогенным онковирусом, который, в отличие от других онковирусов, имеет два дополнительных структурных гена:taxиrех. Продукт tax-гена действует на терминальные повторыLTR, стимулируя синтез вирусной иРНК, а также образование ИЛ-2 рецепторов на поверхности зараженной клетки. Продуктrex-гена определяет очередность трансляции вирусных иРНК. HTLV-2 был изолирован от больного волосисто-клеточным лейкозом. Оба вируса передаются половым, трансфузионным и трансплацентарным путями. Семейство Papillomaviridae (100 типов)– вирус папилломы человека, собак. Вызывают инфекцию в клетках плоского эпителия. Доброкачественные папилломы в области половых органов, на коже, на слизистых дыхательных путей. Типа 2,5,8-рак кожи,опухоли ротовой полости; 16,18-рак шейки матки, влагалища; 6,11-инфекция половых и респираторных органов Генно-инженерная вакцина: 1.Гардо Сил(поверхностные белки 16, 18 типов) Доза: 0----6 лет 2.Церварикс(18,16 тип поверхн. Белков) Семейство Polyomaviridae – вакуолизирующий вирус обезьянSV-40.Вирус полиомы человека. Семейство Adenoviridae – аденовирусы, особенно серотипы 12,18,31 – индуцируют саркомы и трансформируют культуры клеток. Семейство Poxviridae – вирусы фибромы-миксомы кролика, вирус Ябы, вызывающий развитие опухолей, вирус контагиозного моллюска. Семейство Herpesviridae – лимфомы, карциномы. Онкогенез у человека связан с вирусом простого герпеса 2 типа (ВПГ-2) и вирусом Эпштейна-Барр (ВЭБ). Семейство филовирусов (Filoviridae) Семейство Filoviridae Род Marburgvirus Род Ebolavirus (лат.ilum - нить) вирус Эбола - выделен в 1976 г. из крови больной в Южном Судане.. Структура и химический состав. РНК-содержащие вирионы имеют форму длинных извитых нитей, иногда с ответвлениями. Их длина может достигать 1200-4000 нм, ширина - 70-100 нм. Нуклео-капсид спирального типа симметрии, снаружи окружен липид-содержащей оболочкой, суперкапсида нет Стадии репродукции: 1Адсорбция 2Проникновение 3Депротеинезация 4Репликация 5Сборка в цитоплазме 6Выход(почкование) Культивирование- в почках обезьян, на мышах
Патогенез. Вирус Эбола вызывают у человека лихорадку, сопровождающуюся тяжелой интоксикацией, сыпью, подкожными и внутренними кровоизлияниями, массивными кровотечениями с поверхности слизистых оболочек дыхательного и пищеварительного трактов. При этом возникают участки некрозов в печени, селезенке, лимфатических узлах, поджелудочной железе, нарушаются процессы свертывания крови, резко уменьшается количество тромбоцитов. Летальность достигает 50%. Эпидемиология. Заболевание эндемично для некоторых африканских стран. Резервуаром вируса являются обезьяны. Возбудители передаются от обезьян, а также от человека к человеку аэрогенным путем через слизистые оболочки и поврежденную кожу при контакте с кровью и выделениями больных. Инкубационный период 3- 9 дней Специфическая профилактика не разработана. Лабораторная диагностика проводится путем выявления вируса в крови больных при электронно-микроскопическом исследовании, а также путем заражения морских свинок или культуры клеток vero. ЦПД не развивается. Вирусный антиген можно обнаружить с помощью реакции иммунофлюоресценции Семейство Аdепоviridае(для грызунов) Сильноонкогенные-12,18,31 Слабоонкогенные-3,4,7,8,11,14,16,21 В экспериментальных условиях некоторые серотипы способны проявлять онкогенную активность по отношению к новорожденным сирийским хомячкам. Онкогенными являются 13 видов аденовирусов человека, из которых три — высокоонкогенны. Аденовирусы имеют сферическую форму, диаметр вириона —, 70—90 нм. Содержат ДНК, окруженную капсидом. Суперкапсид отсутствует. Культивирование-ph от 5-9, чувствителен в дезосредствам. Антропонозное заболевание Вирусоносительство от 10 до 50 дней Пути передачи:Бытовой, воздушно-капельный, алиментарный Патогенез: Входные ворота---лимфатические узлы----кровь---разные органы(чаще поражение дыхательных путей, ларингит. Иммунитет: гуморальный, клеточный, нестойкий Диагностика: экспресс-(смыв, мокрота), ИФА, ПЦР, РИФ,вирусологический Лечение: Арбидол, ДНКазу( в виде капель), антибиотики, вакцина живая и аттенуированная. Эти вирусы при введении их в большой дозе подкожно, внут-рилегочно или в мозг новорожденных хомячков в 100 % случаев индуцируют образование сарком. Аденовирусы являются лучшеймоделью для изучения вирусного канцерогенеза, хотя в природных условиях они, по-видимому, не имеют отношения к спонтанному образованию опухолей у естественного хозяина (человека). 34 билет: 1) биоценоз полости рта Нормальная микрофлора полости рта - совокупность микроорганизмов, наиболее часто выделяемых из организма здорового человека, колонизирующие различные биотопы и не причиняющие ему видимого вреда. Среди микробов полости рта встречаются аутохтонные(резидентная) — специфические для данного биотопа виды, аллохтонные (транзиторная)— иммигранты из других биотопов хозяина (носоглотки, иногда кишечника), а также виды — иммигранты из окружающей среды (так называемая заносная микрофлора). Аутохтонную микрофлору подразделяют на облигатную(вейлонеллы, пептострептококки актиномицеты, фузобактерии, бактерициды и трепонемы) и факультативную, в составе которой чаще встречаются условно-патогенные бактерии( стрептококки, стафилококки, неиссерии, лактобакетрии, Кандиды). Аллохтонная: облигатная ( клостридии) и факультативные (эшерихии, клебсиеллы) В состав нормальной микрофлоры полости рта входят бактерии, вирусы, грибы и простейшие. Наиболее многочисленными являются бактериальные биоценозы, которые играют основную роль в поддержании постоянства данного биотопа. Микробиоценоз - совокупность микробов, сформировавшаяся в процессе эволюции. Микроорганизмы попадают в полость рта с пищей, водой и из воздуха. Богатство пищевых ресурсов, постоянная влажность, оптимальные значения рН и температуры создают благоприятные условия для адгезии, колонизации различных микробных видов. |