1. Типы биотических взаимоотношений макро и микроорганизма
 Скачать 232.49 Kb.
|
|
78.Лабораторная диагностика колибактериоза. Колибактериоз – острая инфекционная болезнь молодняка сельскохозяйственных животных, характеризующаяся главным образом диареей. Классификация возбудителя сем: Enterobacteriaceae род: Escherichia вид: E. сoli (энтеропатогенные штаммы) Восприимчивы все виды сельскохозяйственных животных, включая птиц и пушных зверей, главным образом, молодняк; болеет человек. Бактериологический метод: материал для исследования: при жизни – кал; посмертно – труп целиком, отрезок тонкого кишечника, брыжеечные лимфатические узлы, паренхиматозные органы, головной мозг. Микроскопия: методы окраски: простой метод, по Граму; микрокартина: полиморфные палочки по 3 мкм, располагаются одиночно, реже попарно; грамотрицательные; спор не образуют; капсулу не образуют; неподвижны. культивирование: посев на питательные среды : МПА, МПБ, дифференциально-диагностические среды (среда Эндо, среда Левина и др.); особенности выделения возбудителя: факультативные анаэробы; оптимальная температура 37oС; срок культивирования 18-20 часов. культуральные свойства: на МПБ – интенсивное помутнение, образование легко разбивающегося осадка; на МПА – сочные, круглые, с ровными краями, серо-белого цвета колонии; на МПА с кровью - сочные, круглые, с ровными краями; на среде Эндо – ярко-красные колонии, на среде Левина – темно-фиолетовые или черные колонии. биохимические свойства: обладает высокой сахаролитической активностью; для выявления проводят посевы на «цветной ряд» (среды Гиса); ферментируют с образованием кислоты и газа – глюкозу, лактозу, маннит, не расщепляют сахарозу; желатин не разжижают, сероводород не образуют, образуют индол, дают положительную реакцию с метиленовым красным (ярко-розового цвета), отрицательная реакция Фогес-Проскауэра. биопроба: внутримышечно заражают выделенной микробной культурой белых мышей и цыплят. Серологический метод: используют РА (пробирочная и на стекле) для серотипизации полученного антигена (микробной культуры) с поли- и моновалентными коли-сыворотками; используют реакцию иммунофлюоресценции. 79.Возбудитель столбняка Столбняк-острое инфекционное заболевание с контактным механизмом передачи возбудителя, характеризующееся поражением нервной системы и проявляющееся тоническим напряжением скелетной мускулатуры и генерализованными судорогами. Таксономия: Семейство: Bacillaceae Род: Clostridium Вид: Cl. tetani Болеть могут все теплокровные животные, включая человека. Больной не заразен для окружающих. Эпидемиологических мероприятий в очаге болезни не проводят. Иммунитет после болезни не развивается. Выздоровление после клинической формы столбнячной инфекции не обеспечивает защиты от нового заболевания. Возбудитель столбняка-грамположительная палочка, являющаяся спорообразующим облигатным анаэробом, то есть живущая в бескислородной среде. Это подвижная крупная тонкая палочка с закругленными концами длиной 4—8 мкм и шириной 0,3—0,8 мкм, имеющая до 20 длинных жгутиков. Возбудитель столбняка относится к категории убиквитарных (вездесущих), но вместе с тем условно-патогенных микроорганизмов. Является обычным обитателем кишечника человека и животных, где он живёт и размножается, не причиняя вреда носителю. В присутствии кислорода и температуре не ниже 4 °C образует споры. Споры устойчивы к внешнему воздействию: выдерживают нагревание до 90 °C в течение 2 часов, при кипячении погибают только через 1—3 часа, в сухом состоянии переносят нагревание до 150 °C, в соленой морской воде живут до 6 месяцев. В испражнениях, почве, на различных предметах сохраняются больше 10 лет. При отсутствии кислорода, температуре 37 °C и достаточной влажности споры прорастают в малоустойчивую вегетативную форму. Возбудитель образует столбнячный экзотоксин — один из сильнейших бактериальных ядов, уступающий по силе лишь ботулиническому токсину. Токсин разрушается при нагревании, воздействии солнечного света, щелочной среды. Не всасывается через слизистую оболочку кишечника, в связи с чем безопасен при проглатывании. Культуральные свойства: требовательны к питательным средам (белок), в среде Китта-Тароци дают равномерное помутнение; на кровяном агаре колонии 4-6 мм, круглые, с неровным краем в виде пушинок с плотным коричневым центром (S формы), чечевицеобразные (R формы). строгий анаэроб; оптимальная температура 37°C; замедленный рост 24-36 часов. Биохимические свойства: инертны, сахара не расщепляют (иногда глюкозу, лактозу, сахарозу; протеолитическая активность слабая; медленно свертывают молоко (4-7 дней) и разжижают желатин; образуют желатиназу и рениноподобный фермент, восстанавливают нитраты. Антигенная структура: О и Н антигены; Н-типоспецифические, различают 10 сероваров, но все выделяют одинаковый токсин; серотипирование в практике не применяется. Бактериологическое исследование - исследуется материал, взятый из раны: - гной - кусочки тканей - инородные тела - тампоны, закладываемые в рану при перевязке - перевязочный материал, содержащий выделения из раны - в случаях столбняка после родов или аборта берут на исследование выделения из влагалища и матки - при исследовании трупа также берут материал из раны, если она имеется, из различных воспалительных очагов и старых рубцов. Микробиологическая диагностика включает в себя следующие 3 этапа: 1) бактериоскопия исходного материала; 2) посев для выделения возбудителя и его идентификации; 3) обнаружение столбнячного токсина. На первом этапе исследования производят микроскопию нативного материала. Приготовить из растертого материала, а также из гноя и отделяемого ран мазки и окрасить их по Граму. Серологическая диагностика и биопроба Для постановки реакции нейтрализации на животных экстракт исследуемого материала вводят внутримышечно 2 мышам по 0,5 мл экстракта, а еще двум мышам те же дозы с противостолбнячной сывороткой. В зависимости от количества токсина симптомы столбняка у животных развиваются на первые или вторые сутки. У животных, получивших токсин с противостолбнячной сывороткой симптомы не появляются, что свидетельствует о наличии в исследуемом материале столбнячного токсина. Одновременно с постановкой реакции нейтрализации производят посев растертого материала в 2 флакона или 2 пробирки с питательной средой (бульон Мартена, бульон Вейнберга) под слоем вазелинового масла. Перед посевом из среды удаляют кислород путем кипячения 15 мин, а затем охлаждают до 40-50 °С и в нее добавляют 0,5 % глюкозы. После культивирования при температуре 35 °С на 2-е, 4-е, 6-е и 10-е сутки микроскопируют мазки из посевов и исследуют культуральную жидкость на наличие столбнячного токсина. Для этого ставят реакцию нейтрализации с противостолбнячной сывороткой. При обнаружении в посеве столбнячного токсина и наличии грамположительных палочек с крупными спорами дают положительный ответ. Патогенез: Инкубационный период 5-14 дней. При анаэробных условиях в ране споры прорастают и выделяют экзотоксин, который по нейрогенным, гемотогенным, лимфогенным путям попадает в ЦНС (спинной мозг, продолговатый мозг, ретикулярную формацию ствола), вызывая параличи вставочных нейронов рефлекторных дуг спинного и продолговатого мозга. Вырабатываемые в мотонейронах импульсы поступают к мышцам непрерывно, вызывая тоническое напряжение скелетных мышц. Поражается симпатическая нервная система: повышается артериальное давление, тахикардия, спазм сосудов, гемолиз. Иммунитет: а) постинфекционный не создается, т.к. микродозы токсина, вызывающие заболевание, недостаточны для выработки иммунитета; б) поствакцинальный (после введение анатоксина) – прочный, длительный (4-5 лет). Лечение а) неспецифическое: первичная обработка раны, противосудорожные препараты, антибиотики, борьба с нарушением водно-электролитного баланса. б) специфическое: антитоксическая противостолбнячная лошадиная сыворотка по схеме или иммуноглобулин. 80.см.85 81. Лабораторная диагностика бруцеллеза.(смотри листок) Бруцеллёз - это инфекционное заболевание, вызываемое бактериями рода Brucella. Эта инфекция поражает, главным образом, животных, в том числе коз, овец, верблюдов, свиней, лосей, оленей, крупный рогатый скот и собак. B. abortus (крс) - легкие или умеренные симптомы, с большой вероятностью хронизации B. canis (собаки) - часто бывает рвота и диарея B. suis (свиньи) - абсцессы в разных органах B. melitensis (человек) - серьезные симптомы, которые могут привести к инвалидности. Мелкие Гр– коккобактерии размером 0,5-0,7х0,6-1,5 мкм. Также могут быть палочковидной формы; в мазках обычно расположены беспорядочно. Жгутиков не имеют. Спор не образуют. Свежевыделенные штаммы могут образовывать нежную капсулу при культивировании на средах, содержащих 10% иммунной сыворотки барана или лошади, а также при выращивании на куриных эмбрионах. Требовательны к питательным средам. Для выращивания обычно применяют триптозный, триптозо-казеиново-соевый и кровяной (5% овечьей крови) агары; оптимальная среда для культивирования - печёночный агар Хеддльсона. Выделяемые из организма больных они размножаются очень медленно, рост может быть обнаружен только через 1–3 недели после посева исходного материала. Строгие аэробы. Лабораторная диагностика Проводится бактериологическим и серологическим методами. Материалом для бактериологического исследования служат кровь, испражнения и моча больных, иногда – спинномозговая жидкость. Выделением возбудителя занимается специальная режимная лаборатория. Образцы инкубируют в МПБ или бульоне Мартена (можно использовать соевый бульон) при 37°С. При проведении исследования засевают 2 порции среды и в одной создают повышенную концентрацию СО. Через 4-5 сут наблюдают рост бруцелл, нередко в виде мелких колоний, вкрапленных в тяжи фибрина; среда остаётся слегка мутной или прозрачной. После пересева на твёрдые среды отмечают характерный рост колоний, из которых отвивают чистые культуры с последующими идентификацией биохимических свойств, определением способности расти на средах с добавлением некоторых анилиновых красителей (бактериостатический метод Хеддльсона) и определением биотипа реакциями агглютинации. Серологические исследования Реакция агглютинации (реакция Райта) - один из основных методов диагностики бруцеллёза. Динамика реакции может быть различной, для неё характерно колебание титров в течение суток; положительная реакция с первого дня заболевания; наиболее высокие титры отмечают через 1-2 мес. Для получения адекватных результатов необходимо использовать негемолизированную сыворотку и Аг, приготовленный из S-форм бруцелл (применять Аг диссоциированных форм нельзя); в эндемичных очагах, вызванных Brucella melitensis, рекомендуют применять гомологичный Аг. Следует помнить, что для реакции Райта характерны проагглютинационные зоны, или прозоны (отсутствие агглютинации в первых разведениях и чёткое её проявление в более высоких разведениях сыворотки). Часто применяют микрометод реакции агглютинации на стекле (реакция Хеддльсона). В острой фазе заболевания диагностическую ценность имеет иммуноферментный метод, выявляющий IgM в сыворотке больного. Выявление неполных AT (реакция Кумбса) с применением антиглобулиновой сыворотки. Для диагностики, особенно при отрицательных результатах бактериологических и серологических исследований, используют аллергические кожные пробы (проба Бюрне), обычно положительные у 70-85% пациентов к концу 1 мес заболевания. В качестве Аг применяют бруцеллин (мелитин, абортин) - протеиновый экстракт культуры бруцелл. Пробу также применяют для проведения эпидемиологических обследований; бывает положительной после вакцинации. Для выявления возбудителя в молоке широко применяется кольцевая проба Банга. Биопроба: заражают подкожно морских свинок, белых мышей. 82. Лабораторная диагностика стрептококкозов. Классификация возбудителей: Сем. Streptococcaceae.Род. Streptococсus, включает 17 серологических групп Виды. Str.pyogenes (гнойно-воспалительный процессые) Str. Ebui (мыт у лошадей) Str. Agalactiiae (мастит) Str. Disgaiactiae (стрептококковый полиартрит ягнят) Str. Sooepidemicus (стрептококковая септицемия птиц). Патогенез и факторы вирулентности: многие патогенные стрептококки относятся к нормальной микрофлоре кожи и слизистых оболочек и проявляют свою патогенность при снижении общей резистентности; -образуют экзотоксины – гемолизин, лейкоцидин, летальный некротоксин; -продуцируют ферменты – гиалуронидаза, фибринолизин, ДНК-азу, РНК-азу, нейрамидазу и др; -образуют термостабильные эндотоксины. Методы диагностики. Бактериологический метод: Материал для исследования: -при жизни – гной, молоко, кровь, кал; -посмертно – пораженные органы. Микроскопия: -методы окраски: простой метод по Граму; Микрокартина: шаровидные клетки до 1 мкм, располагающиеся в короткие и длинные цепочки; -грамположительные; -спор не образуют; -капсулу не образуют; -неподвижны. Культивирование: -посев на питательные среды: МПА и МПБ, с сывороткой крови, с сахаром, с кровью; Особенности выделения возбудителя: -факультативные анаэробы; -оптимальная температура 37oС; -срок культивирования 18-20 часов; Культуральные свойства: -на плотных средах – мелкие, прозрачные с ровным краем колонии; -на жидких средах – незначительное помутнение, крошковидный осадок. Биохимические свойства: -ферментируют углеводы – глюкозу, сахарозу и др. (без газа); -не обладает протеолитическими свойствами; -на кровяном МПА вызывают гемолиз. Биопроба: заражают подкожно белых мышей, кроликов. Серологические методы: применяют реакцию преципитации для типизации выделенных культур. 83.Пастериллёз. Pasteurella aеrogenes – обитатель жкт у свиней. P. urea – у лошадей вызывает атрофический ренит. P. pneumothorica – возбудитель энтозоотической болезни мышей и др. грызунов, хар. Поражением органов дыхания и образованием абсцессов. P. multocida – возб. геморрагической септицемии, холеры птиц и легочных форм пастереллёза. P. haemolytica – возб. пневмонии крс, овец, септицемии телят. У коров и свиней вызывает аборты. (см. 72 вопрос) |