Бактериальной клетки. Основные морфологические формы бактерий и методы их изучения. Принципы классификации бактерий по Берджи
 Скачать 3.01 Mb.
|
|
Методы культивирования Так как они являются облигатными внутриклеточными паразитами, то не растут на питательных средах и поэтому для их культивирования используются теже методы, что и культивирования вирусов: 1.Заражение культуры тканей. 2.Культивирование в развивающихся куриных эмбрионах. 3.Культивирование в организме экспериментальных животных. 4.Размножение в организме эктопаразитов. Заболевания, вызываемые риккетсиями неоднородны Взаимодействие риккетсий с клеткой 1.Адгезия на рецепторах чувствительных клеток – это эндотелиальные клетки капилляров. 2. В месте адгезии возникает инвагинация и риккетсии попадают в клетку, путем пиноцитоза, в составе вакуоли, стенки которой образованы мембраной клетки. В дальнейшем одни продолжают свой цикл внутри вакуоли, а другие – свободно лежат в цитоплазме. После этого они подрастают и делятся обычным бинарным делением (форма А, В, С), а форма Д размножается путем дробления в результате образуются формы А, В, С. Далее происходит разрыв мембраны клетки и риккетсии попадают в межклеточное пространство с тем, чтобы заражать новые клетки. Классификация. термин риккетсии объединяет группублизкородственных организмов, которые делятся на три группы L, B, G. В свою очередь L делится на подгруппы L1, L2 . L1 подгруппа семейство Rickettsiaceae которое делится на два триба: триб – Ehrlichieae и триб – Rickettsia Триб Ehrlichiaeae включает род, Ehrlichiea, который делится на виды canis и sennetsu. Триб Rickettsia включает род, который в свою очередь делится на 2 группы: 1группа – это группа тифов. Сюда относятся Rickettsia prowazekii – возбудители эпидемического сыпного тифа и Rickettsia typhi – возбудители крысино-блошиного тифа. 2 группа – это группа пятнистых лихорадок или группа клещевых риккетсиозов. Сюда относят много видов. Назовем основные: Rickettsia rickettsii – возбудители пятнистой лихорадки скалистых гор и Rickettsia conori - возбудители средиземноморской лихорадки (несколько лет назад у наших соседей в Астрахане была вспышка этого заболевания.). Подгруппа L2 включает семейство Bartonellaceae, род Bartonella - два вида Bartonella quintana – возбудители траншейной или 5- дневной лихорадки и Bartonela hensele – вызывает болезнь кошачьих царапин. Следующая группа – род Coxiella и вид Coxiella burnetii – возбудители Ку - лихорадки (встречается в Саратовской области.) Группа B – у человека заболеваний не вызывает. Морфология носит полиморфный характер. Различают 4 формы: Форма А – кокковидные, овальные клетки, размером О,3- О,4 мкм. Форма В – палочковидные – 1-1,8 мкм. Форма С – бациллярные – 3 – 5 мкм. Форма Д – нитевидные (ветвящиеся) – 10 – 40 мкм. При этом формы А и В встречаютсяпри остром течении заболевания, а С и Д лишь при начальных стадиях развития, либо при хронических формах. При обострении заболевания формы С и Д начинают усиленно размножаться и превращаться в В и А. Сыпной тиф - R prowazekii. !!!!!!! Основным источником эпидемического тифа является человек. Он способен передаваться от больного человека - здоровому через укусы вшей (платяные). Эта особенность делает его широко распространенным (там, где есть вшивость). Вошь заражается при сосании крови больного. Во время сосания вошь прокалывает кожу хоботком. Риккетсии проникают в эпителиальные клетки кишечника, размножаются в них в большом количестве, так что клетки разрушаются, а риккетсии выделяются с экскрементами. Человек заражается при втирании фекалий с риккетсиями или при попадании раздавленной вши в ранки от расчесов. У вшей риккетсии вызывают смертельный риккетсиоз, они погибают через 2 – 2,5 недели. У человека риккетсии попадают в кровь и разносятся по всему организму, избирательно поражая эндотелиальные клетки прекапиллярных разветвлений артерий различных органов, что проявляется в виде деструктивно-пролиферативного эндопериваскулита и приводит к резкому расстройству периферического кровообращения и глубоким нарушениям тканей. Особенно тяжелые последствия наблюдаются при поражении мозговой ткани, а также эндотелия капилляров надпочечников, сердечной мышцы. К таким нарушениям присоединяется интоксикация эндотоксинами и токсическими белками. Инкубационный период 10 - 12 дней. Далее наступает резкое повышение температуры, появляется состояние бреда, иногда развивается менингоэнцефалит и псисхоз. На 4 - 6 день появляется розеолезно- петехиальная сыпь. Лихорадка длиться 2 - недели. Начинается выздоровление. Иммунитет носит стойкий, но стерильный характер. Возбудитель сохраняется в организме в течение длительного времени в виде покоящихся форм. У лиц, переболевших сыпным тифом, нередко наблюдаются повторные случаи через 10-20 лет, которые рассматриваются, как рецедив (но не повторное заражение). 24. Спирохеты. Строение. Патогенные спирохеты Спирохеты (лат. spira – виток, греч. chaite – гребень, грива) отличаются от бактерий и грибов строением в виде штопорообразной извитой формы. Размеры их колеблются в больших пределах (ширина 0,3 - 1,5 мкм и длина 7 - 500 мкм). Строение - тонкие одноклеточные изогнутые или спиральные палочки. с рядом отличительных ультраструктурных особенностей, используемых в дифференцировании родов. - Цитоплазма окружена цитоплазматической мембраной, пептидогликановый слой обеспечивает ригидность клетки и ее форму. - Нуклеоид спирохет не отделен от цитоплазмы ядерной мембраной. - При электронной микроскопии обнаруживается нежная цитоплазматическая мембрана, в которой заключается цитоплазма. - У спирохет нет клеточной стенки, характерной для бактерий, но при электронной микроскопии выявлено, что они имеют тонкую клеточную стенку (перипласт), который прилагает к цитоплазме. -Спирохеты не образуют спор и капсул. - По Романовскому - Гимзе одни виды окрашиваются в синий, другие - в сине- фиолетовый, третьи - в розовый цвет. - Хорошим методом обработки спирохет является серебрение. - Тинкториальные свойства используют для дифференциации сапрофитов и патогенных спирохет. Патогенные спирохеты В порядок Spirochaetales, семейство Spirochaetaceae входят сапрофиты и патогенные виды. К сапрофитам относятся Spirochaeta и Cristispira, представляющие собой: - крупные клетки размером 200 - 500 мкм; - некоторые имеют крипты (волнистый гребни), концы их заострены или тупые; - они обитают на мертвых субстратах, в загрязненных водоемах, в кишечнике холоднокровных животных. - По Романовскому - Гимзе окрашиваются в синий цвет. К патогенным относятся три рода: Treponema, Leptospira, Borrelia. У трепонем видны тонкие цитоплазматические нити в бактериальной цитоплазме, в то время как у Borrelia они отсутствуют. Представители обоих родов обладают активной подвижностью, у них несколько жгутиков присоединены к каждому полюсу клетки и обернуты вокруг бактериального тела клетки. В отличие от других подвижных бактерий, эти жгутики не выступают в окружающую среду, а находятся под наружной оболочкой бактерии. Жгутики трепонем сложно устроены и состоят из влагалища и сердцевины, в то время как жгутики у Borrelia более просты и подобны жгутикам других бактерий. Наружная оболочка спирохет богата липидами, и, по крайней мере у некоторых трепонем, содержит мало белков и липополисахаридов. Это может объяснять чувствительность этих микроорганизмов к губительному действию детергентов и высушивания. Хотя трепонемы относятся к Гр (-) микроорганизмам, они не окрашиваются по методу Грама, и при их исследовании используют специальные методы окраски. Кроме того, патогенные трепонемы не могут хорошо культивироваться на питательных средах, их поддерживают путем пассажа на чувствительных животных. В отличие от них, Borrelia окрашиваются грам-отрицательно и многие патогенные виды могут культивироваться на обогащенных питательных средах, содержащих сыворотку. Представители рода Borrelia отличаются от других спирохет тем, что: - клетки микроорганизмов имеют крупные отлогие неравномерные завитки, число которых колеблется от 3 до 10. - Патогенными для человека являются возбудители возвратного тифа, передающегося вшами (Borrelia recurrentis) и клещами (Borrelia persica и др.). - Они окрашиваются по Романовскому-Гимзе в сине-фиолетовый цвет. Род Трепонема (Gk. trepein - поворот, nema - нить) представлен: - тонкими гибкими клетками с 6-14 завитками. - Концы трепонем сужены или закруглены, некоторые виды на полюсах имеют тонкие удлиненные нити. - Помимо типичных форм могут встречаться трепонемы в виде гранул, кист, L-форм и других структур. - Трепонемы окрашиваются по Романовскому-Гимзе в бледно-розовый цвет. Типовой представитель – возбудитель сифилиса Trepinema pallidum. Микроорганизмы рода Leptospira (Gk. leptos тонкий, speira виток) Характеризующие особенности : 1. очень тонкой клеточной структурой. 2. Лептоспиры образуют 12 – 18 мелких завитков плотно прилегающих друг к другу, формируя первичные спирали. 3. Микроорганизмы имеют две парные осевые нити, прикрепленные к противоположным концам (к базальным тельцам) клетки и направил к друг другу. 4. Средняя часть лептоспир не имеет осевых нитей. Из-за наличия двух пар осевых нитей лептоспиры способны к весьма сложному и активному движению. 5. Во время движения концы микроорганизмов быстро вращаются под прямым углом к основной части тела. 6. В покое концы загнуты крючкообразно, в то время как во время быстрого вращательного движения они походят на петлицы. 7. Вторичные спирали придают лептоспирам вид скобок или буквы S. 8. Цитоплазма слабо преломляет свет. 9. Они окрашиваются в розовый цвет по Романовскому-Гимзе. 10. Некоторые серотипы лептоспир являются патогенными для человека и вызывают лептоспироз. 11. Спирохеты не обладают ферментирующими свойствами, которые могут дать информацию для лабораторного диагноза и не продуцируют растворимые токсины. 25. Грибы. Строение плесневых и дрожжевых грибов I. Общие принципы строения грибов Грибы относятся к эукариотам, к царству Fungi (Mycetes, Mycota). Строение Грибы имеют многослойную ригидную клеточную стенку, ЦПМ, цитоплазму, ядро, органеллы. Грамположительны. Представляют собой многоклеточные или одноклеточные нефотосинтезирующие организмы. Выделяют два основных типа грибов: - гифальный; - дрожжевой. Гифальный гриб Тело гифальных грибов (талом), состоит из тонких ветвящихся нитей (гифы), которые образуют мицелий или грибницу. Гифы, врастающие в субстрат, называются вегетативными, отвечают за питание грибов, а растущие над поверхностью субстрата – это воздушные или репродуктивные гифы (бесполое размножение). Гифы высших грибов разделены перегородками с отверстиями – септами, и такой мицелий носит название септальный. Гифы низших не имеют перегородки. Мицелий называется истинным, если все клетки имеют общую клеточную стенку; псевдомицелий – клетки изолированные. Дрожжевые грибы. Дрожжевые грибы имеют вид овальных клеток, одноклеточные. Грибы аналогичные дрожжам, но не имеющие полового размножения – дрожжеподобные. Размножение грибов происходит половым или бесполым способом. По типу дыхания – аэробы, но тканевые формы могут быть анаэробами. II. Классификация В настоящее время известны более 50 тыс. грибов и более 200 - могут вызывать заболевание у человека. Подавляющие большинство принадлежит классу несовершенных грибов. У них бесполый способ размножения. Заболевания, вызываемые грибами – микозы. I. Поверхностные микозы или кератомикозы, поражающие поверхностный слой кожи и волос. - разноцветный лишай (на коже, туловище, шее, руках появляются розовато-желтые невоспалительные пятна) - черный лишай – в тропиках - черная пьедра и белая пьедра - в странах с тропическим климатом. II. Дерматомикозы, при которых поражаются эпидермис, кожа, волосы и ногти. Возбудители носят название дерматофиты. Они очень устойчивы к различным фактором внешней среды. Трихофитон сохраняется в волосах до 7 лет. Около 40 видов дерматофитов вызывают патологические процессы у человека. Возбудитель передается при контакте с больным человеком или животным, через предметы обихода (расчески, полотенца и т.д.). Люди чаще инфицируются в банях, саунах, душевых и бассейнах. Заболевания: - трихофития - микроспория - фавус - эпидермофития Лабораторная диагностика: - микроскопия - микологический – посев на питательные среды Лечение: - низорал (кетоконазол); - клотримазол. III. Подкожные или субкутанные микозы. Возбудители этих микозов находятся в почве, древесине, на гниющих растениях. Внедряются в местах микротравм. Вовлекают глубокие слои кожи, подкожные ткани – мышцы, фасции. - Споротрихоз; - Хромобластомикоз; - Мадуромикоз. IV. Глубокие или системные микозы (особо опасные инфекции). Распространены на Американском континенте. Находятся в почве, путь передачи – воздушно-капельный. При висцеральных микозах поражаются различные органы, вплоть до летального исхода. - гистоплазмоз; - бластомикоз; - кокцидиом; - криптококкоз. Лечение: амфотерицин Б. 2 ценра по лечению микозов: г. Санкт-Петербург, г. Москва. V. Оппортунистические микозы. Возбудители - условно-патогенные грибы родов Оппорту: - Aspergileus, Мucor; - Penicillium; - Fusarium; - Pneumocystis carinii; - Candida spp. Род Candida Дрожжеподобные грибы, крупные, овальной формы, одноклеточные. Это грам «+», аэробы. По биохимическим свойствам делятся на 200 видов. Клиническое значение, в основном, принадлежит - C. albicans; - C. krusei; - C. tropicalis. Для их культивирования - среда Сабуро. Различные представители этого рода на среде Сабуро формируют различные типы колоний, отличающиеся по цвету и размеру. Через 48 часов C. albicans образуют характерные колонии: выпуклые, крупные, блестящие, сметанообразные, белого цвета. Candida spp широко распространены во внешней среде, являются условно – патогенными, входят в состав нормальной микрофлоры. На коже встречается у 5-20 %, на слизистой рта у 45-50 %, в кишечнике до 30 %, в мокроте до 7 %, также входят в состав нормальной микролоры мочеполового тракта. В окружающей среде Candida spp находится там, где встречаются большие скопления людей (бани, душевые), а так же на продуктах (квашеных овощах, фруктах). В высушенном виде сохраняют свою жизнеспособность в течение нескольких лет. Кандидоз – это эндогенная инфекция, возникающая на фоне применения антибиотикотерапии (они устойчивы к антибактериальным препаратам), иммунодефицита, цитостатиков, гормонотерапии. Различают: 1) поверхностный кандидоз слизистых оболочек 2) хронический гранулематозный кандидоз 3) висцеральный кандидоз различных органов 4) диссеминированный кандидоз (кандидозный сепсис) 5) аллергия на антигены грибов рода Candida. При кандидозе полости рта на слизистой оболочки развивается молочница, белые творожистые налеты, может быть гиперкератоз. Кандидоз влагалища (вульвовагинит) появляется как отек, эритема слизистых оболочек, белые творожистые выделения. Лабораторная диагностика: Т.к. они являются условно-патогенными и входят в состав нормальной микрофлоры, необходимо определить критерии значимости 104 КОЕ/мл. Самые различные поражения: пневмония, отиты, поражение мочеполового тракта, эндокардиты, поражения мозга. Кандидозный сепсис – осложнение висцерального кандидоза. Лечение: - флюконазол; - кетокиназол, не действует на C. Krusei; - клотримазол. Определение видовой принадлежности и чувствительности к препаратам обязательно. Пищевые отравления – микотоксины. Образуются на пищевых продуктах и сырье. Микробиологическая диагностика: - при дерматомикозах микроскопия, при которой обнаруживаются элементы грибка; - микологическое исследование, посев на питательные среды; - иммуногистохимические тесты; - ПЦР; - определение галактомонана и 1,3 бета-деглюкана в сыворотке крови. Специфическая профилактика: нет. Грибы устойчивы ко всем антибиотикам. Есть специальная группа противогрибковых препаратов – полиеновые антибиотики. 26. Вирусы, их особенности, строение вириона. Принципы классификации вирусов. Прионы, Виройды. в связи с особенностями их биологии выделяют в особое отдельное царство Vira. Основные отличительные особенности вирусов от других микроорганизмов: 1. Вирусы – это микроорганизмы, не имеющие клеточного строения. 2. Вирусы имеют чрезвычайно мелкие размеры, поэтому обнаружить их можно только под электронным микроскопом. 3. Вирусы имеют один тип нуклеиновых кислот (НК) – РНК или ДНК, которые выполняют функцию генома вируса. По этому признаку вирусы разделяются на РНК-содержащие или ДНК-содержащие. 4. Вирусы являются облигатными внутриклеточными паразитами на генетическом уровне. Они способны использовать клеточные структуры клетки хозяина для синтеза, работы и регуляции собственного генома. 5. Вирусы лишены собственных белоксинтезирующих и энергетических систем метаболизма и для жизнедеятельности используют эти системы у клетки хозяина. 6. Репродукция их происходит в чувствительных клетках по генетической программе, заложенной в НК. 7. Вирусы имеют особый тип размножения – дизъюнктивную репродукцию. Это разобщенный во времени и пространстве процесс синтеза отдельных вирусных компонентов, который заканчивается сборкой нового вируса. В жизненном цикле вируса выделяют две формы (стадии) – внеклеточную и внутриклеточную. Внеклеточный вирус – вирион – это покоящаяся форма вируса, устойчивая во внешней среде и способная переносить генетическую информацию из одной клетки в другую. Внутриклеточный вирус – это вегетативный вирус – способен к репродукции в инфицированной клетке. |