|
Эпизоотология и инфекционные болезни. Структура и содержание теоретиче. Эпизоотология и инфекционные болезни. Структура и содержание тео. Кафнедра микробиологии, вирусологии, эпизоотологии ветеринарно санитарной экспертизы
ЛЕКЦИЯ -15. ДИАГНОСТИЧЕСКАЯ СТРАТЕГИЯ И ТАКТИКА В ЭПИЗООТОЛОГИИ. ДИАГНОСТИКА ИНФЕКЦИОННЫХ БОЛЕЗНЕЙ. ИДЕНТИФИКАЦИЯ ВОЗБУДИТЕЛЕЙ И ИХ ИНДИКАЦИЯ В ОБЪЕКТАХ ВЕТНАДЗОРА. Значение и место диагностики в системе ППМ. Диагностика - «глаза и уши» эпизоотологии. Исторические аспекты отечественной ветеринарной диагностики.
Основные направления в диагностике инфекций:
клинико-эпизоотологический анализ;
макро- и микроскопическое исследование инфицированных тканей с целью выявления специфических поражений;
микробиологические приемы выделения и идентификации возбудителей;
серологические тесты для определения специфических антител или выявление динамики их нарастания.
Диагностические ситуации в эпизоотологии:
Определение:
| Общая стратегия:
| | эпизоотологический мониторинг;
| угрожаемые, предъэпизоотические
| клиническое наблюдение,
контроль факторов и групп риска,
серологическая разведка,
животные-сентинел
в системе эпизоотологического мониторинга и надзора;
| неблагополучные, эпизоотические
| клиническая и эпизоотологическая диагностика,
патоморфологические исследования,
изоляция и идентификация возбудителя
в системе эпизоотологического надзора и контроля;
| | характеристика постинфекционных изменений,
анамнез клинический и эпизоотологический,
патогномонические и постморбидные признаки,
постинфекционный иммунитет (IgM, IgG)
в системе эпизоотологического мониторинга и надзора.
|
Методологические принципы диагностики инфекционных болезней:
Манифестная инфекция -
острая, подострая, хроническая, ремиссии
| клинические и патогномонические признаки
прямая демонстрация возбудителя или его антигенов
изоляция возбудителя
его идентификация (микробиологическая, серологическая, генетическая)
| Скрытая инфекция -
латентная, персистентная,
медленная
| демонстрация иммунного ответа - антигены и антитела (серологическая эпизоотология)
биохимические (гематологические) изменения
идентификация генома возбудителя (молекулярная эпизоотология)
| Постинфекционные состояния
| клиническая история (анамнез)
патогномонические изменения
демонстрация иммунного ответа (антитела)
|
Методология:
патогенетические аксиомы - ворота инфекции, локализация инфекционного процесса и динамика его развития, локализация и специфика поражений, локализация возбудителя, симптомы и трансмиссия, циркулирующие системы, типичные поражения, выделения, паренхиматозные органы;
анализ ситуации и формулировка диагностических задач - выделение и идентификация возбудителя, тестирование антител, патоморфологические тесты, виды и типы специментов;
алгоритмы решения. Общая схема:
Стадии:
| Маркеры инфекции (выраженность):
| инкубационный период
| возбудитель (++)
| генерализация инфекции
| возбудитель (++++)
| манифестная форма
| возбудитель (+++), антигены (+++)
| конвалесценция
| антигены (++), IgM (++++)
| ремиссии
| антитела IgG, IgA (++++)
| множественное тестирование: параллельное, серийное (последовательное), ретестирование (негативного стада).
Общие требования к средствам и методам диагностики и их качественные характеристики:
чувствительность (пропорция истинно положительных, «правильных» результатов) и специфичность (пропорция истинно отрицательных результатов);
аутентичность, или соответствие - правильность выбора как теста, так и объекта);
чистота, или точность - глубина, или уровень постановки диагноза по линии: симптом этиология идентификация возбудителя нозология разновидность возбудителя. Например, мастит инфекционный бактериальный стафилококковый, или трахеобронхит собак инфекционный аденовирус собак 2 типа;
разрешающая способность, или обоснованность (достаточность) - необходимая полнота методического спектра диагностики по линии: клиника и симптоматика биохимия, гематология, патоморфология микробиология серология геномный или полипептидный анализ. Например, репродуктивные расстройства у свиноматок гибель и рассасывание эмбрионов, мумификация плодов и мертворождаемость выявление антигенов парвовируса свиней с помощью МФА в тканях пораженных плодов определение сероконверсии в парных сыворотках свиноматок в отношении ПВС, сравнение титров IgM и IgG, или массовый острый лихорадочный синдром и угнетение у свиней всех возрастов экстенсивный геморрагический диатез на вскрытии выделение вируса КЧС в культуре клеток с помощью МФА окончательное подтверждение биопробой на животных, или прогрессирующее исхудание взрослого КРС персистентный лимфоцитоз РИД-позитивность на лейкоз;
прецизионость (статистическая достоверность);
воспроизводимость (повторяемость в чувствительности и специфичности);
достоверность (надежность, испытанность);
ценность, стоимость;
репрезентативность выборки.
Семиотика (см. лекцию 7), патогномонические макро- и микроскопические признаки (на вскрытии и при патогистологическом исследовании):
клиническое проявление инфекционных болезней;
возбудитель и антигены в мазках-отпечатках, тельца-включения;
дифференциальные таблицы (по клинической картине, макро- и микроизменениям).
Микробиологическая диагностика:
прямое обнаружение возбудителя - светооптическая и электронная микроскопия, иммуноэлектронная микроскопия, экспресс-методы, общие свойства - бактериальный рост, фильтруемость, патогенность для лабораторных моделей;
метод флюоресцирующих антител, другие хромогенные субстраты и метки (ферритин, коллоидное золото);
выделение возбудителя на биообъектах - биопроба, экспериментальная инфекция, моделирование, признаки (куриные эмбрионы, культура клеток, лабораторные и естественно-восприимчивые животные);
количественные аспекты и разрешающая способность методов, количественные тесты, титрование, выражение;
идентификация - культуральные, биохимические, генетические свойства и признаки, таксономия возбудителя.
Серологическая диагностика:
серологические реакции, методы серодиагностики, номенклатура, чувствительность и специфичность;
качественные тесты с одним разведением сыворотки (РДП, РИД, РСК);
тесты с серийными разведениями сыворотки (РН, РСК);
тесты с прецизионными возможностями - иммуноферментный анализ и РНГА (количество), иммуноблотинг (качество, антигенный спектр антител);
количественные измерения, выражение, тесты, разведения, логарифмическая трансформация (log2), средние геометрические титры (СГТ);
серотипизация и тесты.
Организационно-правовые основы:
нормативно-техническая документация;
силы и средства, уровни решения проблем (ветлаборатории, НИУ, прецизионные центры), ответственность;
материально-техническое обеспечение (приборы, реактивы, биопрепараты, их разработчики и производители), стандартизация и сертификация.
Интерпретация результатов:
статистическая обработка, количественное выражение и достоверность результатов;
истинно положительный и отрицательный результаты, принципиальные различия их получения и реализации;
ложно-положительные результаты и их причины - перекрестные реакции, неспецифические ингибиторы, неспецифическая агглютинация;
ложно-отрицательные результаты и их причины - естественная или индуцированная толерантность и супрессия (например, вирусная диарея+лейкоз КРС в РИД), неверно выбранные время тестирования или сами тесты, неспецифические ингибиторы (антикомплементарность сыворотки, токсичность для субстратов, неполные или блокирующие антитела, недостаточная чувствительность тестов).
Целевые возможности диагностических направлений и отдельных методов в решении общих и частных эпизоотологических задач (см. выше). Место и уровни.
Дифференциальная диагностика и ее эпизоотологическое значение при инфекциях различных категорий.
Прецизионный анализ в диагностике инфекций. Цели, задачи, методы и уровни решений.
Проблема дифференциации постинфекционного и поствакцинального иммунитета.
Определение и принципы серологической эпизоотологии:
серопозитивность, серонегативность, сероконверсия;
аналитическая специфичность и титры - предельные возможности, обеспечение чистоты, или точности диагноза, выявление минимальных «следов» инфекции, как правило скрытой;
диагностическая специфичность и титры - оптимальные расчетные (эмпирически) значения, коррелирующие с показателями других тестов (как правило клиническо-морфологических), подтверждение достоверности и достаточности диагноза.
Индикация возбудителей инфекций как система:
цели и задачи;
микробиологические объекты ветнадзора;
методологические принципы исследования внешней среды.
Лабораторные инфекции и способы их предупреждения.
|
|
|