Краснодар, 2017 патогенные бактерии
 Скачать 0.92 Mb.
|
|
V. Энтероагрессивные (EAEC) VI. Диффузноагрессивные (DAEC) 10. Лабораторная диагностика. Основана на выделении чистой культуры возбудителя и его идентификации, а также на тестировании токсинов с помощью ПЦР. Идентификация производится с помощью набора поливалентных ОК-сывороток и набора адсорбированных сывороток, содержащих антитела только к определённым антигенам. При необходимости у выделенных возбудителей определяют чувствительность к антибиотикам. 11. Лечение и профилактика. Используют различные антибиотики. Для восстановления водно-солевого обмена применяют оральные солевые растворы. Микробиология Холеры 1. Видовое название возбудителя и его систематическое положение: V.cholerae. РодVibrioотносится к семействуVibrionaceae. 2. Морфологические свойства: • 1,5-3,0 мкм х 0,5 мкм; • короткие палочки; • располагаются одиночно, беспорядочно; • изогнутые или прямые; • не образуют спор и капсул; • подвижные (монотрих). 3. Тинкториальные свойства: • Г-. 83 4. Физиологические свойства: • аэробы и факультативные анаэробы; • температурный оптимум для роста18-37 о С; • (!) pH=8,6-9,0; • некоторые виды галлофилы (не растут при отсутствии NaCl). 5. Культуральные свойства: • не требователен к питательным средам; • ППС: щелочной агар, желточно-солевой агар, щелочной альбуминат, щелочной агар с кровью, лактозо-сахарозные, среда TCBS (тиосульфатцитрат-бромтимоловый сахарозный агар) и её модификации. Однако чаще всего используют щелочной МПА, рост: гладкие стекловидно-прозрачные с голубоватым оттенком дисковидные колонии вязкой консистенции; • ЖПС: 1%-ная щелочная пептонная вода (ПВ), содержащей 0,5-1,0% NaCl. Для подавления роста протея к ПВ рекомендуется добавлять теллурит калия. 1%-ная ПВ является наилучшей средой обогащения для холерного вибриона. Рост: нежная рыхлая сероватого цвета плёнка, которая при встряхивании легко разрушается и падает на дно в виде хлопьев, ПВ умеренно мутнеет. 6. Биохимические свойства: • ферментируют углеводы с образованием кислоты без газа; • оксидаза +; • восстанавливают нитраты в нитриты; • расщепляют желатин: при посеве уколом в столбик желатина вибрион через 2 суток при температуре 22-23 0 вызывает разжижение с поверхности в виде пузырька, затем воронкообразное и, наконец, послойное; • р-ция Фогеса – Проскауэра +; • уреазы не имеют; • образуют индол; • не образуют H 2 S; • имеет лизин- и орнитиндекарбоксилазы, не имеет аргининдегидролазы; • в молоке вибрион быстро размножается, вызывая через 24-48 часов свёртывание, а затем наступает пептонизация молока, и через 3-4 дня вибрион погибает из-за сдвига pH молока в кислую сторону. 84 Б.Хейберг предложил классификацию вибрионов (холерных и холероподобных) по способности ферментировать маннозу, сахарозу и арабинозу и разделил их на 8 групп. V.cholerae относится у группе 1. (М+;С+;А-). 7. Антигенные свойства: • Н-антиген – родоспецифичный (общий для холерных и холероподобных вибрионов); • О-антиген.Имеется 139 вариантов. По О-антигены вибрионы разделены на 139 серогрупп (которые постоянно пополняются). Холерный вибрион относится к О1 группе. Антигены V.cholerae: • А-антиген– видоспецифичный; • В- и С-антигены – типоспецифичные; Различают три серотипа V.cholerae: 1) серотип Огава (АВ); 2) серотип Инаба (АС); 3) серотип Гикошима (правильнее Хикодзима) (АВС). • OR-антиген(в стадии диссоциации). (!!!) Вид V.cholerae подразделяют на 4 биотипа: 1) V.cholerae cholerae; 2) V.cholerae eltor; 3) V.cholerae proteus (finklerpriori); 4) V.cholerae albensis. ИЛИ 1) V.cholerae O1 cholerae; 2) V.cholerae eltor (он тоже О1); 3) V.cholerae O139 bengal; 4) V.cholerae non O1 (V.ch.proteus, V.ch.albensis и другие серовары, которые не агглютинируются О1- и О139-сыворотками). Немного о 7-й пандемии холеры (1961-1975 гг.) Характерной ее особенностью является двуволновой характер течения, где за 1- ю волну заболеваемости был ответственен классический V.cholerae O1 cholerae 85 (на тот момент его звали по-другому), а за вторую – V.cholerae eltor. И вроде как антибиотиками в то время уже активно в медицине пользовались, пандемия продлилась немало лет, если не считать, что она вообще доросла до мирового масштаба. Хотя V.cholerae eltor был впервые выделен еще в 1905 г., на тот момент он не был патогенен для человека. Но с течением времени этот подвид холерного вибриона приобрел патогенные свойства, что пагубно сказалось на населении к середине течения пандемии (лул). Признавая важность V.cholerae eltor, ему дали место отдельного подвида, пускай он и относится к О1- серогруппе. А тогда зачем было выделять V.cholerae O139 bengal? Все примерно по той же причине – этот хлопец стал виновником другого массового заболевания людей, но только в масштабах эпидемии (1992-1994 гг.). Поразило эндемичный регион – Индию, Бенгалию, немножко Юго-Восточную Азию. А все по причине появления нового О-антигена – О139 (в результате мутации того самого Эль- Тора),и как следствие, новой серогруппы, против представителей которой не было ни постинфекционного, ни поствакцинального иммунитета. Учитывая «заслуги» данного молодца перед человечеством, ему тоже дали место отдельного подвида. Так-то. 8. Факторы патогенности: I. Подвижность: 1) жгутик (очевидно); II. Хемотаксис (фиг знает что); III. Факторы адгезии и колонизации: 2) муциназа – разрушает слизь; 3) нейраминидаза – освобождает рецепторы, облегчает проникновение вибрионов внутрь энтероцитов; 4) гемагглютинин/протеаза – отделает вибрионы от энтероцитов, способствуя выходу бактерий во внешнюю среду; IV. Экзотоксины: 5) холерный токсин – холероген (CTX AB). Состоит из: • фрагмента А – А 1 (АДФ-рибозилтрансфераза) и А 2 (связывает А 1 и В) – определяет специфичность холерного токсина; дает ему свойства суперантигена; • фрагмента В (5 одинаковых субъединиц) – распознает рецептор (моносиалоганглиозид) и связывается с ним; создает гидрофобный канал для прохождения субъединицы А 1 86 Для обнаружения способности V.choleraeпродуцировать холероген можно использовать различные методы: а) биологическая проба на кроликах; б) непосредственное обнаружение холерогена с помощью ПЦР, ИФМ или реакции пассивного иммунного гемолиза. 6) новые токсины, способные вызывать диарею, но не имеют генетического и иммунологического родства с холерогеном; 7) дермонейротические и геморрагические факторы (слабоизучены); V. Эндотоксин – ЛПС. 8. Эпидемиология инфекции: • антропоноз (больной холерой или вибрионоситель); • пути заражения: а) водный (питье, купание, хозяйственно-бытовые нужды); б) контактно-бытовой; в) пищевой. • особенностью холеры является то, что после неё, как правило, не остаётся длительного носительства и не формируется стойких эпидемических очагов. При возникновении заболеваний холерой осуществляют комплекс противоэпидемических мероприятий, среди которых ведущим и решающим является активное своевременное выявление и изоляция больных в острой и атипической форме и здоровых вибрионосителей. 9. Патогенез инфекции: Инкубационный период при холере от нескольких часов до 6 суток, чаще всего 2-3 дня. Попав в просвет тонкого кишечника, холерные вибрионы за счёт подвижности и хемотаксиса к слизистой оболочке направляются к слизи. Чтобы проникнуть через неё, вибрионы выбрасывают ряд ферментов (муциназу, протеазы, лецитиназу, нейраминидазу). Путём адгезии вибрионы прикрепляются к гликокаликсу эпителия и, теряя подвижность, начинают интенсивно размножаться, колонизируя микроворсинки тонкого кишечника, и одновременно вырабатывать большое количество экзотоксина – холерогена. Молекулы холерогена связываются с моносиалганглиозидом и проникают в мембрану клетки, где активируют аденилатциклазную систему, а накапливающийся цАМФ вызывает гиперсекрецию жидкости, катионов и анионов из энтероцитов, что и приводит к холерной диарее, обезвоживанию и обессоливанию организма. 87 Различают три типа течения болезни: I. Бурное, тяжёлое обезвоживающее диарейное заболевание, приводящее к смерти больного через несколько часов; II. Менее тяжёлое течение или понос без обезвоживания; III. Бессимптомное течение заболевания (вибрионосительство). При тяжёлой форме холеры у больных появляется понос, стул учащается, испражнения становятся всё более обильными, принимают водянистый характер, утрачивают фекальный запах, и имеют вид рисового отвара. Затем присоединяется изнурительная рвота, сначала содержимым кишечника, а затем рвотные массы приобретают вид рисового отвара. Температура падает ниже нормы, кожа становится синюшной, морщинистой и холодной – холерный Алги. В результате обезвоживания происходит сгущение крови, развивается цианоз, кислородное голодание, резко страдает функция почек, появляются судороги, больной теряет сознание и наступает смерть. 10. Иммунитет: Прочный, длительный, повторные заболевания наблюдаются редко. Иммунитет антитоксический и антимикробный, обусловлен антителами, клетками иммунной памяти и фагоцитами. 11. Лабораторная диагностика: Материалом для исследования служат испражнения и рвотные массы. Методы диагностики: • бактериологический. На вибрионосительство исследуют испражнения. У лиц, погибших от холеры, для исследования берут лигированный отрезок тонкого кишечника и желчный пузырь. Из объектов внешней среды чаще всего исследуют воду открытых водоёмов и сточные воды. При поведении бактериологического исследования необходимо соблюдать следующие три условия: 1) как можно быстрее произвести посев материала от больного; 2) посуда, в которую берут материал, не должна обеззараживаться химическими веществами и не должна содержать их следа, т.к. холерный вибрион к ним очень чувствителен; 3) исключить возможность загрязнения и заражения окружающих. Выделение культуры производят по схеме: 88 сеют одновременно на ПВ, МПА или какую-либо избирательную среду (лучше всего TCBS) через 6 часов исследуют плёнку, образующуюся на ПВ, и в случае необходимости делают посев на вторую ПВ пересев с ПВ на щелочной МПА подозрительные колонии пересевают для получения чистой культуры, которую идентифицируют по морфологическим, культуральным, биохимическим свойствам, подвижности и окончательно типируют с помощью диагностических агглютинирующих сывороток О-, OR-, Инаба, Огава и фагов (ХДФ). • Методом ускоренной диагностики является люминесцентно- серологический. Он позволяет обнаружить холерный вибрион непосредственно в исследуемом материале в течении 1,5-2 часов; • РПГА с антительным диагностикумом – для быстрого обнаружения холерного вибриона в испражнениях и объектах внешней среды. 12. Лечение и профилактика: Лечение больных холерой должно заключаться прежде всего в регидратации и восстановлении нормального водно-солевого обмена. С этой целью рекомендуется использовать солевые растворы. Холерная вакцина. Состав: клетки штаммов холерных вибрионов серологических типов Инаба и Огава, убитых нагреванием или формальном, суспендированные в физиологическом растворе или в сухом виде. Назначение: для профилактики. Способ применения: подкожно в подлопаточную область. |