Краснодар, 2017 патогенные бактерии
 Скачать 0.92 Mb.
|
|
сульфаниламидные препараты и антибиотики (пенициллин, рифампицин и др.). Для создания искусственного иммунитета против менингита предложены вакцины, получаемые из высокоочищенных полисахаридов серогрупп A, C, Y и W135, но каждая из них формирует лишь группоспецифический иммунитет. 33 Менингококковая вакцина полисахаридная группы А сухая предназначена для профилактики менингококковой инфекции. Состав: капсульный специфический полисахарид менингококка серогруппы А. Способ применения: подкожно однократно в подлопаточную полость или в верхнюю треть плеча. Микробиология Гонореи 1. Видовое название возбудителя и его систематическое положение: Neisseria gonorrhoeae. Род Neisseriaотносится к семейству Neisseriaceae класса Betaproteobacteria. 2. Морфологические свойства: • 0,7-,0,8 мкм (1,25-1,60 мкм); • форма кофейного зерна или почки; • диплококки, вогнутые стороны клеток обращены друг к другу (между клетками есть зазор); • в материале от больного могут располагаться внутри лейкоцитов; • не имеют жгутиков, капсул, спор; • не образуют пигмента. 3. Тинкториальные свойства: • Г-; • хорошо красятся анилиновыми красителями; • часто используют метиленовый синий для выявления характерной бобовидной формы. 4. Физиологические свойства: • строгие аэробы (при первичном посеве лучше вырастают при небольшом повышении содержания СО 2 ); • оптимальная температура = 35-36 о С; • рН – 7,2-7,6. 5. Культуральные свойства: • Плохо растут на МПА; 34 • Хорошо растут на средах, содержащих сыворотку, асцитическую жидкость или кровь, для лучшего роста к ППС добавляют крахмал, холестерол, альбумин и частички угля; требуют наличия в среде железа; • Гемолиз не вызывают; • Рост на ППС: ➢ Т 1 и Т 2 гонококки (вирулентные) – мелкие, блестящие колонии в виде капель; ➢ Т 3 и Т 4 гонококки (невирулентные) – крупные, тусклые, плоские колонии. 6. Биохимические свойства: • Ферментируют только глюкозу с образование кислоты без газа. 7. Антигенные свойства: • Белковые антигены наружной мембраны – 16 серотипов. • ЛПС-антигены; • Бактерицины, которые также могут быть использованы для типирования. 8. Факторы патогенности: • пили, с помощью которых гонококки осуществляют адгезию и колонизацию эпителиальных клеток слизистой оболочки мочеполовых путей; • высвобождающийся при разрушении гонококков эндотоксин. 9. Эпидемиология инфекции: Единственным источником является человек, инфицированный гонококками. Заражение происходит главным образом половым путём, иногда через предметы обихода. Основным местом обитания является поверхность слизистой оболочки мочеполовых путей, реже – прямой кишки и глотки. Гонококки обладают слабой устойчивостью к внешним воздействиям: быстро погибают под действием прямых солнечных лучей, УФ-света, высушивания, высокой температуры. Различные химические вещества убивают их в течение короткого времени. 10. Патогенез инфекции: 35 Входные ворота у мужчин – слизистая оболочка уретры, у женщин – слизистая оболочка влагалища, уретры и шейки матки. В случае проникновения через эпителиальный барьер гонококки могут распространяться в окружающие ткани, поступать в кровь, проникать в синовиальные оболочки суставов, сердце и другие органы, вызывая воспалительные процессы, а иногда и септицемию и офтальмию (воспаление слизистой глаза). Инкубационный период от одного дня до 2-3 недель (в среднем 3-4 дня). Две основные клинические формы: острая и хроническая. Типичные симптомы острой гонореи: острое гнойное воспаление уретры, желез нижнего отдела половых органов и шейки матки у женщин, сопровождающееся болевыми ощущениями, а также обильными гнойными выделениями из уретры. Для хронической гонореи типично более вялое проявление клинических симптомов. 11. Иммунитет: Перенесённое заболевание не оставляет иммунитета к повторному заражению, но это обстоятельство, вероятно, связано с тем, что иммунитет имеет типоспецифический характер. 12. Лабораторная диагностика: Материалом для исследования является гнойное отделяемое влагалища, уретры, шейки матки, а также осадок и нити мочи. Методы диагностики: • бактериоскопический. Мазки окрашивают по Граму и метиленовым синим. Обнаружение по трём признакам: грамотрицательная окраска, бобовидные диплококки, внутриклеточное расположение. Для обнаружения гонококков в мазке также используют метод прямой и непрямой иммунофуоресценции. Однако под влиянием химио- и антибиотикотерапии, а также при хронической гонорее морфология и окраска по Граму у гонококков могут меняться. При хронической гонорее в мазках обнаруживают гонококки типа Аша: клетки диплококка имеют неодинаковую величину и форму; • бактериологический. Культуры засеивают на специальные ПС, затем оценивают характер их роста на ПС, готовят микропрепараты и опять микроскопируют; • серологический метод – РСК; • аллергический метод – кожная проба с гонококковым аллергеном. 36 13. Лечение и профилактика: Для лечения применяют сульфаниламидные препараты и антибиотики. Специальная профилактика не разработана. Общая профилактика такая же, как и при других венерических заболеваниях. Гонококковая вакцина (лечебная) предназначена для лечения. Состав: взвесь убитых гонококков. Способ применения: внутримышечно в область ягодицы. «Капельные» инфекции Микробиология Дифтерии 1. Видовое название возбудителя и его систематическое положение: C.diphtheriae.РодCorynebacterium относится кклассу Actinobacteria. В природе существуют три основных варианта (биотипа) дифтерийной палочки: gravis, intermediusи mitis. Они различаются по морфологическим, культуральным, биохимическим и другим свойствам. Деление дифтерийных бактерий на биотипы было произведено с учетом того, при каких формах течения дифтерии у больных они выделяются с наибольшей частотой. Тип gravis чаще выделяется от больных с тяжелой формой дифтерии и вызывает групповые вспышки. Тип mitis вызывает более легкие и спорадические случаи заболеваний, а тип intermedius занимает промежуточное положение между ними. С.belfanti, ранее относимый к биотипу mitis, выделен в самостоятельный, четвертый, биотип. Его главное отличие от биотипов gravis и mitis – способность восстанавливать нитраты в нитриты. 2. Морфологические свойства: • 1,0-8,0 мкм х0,3-0,8 мкм; 37 • прямые или слегка изогнутые неподвижные палочки; • спор и капсул не образуют; • очень часто они имеют вздутия на одном или обоих концах; • часто содержат метахроматические гранулы – зерна волютина (полиметафосфаты). 3. Тинкториальные свойства: • Г+, но в старых культурах нередко обесцвечивается и имеет отрицательную окраску по Граму; • метиленовыйсиний– зерна волютина приобретают голубовато-пурпурный цвет; • по Нейссеру– палочки окрашиваются в соломенно-желтый, а зерна волютина – в темно-коричневый цвет, ирасполагаютсяобычно по полюсам ; • анилиновые красители. 4. Физиологические свойства: • аэроб или факультативный анаэроб; • температурный оптимум 35-37 °С; • рН=7,6-7,8. 5. Культуральные свойства: • не требовательны к ПС; • лучше растут на средах, содержащих сыворотку или кровь с добавлением больших количеств теллурита калия (с подавлением роста др. бактерий). Восстанавливая его из среды до металлического теллура, колонии окрашиваются в характерный темно-серый или черный цвет: ➢ Колонии gravis: серый или черный центр, бледная периферия с радиальной исчерченностью, неровные края, 2-3 мм, ломкие при прикосновении; ➢ Колонии mitis: темно-серые или черные, гладкие, блестящие, 1-2 мм, ровные края, мягкие, легко снимаются; ➢ Колонии intermedius: серовато-черные, шероховатые или гладкие, < 1 мм. • избирательные – свернутые сывороточные среды Ру или Леффлера, рост на них появляется через 8—12 ч в виде выпуклых, величиной с булавочную головку колоний серовато-белого или желтовато-кремового цвета. Поверхность их гладкая или слегка зернистая, на периферии колонии 38 несколько более прозрачные, чем в центре. Колонии не сливаются, вследствие чего культура приобретает вид шагреневой кожи; • ЖПС: ➢ Колонии gravis: поверхностная пленка, на дне осадок, бульон прозрачный; ➢ Колонии mitis: диффузное помутнение с образование осадка; ➢ Колонии intermedius: тонкое гранулярное помутнение с последующим оседание гранул на дно. 6. Биохимические свойства: • ферментируют глюкозу, мальтозу, галактозу с образованием кислоты без газа; • имеют цистиназу; • не имеют уреазы и не образуют индола. По этим признакам они отличаются от тех коринеформных бактерий (дифтероидов), которые чаще других встречаются на слизистой оболочке глаза (С.xerosus) и носоглотки(С.pseudodiphtheriticum)и от других дифтероидов. 7. Антигенные свойства: • О-антиген (несколько десятков видов), по которым их делят на 11 серотипов. Gravis – 1,2,3,4,5,7; mitis – 6,8,9,10,11. 8. Факторы патогенности: I. Факторы адгезии, колонизации. Структуры, ответственные за адгезию, не идентифицированы, однако без них дифтерийная палочка не смогла бы ко- лонизировать клетки. Их роль выполняют какие-то компоненты клеточной стенки возбудителя; II. Факторы инвазии (гиалуронидаза, нейраминидаза и протеаза); III. Токсический гликолипид, содержащийся в клеточной стенке возбудителя. Он представляет собой 6,6'-диэфир трегалозы, содержащий коринемиколовую кислоту (С 32 Н 64 О 3 ) и коринемиколиновую кислоту (С 32 Н 62 О 3 ) в эквимолярных отношениях. Гликолипид оказывает разрушающее действие на клетки ткани в месте размножения возбудителя; 39 IV. Экзотоксин, обусловливающий патогенность возбудителя и характер патогенеза заболевания. Он поражает, главным образом, симпато- адреналовую систему, сердце, сосуды и периферические нервы. Экзотоксин синтезируется в виде неактивного предшественника - единой поли- пептидной цепи с м. м. 61 кД. Его активация осуществляется собственной бактериальной протеазой, которая разрезает полипептид на два связанные между собой дисульфидными связями пептида: А и В. Пептид В выполняет акцепторную функцию – он распознает рецептор, связывается с ним и формирует внутримембранный канал, через который проникает в клетку пептид А и реализует биологическую активность токсина. Пептид А представляет собой фермент АДФ-рибозилтрансферазу, который обеспечивает перенос аденозиндифосфатрибозы из НАД на один из аминокислотных остатков (гистидина) белкового фактора элонгации EF-2. В результате модификации EF-2 утрачивает свою активность, и это приводит к подавлению синтеза белка рибосомами на стадии транслокации. Токсин синтезируют только такие С.diphtheriae, которые несут в своей хромосоме гены умеренного конвертирующего профага. Для обнаружения токсигенности дифтерийных бактерий можно использовать следующие способы: 1) Биологические пробы на животных. Внутрикожное заражение морских свинок фильтратом бульонной культуры дифтерийных бактерий вызывает у них некроз в месте введения; 2) Заражение куриных эмбрионов. Дифтерийный токсин вызывает их гибель; 3) Заражение культур клеток. Дифтерийный токсин вызывает отчетливый цитопатический эффект; 4) Метод твердофазного иммуноферментного анализа с использованием меченных пероксидазой антитоксинов; 5) Использование ДНК-зонда для непосредственного обнаружения tox- оперона в хромосоме дифтерийных бактерий; 6) серологический – метод преципитации в геле. Суть его состоит в следующем. Полоску стерильной фильтровальной бумаги размером 1,5 х 8 см смачивают антитоксической противодифтерийной сывороткой, со- держащей 500 АЕ в 1 мл, и наносят на поверхность питательной среды в чашке Петри. Чашку подсушивают в термостате 15—20 мин. Испытуемые культуры засевают бляшками по обе стороны от бумажки. На одну чашку засевают несколько штаммов, один из которых, заведомо токсигенный, служит контролем. Чашки с посевами инкубируют при 37 °С, результаты учитывают через 24—48 ч. Вследствие встречной диффузии в геле антитоксина и токсина в месте их взаимодействия образуется четкая линия преципитации, которая сливается с линией преципитации контрольного 40 токсигенного штамма. Полоски неспецифической преципитации (они образуются, если в сыворотке кроме антитоксина присутствуют в небольшом количестве другие антимикробные антитела) появляются поздно, выражены слабо и никогда не сливаются с полоской преципитации контрольного штамма. 9. Эпидемиология инфекции: • антропоноз (источник – больной человек или носитель); • заражение происходит следующими путями: ➢ воздушно-капельным; ➢ воздушно-пылевым путем; ➢ контактно-бытовым (через бывшие в употреблении у больных или здоровых бактерионосителей: посуда, книги, белье, игрушки и т. п.); ➢ алиметарным (в случае инфицирования пищевых продуктов). Особую роль в эпидемиологии дифтерии играют здоровые бактерионосители. В условиях спорадической заболеваемости они способствуют сохранению возбудителя в природе. Средняя продолжительность носительства – 2 месяца (для токсигенных штаммов). 10. Патогенез инфекции: Возбудитель может проникнуть в организм человека через слизистые оболочки различных органов или через поврежденную кожу. В зависимости от локали- зации процесса различают дифтерию зева, носа, гортани, уха, глаза, половых органов и кожи. Инкубационный период – 2-10 дней. При клинически выраженной форме дифтерии в месте локализации возбудителя развивается характерное фибринозное воспаление слизистой оболочки. Токсин, вырабатываемый возбудителем, сначала поражает эпителиальные клетки, а затем близлежащие кровеносные сосуды, повышая их проницаемость. В выходящем экссудате содержится фибриноген, свертывание которого приводит к образованию на поверхности слизистой оболочки серовато-белого цвета пленчатых налетов, которые плотно спаяны с подлежащей тканью и при отрыве от нее вызывают кровотечение. Следствием поражения кровеносных сосудов может быть развитие местного отека. Особенно опасной является дифтерия зева, так как она может стать причиной дифтерийного крупа вследствие отека слизистой оболочки гортани и голосовых связок, от которого раньше погибало в результате асфиксии 50—60% больных дифтерией детей. Дифтерийный токсин, поступая в кровь, вызывает общую глубокую интоксикацию. 11. Иммунитет: 41 Прочный, стойкий, фактически пожизненный, повторные случаи заболевания наблюдаются редко. Иммунитет носит главным образом антитоксический характер, меньшее значение имеют антимикробные антитела. Для оценки уровня противодифтерийного иммунитета ранее широко применялась проба Шика. 12. Лабораторная диагностика: Материалом для исследования служат слизь из зева и носа, пленка с миндалин или других слизистых оболочек, являющихся местом входных ворот возбудителя. Единственным методом микробиологической диагностики дифтерии является бактериологический, с обязательной проверкой выделенной культуры коринебактерий на токсигенность. Бактериологические исследования на дифтерию проводят в трех случаях: I. Для диагностики дифтерии у детей и взрослых с острыми воспалительными процессами в области зева, носа, носоглотки; II. По эпидемическим показаниям лиц, находившихся в контакте с источником возбудителя дифтерии; III. Лиц, вновь поступающих в детские дома, ясли, школы-интернаты, другие специальные учреждения для детей и взрослых, с целью выявления среди них возможных бактерионосителей дифтерийной палочки. Посевы производят на теллуритовые сывороточные или кровяные среды и одновременно на свернутые сывороточные среды Ру (свернутая лошадиная сыворотка) или Леффлера (3 части бычьей сыворотки + 1 часть сахарного бульона), на которых рост коринебактерий появляется уже через 8—12 ч. Выделенную культуру идентифицируют по совокупности морфологических, культуральных и биохимических свойств, по возможности используют методы серо- и фаготипирования. Во всех случаях обязательна проверка на токсигенность одним из указанных выше методов. Морфологические особенности коринебактерий лучше изучать, используя три метода ок- рашивания препарата-мазка: по Граму, Нейссеру и метиленовым синим (или толуидиновым синим). 13. Лечение и профилактика: Специфическим средством лечения дифтерии является применение противодифтерийной антитоксической сыворотки. Эффективным методом лечения является применение антибиотиков (пенициллины, тетрациклины, эритромицин) и сульфанил- амидных препаратов. С целью стимулирования выработки собственных антитоксинов можно использовать анатоксин. Для 42 освобождения от бактерионосительства следует использовать те антибиотики, к которым данный штамм коринебактерий высокочувствителен. Основным методом борьбы с дифтерией является массовая плановая вакцинация населения. С этой целью используют различные варианты вакцин, в том числе комбинированные, т. е. направленные на одновременное создание иммунитета против нескольких возбудителей. Наибольшее распространение в России получила вакцина АКДС. |