Краснодар, 2017 патогенные бактерии
 Скачать 0.92 Mb.
|
|
Адсорбированный дифтерийный анатоксин. Состав: очищенный и концентрированный дифтерийный анатоксин, адсорбированный на гидроокиси алюминия. Назначение: для профилактики дифтерии у детей с 5-6-месечного возраста. Способ применения: внутримышечно или подкожно. Противодифтерийная сыворотка. Состав: очищенная и концентрированная методом Диаферм-3 сыворотка лошадей, гипериммунизированных дифтерийным анатоксином. Назначение: для лечения и профилактики. Способ применения: внутримышечно. Очищенный дифтерийный токсин для реакции Шика. Состав: очищенный и концентрированный дифтерийный токсин. Назначение: для выявления невосприимчивости к дифтерии у детей. Способ применения: внутрикожно в среднюю часть ладонной поверхности предплечья. Микробиология Коклюша и Паракоклюша 1. Видовое название возбудителя и его систематическое положение: B.pertussis, B.parapertussis. Род Bordetella относится к классу Betaproteobacteria. 2. Морфологические свойства: • 0,2-0,5 х 1,0-1,2 мкм; • форма овоидной палочки или коккобактерии; Паракоклюшная палочка имеет такую же форму, но несколько крупнее (0,6 х 2 мкм). • расположены чаще поодиночке, но могут располагаться попарно; • спор не образуют; • у молодых культур и у бактерий, выделенных из макроорганизма, обнаруживается капсула; • бордетеллы неподвижны, за исключениемВ.bronchiseptica, которая является перитрихом. 43 3. Тинкториальные свойства: • Г-; • хорошо окрашиваются всеми анилиновыми красителями; • иногда выявляется биполярная окраска за счет зерен волютина на полюсах клетки. 4. Физиологические свойства: • строгие аэробы, хемоорганотрофы; • Оптимальная температура роста – 35-36 °С. 5. Культуральные свойства: • Характерной особенностью коклюшных бактерий является их наклонность к быстрому изменению культуральных и серологических свойств при изменении состава питательной среды, температуры и других условий выращивания. В процессе перехода от S-формы (фаза I) к стабильной шероховатой R-форме (фаза IV) через промежуточные фазы II и III наблюдаются плавные изменения антигенных свойств; патогенные свойства теряются; • возбудитель коклюша в гладкой S-форме (так называемая фаза I), в отличие от двух других видов бордетелл, не растет на МПБ и МПА, так как его размножению мешают накопление в среде ненасыщенных жирных кислот, образующихся в процессе роста, а также возникающая при росте коллоидная сера и другие продукты метаболизма. Для их нейтрализации (или адсорбции) в среду выращивания коклюшных бактерий необходимо добавлять крахмал, альбумин и древесный уголь или ионообменные смолы. Микроб требует наличия в среде выращивания 3 аминокислот – пролина, цистеина и глутаминовой кислоты, источником которых служат гидролизаты казеина или фасоли. Паракоклюшные бактерии и В.bronchiseptica, а также фазы II, III и IV коклюшных бактерий растут на МПА и МПБ; • ППС: ➢ среда Борде-Жангу (картофельно-глицериновый агар с добавлением крови), на ней она растет в виде гладких, блестящих, прозрачных куполообразных с жемчужным или металлическим ртутным оттенком колоний диаметром около 1 мм с нерезко ограниченной зоной гемолиза вокруг, распространяющейся диффузно в среду; 44 ➢ казеиново-угольный агар (КУА) – гладкие выпуклые колонии диаметром около 1 мм, имеющие серовато-кремовый цвет и вязкую консистенцию. • Колонии паракоклюшных бактерий по внешнему виду не отличаются от коклюшных, но крупнее и выявляются на 2-3-й день, а колонии В.bronchiseptica выявляются уже на 1-2-й день; • ЖПС: диффузное помутнение с придонным плотным осадком. Клетки могут быть несколько крупнее и полиморфными, иногда образуют нити. В R-форме и промежуточных формах бактерии проявляют выраженный полиморфизм. 6. Биохимические свойства: • не ферментируют углеводов; • не образуют индола; • невосстанавливают нитраты в нитриты (за исключениемВ.bronchiseptica); • паракоклюшные бактерии выделяют тирозиназу, образуя пигмент, окрашивающий среду и культуру в коричневыйцвет. 7. Антигенные свойства: • родовой агглютиноген 7; • видоспецифичный соматический О-антиген (агглютиноген 1); • типоспецифические агглютиногены 2 и 3. В зависимости от их сочетания уBordetella pertussis выделяют четыре сероварианта: 1,2,3; 1,2,0; 1,0,3 и 1,0,0. 8. Факторы патогенности: I. Факторы адгезии и колонизации: 1) фимбрии (агглютиногены); 2) белок наружной мембраны – пертактин и филаментозный гемагглютинин (поверхностный белок). II. Факторы, препятствующие фагоцитозу: 3) Капсула; III. Ферменты «агрессии и защиты»: 4) гиалуронидаза; 5) лецитиназа; 6) плазмокоагулаза; 45 7) аденилатциклаза. IV. Токсины: 8) Эндотоксины(ЛПС) два липида: А и Х. Биологическая активность ЛПС определяется липидом Х, липид А обладает низкой пирогенностью и не токсичен.ЛПС обладает иммуногенностью (цельноклеточная вакцина), но вызывает сенсибилизацию; 9) Экзотоксины (3 штуки): а) Коклюшный токсин – по структуре и функции подобен холерогену, про- являет активность АДФ-рибозилтрансферазы, сильный иммуноген, повышает лимфоцитоз и выработку инсулина; б) Трахеальный цитотоксин – представляет собой фрагмент пептидогликана, обладает пирогенностью, артритогенностью, индуцирует медленноволновой сон и стимулирует продукцию IL-1, в ответ на который синтезируется оксид азота (цитотоксический фактор). Повреждает эпителиальные клетки трахеи и вызывает цилиостаз; в) Термолабильный дермонекротоксин обладает нейротропностью, сосудосуживающей активностью, гомологичен цитотоксическому некротизирующему фактору 1 (CNF1) кишечной палочки. Мишенью его являются Rho-белки мембран клеток. Обнаруживают дермонекротоксин внутрикожной пробой на кроликах (проба Дольда). 9. Эпидемиология инфекции: • антропоноз (источник – больной типичной или стертой формой, особенно в период до появления спазматического кашля). При коклюшеподобном заболевании, вызванномВ.bronchiseptica, источником инфекции могут быть домашние и дикие животные, среди которых иногда на- блюдаются эпизоотии (свиньи, кролики, собаки, кошки, крысы, морские свинки, обезьяны), при этом чаще всего у животного поражается респираторный тракт. • путь заражения – воздушно-капельный. Бордетеллы обладают специфическим тропизмом к цилиарному эпителию респираторного тракта хозяина. 10. Патогенез инфекции: Инкубационный период при коклюше от 3 до 14 дней, чаще 5—8 дней. Возбудитель, попавший на слизистую оболочку верхних дыхательных путей, размножается в клетках цилиарного эпителия и далее бронхогенным путем 46 распространяется в более низкие отделы (бронхиолы, альвеолы, мелкие бронхи). При действии экзотоксина эпителий слизистой оболочки некротизируется, в результате чего раздражаются кашлевые рецепторы и создается постоянный поток сигналов в кашлевой центр продолговатого мозга, в котором формируется стойкий очаг возбуждения. Это приводит к возникновению спазматических приступов кашля. Бактериемии при коклюше не бывает. Вторичная бактериальная флора может приводить к осложнениям. В течении заболевания выделяют следующие стадии: 1) Катаральный период, длящийся около 2 недель и сопровождающийся сухим кашлем. Состояние больного постепенно ухудшается; 2) Конвульсивный (судорожный), или спазматический, период, длящийся до 4—6 недель и характеризующийся возникающими до 20—30 раз в сутки приступами неукротимого «лающего» кашля, причем приступы могут быть спровоцированы даже неспецифическими раздражителями (свет, звук, запах, медицинские манипуляции, осмотр и т. д.); 3) Период разрешения, когда приступы кашля становятся реже и все менее продолжительными, отторгаются некротизированные участки слизистой оболочки верхних дыхательных путей, часто в виде «слепков» с трахеи и бронхов. Продолжительность — 2—4 недели. 11. Иммунитет: После перенесенного заболевания формируется стойкий пожизненный иммунитет; поствакцинальный иммунитет сохраняется всего 3—5 лет. 12. Лабораторная диагностика: В качестве материала используют слизь из носоглотки или мокроту. Методы: • бактериологический – материал от больного высевают на КУА или среду Борде-Жангу. Посев также может быть сделан методом «кашлевых пластинок». Выросшую культуру идентифицируют по совокупности культуральных, биохимических и антигенных свойств; • серологический – РА, РСК, РПГА. Ставятся, в основном, для ретроспективной диагностики коклюша или в тех случаях, когда не выделена чистая культура. Антитела к возбудителю появляются не ранее 3- й недели заболевания, диагноз подтверждается возрастанием титра антител в сыворотках, взятых с 1-2-недельным интервалом. У детей первых двух лет жизни серологические реакции часто бывают отрицательными; • реакция иммунофлуоресценции (ускоренная диагностика). 47 13. Лечение и профилактика: Для плановой профилактики коклюша у детей используют адсорбированную коклюшно-дифтерийно-столбнячную вакцину (АКДС). На этом же компоненте основана выпускаемая отдельно убитая коклюшная вакцина, применяемая в детских коллективах по эпидемиологическим показаниям. Этот компонент реактогенен (нейротоксическое свойство), поэтому сейчас активно изучаются бесклеточные вакцины, содержащие от 2 до 5 компонентов (коклюшный анатоксин, филаментозный гемагглютинин, пертактин и 2 агглютиногена фимбрий). Для лечения применяют антибиотики (гентамицин, ампициллин), эффективные в катаральном и бесполезные в судорожном периоде заболевания. Адсорбированная коклюшно-дифтерийно-столбнячная вакцина (АКДС). Состав: смесь убитых мертиолятом коклюшных микробов и очищенных и концентрированных дифтерийного и столбнячного анатоксинов, адсорбированных на гидроокиси алюминия. Назначение: для профилактики коклюша, дифтерии и столбняка у детей с 5-6-месячного возраста до 6 лет. Способ применения: внутримышечно. Микробиология Туберкулёза 1. Видовое название возбудителя и его систематическое положение: M. tuberculosis, M.bovis, M.avium. Род Mycobacteriumотноситсяксемейству Mycobacteriaceae. Классификация: I. По скорости роста: 1) Быстрорастущие — крупные видимые колонии появляются ранее 7-го дня инкубации (18 видов); 2) Медленнорастущие — крупные видимые колонии появляются после 7-ми и более дней инкубации (20 видов); 3) Микобактерии, которые требуют специальных условий для роста или не растут на искусственных питательных средах. К этой группе относятся два вида:М. leprae и М. lepraemurium; II. По способности к пигментообразованию: 1) Фотохромогенные – образуют пигмент лимонно-желтого цвета при росте на свету; 48 2) Скотохромогенные – образуют пигмент оранжево-желтого цвета при инкубировании в темноте; 3) Нефотохромогенные – пигмента не образуют (независимо от наличия света), иногда культуры имеют светло-желтоватую окраску. Многие биологические свойства микобактерий объясняются высоким содержа- нием липидов, составляющих до 40 % сухого остатка клеток. Обнаружены три фракции липидов: фосфатидная (растворимая в эфире), жировая (растворимая в эфире и ацетоне) и восковая (растворимая в эфире и хлороформе). В составе липидов имеются различные кислотоустойчивые жирные кислоты, в том числе туберкуло-стеариновая, фтиоидная, миколовая и др. Высокое содержание липидов определяет следующие свойства туберкулезных палочек: 1) Устойчивость к кислотам, щелочам и спирту. 2) Трудная окрашиваемость красителями. 3) Относительно высокая устойчивость к высушиванию и действию солнечных лучей. 4) Устойчивость к действию обычных дезинфицирующих веществ. 5) Высокая гидрофобность, которая находит свое отражение в культуральных свойствах. 6) С высоким содержанием липидов связана и патогенность туберкулезных бак- терий. 2. Морфологические свойства: • 1,0-4,0 х 0,3-0,6 мкм; • тонкие, стройные, короткие или длинные, прямые или искривленные палочки; в старых культурах наблюдаются нитевидные, ветвящиеся формы, нередко зернистые формы (зерна Муха), как в виде свободно лежащих зерен, так и в виде зерен, содержащихся внутриклеточно. В организме больных под влиянием химиопрепаратов часто образуются ультрамалые формы, способные проходить через мелкопористые бактериальные фильтры («фильтрующиеся формы»); • неподвижны, спор и капсул не образуют. 3. Тинкториальные свойства: • Г+; • окраска Циля-Нильсена (концентрированный раствор карболового фуксина при подогревании). Восприняв окраску, туберкулезные бактерии, в отличие от 49 других клеток, не обесцвечиваются ни спиртом, ни кислотой, ни щелочью, поэтому при докрашивании метиленовым синим в мазке все бактерии, клеточные элементы и слизь окрашиваются в синий цвет, а туберкулезные палочки сохраняют исходную красную окраску. Этот метод позволяет дифференцировать их от некоторых непатогенных микобактерий, например М.smegmatis, содержащихся на слизистой оболочке уретры, но обесцвечивающихся спиртом. Вместе с тем необходимо иметь в виду, что встречаются и кислотоподатливые («синие» при окрашивании по Цилю- Нильсену) формы туберкулезных бактерий (в том числе палочковидные, нитевидные и зернистые). 4. Физиологические свойства: • аэроб; • оптимальная температура для роста 37 °С; • оптимальная рН - в пределах 6,4-7,0. 5. Культуральные свойства: • требовательны к питательным средам; • на глицериновом бульоне рост в виде пленки желтоватого цвета, которая постепенно утолщается, становится ломкой и приобретает бугристо- морщинистый вид, при этом бульон остается прозрачным; • на глицериновом агаре через 7-10 дней образуется сухой чешуйчатый налет, постепенно переходящий в грубые бородавчатые образования; • на щелочном альбуминате (или на стекле, помещенном в цитратную лизированную кровь) рост туберкулезных бактерий, содержащих поверхностный гликолипид (корд-фактор) змеевидный – размножающиеся клетки располагаются, образуя структуру, напоминающую змею, жгут, веревку или женскую косу; • наилучшей считается яичная среда Левенштейна-Иенсена. Кроме того, предложена специальная полужидкая среда для выделения L-форм М.tuberculosis; • метод микрокультур: на предметное стекло наносят исследуемый материал, обрабатывают его серной кислотой, отмывают, стекло помещают в цитратную лизированную кровь и инкубируют при температуре 37 0 С. Уже через 3-4 суток рост микобактерий на стекле проявляется в виде микроколоний, которые к 7-10-му дню достигают максимального развития, а микобактерии хорошо выявляются при микроскопии. При этом вирулентные микобактерии образуют змеевидные колонии, а невирулентные растут в виде аморфных скоплений. 50 6. Биохимические свойства: • высокая каталазная и пероксидазная активность; • синтезируют ниацин (никот.к-та), который накапливает в культуральной среде (проба Конна); • дифференцировка видов микобактерий между быстро- и медленно растущими производится с учетом способностей восстанавливать нитраты, теллурит, наличия уреазы, никотин- и пиразинамидазы и др. и т.д. 7. Антигенные свойства: • вид M.tuberculosis однороден по АГ-структуре (сероваров нет), сходен с M.bovis и M.microti; • имеется широкий набор антигенов, способных вызывать в организме человека и животных образование антиполисахаридных, антифосфатидных, антипротеиновых и иных антител, различающихся по своей специфичности. Живые и убитые бактерии способны индуцировать развитие гиперчувствительности замедленного типа. Этим свойством не обладают ни белки, ни одна из липидных фракций микобактерий. Для внутривидовой дифференциацииМ. tuberculosis разработана система классификации, основанная на фаготипировании штаммов с помощью набора из десяти микобактериофагов: 4 основных и 6 вспомогательных. 8. Факторы патогенности: • фтиоидная, миколовая и другие жирные кислоты в составе липидов – оказывают своеобразное токсическое действие на клетки тканей. Липиды клеточной стенки подразделяются на 3 фракции: ➢ фосфатидная – наиболее активная из всех липидов, обладает способностью вызыватьвнормальном организме специфическую тканевую реакцию собразованиемэпителиоидных клеток; ➢ жировая– ответственна за образование туберкулоидной ткани. Эти свойства указанных липидных фракций связаны с наличием в их составе фтиоидной кислоты; ➢ восковая – липиды данной фракции содержат миколовую кислоту, способной вызыватьреакции с образованием многочисленных гигантских клеток. 51 Таким образом, с липидами, состоящими из нейтральных жиров, восков, стеринов, фосфатидов, сульфатидов и содержащими такие жирные кислоты, как фтиоидная, миколовая, туберкуло-стеариновая, пальмитиновая и другие, связаны патогенные свойства туберкулезной палочки и те биологические реакции, которыми ткани отвечают на их внедрение. • Главным фактором патогенности является токсический гликолипид (корд-фактор), которыйрасполагаетсяна поверхности и в толще клеточной стенки. По химической природе он представляет собой полимер, состоящий из одной молекулы дисахарида трегалозы и связанных с ней в эквивалентных соотношениях миколовой и миколиновой высокомолекулярных жирных кислот – трегалоза-6,6'-димиколат (С 186 Н 366 О ш ). Корд-фактор не только оказывает токсическое действие на ткани, но и защищает туберкулезные палочки от фагоцитоза, блокируя окислительное фосфорилирование в митохондриях макрофагов. Будучи поглощеннымифагоцитами,они размножаются в них и вызывают их гибель. Корд-фактор обладает двумя характерными свойствами, указывающими на его важную роль как основного фактора патогенности. 1. При внутрибрюшинном заражении белых мышей он вызывает их гибель. Подобным действием не обладает ни одна другая фракция туберкулезной палочки; 2. Он подавляет миграцию лейкоцитов больного туберкулезом человека (in vivo и in vitro). М. tuberculosis, лишенные корд-фактора, являются непатогенными или слабопа- тогенными для человека и морских свинок. С необычным химическим составом туберкулезных клеток связана также способность их вызывать характерную для туберкулеза реакцию гиперчувствительности замедленного типа, выявляемую с помощью туберкулиновой пробы. |