Методвказ_вки (БП). Методичні вказівки до практичних занять з біологічної та біоорганічної хімії для студентів медичного факультету
Скачать 491 Kb.
|
Самостійна аудиторна робота
апофермент – ........ кофермент – ......... холофермент – ..... кофактор – ........... простетична група – .......
2. Виконати лабораторну роботу «Денатурація ферментів під впливом високої температури» і захистити протокол. Принцип методу. Більшість білків випадають в осад і денатуруються при температурі вище 50 - 55оС внаслідок руйнування водневих і гідрофобних зв’язків. Але деякі білки, в складі яких багато дисульфідних зв’язків, стійких при високій температурі, здатні до ренатурації, не втрачають своєї структури і функціональної активності після припинення дії високої температури (ферменти:трипсин, рибонуклеаза). Фермент α-амілаза (КФ 3.2.1.1) слини каталізує гідроліз α –1,4-глікозидного зв’язку крохмалю і глікогену з утворенням дисахариду мальтози та декстринів. Про вплив температури на активність амілази слини судять за розщепленням крохмалю. Ступінь розщеплення крохмалю виявляють йодокрохмальною реакцією: нерозщеплений крохмаль з йодом дає синє забарвлення. Кінцеві продукти гідролізу крохмалю - мальтоза і глюкоза – не реагують з йодом. Хід роботи. В пробірку відливають невелику кількість нерозведеної слини (2 або 3 мл) і кип’ятять її протягом 5-8 хв., після чого охолоджують. В три пробірки наливають по 10 крапель 1% розчину крохмалю. В 1-у пробірку добавляють 10 крапель слини, не кип’яченої, в 2-у - 10 крапель прокип’яченої слини, в 3-ю - 10 крапель води в якості контролю. Всі пробірки поміщають в термостат або водяну баню при температурі 38оС на 10 хв. Після цього проводять якісну реакцію на крохмаль і продукти його розщеплення. Реакція на крохмаль (йодна проба). До досліджуваного розчину доливають 10 крапель р-ну йоду в йодиді калію. В присутності крохмалю з’являється синє забарвлення; в контрольній пробі і в пробі з прокип’яченою слиною спостерігається синє забарвлення, так як прокип’ячена слина втрачає свої ферментативні властивості і не розщеплює крохмаль. Література
Обговорено і затверджено на засіданні кафедри, протокол №1 від 28.08.2008р. Зав. кафедрою проф. Ерстенюк А.М. Заняття №3 Тема: ФІЗИКО-ХІМІЧНІ ВЛАСТИВОСТІ БІЛКІВ-ФЕРМЕНТІВ.Актуальність теми: Знання властивостей ферментів необхідні для розуміння механізму дії ензимів та застосування ферментативних препаратів у практичній медицині. Навчальні цілі: Знати: фізико-хімічні властивості ферментів. Вміти: провести дослідження впливу рН на активність амілази слини та інтерпретувати одержані дані. Самостійна позааудиторна роботаВ зошитах для протоколів: а) намалюйте графіки залежності активності ферментів від температури і рН середовища. б) підготуйте вихідні дані для оформлення протоколу лабораторної роботи „Вплив рН середовища на активність амілази слини”. Контрольні питання
|