Главная страница
Навигация по странице:

  • 4.1 Исследование иммуномодулирующего действия экстракта из эми­ниума Регеля

  • Таблица 5 - Влияние эминиума Регеля на продукты перекисного окисления ли­пидов (ПОЛ) в печени после ионизирующего облучения и эмоционального стресса

  • ПРИМЕНЕНИЕ ЛЕКАРСТВЕННЫХ РАСТЕНИЙ ПРОТИВООПУХОЛЕВОГО ДЕЙСТВИЯ ПРИ ПРОИЗВОДСТВЕ ФУНКЦИОНАЛЬНЫХ ПИЩЕВЫХ ПРОДУКТОВ. Монография. Монография Семей 2017 удк 615. 3 Ббк 52. 8155. 6 П 75 Рецензенты


    Скачать 1.03 Mb.
    НазваниеМонография Семей 2017 удк 615. 3 Ббк 52. 8155. 6 П 75 Рецензенты
    АнкорПРИМЕНЕНИЕ ЛЕКАРСТВЕННЫХ РАСТЕНИЙ ПРОТИВООПУХОЛЕВОГО ДЕЙСТВИЯ ПРИ ПРОИЗВОДСТВЕ ФУНКЦИОНАЛЬНЫХ ПИЩЕВЫХ ПРОДУКТОВ
    Дата08.07.2021
    Размер1.03 Mb.
    Формат файлаdoc
    Имя файлаМонография.doc
    ТипМонография
    #223739
    страница4 из 7
    1   2   3   4   5   6   7

    4. Исследование влияния извлеченных из лекарственных растений природных компонентов на состояние и обменные процессы в органах им­мунной системы живого организма
    Как известно, основными методами лечения онкологических боль­ных яв­ля­ются хирургический метод, радио ‑ и химиотерапия. Более 60 % онкологичес­ких больных подвергаются лучевому методу лечения, который, в отличие от хирургического метода, называют бескровным. Но он имеет негативные послед­ствия для организма человека. Ранние общие лучевые реакции прояв­ляют­ся в виде снижения аппетита, тошноты, рвоты, снижения количества лейкоци­тов, тромбоцитов, лимфоцитов в крови, анемии (снижении количест­ва гемоглобина и эритроцитов). У части больных угнетение кроветворных ор­ганов выявляется и после окончания лечения и оказывается достаточно стойким.

    Химиотерапия также является распространенным методом ле­чения при злокачественных опухолях. Она основана на применении цитостатиков - хими­ческих веществ, повреждающих и убивающих клетки в процессе их деления. Особенностью химиотерапевтического лечения является его длительность и повторяемость. Отдельные повторные курсы введения препарата проводятся на протяжении нескольких лет, иногда в течение всей жизни больного. Так же как и при лучевой терапии, частым осложнением химиотерапии является угнетение кроветворения. После проведённого онкобольным курса химиотерапии отмечается резкое снижение всех показателей работы кроветворной систе­мы и самой крови [28].

    В формуле крови и её составе происходят резкие измене­ния, которые вы­ражены в падении уровня её структурных элементов. После химиотерапии им­мунитет больного резко снижается, что обусловлено падением уровня лей­коци­тов, отвечающих за иммунный ответ организма против различных инфекций и патологических агентов внутреннего и внешнего происхождения.

    Как следствие, снижение иммунного статуса приводит к подверженности пациентов любым инфекционным заболеваниям. Поэтому, после проведенного курса химиотерапии больные проходят лечение антибиотиками, чтобы избе­жать инфекционных заболеваний. Данная мера, конечно, не способствует улучшению общего состояния больного, которое и так понижено применением лучевой и химиотерапии.

    Всё вышесказанное обусловливает необходимость исследований по им­муномодулирующему действию экстрактов и настоек на живой организм, им­мунный статус которого был понижен в результате действия различных факто­ров, в частности, радиационного излучения и эмоционального стресса.

    Это объясняется тем, что иммуномодулирующее воздействие признано важным элементом противоопухолевого лечения. Несмотря на наличие доста­точного количества иммуномодуляторов синтетического происхождения, со­храняется интерес к лечению лекарственными растениями, обладающими им­муномодулирующими свойствами.

    Исследование иммунного статуса включает в себя определение количе­ства лейкоцитов, лимфоцитов, разнообразных подгрупп Т-лимфоцитов, кон­центрацию циркулирующих иммунных комплексов и др. На этом этапе учиты­ваются количество клеток, их процентное соотношение и функциональная ак­тивность.
    4.1 Исследование иммуномодулирующего действия экстракта из эми­ниума Регеля
    Известно, что ионизирующее излучение и различного рода стрессы мо­гут вызвать цепную реакцию метаболических нарушений в организме человека, ко­торые, в конечном счете, могут привести к развитию онкозаболеваний. Отсюда, представляет интерес изучение действия полученного нами экс­тракта эминиума Регеля на коррекцию функций иммунной системы подопыт­ных животных, нарушенных в результате облучения и стресс-воздействия.

    В связи с этим, были проведены следующие исследования:

    - по влиянию малой дозы ионизирующего гамма-излучения (0,2 Гр) и эмоционального стресса на иммунный статус животных (клеточный иммуни­тет);

    - по влиянию экстракта эминиума Регеля на состояние перекисного окис­ления липидов (ПОЛ) и антиоксидантной системы (АОС) в печени и селезенке облученных гамма-излучением в 0,2 Гр подопытных животных на фоне эмоци­онального стресса.

    Для изучения влияния малых доз ионизирующего гамма-излучения (0,2 Гр) и эмоционального стресса на иммунный статус животных были использо­ваны 30 половозрелых беспородных белых крыс обоего пола массой 180±20 г, которые были разделены на две группы: контрольную (интактные животные) и опытную (облученные животные).

    Животных облучали гамма-лучами 60Со на радиотерапевтической уста­новке «Луч-1» в дозе 0,2 Гр. Иммунологические показатели, характеризующие функциональное состояние разных звеньев иммунной системы организма животных, определяли до облучения крыс и через 3 месяца после него (таблица 3).
    Таблица 3 - Показатели клеточного иммунитета после гамма-излучения в дозе 0,2 Гр

    Показатели крови, в 1 мкл

    Исследуемые группы животных

    контрольная

    опытная

    Лейкоциты

    6525±147

    6291±170

    Лимфоциты

    1. 2821±111

    2. 41±2,3

    1. 4459±55

    2. 52,1±1,2

    СД3+ (Т-общие)

    1. 1462±85

    2. 33±1,8

    1. 767±15

    2. 17±0,8

    СД4+

    1. 703±86,0

    2. 21,3±1,8

    1. 340±11

    2 11±0,6

    СД8+

    1. 492±2,6

    2. 11,2±0,4

    1. 174±10

    2. 7,5±0,6

    СД4+/СД8+

    1,90±0,13

    1,46±0,07

    РТМЛ (индекс)

    0,82±0,05

    0,2±0,02

    Примечания:

    1 – абсолютное число в 1 мкл

    2 – относительное число лимфоцитов, %

    Как видно из таблицы 3, облучение приводит к уменьшению РТМЛ (в 4,1 раза), и к снижению содержания практически всех иммуноцитов, за исключе­нием лимфоцитов, число которых увеличивается в 1,58 раза. Уменьшение со­держания иммуноцитов (лейкоцитов - в 1,04 раза, СД+3 (Т-общие) – в 1,91 раза, СД4+ - в 2,07 раза, СД8+ - в 2,83 раза и соотношения СД4+/СД8+ в 1,3 раза) свидетельствует о снижении иммунного статуса животных под воздействием малой дозы ионизирующего облучения.

    На следующем этапе работы было изучено влияние эмоционального стресса на иммунный статус также 30 крыс, которые были разделены на две группы: контрольную (интактные животные) и опытную (животные, подверг­шие эмоциональному стрессу).

    Иммунологические показатели, характеризующие функциональное со­стояние различных звеньев иммунной системы организма животных, опреде­ляли после воспроизведения стресса в течение 1 суток, 2 суток, 3 суток. Резуль­таты исследований представлены в таблице 4.
    Таблица 4 - Показатели клеточного иммунитета при эмоциональном стрессе

    Показатели крови, в 1 мкл

    Исходное

    Длительность стресс-воздействия

    1 сутки

    2 суток

    3 суток

    Лейкоциты

    6520±150

    9725±323

    7430±256

    6900±190

    Лимфоциты

    1. 2600±113

    2. 40±3,6

    1. 7030±250

    2. 64±7,4

    1. 5174±123

    2. 69±6,3

    1. 4624±115

    2. 67±6,1

    СД3+ (Т-общие)

    1. 1457 ±84

    2. 32±2,2

    1. 1760±45

    2. 35±3,4

    1. 1687±49

    2. 32±2,8

    1. 1392±37

    2. 30±1,9

    СД4+

    1. 698±85,9

    2. 21,2±1,9

    1. 1079±25

    2. 20,0±2,1

    1. 1033±30

    2. 20,3±2,0

    1. 797±15

    2. 17±1,3

    СД8+

    1. 488±22

    2. 10,8±0,6

    1. 1024±36

    2. 14±1,3

    1. 654±23

    2. 12±0,3

    1. 595±11

    2. 13±0,4

    СД4+/СД8+

    1,96±0,16

    1,4±0,24

    1,69±0,17

    1,3±0,13

    РТМЛ (ед.)

    0,8±0,06

    0,5±0,01

    0,58±0,02

    0,63±0,017

    Примечания:

    1 – абсолютное число в 1 мкл

    2 – доля в общем числе лимфоцитов, %


    Как видно из таблицы 4, воздействие эмоционального стресса влияет на иммунный статус подопытных животных. Стресс-воздействие в наших экспе­риментах несколько повышал защитную реакцию организма, что отражалось в увеличении содержания иммуноцитов. Вместе с тем, как и в случае с облуче­нием (таблица 3) стресс-воздействие приводит к снижению РТМЛ в 1,27 – 1,6 раза и уменьшению соотношения СД4+/СД8+ в 1,16 -1,4 раза, что свидетель­ствует как о положительном, так и об отрицательном воздействиях стресса на организм животных.

    Длительность воздействия стресса снижает степень защитной реакции ор­ганизма, то есть, увеличение содержания иммуноцитов на 3 сутки было меньше, чем на 1 и 2 сутки стресс - воздействия. Так, например, содержание лейко­цитов после первых суток стресс - воздействия увеличилось на 3205 ед. в 1 мкл, тогда как после 3 суток стресс - воздействия содержание лейкоцитов увели­чи­лось всего на 380 ед. в 1 мкл. Это, по-видимому, объясняется тем, что после 3 суток стресс-воздействия наступает истощение защитных сил организма.

    Таким образом, на основании проведенных исследований установлено, что, как и ионизирующее облучение в малой дозе, так и стресс - воздействие ме­няют иммунный статус организма. При этом, если облучение вызывает уг­нете­ние защитных функций иммунитета, то кратковременное стресс - воздей­ствие (1 сутки) повышает иммунный статус организма. Однако, длительный стресс негативно воздействует на иммунную систему организма, снижая ди­на­мику увеличения содержания иммуноцитов.

    Как известно, одними из критериев состояния иммунной системы явля­ются показатели перекисного окисления липидов и антиоксидантной системы организма.

    В связи с этим, на следующем этапе работы было исследовано влияние экстракта эминиума Регеля на перекисное окисление липидов и антиоксидант­ную систему в печени и селезенке подопытных животных, облученных малой дозы гамма-излучения и животных, облученных малой дозы гамма-излучения уже на фоне эмоционального стресса.

    Известно, что радиоактивное облучение приводит к усилению перекис­ного окисления липидов. Активация перекисного окисления характерна для многих заболеваний, в том числе и онкологических заболеваний. И, как след­ствие, в результате усиления перекисного окисления липидов в организме уве­личивается содержание диеновых конъюгатов (ДК) и малонового диальдегида (МДА), которые являются продуктами распада липидов.

    Клетки организма имеют хорошо развитую защитную систему (антиокси­дантную систему) для обеспечения максимальной защиты их от перекисного окисления липидов. Активность антиоксидантной системы определяется со­держанием высокомолекулярных антиоксидантов, к которым относятся мем­браносвязанные ферменты - каталаза, глютатионредуктаза (ГР), глютатионпе­роксидаза (ГП). По увеличению содержания данных ферментов можно судить об усилении активации антиоксидантной системы.

    В связи с высокой чувствительностью организма человека к ионизирую­щему воздействию и другим неблагоприятным факторам возникает необ­хо­ди­мость в более детальном исследовании совместного действия ионизиру­ющего излучения в малых дозах и эмоционального стресса на состояние перекисного окисления липидов и антиоксидантной системы в печени и селезенке.

    Эксперименты проводились на 165 белых беспородных половозрелых крысах. Подопытных животных облучали малой дозой гамма-излучения (0,2 Гр) в течение 3 месяцев. По окончании облучения 3 группы животных подвер­гались эмоциональному стрессу в течение 1 суток, 2 суток, 3 суток, соответ­ственно. По завершении эмоционального стресса каждой группе животных вводили перорально экстракт эминиума Регеля в течение 10 дней в дозе 2,5 мл/кг массы тела. Результаты экспериментальных исследований представлены в таблицах 5, 6, 7 и 8.

    Для сравнительного анализа влияния эминиума Регеля на продукты пере­кисного окисления липидов в отдаленном периоде после ионизирующего облу­чения и эмоционального стресса подопытные животные были разделены на следующие группы:

    1. контроль - интактные животные;

    2. 1 опытный вариант - облученные в течение 3 месяцев животные;

    3. 2 опытный вариант - облученные в течение 3 месяцев животные, под­вергшиеся эмоциональному стрессу;

    4. 3 опытный вариант - облученные в течение 3 месяцев животные, под­вергшиеся эмоциональному стрессу и получавшие экстракт эминиума Регеля.

    Результаты исследования эминиума Регеля на продукты перекисного окисления липидов в печени облученных животных после ионизирующего об­лучения и эмоционального стресса представлены в таблице 5.

    Как видно из таблицы 5, у облученных животных малой дозой гамма-из­лучения (первый опытный вариант) в течение 3 месяцев существенных измене­ний в печени не наблюдалось со стороны перекисного окисления липидов (ДК и МДА) в сравнении с интактными животными (контрольный вариант).

    Дополнительное стресс-воздействие в течение суток на облученные жи­вотные в их печени наблюдается повышение содержаний ДК и МДА в 1,67 и 1,6 раз, соответственно.
    Таблица 5 - Влияние эминиума Регеля на продукты перекисного окисления ли­пидов (ПОЛ) в печени после ионизирующего облучения и эмоционального стресса

    Продукты ПОЛ

    Контроль

    Длительность эмоционального стресса

    1 сутки

    2 суток

    3 суток

    ДК, ед. опт. плотности/мг ОЛ

    0,67±0,06

    1) 0,69±0,05

    2) 1,12±0,11

    3) 0,97±0,08

    1) 0,69±0,05

    2) 1,03±0,08

    3) 0,81±0,07

    1) 0,69±0,05

    2) 2,37±0,20

    3) 1,21±0,11

    МДА, нмоль

    0,15±0,01

    1) 0,14± 0,01

    2) 0,24± 0,03

    3) 0,22±0,02

    1) 0,14± 0,01

    2) 0,23±0,02

    3) 0,18±0,02

    1) 0,14± 0,01

    2) 0,27±0,03

    3) 0,18±0,03

    Примечания:

    1) первый опытный вариант (облучение)

    2) второй опытный вариант (облучение + эмоциональный стресс)

    3) третий опытный вариант (облучение + эмоциональный стресс + экстракт эминиума Регеля)


    При увеличении стресс-воздействия до 2 суток в печени облученных жи­вотных содержания ДК и МДА остаются практически на том же уровне, что и после стресс-воздействия в течение 1 суток. Тогда как, при стресс-воздействии в течение 3 суток в печени облученных животных наблюдается повышение со­держаний ДК и МДА в 3,53 и 1,8 раза, соответственно.

    Таким образом, в печени подопытных животных, подвергших облучению малой дозы гамма-излучения и эмоциональному стрессу, происходит повыше­ние активности перекисного окисления липидов.

    По завершении эмоционального стресса каждой группе животных вво­дили перорально экстракт эминиума Регеля в течение 10 дней в дозе 2,5 мл/кг массы тела.

    Как видно из таблицы 5, введение экстракта эминиума Регеля облучен­ным животным, подвергшимся эмоциональному стрессу в течение 1 суток, 2 суток и 3 суток, привело к снижению содержания ДК и МДА в их печени. При­чем, значительное снижение ДК наблюдалось в варианте с 3-суточным стресс-воздействием с 2,37 до 1,21 ед. опт. плотности/мг ОЛ (то есть, почти в 2 раза).

    Таким образом, введение подопытным животным экстракта эминиума Ре­геля приводило к нормализации перекисного окисления липидов в их печени.

    Для понимания и оценки состояния иммунной системы организма жела­тельно исследовать перекисное окисление липидов еще на одном органе, участ­вующим в поддержании гомеостаза - на селезенке.

    Как видно из таблицы 6, в селезенке облученных животных в течение 3 месяцев малой дозой гамма-излучения (первый опытный вариант) наблюдалось незначительное увеличение активности перекисного окисления липидов (ДК и МДА) в сравнении с интактными животными (контрольный вариант).

    Дополнительное стресс-воздействие в течение 1 суток на облученных жи­вотных в их селезенке наблюдается повышение содержаний ДК и МДА в 1,12 и 1,13 раз, соответственно. При увеличении стресс-воздействия до 2 суток в селе­зенке облученных животных содержания МДА и ДК остается практически на том же уровне, что и после стресс-воздействия в течение суток. Тогда как, при стресс-воздействии в течение 3 суток в селезенке об­лученных животных на­блю­дается повышение содержаний ДК и МДА в 1,2 и 1,23 раза, соответственно.
    Таблица 6 - Влияние эминиума Регеля на продукты перекисного окисления ли­пидов (ПОЛ) в селезенке после ионизирующего облучения и эмоционального стресса

    Продукты ПОЛ

    Контроль

    Длительность эмоционального стресса

    1 сутки

    2 суток

    3 суток

    ДК, ед. опт. плотности/мг ОЛ

    1,27±0,15

    1) 1,34±0,12

    2) 1,42±0,11

    3) 1,34±0,12

    1) 1,34±0,12

    2) 1,43±0,14

    3) 1,30±0,11

    1) 1,34±0,12

    2) 1,51±0,13

    3) 1,27±0,11

    МДА, нмоль

    0,31±0,03

    1) 0,34±0,03

    2) 0,35±0,03

    3) 0,34±0,02

    1) 0,34±0,03

    2) 0,36±0,04

    3) 0,30±0,03

    1) 0,34±0,03

    2) 0,38±0,03

    3) 0,29±0,03

    Примечания:

    1) первый опытный вариант (облучение)

    2) второй опытный вариант (облучение + эмоциональный стресс)

    3) третий опытный вариант (облучение + эмоциональный стресс + экстракт эминиума Регеля)


    Таким образом, у подопытных животных, подвергшихся облучению ма­лой дозой гамма-излучения и эмоциональному стрессу, происходит повышение активности перекисного окисления липидов в селезенке, но незначительное в сравнении с печенью. Введение же подопытным животным экс­тракта эминиума Регеля приводило к нормализации перекисного окисления липидов в их селе­зенке.

    Так, например, как видно из таблицы 6, введение экстракта эминиума Ре­геля облученным животным, подвергшимся эмоциональному стрессу в течение 1 суток, 2 суток и 3 суток, привело к снижению содержания ДК и МДА. При­чем, значительное снижение ДК наблюдалось в варианте с 3-суточным стресс-воздействием с 1,51 до 1,27 ед. опт. плотности/мг ОЛ (то есть, на 16 %).

    Одним из возможных механизмов нормализации перекисного окисления липидов является активизация антиоксидантной системы, которая повышают защитную функцию организма.

    Результаты исследования состояния антиоксидантной системы печени подопытных животных представлены в таблице 7.

    Как видно из таблицы 7, у облученных животных (первый опытный вари­ант) существенных изменений антиоксидантного состояния печени не наблю­далось в сравнении с интактными животными (контрольный вариант).
    Таблица 7 – Влияние экстракта эминиума Регеля на содержание ферментов ан­тиоксидантной системы (АОС) в печени после ионизирующего облучения и эмоционального стресса

    Ферменты

    Контроль

    Длительность эмоционального стресса

    1 сутки

    2 суток

    3 суток

    Глютатион­редуктаза, мкмоль

    25,44±2,42

    1) 26,15±2,65

    2) 26,88±2,54

    3) 29,94±2,14

    1) 26,15±2,65

    2) 24,22±2,57

    3) 25,61±2,14

    1) 26,15±2,65

    2) 23,31±2,01

    3) 31,17±2,04

    Глютатион­пероксидаза, мкмоль

    177,33±15,55

    1) 186,11±14,24

    2) 164,33±14,34

    3) 167,73±12,28

    1) 186,11±14,24

    2) 154,98±11,65

    3) 160,39±12,56

    1) 186,11±14,24

    2) 151,85±13,27

    3) 172,49±12,04

    Каталаза,

    кат/л

    76,55±5,57

    1) 68,66±5,45

    2) 68,52±7,33

    3) 74,66±6,75

    1) 68,66±5,45

    2) 69,88±5,28

    3) 79,65±6.77

    1) 68,66±5,45

    2) 67,33±5,57

    3) 85,26±6,11

    Примечания:

    1) первый опытный вариант (облучение)

    2) второй опытный вариант (облучение + эмоциональный стресс)

    3) третий опытный вариант (облучение + эмоциональный стресс + экстракт эминиума Регеля)


    Вместе с тем, совместное воздействие ионизирующего облучения и стресс - воздей­ствия (второй опытный вариант) приводит к снижению концен­трации всех ферментов антиоксидантной системы, особенно на 3 сутки. Так, например, концентрация глутатионпе­рок­сидазы у облученных животных, под­вергшихся стресс-воздействию, уменьшилась на 3 сутки в 1,08 раз в сравнении с ее концентрацией у облученных животных, подвергшихся стресс-воздей­ствию в течение 1 суток.

    Введение экстракта эминиума Регеля жи­вотным перорально стимулирует антиоксидантную активность печени облученных животных, подвергшихся стресс-воздействию. Причем, стимулиру­ющее действие экстракта эминиума Ре­геля было более высоким на 3 сутки стресс-воздействия.

    Так, например, кон­цен­трация глутатионредуктазы у облученных животных, подвергшихся стресс-воздействию, увеличилась на 3 сутки в 1,34 раза, тогда как концентрация дан­ного фермента у облученных животных, подвергшихся стресс-воздействию в течение 1 суток, увеличилась под действием экстракта эминиума Регеля всего в 1,11 раз (таблица 7).

    Аналогичная динамика стимулирующего эффекта экстракта эминиума Ре­геля на антиоксидантную систему облученных животных, подвергшихся стресс - воздействию, наблюда­лась и в случаях с глютатионпероксидазой и ката­лазой.

    Таким образом, введение подопытным животным экстракта эминиума Ре­геля в наших исследованиях приводит к активизации антиоксидантной системы печени, что свидетельствует о возможности восстановления защитных систем ор­ганизмов, подвергшихся воздействию неблагоприятных факторов среды, за счет природных антиоксидантов.

    Аналогичная динамика стимулирующего действия экстракта эминиума Регеля на повышение антиоксидантной системы наблюдалась и в селезенке по­допытных животных.

    Результаты исследования состояния антиоксидантной системы селезен­ки подопытных животных представлены в таблице 8.

    Как видно из таблицы 8, у облученных животных (первый опытный вари­ант) наблюдалось угнетение антиоксидантной системы селезенки в срав­нении с интактными животными (контрольный вариант). Об этом свидетель­ствует сни­жение содержания всех трех ферментов в селезенке облученных животных по сравнению с интактными животными.

    Таблица 8 - Влияние экстракта эминиума Регеля на содержание ферментов ан­тиоксидантной системы (АОС) в селезенке после ионизирующего облучения и эмоционального стресса

    Ферменты

    Контроль

    Длительность эмоционального стресса

    1 сутки

    2 суток

    3 суток

    Глютатион­редуктаза, мкмоль

    37,33±3,81

    1) 30,58±3,12

    2) 29,24±2,44

    3) 38,38±3,12

    1) 30,58±3,12

    2) 32,22±2,57

    3) 37,34±3,73

    1) 30,58±3,12

    2) 26,31±2,01

    3) 30,12±2,12

    Глютатион­пероксидаза, мкмоль

    267,55±24,66

    1) 201,33±19,25

    2) 219,34±19,55

    3) 223,26±18,43

    1) 201,33±19,25

    2) 232,25±18,33

    3) 256,37±17,63

    1) 201,33±19,25

    2) 204,55+18,91

    3) 258,01±19,17

    Каталаза,

    кат/л

    61,36±5,56

    1) 49,66±4,18

    2) 46,38±4,97

    3) 58,67±4,11

    1) 49,66±4,18

    2) 43,55±4,13

    3) 56,43±4,12

    1) 49,66±4,18

    2) 43,07±3,68

    3) 55,99±5,17

    Примечания:

    1) первый опытный вариант (облучение)

    2) второй опытный вариант (облучение + эмоциональный стресс)

    3) третий опытный вариант (облучение + эмоциональный стресс + экстракт эминиума Регеля)


    Совместное воздействие ионизирующего облучения и стресс-воздей­ствия (второй опытный вариант) также приводит к снижению концентрации всех фер­ментов антиоксидантной системы селезенки, особенно на 3 сутки. Так, напри­мер, концентрация каталазы в селезенке облученных животных, подвергшихся стресс-воздействию, на 3 сутки уменьшилась в 1,08 раз в срав­нении с ее концен­трацией у облученных животных, подвергшихся стресс-воздей­ствию в течение 1 суток.

    Введение экстракта эминиума Регеля животным перорально стимулирует антиоксидантную активность селезенки облученных животных, подвергшихся стресс-воздействию. Так, например, в се­лезенке облученных животных, под­вергшихся стресс-воздействию, концен­трация каталазы под действием экс­тракта эминиума Регеля увеличилась на 1 сутки в 1,26 раза, на 2 сутки – в 1,28 раза, на 3 сутки – в 1,30 раз (таблица 8).

    Аналогичная динамика стимулирующего эффекта экстракта эминиума Регеля на антиоксидантную систему облученных животных, подвергшихся стресс-воздействию, наблюда­лась и в случаях с глютатионпероксидазой и глю­татионредуктазой.

    Таким образом, в наших исследованиях введение подопытным живот­ным экстракта эминиума Регеля приводит к активизации антиоксидантной системы в селезенке, также как и в печени, что свидетельствует о возможности восста­новления защитных систем организмов, подвергшихся воздейст­вию неблаго­приятных факторов среды, за счет природных антиоксидантов.

    На основании серии проведенных исследований по влиянию получен­ного нами экстракта эминиума Регеля на иммунный статус облученных гамма-излу­чением в 0,2 Гр подопытных животных на фоне эмоционального стресса было установлено, что:

    1) ионизирующее облучение в малой дозе и стресс-воздействие меняют иммунный статус организма. При этом если облучение вызывает угнетение за­щитных функций иммунитета, то кратковременное стресс-воздействие (1 сут­ки) несколько повышает иммунный статус организма. Однако, длительный стресс негативно воздействует на иммунную систему организма, снижая дина­мику увеличения содержания иммуноцитов.

    2) в печени и селезенке подопытных животных, подвергших облучению малой дозы гамма-излучения и эмоциональному стрессу, происходит повыше­ние активности перекисного окисления липидов. При этом, повышение актив­ности перекисного окисления липидов в селезенке животных наблюдается в не­значительной степени, в сравнении с печенью. Это объясняется, по-видимому, тем, что селезенка в большей степени, чем печень, принимает участие в под­держании иммунного статуса организма.

    Введение же подопытным животным экстракта эминиума Регеля при­во­дило к нормализации перекисного окисления липидов как в печени, так и в се­лезенке.

    3) совместное воздействие малой дозы ионизирующего облучения и стресс - воздей­ствия приводит к снижению концентрации всех ферментов анти­оксидантной системы как в печени, так и в селезенке, осо­бенно на 3 сутки. Вве­дение же экстракта эминиума Регеля животным пер­ораль­но стимулировало ан­тиоксидан­тную активность печени и селезенки облученных животных, под­вер­гшихся стресс-воздействию, что свидетельствует о возможности восстанов­ления за­щитных систем организмов, подвергшихся воздействию неблагоприят­ных факторов среды, за счет природных антиоксидантов.

    На следующем этапе исследований было изучено влияние экстракта эми­ниума Регеля на перекисное окисление липидов (на диеновые коньюгаты и ма­лоновый диальдегид в печени и селезенке) и антиоксидантную систему (на глютатионредуктазу, глютатионпероксидазу и каталазу в печени и селезенке) интактных (здоровых) животных и подопытных животных, облученных высо­кой дозой в 6 Гр гамма-излучения, без эмоционального стресса и на фоне эмо­ционального стресса.

    Как известно, радиация приводит к активации перекисного окисления ли­пидов организма, которая характерна для многих заболеваний, в том числе и онкологических заболеваний. И, как следствие, в результате усиления перекис­ного окисления липидов в организме увеличивается содержание диеновых конъюгатов (ДК) и малонового диальдегида (МДА), которые являются продук­тами распада липидов.

    Живой организм имеет хорошо развитую защитную систему на уровне целого организма (органы иммунной системы и иммуноциты) и на клеточном уровне (ферменты антиоксидантной системы). На клеточном уровне активность антиоксидантной системы обеспечивает максимальную защиту организма от перекисного окисления липидов, которая определяется содержанием высоко­молекулярных антиоксидантов - мембраносвязанных ферментов (каталазы, глютатионредуктазы, глютатионпероксидазы). По увеличению их содержания можно судить об усилении активации антиоксидантной системы.

    В связи с высокой чувствительностью организма человека к ионизирую­щему воздействию и другим неблагоприятным факторам возникает необходи­мость в более детальном исследовании совместного действия ионизирующего излучения в сублетальной дозе в 6 Гр и эмоционального стресса на состояние перекисного окисления липидов и антиоксидантной системы в печени и селе­зенке.

    Животные были разделены на 7 групп: контрольную (I группа - интакт­ные животные) и опытные группы.

    Опытные группы:

    • II группа - облученные животные на фоне эмоционального стресса в те­чение 1 суток;

    • III группа - облученные животные на фо­не эмоционального стресса в те­чение 2 суток;

    • IV группа - облученные животные на фо­не эмоционального стресса в те­чение 3 суток;

    • V группа - облученные животные на фоне эмоционального стресса в те­чение 1 суток с введением экстракта эминиума Регеля;

    • VI - облученные животные на фоне эмоционального стресса в течение 2 суток с введе­нием экстракта эминиума Регеля;

    • VII - облученные животные на фоне эмоционального стресса в течение 3 суток с введением экстракта эминиума Регеля.

    В гомогенатах тканей животных (в селезенке и печени) опытных и кон­трольной групп изучали продукты перекисного окисления липидов (ПОЛ). Экс­тракт эминиума Регеля (ЭР) вводился подопытным животным перорально в те­чение 14 дней в дозе 2,5 мл/кг массы тела.

    Результаты исследования экстракта эминиума Регеля на продукты пере­кисного окисления липидов в печени и селезенке облученных животных после ионизирующего облучения сублетальной дозой в 6 Гр и эмоционального стрес­са представлены в таблице 9 (диеновые коньюгаты) и таблице 10 (малоно­вый диальдегид).

    Как видно из таблицы 9, облучение животных сублетальной дозой радиа­ции дозой в 6 Гр (группы II, III, IV) на фоне эмоционального стресса приводит к повышению содержания диеновых коньюгатов (от 3,68 до 4,35 ед. опт. плотно­сти/мг ОЛ в печени и от 2,24 до 3,55 опт. плотности/мг ОЛ в селезенке).
    Таблица 9 - Влияние ЭР на продукты ПОЛ – диеновые коньюгаты (опт. плотно­сти/мг ОЛ) в селезенке и печени

    Объект

    Контроль­ная группа

    Длительность эмоционального стресса

    1 сутки

    2 сутки

    3 сутки

    Печень

    I. 0,67±0,06

    II. 3,68±0,31 ***

    V. 3,41±0,25

    III. 2,67±0,20 ***

    VI. 2,02±0,15 +

    IV. 4,35±0,30 ***

    VII. 3,64±0,31

    Селе­зенка

    I. 1,27±0,15

    II. 2,24±0,20 *

    V. 2,04±0,17

    III. 2,17±0,18 *

    VI. 1,67±0,12 +

    IV. 3,55±0,33 ***

    VII. 2,76±0,21 +

    Примечания:

    * - р≤0,05; ** - р≤0,01; *** - р≤0,001 достоверно к контрольной группе;

    + - р<0,05 достоверно к II-V, III-VI, IV-VII группам;

    II, III, IV группы гамма-облучение + эмоциональный стресс;

    V, VI, VII – гамма-облучение + эмоциональный стресс + эминиум Регеля


    Введение же экстракта эминиума Регеля достоверно снижает их содержа­ние. Причем, снижение диеновых коньюгатов в селезенке и печени под дейст­вием экстракта эминиума Регеля наибольшим было на 3 сутки воздействия эмо­ционального стресса (от 4,35 до 3,64 опт. плотности/мг ОЛ в печени и от 3,55 до 2,76 опт. плотности/мг ОЛ в селезенке).

    Как видно из таблицы 10, облучение животных сублетальной дозой ради­ации дозой в 6 Гр (группы II, III, IV) на фоне эмоционального стресса приводит к повышению содержания малонового диальдегида (от 0,19 до 0,36 нмоль в пе­чени и от 0,78 до 1,24 нмоль в селезенке).

    Введение же экстракта эминиума Регеля также достоверно снижает их содержание. Как и в случае диеновых коньюгатов, снижение содержания мало­нового диальдегида в селезенке и печени под действием экстракта эминиума Регеля было наибольшим на 3 сутки воздействия эмоциального стресса (от 0,36 до 0,21 нмоль в печени и от 1,24 до 1,01 нмоль в селезенке).

    Таблица 10 - Влияние Эминиум Регеля на продукт ПОЛ – малоновый диальде­гид (нмоль) в селезенке и печени

    Объект

    Контроль­ная группа

    Длительность эмоционального стресса

    1 сутки

    2 сутки

    3 сутки

    Печень

    I. 0,15±0,01

    II. 0,19±0,02

    V. 0,18±0,02

    III. 0,23±0,02**

    VI. 0,15±0,01+

    IV. 0,36±0,04 ***

    VII. 0,21±0,02+

    Селе­зенка

    I. 0,31±0,03

    II. 0,78±0,08 ***

    V. 0,65±0,06

    III. 0,67±0,07 **

    VI. 0,54±0,05

    IV. 1,24±0,09 ***

    VII. 1,01±0,11

    Примечания:

    * - р≤0,05; ** - р≤0,01; *** - р≤0,001 достоверно к контрольной группе;

    + - р<0,05 достоверно к II-V, III-VI, IV-VII группам;

    II, III, IV группы гамма-облучение + эмоциональный стресс;

    V, VI, VII – гамма-облучение + эмоциональный стресс + эминиум Регеля


    Таким образом, в печени подопытных животных, подвергших облучению высокой дозы гамма-излучения и эмоциональному стрессу, происходит повы­шение активности перекисного окисления липидов, которое характерно для многих заболеваний, в том числе и онкологических заболеваний.

    Тогда как, введение подопытным животным экстракта эминиума Регеля приводит к понижению активности перекисного окисления липидов, что свиде­тельствует о проявлении иммуномодулирующих свойств данного лекарствен­ного растения.

    К одним из возможных механизмов нормализации перекисного окисле­ния липидов является активизация антиоксидантной системы, которая повы­шают защитную функцию организма.

    Результаты исследования состояния антиоксидантной системы по актив­ности ферментов в печени и селезенке подопытных животных представлены в таблице 11 (глютатион редуктаза), таблице 13 (глютатионпероксидаза), таблице 14 (каталаза).

    Как видно из таблицы 11, облучение животных сублетальной дозой ради­ации дозой в 6 Гр (группы II, III, IV) на фоне эмоционального стресса приводит к понижению активности глютатионредуктазы (от 22,66 до 15,43 мкмоль/мг в сек в печени и от 26,22 до 17,22 мкмоль/мг в сек в селезенке).

    Таблица 11 - Влияние экстракта эминиума Регеля на активность ферментов ан­тиоксидантной системы - глютатионредуктазы (мкмоль/мг в сек) в селезенке и печени

    Объект

    Контрольная группа

    Длительность эмоционального стресса

    1 сутки

    2 сутки

    3 сутки

    Печень

    I. 25,44±2,42

    II. 22,66±2,12

    V. 24,34±2,03

    III. 19,12±1,53*

    VI. 26,88±2,31+

    IV. 15,43±1,23 *

    VII. 25,29±2,03++

    Селе­зенка

    I. 37,33±3,81

    II. 26,22±2,53*

    V. 29,67±2,65

    III. 23,21±1,83*

    VI. 24,56±2,13

    IV. 17,22±1,22 **

    VII. 25,55±3,01+

    Примечания:

    * - р≤0,05; достоверно к контрольной группе;

    + - р<0,05 достоверно к II-V, III-VI, IV-VII группам;

    II, III, IV группы гамма-облучение + эмоциональный стресс;

    V, VI, VII – гамма-облучение + эмоциональный стресс + эминиум Регеля


    Введение же экстракта эминиума Регеля также достоверно повышает ак­тивность глютатионредуктазы. Повышение активности глютатионредуктазы в селезенке и печени под действием экстракта эминиума Регеля наблюдается на первые сутки с 22,66 до 24,34 мкмоль/мг в сек, на вторые сутки с 19,12 до 26,88 мкмоль/мг в сек, на третьи сутки с 15,43 до 25, 29 мкмоль/мг в сек в печени. В селезенке также наблюдается положительный эффект экстракта эминиума Ре­геля - на первые сутки с 26,22 до 29,67 мкмоль/мг в сек, на вторые сутки с 23,21 до 24,56 мкмоль/мг в сек, на третьи сутки с 17,22 до 25,55 мкмоль/мг в сек в се­лезенке.

    Таким образом, наблюдается стимулирующее действие экстракта эмини­ума Регеля на активность фермента антиоксидантой системы - глютатионре­дуктазы в селезенке и печени.

    Облучение животных сублетальной дозой радиации дозой в 6 Гр (группы II, III, IV) на фоне эмоционального стресса приводит также к понижению ак­тивности глютатионпероксидазы (от 126,63 до 111,87 мкмоль/мг в сек в печени и от 149,38 до 130,07 мкмоль/мг в сек в селезенке) (таблица 12).

    Введение экстракта эминиума Регеля достоверно повышает активность глютатионпероксидазы. Повышение активности глютатионпероксидазы в селе­зенке и печени под действием экстракта эминиума Регеля наблюдается на пер­вые сутки с 126,63 до 130,29 мкмоль/мг в сек , на вторые сутки с 120,78 до 143,63 мкмоль/мг в сек, на третьи сутки с 111,87 до 124,36 мкмоль/мг в сек в печени.
    Таблица 12 - Влияние экстракта эминиума Регеля на активность ферментов ан­тиоксидант­ной системы - глютатионпероксидазы (мкмоль/мг в сек) в селезенке и печени

    Объект

    Контрольная группа

    Длительность эмоционального стресса

    1 сутки

    2 сутки

    3 сутки

    Печень

    I. 177,33±15,55

    II. 126,63±10,53*

    V. 130,29±12,18

    III. 120,78±10,04*

    VI143,63±11,18

    IV. 111,87±9,39 *

    VII. 124,36±10,12

    Селе­зенка

    I. 267,55±24,66

    II. 149,38±13,28 **

    V. 150,27±14,11

    III. 151,67±12,55 **

    VI. 155,36±14,48

    IV. 130,07±11,47 ***

    VII. 138,66±13,56

    Примечания:

    * - р≤0,05; ** - р≤0,01; *** - р≤0,001 достоверно к контрольной группе;

    + - р<0,05 достоверно к II-V, III-VI, IV-VII группам;

    II, III, IV группы гамма-облучение + эмоциональный стресс;

    V, VI, VII – гамма-облучение + эмоциональный стресс + эминиум Регеля.


    В селезенке также наблюдается положительный эффект экстракта эмини­ума Регеля - на первые сутки с 149,38 до 150,27 мкмоль/мг в сек, на вторые сутки с 151,67 до 155,36 мкмоль/мг в сек, на третьи сутки с 130,07 до 138,66 мкмоль/мг в сек в селезенке.

    На основании проведенных исследований установлено, что экстракт эми­ниума Регеля достоверно повышает активность глютатионпероксидазы как в печени, так и в селезенке. Однако, в печени на вторые сутки повышение актив­ности глютатионредуктазы достоверно выше, чем в селезенке.

    Результаты исследования влияния экстракта эминиума Регеля на актив­ность каталазы (кат/л) в селезенке и печени подопытных животных, облучен­ных сублетальной дозой радиации в 6 Гр представлена в таблице 13.

    Таблица 13 - Влияние экстракта эминиума Регеля на активность ферментов ан­тиоксидантной системы - каталазы (кат/л) в селезенке и печени

    Объект

    Контрольная группа

    Длительность эмоционального стресса

    1 сутки

    2 сутки

    3 сутки

    Печень

    I. 76,75±5,57

    II. 42,66±4,05**

    V. 43,42±4,62

    III. 48,11±4,21**

    VI1. 67,28±6,55+

    IV. 31,36±2,29** *

    VII. 46,87±4,23+

    Селе­зенка

    I. 61,36±5,56

    II. 37,69±3,22 *

    V.39,97±3,54

    III. 35,83±3,13 **

    VI. 49,37±5,19

    IV. 29,37±2,85 ***

    VII. 49,33±5,52 +

    Примечания:

    * - р≤0,05; ** - р≤0,01; *** - р≤0,001 достоверно к контрольной группе; + - р<0,05 достоверно к II-V, III-VI, IV-VII группам;

    II, III, IV группы гамма-облучение + эмоциональный стресс;

    V, VI, VII - гамма-облучение + эмоциональный стресс + эминиум Регеля.


    Как видно из таблицы 13, динамика стимулирующего эффекта экстракта эминиума Регеля на антиоксидантную систему облученных животных, под­вергшихся стресс-воздей­ствию, в случаях с каталазой была аналогична дина­мике действия экстракта эминиума Ре­геля на активности антиоксидантных ферментов – глютатионредуктазы и глютатионпероксидазы.

    На основании полученных данных установлено, что при действии облу­чения сублетальной дозой в 6 Гр на фоне эмоционального стресса происходит активация ПОЛ в печени и селезенке, что проявляется в увеличении содержа­ния диеновых коньюгатов и малонового диальдегида.

    Экстракт же эминиума Регеля оказывает нормализующее влияние на со­держание диеновых коньюгатов в селезенке и на содержание малонового ди­альдегида в печени на 2 и 3 сутки эксперимента. Это свидетельствует о прояв­лении антиоксидантных свойств у экстракта эминиума Регеля.

    Таким образом, все экспериментальные данные по исследованию имму­номодулирующего действия экстракта из эминиума Регеля показали, что дан­ный растительный экстракт оказывает протекторное дей­ствие против негатив­ного воздействия эмоцио­нального стресса и ионизирующего облучения (как низкой дозы в 0,2 Гр, так и сублетальной – в 6 Гр), которые вызывают иммуно­дефицитное состояние организма через нарушения в перекисном окислении липидов и антиоксидантной системе.

    Особый интерес представляет исследование возможного иммуномодули­рующего действия полученных нами настоек из 2 растительных композиций на основе 5 фармакопейных лекарственных растений на сниженный иммунный ста­тус живого организма, подвергшегося радиационному облучению.

    Во-первых, каждая настойка получена не из одного, а из 3 лекарственных растений, каждое из которых содержит целый ряд биологически активных ве­ществ, которые, как было показано нами, обладали противоопухолевым дей­ствием. Во-вторых, как было сказано выше:

    • настойки представляют собой сложный комплекс метаболитов вторич­ного происхождения, лечебное дей­ствие которых обусловливается не одним только действующим веществом;

    • настойки весьма просты в получении и экономически выгодны в производ­стве;

    • при изготовлении настоек был использован этиловый спирт, благодаря ко­торому они могут храниться несколько лет, не теряя своих целебных свойств.

    1   2   3   4   5   6   7


    написать администратору сайта