ПРИМЕНЕНИЕ ЛЕКАРСТВЕННЫХ РАСТЕНИЙ ПРОТИВООПУХОЛЕВОГО ДЕЙСТВИЯ ПРИ ПРОИЗВОДСТВЕ ФУНКЦИОНАЛЬНЫХ ПИЩЕВЫХ ПРОДУКТОВ. Монография. Монография Семей 2017 удк 615. 3 Ббк 52. 8155. 6 П 75 Рецензенты
Скачать 1.03 Mb.
|
4.2 Исследование иммуномодулирующего действия настоек из 2 растительных композиций В работе были использованы настойки из двух композиций, отличающихся составом лекарственных растений. В состав композиции 1 входили тимьян ползучий, береза повислая, девясил высокий (в соотношении 1:2:2). Состав композиции 2 состоял из мяты перечной, подорожника среднего, девясила высокого (в соотношении 1:2:2). Для сравнительного анализа противоопухолевого действия настоек из этих двух композиций были проведены серии параллельных экспериментов по идентичной схеме, поскольку разный состав растений двух этих композиций предопределяет и разное содержание биологически активных веществ в настойках. Для исследования противоопухолевых эффектов исследуемых настоек подопытные животные подвергались сублетальной дозе в 6 Гр, поскольку, при такой большой дозе облучения начинается процесс онкогенеза, вызванного радиацией. Данный процесс характеризуется на первом этапе угнетением иммунной системы организма, которое проявляется в изменениях иммунологических показателей клеточного иммунитета и неспецифической фагоцитарной резистентности и, впоследствии, к появлению злокачественных новообразований [106]. Учитывая, что первой мишенью радиационного облучения является иммунная система организма, то на данном этапе работе для исследования противоопухолевых свойств и возможного иммуномодулирующего действия настоек из двух растительных композиций были проведены эксперименты по исследованию действия двух растительных композиций на иммунологические показатели и неспецифическую фагоцитарную резистентность интактного (здорового) и организма при онкопроцессе радиационного происхождения. В экспериментах были использованы 35 половозрелых беспородных белых крыс обоего пола массой 180±20 г, которые были разделены на две группы: контрольную (15 интактных животных) и опытную (20 облученных животных). Иммунологические показатели, характеризующие функциональное состояние различных звеньев иммунной системы организма животных, определяли в обеих группах до начала эксперимента. Затем, животных опытной группы облучали однократно гамма-лучами 60Со в дозе 6 Гр, по истечении 30 дней животным обеих групп (интактные и облученные) вводили композиции в дозе 2,5 мл на 1 кг в течение 14 дней. Затем снимали иммунологические показатели животных обеих групп (интактных и облученных). Результаты исследования влияния сублетальной дозы гамма-излучения (6 Гр) на иммунную систему животных представлены в таблице 14. Как видно из таблицы 14, сублетальная доза гамма-излучения (6 Гр) приводила к уменьшению содержание практически всех иммуноцитов, кроме лимфоцитов, содержание которых увеличилось в 1,56 раза. Также наблюдалось увеличение РТМЛ (индекса) в 1,71 раза, что свидетельствует о большем снижении иммунного статуса животных, подверженных сублетальной дозе гамма-излучения (6 Гр). Эти данные указывают на то, что сублетальная доза в 6 Гр приводит к изменению иммунологических показателей, свидетельствующего о появлении в организме облученных подопытных животных первых признаков появления онкологического заболевания под воздействием радиации. Таблица 14 - Влияние гамма-излучения в дозе 6 Гр на Т-систему иммунитета
На первом этапе было исследовано влияние настойки первой композиции (композиции 1) на Т-систему иммунитета интактного (необлученного) животного. Первая композиция состояла из следующих лекарственных растений: тимьян ползучий, береза повислая, девясил высокий в соотношении 1:2:2, соответственно. К группе 1 относятся интактные животные, которым не вводили исследуемую настойку, к группе 2 относятся животные, которым вводили настойку из первой растительной композиции в дозе 2,5 мл/кг перорально в течение 14 дней. Результаты исследования представлены в таблице 15. Таблица 15 - Влияние композиции 1 на показатели Т-системы иммунитета
Как видно из таблицы 15, введение настойки первой растительной композиции незначительно повышает уровень лейкоцитов на 11 %, а лимфоцитов – на 15 % в периферической крови интактных животных, что свидетельствует о том, что настойка из данной композиции не влияла на иммунный статус здорового организма. В пользу данного утверждения свидетельствует идентичность показателей РТМЛ первой и второй группы животных, поскольку уменьшение значения РТМЛ свидетельствовало бы о возникновении аллергических реакций организма. Кроме того, уменьшение показателя ЦИК (38 %) в группе 2 свидетельствует о том, что введение настойки первой растительной композиции не вызывает ответной аллергической реакции организма подопытных животных. Таким образом, по результатам исследований следует, что исследуемая настойка не оказывает существенного влияния на клеточное звено иммунитета необлученного (интактного) организма. Результаты исследования влияния настойки из первой растительной композиции на неспецифическое фагоцитарное звенья иммунитета интактного организма представлены в таблице 16. Таблица 16 - Влияние композиции 1 на показатели неспецифического фагоцитарного звена
Увеличение фагоцитоза (от 36,2 до 40 %), фагоцитарного числа (Ф/Ч) (от 1,6 до 2,1), тест восстановления нитросинего тетразолия (НСТ-теста) (от 4,9 до 8,0) свидетельствует о том, что исследуемая настойка положительно влияет на неспецифическую фагоцитарную резистентность организма и повышает функционально-метаболическую активность нейтрофилов (таблица 16). Таким образом, установлено, что введенная настойка первой растительной композиции: - не является токсичной для организма; - оказывает иммуностимулирующее влияние на неспецифическую фагоцитарную резистентность интактного организма, повышая функционально-метаболическую активность нейтрофилов, что, в свою очередь, усиливает процессы элиминации ЦИК (комплекс антиген и антитело), приводя к снижению их концентрации. На следующем этапе исследований были проведены аналогические эксперименты с настойкой второй композиции лекарственных растений (композиция 2). Вторая композиция состояла из следующих лекарственных растений: мята перченая, подорожник средний, девясил высокий в соотношении 1:2:2, соответственно. Результаты исследования влияния композиции 2 на Т-систему иммунитета интактного организма представлены в таблице 17. Как видно из таблицы 17, введение настойки второй растительной композиции незначительно повышает уровень лейкоцитов на 9 %, а лимфоцитов – на 10 % в периферической крови интактных животных, что свидетельствует о том, что настойка из данной композиции не влияла на иммунный статус здорового организма. Таблица 17 - Влияние композиции 2 на показатели Т-системы иммунитета
Индекс миграции лейкоцитов в реакции РТМЛ достоверно повысился на 80 %, ЦИК в периферической крови снизился на 88 %. Увеличение РТМЛ является благоприятным фактором, свидетельствующим о повышении иммунного статуса организма подопытных животных. Уменьшение показателя ЦИК (88 %) в группе 2 свидетельствует о том, что введение настойки второй растительной композиции также, как и первая растительная композиция, не вызывает ответной аллергической реакции организма подопытных животных. Таким образом, по результатам исследований следует, что настойка композиции 2, в отличие от настойки композиции 1 оказывает положительное действие на клеточное звено иммунитета. Результаты исследования влияния настойки из второй растительной композиции на неспецифическое фагоцитарное звенья иммунитета интактного организма представлены в таблице 18. Как видно из таблицы 18, фагоцитоз увеличился от 36,2 до 46 % , фагоцитарное число - от 1,6 до 2,1, а значение НСТ - теста практически не изменилось. Таблица 18 - Влияние композиции 2 на показатели неспецифического фагоцитарного звена иммунитета
Эти данные свидетельствует о том, что исследуемая настойка положительно влияет на неспецифическую фагоцитарную резистентность организма, повышая функциональную активность клеточного звена иммунитета и активизируя функциональную способность лейкоцитов. Таким образом, установлено, что введенная настойка второй растительной композиции: - не является токсичной для организма; - оказывает иммуностимулирующее действие и на клеточное и фагоцитарное звено иммунитета интактного организма, повышая функциональную активность Т-лимфоцитов и поглотительную способность нейтрофилов. На следующем этапе работы было исследовано влияние настойки первой композиции на Т-систему иммунитета у животных, облученных сублетальной дозой радиации в 6 Гр. Животных облучали однократно по 6 Гр за 30 суток до введения им настойки. Подопытные животные 1 группы это животные, не получавшие облучения и настойку (интактные), животные 2 группы получали данную настойку в дозе 2,5 мл/кг через 30 дней после облучения в течение 14 дней перорально. Результаты исследования влияния настойки первой растительной композиции на иммунологические Т-показатели организма при онкопроцессе радиационного происхождения представлены в таблице 19. При развитии онкопроцесса радиационного генеза развивается депрессия во всех звеньях иммунной системы, то есть количество лейкоцитов уменьшилось с 6,5 у необлученных животных до 5 у облученных животных, а количество лимфоцитов у облученных животных увеличилось до 44 в сравнении с необлученными животными (см. таблица 14). Таблица 19 - Влияние композиции 1 на показатели Т-системы иммунитета при онкопроцессе
Введение облученным животным настойки первой растительной композиции привело к достоверному увеличению лейкоцитов в периферической крови до 8,7 (увеличение на 34 %), тогда как содержание лимфоцитов практически не изменилось. Наблюдается достоверное повышение концентрации ЦИК в сыворотке крови облученных животных, но при этом оно не достигает исходного уровня интактных животных. Таким образом, при развитии онкопроцесса настойка из первой растительной композиции оказывает иммуностимулирующее влияние на клеточное звено иммунитета, повышая функциональную активность Т-лимфоцитов. Для исследования воздействия применяемой настойки на иммунный статус подопытных животных, облученных сублетальной дозой радиации, необходимо дополнительно определить показатели неспецифического фагоцитарного звена иммунитета для оценки резистентности организма. Результаты исследования влияния настойки из первой растительной композиции на неспецифическое фагоцитарное звена иммунитета облученного организма подопытных животных, то есть при онкологическом процессе радиационного происхождения, представлены в таблице 20. Как видно из таблицы 20, под воздействием введенной настойки из первой растительной композиции у облученных подопытных животных отмечается нормализация показателей фагоцитоза, НСТ-теста и повышение фагоцитарного числа, что свидетельствует о нормализации неспецифической фагоцитарной резистентности организма облученного животного. Таблица 20 - Влияние композиции 1 на показатели неспецифического фагоцитарного звена иммунитета при онкопроцессе
Таким образом, при онкологическом процессе радиационного происхождения настойка из первой растительной композиции повышает функциональную активность лейкоцитов и нормализует неспецифическую фагоцитарную резистентность организма подопытных животных, что свидетельствует о нормализации иммунного статуса подопытных животных, сниженного под действием сублетальной дозы радиации. Аналогичные исследования были проведены на подопытных животных с введением настойки из второй растительной композиции. Результаты исследования влияния настойки из второй растительной композиции на Т-системы иммунитета организма при онкологическом процессе радиационного происхождения представлены в таблице 21. Таблица 21 - Влияние композиции 2 на показатели Т-системы иммунитета при онкопроцессе
Как видно из таблицы 21, введение настойки из второй растительной композиции облученным животным привело к несколько большему увеличению лейкоцитов в периферической крови до 9,0 (увеличение на 38 %) по сравнению с действием настойки из первой растительной композиции (увеличение 34 %). Содержание лимфоцитов практически не изменилось, как и в случае с настойкой из первой растительной композиции. Под действием настойки из второй композиции наблюдается достоверное повышение концентрации ЦИК в сыворотке крови у облученных животных, но при этом оно не достигает исходного уровня ЦИК интактных животных. При этом стимулирующее действие настойки из первой композиции было несколько выше (0,028), чем действие настойки из второй композиции (0,013). Тогда как, значение РТМЛ практически не изменилось под действием настойки. Таким образом, на основании полученных результатов по изучению влияния настойки из второй растительной композиции на состояние иммунитета облученных животных установлено, что под воздействием исследуемой настойки происходит улучшение функций клеточного звена иммунитета до уровня показателей интактного организма, повышение напряженности фагоцитарных реакций на фоне снижения поглотительной способности нейтрофилов. Результаты исследования влияния настойки из второй растительной композиции на неспецифическое фагоцитарное звена иммунитета облученного организма подопытных животных, то есть при онкологическом процессе радиационного происхождения, представлены в таблице 22. Таблица 22- Влияние композиции 2 на показатели неспецифического фагоцитарного звена иммунитета при онкопроцессе
Как видно из таблицы 22, под воздействием введенной настойки из второй растительной композиции, также как в экспериментах с настойкой из первой растительной композиции, у облученных подопытных животных отмечается нормализация показателей фагоцитоза, НСТ-теста и повышение фагоцитарного числа, что свидетельствует о нормализации неспецифической фагоцитарной резистентности организма облученного животного. Таким образом, на основании проведенных исследований действия настоек на иммунологические показатели и на неспецифическую фагоцитарную резистентность интактных животных было установлено, что обе настойки из растительных композиций были нетоксичными для интактных животных, т.к. они: - не вызывают ответной аллергической реакции организма интактных (здоровых) животных; - не оказывают существенного влияния на клеточное звено иммунитета. На основании проведенных исследований действия настоек на иммунологические и на неспецифическую фагоцитарную резистентность у облученных сублетальной дозой радиации в дозе 6 Гр животных было установлено, что обе настойки из растительных композиций улучшают функции клеточного звена иммунитета через изменение содержания иммуноцитов (лейкоцитов и лимфоцитов) и нормализуют неспецифическую фагоцитарную резистентность организма подопытных животных, что свидетельствует о нормализации иммунного статуса подопытных животных, сниженного под действием сублетальной дозы радиации. При этом, настойка из первой композиции при развитии онкологического процесса радиационного происхождения оказывает иммуностимулирующее влияние на клеточное звено иммунитета, повышая функциональную активность Т-лимфоцитов. Настойка из второй растительной композиции у опытных животных с онкологическим процессом оказывает иммуномодулирующее влияние на функциональное состояние клеточного звена иммунитета, поддерживая их до уровня показателей интактного организма. |