|
|
дневник практика фармакогнозия. ++дневник Свамбаева Кристина 407 Б. Морфологическое определение важнейших групп лекарственного растительного сырья и других возможных примесей
При наличии карбонильных соединений на холоду или при нагревании смесь окрашивается в розовый цвет. Нитропруссидная реакция. 5—10 капель эфирного масла смешивают с таким же количеством свежеприготовленного раствора натрия нитропруссида и 3 каплями 5 %-ного раствора щелочи. Раствор окрашивается в красный цвет, который постепенно исчезает при стоянии. Наличие двойной связи, размещенной вблизи карбонильной группы, способствует реакции. Карвон, пулегон, цитраль дают красное окрашивание; камфора, фенхон, ментон, цитронеллаль в реакцию не вступают. Реакция на азуленогены Реакция Эрлиха—Мюллера. 5—10 капель эфирного масла смешивают в пробирке с 1—2 мл реактива и подогревают на водяной бане. Через несколько минут при наличии азуленогенов появляется фиолетовое, зеленое или голубое окрашивание. Реактив Эрлиха—Мюллера. 1г п-диметиламинобензальдегида растворяют в 50 мл воды и смешивают с 5 г 85 %-ной кислоты О-фосфорной и 50 г 96 %-ной кислоты уксусной. К смеси прибавляют 50 мл воды и перемешивают. Хранят в защищенном от света месте в герметично закрытых склянках из темного стекла Испытуемый раствор. К 0.2 г свежеизмельченного в порошок сырья прибавляют 2 мл метиленхлорида Р, встряхивают в течение нескольких минут, фильтруют и упаривают досуха при температуре около 40 °С. Полученный остаток растворяют в 0.1 мл толуола Р. Раствор сравнения. 50 мг ментола Р, 20 мкл цинеола Р, 10 мг тимола Р и 10 мкл метилацетата Р растворяют в толуоле Р и доводят объем раствора тем же растворителем до 10 мл. На линию старта ТСХ пластинки со слоем силикагеля GF254 Р наносят в виде полосок 20 мкл испытуемого раствора и 10 мкл раствора сравнения. Пластинку помещают в камеру с системой растворителей этилацетат Р - толуол Р (5:95). Когда фронт растворителей пройдет 15 см от линии старта, пластинку вынимают из камеры, сушат на воздухе до удаления растворителей и просматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм. На хроматограмме испытуемого раствора должна проявляться яркая флуоресцирующая зона непосредственно ниже зоны тимола на хроматограмме раствора сравнения (карвон, пулегон). Пластинку опрыскивают раствором анисового альдегида Р, нагревают в течение 5-10 мин при температуре 100-105 ° С и просматривают при дневном свете.
На хроматограмме раствора сравнения в нижней трети ее части должны проявляться в порядке увеличения значений Rf зоны интенсивно синего или фиолетового цвета (ментол); фиолетово-синяя или коричневая (цинеол); розового цвета (тимол); синевато-фиолетового цвета (метилацетат). На хроматограмме испытуемого раствора должны проявляться зона, соответствующая ментолу (наиболее интенсивная) и зона слабой интенсивности, соответствующая цинеолу; возможно проявление светло-розовой или синевато-серой, или серовато-зеленой зон с Rf, значение которых находятся между значениями Rf зон цинеола и тимола на хроматограмме раствора сравнения (карвон, пулегон, изоментон). В средней части хроматограммы должны проявляться синевато-фиолетовая зона (метилацетат) и непосредственно под ней зеленовато-синяя зона (ментон), а возле фронта растворителей - интенсивная красновато-фиолетовая зона (углеводороды). Допускается присутствие дополнительных менее интенсивных зон.
| Схема хроматограммы Неподвижная фаза (сорбент) - силикагель GF254 Подвижная фаза (система растворителей)- этилацетат Р - толуол Р(5:95) Детекция пятен интенсивно синего цвета (ментол); коричневая (цинеол); розового цвета (тимол); синевато-фиолетового цвета (метилацетат), светло-розового, синевато-серой (карвон, пулегон, изоментон), синевато-фиолетовая зона (метилацетат), зеленовато-синяя зона (ментон), интенсивная красновато-фиолетовая зона (углеводороды) Проявление А: просматривают в ультрафиолетовом свете при длине волны 254 нм. Результаты А: на хроматограмме испытуемого раствора может обнаруживаться слабая зона поглощения (карвон, пулегон), расположенная немного ниже зоны тимола на хроматограмме раствора сравнения. Проявление В: пластинку опрыскивают раствором анисового альдегида Р и нагревают при температуре от 100°С до 105°С в течение 5—10 мин. Просматривают при дневном свете.
Результаты В: на хроматограмме раствора сравнения обнаруживаются зоны в порядке увеличения значения R
Значения Rf основного пятна 0,331
Обозначения: 1 – хроматограмма испытуемого раствора, 2 – хроматограмма раствора сравнения
|
|
| |
|
|
Скачать 3.13 Mb.