Наиболее часто используются тонкослойная и бумажная хроматография. В бумажной и тонкослойной хроматографии пробу, объем которой указан в ФСП, наносят на стартовую линию, как описывается в общих методах хроматографии. Для анализа препарат предпочитают не разбавлять, но очень важно предотвратить нанесение такого количества активности, которое обусловит потери при измерении за счет совпадений. Поэтому для анализа используют такое количество препарата, чтобы можно было получить статистически достоверные результаты измерения для тех примесей, активность которых составит не менее 0,5% от нанесенного количества. В то же время активность анализируемой пробы должна быть такой, чтобы поправка на просчеты, обусловленная мертвым временем регистрирующей установки, не превышала 1-2%. При измерении, в случае необходимости, в пробу может быть добавлен носитель. При этом массы разделяемых веществ не должны превышать допустимые для указанных методов.
После разделения хроматограмму высушивают, и положение зон радиоактивности определяют авторадиографией или путем измерения активности по длине хроматограммы, с помощью соответствующих коллимированных счетчиков, или путем разрезания полоски и измерения активности каждого участка полоски. Положение пятен и участков можно химически идентифицировать путем сравнения с соответствующими растворами такого же химического вещества (нерадиоактивного), используя соответствующий метод детектирования.
Активность может быть измерена путем интегрирования с использованием сканеров или цифровых счетчиков. Когда полоски разрезаются по частям, то отношения измеренной активности определяют отношения концентраций радиоактивных химических форм.
Удельная активность
Удельную активность обычно рассчитывают исходя из объемной активности и концентрации изучаемого химического соединения после подтверждения, что активность относится только к радионуклиду (радионуклидная чистота) и интересующим химическим формам (радиохимическая чистота).
Удельная активность изменяется во времени. Поэтому величину удельной активности приводят с указанием даты и, если необходимо, времени.
Компоненты
Для установления подлинности и количественного определения компонентов, входящих в состав радиофармацевтического препарата, можно использовать любые пригодные методы физико-химического анализа. Однако, принимая во внимание требования радиационной безопасности, а также небольшое количество фасовок РФП в серии, следует учитывать необходимость минимизации проб испытуемого препарата, как по объему, так и по массе. Кроме того, предпочтительно должны быть выбраны методы экспресс-анализа с использованием дистанционно управляемого оборудования. Для выполнения анализов препарата при отсутствии отечественных реагентов и материалов допускается использование импортных реактивов и материалов соответствующей квалификации. Конкретные методики <*> приводят в частных ФСП.
--------------------------------
<*> При описании методики приводят вещества (стандартный образец, аттестованная смесь), используемые для проверки пригодности аналитической системы.
В исключительных случаях из-за невозможности количественного определения какого-либо компонента современными методами в составе РФП с учетом вышеизложенных требований определение не проводят.
Химические примеси
Для определения примесей органических веществ и установления их
допустимых пределов могут быть использованы соответствующие ОФС. Для
определения примесей неорганических веществ, в принципе, можно использовать
статью "Испытания на чистоту и допустимые пределы примесей". Однако, как
правило, допустимое содержание примесей в растворах РФП жестко нормируется,
так как уровень концентрации радионуклида в препарате без добавления
-7 -8
носителя составляет
10 -10 моль/л, и примеси могут конкурентно
связываться с химическими веществами, входящими в состав препарата, что
приводит к изменению его радиохимической чистоты и, соответственно,
фармакокинетики. Поэтому для определения примесей следует использовать
высокочувствительные физико-химические методы анализа, такие как
атомно-эмиссионная и атомно-абсорбционная пламенная спектрометрия или
спектрометрия индуктивносвязанной плазмы в сочетании с масс-спектроскопией.
Обязательным является определение примесей свинца, железа, мышьяка, а также
металлов, присутствующих в конструкционных материалах мишеней и/или
радионуклидных генераторов. Технологическое описание этих аналитических
методов приведено в соответствующих ОФС, или его приводят в частной ФСП.
Кроме того, приводят меры предосторожности, связанные с использованием
радиоактивности, и обеспечивающие радиационную безопасность выполнения
определения.
Энантиомерная чистота
При необходимости должна быть указана стереоизомерная чистота.
Определение рН
Определение рН раствора препарата или лиофилизата следует проводить в соответствии со статьей "Ионометрия".
ФИЗИОЛОГИЧЕСКОЕ (биологическое) РАСПРЕДЕЛЕНИЕ
При необходимости для некоторых РФП предписаны биологические испытания. Распределение активности, наблюдаемое в указанных органах, тканях и других частях тела у соответствующих видов животных (обычно крысы или мыши), должно реально отражать ожидаемое распределение у человека и, таким образом, подтвердить функциональную пригодность препарата.
В частных ФСП приводят вид испытания и требования к биологическому распределению радиофармацевтического препарата. Биологическое распределение, соответствующее требованиям, обеспечит накопление радиоактивных соединений в интересующем биологическом органе человека и пределы его накопления по отношению к окружающим органам и системам.
В общем случае испытание проводят следующим образом.
Каждому из трех животных внутривенно вводят испытуемый препарат. Если важно, то в ФСП указывают: вид животных, их пол, породу и вес и/или возраст. Исследуемая инъекция РФП соответствует клинической (по химическому составу). При необходимости продукт растворяют в соответствии с инструкцией производителя. В некоторых случаях перед введением необходимо сразу разбавить препарат.
Для введения обычно используют внутривенный способ в хвостовую вену. В отдельных случаях могут быть использованы другие вены, такие как бедренная, яремная или вена полового члена, или другие способы введения. Животных, у которых наблюдается выведение препаратов из сосудов в ткани (во время инъекции или обнаруживается после измерения активности тканей) выбраковывают из эксперимента. Сразу же после введения каждое животное помещают в отдельную клетку, которая позволяет проводить сбор экскрементов (не допускается загрязнения поверхности тела животного).
В определенное время после инъекции животных забивают определенным способом и вскрывают. Измеряют активность выбранных органов и тканей соответствующим прибором, который описан в частной ФСП. Затем рассчитывают биологическое распределение, выражая в процентах накопление активности в каждом из выбранных органов и тканях. Для этого активность органа может быть отнесена к введенной активности, рассчитанной путем измерения эталона или содержимого шприца до и после инъекции. Для некоторых РФП может быть более подходящим способ определения активности взвешенного образца выбранной ткани (активность/масса).
Препарат соответствует требованиям испытаний, если распределение активности, по крайней мере, у двух из трех животных соответствует установленным критериям.
Стерильность
РФП для парентерального введения должны быть приготовлены с соблюдением мер предосторожности, чтобы исключить микробное загрязнение и обеспечить стерильность. Испытание на стерильность выполняют в соответствии со статьей "Испытание на стерильность". Однако из-за короткого периода полураспада радионуклидов, входящих в состав большинства РФП, результат анализа на стерильность получают, как правило, после использования конкретной партии. В таких случаях в частных ФС и ФСП приводят указание о том, что результат контроля стерильности может быть получен после использования препарата.
Часто по нормативам радиационной безопасности (высокий уровень радиоактивности) для испытания на стерильность невозможно использовать РФП в количествах, приведенных в статье "Испытание на стерильность". Кроме того, когда объем партии РФП ограничен одним или несколькими образцами (например, терапевтические или ультракороткоживущие препараты), то тест на стерильность оказывается невыполнимым. Если период полураспада очень короткий (например, меньше 20 мин.), то введение препарата пациенту обычно проводят в потоке с применением метода мембранной фильтрации и валидацией системы производства.
Как правило, для РФП контроль соблюдения условий стерилизации должен гарантировать стерильность препарата, а испытание на стерильность предусматривает проверку каждой десятой партии препаратов, стерилизуемых автоклавированием (при условии валидации процесса стерилизации), и каждой партии препаратов, приготовляемых в асептических условиях или стерилизуемых в сухожаровом шкафу.
Бактериальные эндотоксины или пирогенность
Испытание на бактериальные эндотоксины является более предпочтительным для РФП из-за большей чувствительности и скорости проведения. Испытание проводят в соответствии со статьей "Бактериальные эндотоксины" с соблюдением необходимых предосторожностей в целях ограничения облучения персонала, проводящего тест.
В разделе "Бактериальные эндотоксины" (БЭ) частных ФС (ФСП) указывают предельное содержание бактериальных эндотоксинов на максимальную дозу препарата в миллилитрах с учетом способа его введения. Для препаратов, приготовляемых из лиофилизатов и растворов (элюатов), расчет значений предельного содержания БЭ каждого из компонентов (лиофилизатов или растворов) проводят с учетом величины предельного содержания БЭ в готовой лекарственной форме: для препаратов, вводимых внутривенно, предельное содержание БЭ рассчитывают по формуле 175 ЕЭ/V, где V - максимальная доза препарата в мл в конце срока годности (наибольшая по объему доза препарата с наименьшей объемной активностью).
Расчеты необходимо проводить с использованием данных проекта ФСП или ФС об изменении величины объемной активности препарата в процессе хранения и данных инструкции по медицинскому применению о максимальной дозе, вводимой пациенту.
Если точное определение максимально вводимого объема не представляется возможным (так как для РФП показателем дозы является вводимая активность), целесообразно за V принимать максимальный объем, используемый для введения пациенту РФП, равный 10 мл. Полученное значение выражают в ЕЭ на мг сухого вещества, мл раствора или на флакон.
Кроме расчетов должна быть проведена экспериментальная апробация выбранных величин в соответствии с требованиями статьи "Бактериальные эндотоксины", раздел "Мешающие факторы".
Подробное обоснование, а также результаты экспериментального подтверждения правильности выбранного значения предельного содержания БЭ в готовой инъекционной лекарственной форме РФП или ее компонентах приводят в пояснительной записке к проекту ФСП.
Если природа РФП обуславливает ингибирование или активирование процесса гелеобразования (при определении бактериальных эндотоксинов) и невозможно ликвидировать мешающий фактор (факторы), проводят испытание на пирогенность в соответствии со статьей "Пирогенность".
Для РФП, пирогенность которых может быть обусловлена не только бактериальными эндотоксинами, но и природой испытуемого материала, проводят испытание на пирогенность.
В разделе "Пирогенность" указывают, что препарат должен быть апирогенным. Количество вводимого препарата приводят в миллилитрах на 1 кг массы животного.
Испытание РФП, поставляемых в клинические учреждения в готовой для использования форме, на бактериальные эндотоксины или пирогенность предусматривает проверку каждой десятой партии препаратов.
Срок годности
Срок годности радиофармацевтического препарата определяется совокупностью следующих факторов:
- стабильность химического и радиохимического состава препарата;
- уменьшение активности препарата с течением времени по закону радиоактивного распада;
- возрастание относительного содержания долгоживущих радионуклидных примесей, имеющих периоды полураспада большие, чем основной радионуклид.
Срок годности каждого препарата приводят в соответствующей частной ФСП и устанавливают на основании данных анализа препарата, выдержанного в предписанных условиях определенное время, подтверждающих предложенный срок годности. Периодичность контроля РФП в зависимости от их срока годности представлена в табл. 38.1.
Таблица 38.1
Периодичность контроля РФП
при установлении их срока годности
N п/п
|
Срок годности
|
Периодичность проверки качества
|
1.
|
До 40 мин. включительно
|
На время изготовления
|
2.
|
Свыше 40 мин.
до 5 сут. включительно
|
На время изготовления и конец срока
годности
|
3.
|
Свыше 5 сут.
до 10 сут. включительно
|
На дату изготовления и конец срока
годности
|
4.
|
Свыше 10 сут.
|
На дату изготовления, в середине и в конце
срока годности
|
Для препаратов со сроками годности, указанными в пп. 3 и 4, приводят еще один раз данные анализа за их пределами. Временной интервал со времени окончания срока годности до даты данного анализа составляет 10-50% срока годности по усмотрению разработчика.
Хранение
РФП хранят в соответствии с действующими "Основными санитарными правилами обеспечения радиационной безопасности" (ОСПОРБ-99), а также специальными требованиями, если таковые предусмотрены ФС (ФСП) на конкретные препараты. Условия хранения должны обеспечивать снижение мощности дозы излучения до допустимого уровня.
При необходимости в частной ФСП указывают конкретные условия хранения препарата, обусловленные его специфическими свойствами и обеспечивающие сохранность его качества (температурный режим и т.д.).
Транспортирование
Транспортирование РФП выполняется в соответствии с действующими правилами перевозки радиоактивных веществ.
Упаковка и маркировка
Упаковка и маркировка РФП должна производиться в соответствии с национальным и Европейским законодательством в отношении радиоактивных препаратов медицинского назначения. При этом необходимо учитывать, что исчерпывающая информация о препарате должна содержаться в паспорте и инструкции по медицинскому применению препарата. Маркировка первичной упаковки РФП (как правило, флакон для лекарственных средств) должна содержать минимум информации в целях обеспечения минимальной лучевой нагрузки на глаза медперсонала.
На этикетке первичной упаковки (флакона) со знаком радиационной опасности указывают: название препарата, лекарственную форму, активность (для капсул или драже активность каждой единицы) на установленную дату (и время) поставки, номер серии, срок годности.
На этикетке вторичной упаковки (комплект упаковочный транспортный) со знаком радиационной опасности указывают: наименование производителя, его товарный знак (при его наличии), адрес, название препарата, МНН на русском языке (если оно имеется), лекарственную форму, состав, активность (для капсул или драже активность каждой единицы и количество единиц в упаковке) на установленную дату (и время) поставки, номер серии, "стерильно" (только для инъекционных лекарственных форм), срок годности, условия хранения, тип и номер контейнера, транспортную категорию и индекс, номер регистрационного удостоверения и, при необходимости, штрих-код.
Меры предосторожности
Все процедуры с РФП выполняются в строгом соответствии с действующими санитарными правилами обеспечения радиационной безопасности.
Приложение
ТАБЛИЦА
ОСНОВНЫХ ФИЗИЧЕСКИХ ХАРАКТЕРИСТИК РАДИОНУКЛИДОВ
Обозначения:
e = электроны Оже
A
ce = электроны конверсии
бета- = электроны
бета+ = позитроны
гамма = гамма-излучение
X = рентгеновское излучение
┌───────────┬───────────┬────────────────────────────────┬──────────────────────────┐
│ │ │ Электронная эмиссия │ Фотонная эмиссия │
├───────────┼───────────┼──────┬─────────────┬───────────┼──────┬───────┬───────────┤
│Радионуклид│ Период │ Тип │ Энергия │Вероятность│ Тип │Энергия│Вероятность│
│ │полураспада│ │ (MeV) │ (на 100 │ │ (MeV) │ (на 100 │
│ │ │ │ │ распадов) │ │ │ распадов) │
├───────────┴───────────┴──────┴─────────────┴───────────┴──────┴───────┴───────────┤
│ (I) Средняя энергия бета-спектра │
│ (II) Максимальная вероятность, соответствующая полной аннигиляции │
│ в источнике на 100 распадов │
├───────────┬───────────┬──────┬─────────────┬───────────┬──────┬───────┬───────────┤
│ 3 │12.33 │бета- │ (I) │100 │ │ │ │
│Тритий ( Н │(6) лет │ │0.006 │ │ │ │ │
│ │ │ │(макс: 0.019)│ │ │ │ │
├───────────┼───────────┼──────┼─────────────┼───────────┼──────┼───────┼───────────┤
│Углерод-11 │20.385 │бета+ │ (I) │99.8 │гамма │0.511 │ (II) │
│ 11 │(20) мин. │ │0.386 │ │ │ │199.5 │
│( C) │ │ │(макс: 0.960)│ │ │ │ │
├───────────┼───────────┼──────┼─────────────┼───────────┼──────┼───────┼───────────┤
|
Скачать 3.93 Mb.