Общая микробиология
 Скачать 0.8 Mb.
|
|
Эпидемиология. Источником клостридиальной инфекции являются человек и животные, в желудочно-кишечном тракте которых обитают клостридии. Естественным резервуаром инфекции и фактором передачи служит инфицированная почва. Механизм заражения – контактный. Путь передачи – раневой. Входные ворота инфекции – поврежденная кожа. Восприимчивость человека к анаэробной клостридиальной инфекции высокая, заболеваемость значительно возрастает во время военных действий. В мирное время основными группами риска являются работники сельского хозяйства, строительные и дорожные рабочие. Патогенез клостридиальной анаэробной инфекции. Возникновению клостридиальной анаэробной инфекции способствует загрязнение раны землей, наличие обширных очагов размозжения и некроза тканей. Омертвевшие ткани, богатые гликогеном, служат для клостридий благоприятной питательной средой. После попадания в рану в условиях гипоксии споры прорастают в вегетативные клетки, клостридии размножаются в месте входных ворот и синтезируют экзотоксины и ферменты агрессии. В частности, лецитиназа расщепляет лецитин клеточных мембран, гиалуронидаза и коллагеназа увеличивают проницаемость тканей. Результатом действия токсинов и экзоферментов является некроз мышечной и соединительной ткани, развитие отека, скопление газов в тканях, интоксикация организма. Условиями развития клостридиальной инфекции является травматический некроз тканей и наличие в ране анаэробных условий (карманов). Токсины микробов и продукты распада тканей оказывают общее токсическое действие на организм, что приводит к тяжелой интоксикации, нарушающей функции всех жизненно важных органов и систем. Патогномоничными признаками клостридиальной анаэробный раневой инфекции являются зловонный гнилостный запах отделяемого раны, серо-зеленый или коричневый цвет отделяемого раны, гнилостный характер некроза (бесструктурный детрит серого, сине-зеленого или коричневого цвета), газообразование, выявляемое как крепитация (хруст) при пальпации и аускультации, ячеистый или перистый рисунок тканей на рентгенограмме. Клиническая картина. Инкубационный период при клостридиальной анаэробной инфекции составляет 1-3 дня. Кожные покровы вокруг раны бледные, с синюшным оттенком. Края раны отечные, видимые мышцы напоминают вареное мясо. При надавливании из раны выделяются пузырьки газа с неприятным запахом. При пальпации отмечается характерная крепитация. Выражена общая интоксикация организма. Специфическими симптомами газовой гангрены являются: - симптом лигатуры (симптом Мельникова) – при наложении лигатуры (завязанной нити, швов) на участок конечности с газовой гангреной уже через 15-20 минут завязанная нить начинает впиваться в кожу из-за распухания конечности; - симптом пробки шампанского – при извлечении тампона (салфетки) из раневого хода слышен хлопок из-за выхода образовавшегося газа; - симптом шпателя - при постукивании металлическим шпателем по поражённой области слышен хрустящий звук; - симптом бритвы - при бритье кожных покровов вокруг раны слышен слышен хрустящий звук; - симптом Краузе - межмышечные скопления газа на рентгеновском снимке напоминают “ёлочки”. Диагностика. Исследуемым материалом при клостридиальной анаэробной инфекции служат пораженные и некротизированные ткани, взятые из раны на границе со здоровыми тканями, экссудат, гной, раневое отделяемое, кровь. От трупов берут кусочки мышц, печени, селезенки; кровь из сердца, раневое отделяемое. При пищевых токсикоинфекциях исследуют рвотные массы, фекалии, кровь, остатки пищевых продуктов. При лабораторной диагностике клостридиальной анаэробной инфекции используют бактериоскопический, культуральный и биологический методы. Бактериоскопический метод включает микроскопию мазков, приготовленных из исследуемого материала и окрашенных по Граму и Бурри-Гинсу (для выявления капсулы). Подвижность культур определяют методом “висячей капли”. В качестве экспресс-метода используют РИФ. Культуральный метод предусматривает посев исследуемого материала в жидкую питательную среду Китта-Тароцци для накопления бактерий с последующим пересевом культуры на плотные среды (кровяной сахарный агар Цейсслера, среду Вильсона-Блера). Посевы инкубируют в анаэростате при температуре 37ОС. Выросшую культуру идентифицируют по морфологическим и биохимическим свойствам. Биологический метод основан на реакции нейтрализации токсинов (фильтратов бульонных культур или центрифугатов исследуемого материала) специфическими антитоксическими сыворотками с последующим заражением белых мышей или морских свинок. Кроме результатов лабораторных исследований в диагностике клостридиальной анаэробной инфекции важное значение имеет характерная клиническая картина заболевания, общая интоксикация организма, рентгенологическое исследование (“пористость” мышечной ткани). Лечение. Основное внимание уделяется хирургической обработке раны: удаление некротизированных тканей, обеспечение оттока отделяемого раны (дренаж) и притока кислорода, применение повязок с раствором перекиси водорода. Для обеспечения тканей кислородом используют гипербарическую оксигенацию – создание повышенной концентрации кислорода в крови: концентрация кислорода 3% считается бактериостатической, 6% - бактерицидной. Нейтрализацию клостридиальных токсинов проводят с помощью антитоксических сывороток против C. perfringens, C. novyi, C. septicum. Антибактериальная терапия предусматривает введение максимальных доз антибиотиков (пенициллина, тетрациклина). Иммунитет и профилактика. Постинфекционный и поствакцинальный иммунитет определяется антитоксическими антителами. Для специфической профилактики с целью создания искусственного активного иммунитета используют “Секстанатоксин”, в состав которого входят столбнячный анатоксин, ботулинические анатоксины типов А, В и Е, а также анатоксины C. perfringens и C. novyi. Вопрос 17. Кампилобактерии, хеликобактерии. Особенности биологии и патогенеза вызываемых ими заболеваний. Микробиологическая диагностика. Таксономия. Кампилобактерии относятся к отделу Gracilicutes, порядку Campylobacterales, семейству Campylobacteraceae. В состав этого семейства включено три рода: Campylobacter, Helicobacter, Arcobacter. Поражения у человека вызывают два рода: Campylobacter и Helicobacter. Род Campylobacter (от греч. campylos - кривой, изогнутый, bakterion - палочка) включает в себя более 20 видов, из которых наибольшее значение в патологии человека имеют С. jejuni (основной) и С. fetus. Реже встречаются С. coli, C. lari, C. hyointestinalis и другие виды. В составе некоторых видов (С. fetus, C. hyointestinalis, С. jejuni) выделяют подвиды. При генерализованных и септических формах заболевания чаще всего встречается С. fetus. По температурному оптимуму кампилобактерии подразделяются на термофильные и мезофильные. Термофильные кампилобактерии имеют температурный оптимум роста 37-44 ОС. Они образуют группу С. jejuni, включающую этот вид, а также виды С. coli и C. lari. Мезофильные кампилобактерии имеют температурный оптимум 25-37ОС. К ним относится С. Fetus и ряд условно-патогенных видов (C. concisus, C. sputorum, C. fennelliae, C. cinaedi, C. hyointestinalis), обитающих в ротовой полости и толстом кишечнике. Морфологические и тинкториальные свойства. Кампилобактерии представляют собой извитые бактерии, имеющие характерную S-образную форму. Концы бактериальных клеток заостренные. В препаратах, приготовленных из патологического материала и молодых культур, возбудитель имеет вид изогнутой палочки в виде штопора, запятой, летящей чайки, буквы V, спирали, изогнутой вокруг длинной оси, с одним или несколькими завитками. При культивировании более 48-72 часов образуются кокковидные или нитевидные формы. Кампилобактерии обладают подвижностью, характеризуются быстрыми, винтообразными или штопорообразными движениями. Подвижность обусловлена наличием 1-2 жгутиков, расположенных на полюсах клетки. Спор и капсул кампилобактерии не образуют. Водные и спиртовые растворы анилиновых красителей воспринимают с трудом. Обычно эти бактерии окрашивают карболовым фуксином Циля, азуром-эозином, кристаллическим фиолетовым. Хорошо окрашиваются по Романовскому-Гимзе. По Граму кампилобактерии окрашиваются отрицательно. Культуральные и биохимические свойства. Кампилобактерии являются капнофилами (хорошо развиваются в присутствии углекислого газа) и микроаэрофилами (лучше растут при сниженной концентрации кислорода). Оптимальной газовой средой служит смесь из 5-7% кислорода, 83-85% азота и 10% углекислого газа. Оптимальная величина рН питательных сред - 7,0-7,2. Кампилобактерии относятся к термофильным микроорганизмам - оптимальная температура выращивания составляет 42ºС, но разные виды кампилобактерий различаются по температуре культивирования: одни виды хорошо растут при температуре 25ОС, другие – при 37ОС, третьи – при 42ОС. Время выращивания составляет не менее 24-48 часов. Кампилобактерии требовательны к питательным средам. Растут на средах с добавлением глицерина, крови, гемина, гидролизата белков, аминокислот, ростовых факторов и солей. Для выращивания кампилобактерий используются: - мясо-пептонный печеночный агар (МППА); - полужидкий печеночно-желатиновый агар (ПЖА); - железо-эритритный кровяной агар (ЖЭКА); - сафранино-железо-новобиоциновая среда (СЖН); - среда Китта-Тароцци без масла; - кампилобакагар; - селективная питательная среда для выделения термофильных кампилобактерий (ПСТК-среда); - кровяной агар (КА); - шоколадный агар (ША); - среда Бутцлера. Обязательное условие - наличие в среде 7-10% эритроцитов и антибиотиков (ванкомицина, амфотерицина В), подавляющих рост сопутствующей микрофлоры. На плотных средах кампилобактерии через 24-48 часов образуют нежный мелкоросинчатый серовато-белый налет или отдельные серо-голубоватые или серовато-жемчужные мелкие блестящие слизистые расползающиеся или выпуклые колонии, напоминающие капли конденсата. На полужидком печеночно-желатиновом агаре через 2-7 суток появляется рост в пробирке около самой поверхности среды в виде серовато-голубоватого диска толщиной от 1 до 4 мм. В жидких питательных средах кампилобактерии формируют гомогенное помутнение и осадок. Биохимические и ферментативные свойства выражены слабо: углеводы не ферментируют, не выделяют индола и аммиака, не разжижают желатина, не свертывают молоко, образуют сероводород, дают положительную реакцию на каталазу, гемолитической активностью не обладают. Способность к гидролизу гиппурата натрия является основным признаком, позволяющим дифференцировать C. jejuni и С. coli. Биохимические признаки используются для установления видовой принадлежности кампилобактерий.
На основании гидролиза гиппурата натрия, продукции ДНКазы, щелочной фосфатазы, разложения Твина-40 и Твина-80 термофильные кампилобактерии подразделяются на 32 биовара, в том числе C. jejuni – на 15 биоваров, C. coli – на 12 биоваров и C. lari – на 5 биоваров. Антигенная структура. Кампилобактерии имеют термостабильные соматические О-антигены, термолабильные жгутиковые Н-антигены и К-антигены. О-антигены находятся во внешней мембране и состоят из липополисахаридов. По О-антигену кампилобактерии подразделяются на 60 сероваров, а по Н-антигену – на 50 серотипов. Факторы патогенности кампилобактерий и патогенез заболевания. К факторам патогенности кампилобактерий относятся адгезины, жгутики, муциназа, энтеротоксины, эндотоксин, цитотоксин, муциназа. Поверхностные специфические адгезины обеспечивают колонизацию слизистой оболочки кишечника. Жгутики кампилобактерий обусловливают их подвижность и способность к перемещению вдоль эпителия. Муциназа способствует проникновению бактерий через слой слизи, покрывающий эпителий кишечника. Термолабильный холероподобный энтеротоксин является разновидностью экзотоксина. Термостабильный энтеротоксин высвобождается после гибели бактерий и вызывает общую интоксикацию организма. Энтеротоксины нарушают водно-солевой обмен путем образования цАМФ. Эндотоксин кампилобактерий подобно эндотоксинам других грамотрицательных бактерий вызывает развитие токсикоза, обладает пирогенным действием. Дизентериеподобный цитотоксин высвобождается после гибели бактерий и вызывает гибель эндотелиальных клеток. В патогенезе заболевания важную роль играют адгезивные и инвазивные свойства микроба, способность кампилобактерий размножаться в присутствии желчи. Благодаря наличию жгутиков, кампилобактерии проникают через слизь, движутся вдоль эпителия тонкой кишки и прикрепляются к эпителиальным клеткам. Бактерии колонизируют верхние отделы тонкой кишки. Затем бактерии легко проникают через эпителиальные клетки и межклеточные пространства в подслизистый слой. В результате этого развиваются воспаление, отек слизистой оболочки, появляются язвы, которые сливаются и образуют крупные изъязвления. Эрозии слизистой оболочки кишечника клинически проявляются наличием в стуле больного крови и слизи. После гибели кампилобактерий высвобождается термостабильный энтеротоксин и дизентериеподобный цитотоксин, которые вызывают гибель эпителиальных клеток и оказывают общее токсическое действие на организм. Эпидемиология. Кампилобактерии относятся к группе зооантропонозов. Основным резервуаром и источником инфекции являются птицы, сельскохозяйственные животные (крупный и мелкий рогатый скот, свиньи), редко - человек (больной, реконвалесцент, носитель). В последние годы основным естественным резервуаром кампилобактерий является промышленная птица. C. jejuni поражает широкий круг животных, C. coli чаще выделяется от свиней, а C. fetus поражает крупный и мелкий рогатый скот. Инфицированные животные часто являются носителями кампилобактерий, что приводит к последующей контаминации мяса из содержимого кишечника. Животные-носители инфицируют кампилобактериями также воду и почву. Контаминация молока кампилобактериями происходит в результате фекального загрязнения или при кампилобактериозном мастите коров. Механизм заражения человека - фекально-оральный, пути заражения – пищевой и водный. Наиболее часто заболевание возникает при употреблении инфицированного мяса кур, воды из случайных источников, сырого молока. Для возникновения заболевания достаточно около 500 микробных клеток. Случаи заболевания регистрируются в течение всего года, чаще в летне-осенние месяцы. Отмечаются профессиональные заболевания лиц, ухаживающих за больными животными. Естественная восприимчивость людей высокая. В 1% случаев наблюдается бактерионосительство. Основная форма поражения у человека - кампилобактериозы, по своей распространенности они не уступают сальмонеллезам, достигая 12-15% от общего числа острых кишечных инфекций. Заболевания регистрируются повсеместно. Клиника. Кампилобактериоз – острое инфекционное зоонозное заболевание, характеризующееся синдромом общей интоксикации, поражением желудочнокишечного тракта и возможностью генерализации патологического процесса. Инкубационный период продолжается до 6 дней (чаще 1-2 дня). Выделяют 2 формы кампилобактериоза: - типичная форма (желудочно-кишечная и генерализованная); - атипичная форма (бессимптомная, инаппарантная). Кампилобактериоз может протекать в виде энтероколита, сепсиса, локальных внекишечных заболеваний (менингит, энцефалит, эндокардит); гнойновоспалительных заболеваний новорожденных, заболеваний ротовой полости. По клиническому течению выделяют следующие формы кампилобактериоза: 1) гастроинтестинальная форма; 2) генерализованная (септическая) форма; 3) хроническая форма; 4) субклиническая форма. Чаще наблюдается гастроинтестинальная форма. Среди диарейных заболеваний у детей удельный вес кампилобактериоза колеблется от 3 до 30%. Заболевание чаще встречается у детей первого года жизни. Наблюдается эта форма и у взрослых в виде спорадических случаев или вспышек. Для гастроинтестинальной формы характерно острое начало. Появляются лихорадка, общая интоксикация и синдром гастроэнтерита. Больные жалуются на тошноту, боли в эпигастральной области, сухость кожи и слизистых оболочек, олигурию, у отдельных больных отмечены кратковременные судороги. У детей лихорадка и общая интоксикация более выражены, в стуле могут отмечаться примеси слизи и крови, чаще развивается обезвоживание. |