Общая микробиология
 Скачать 0.8 Mb.
|
|
Иммунитет: Во время заболевания в противовирусном ответе участвуют факторы неспецифической защиты: выделительная функция организма, сывороточные ингибиторы, альфа-интерферон, специфические IgA в секретах респираторного тракта, которые обеспечивают местный иммунитет. Клеточный иммунитет - NK-клетки и специфические цитотоксические Т-лимфоциты, действующие на клетки, инфицированные вирусом. Постинфекционный иммунитет достаточно длителен и прочен, но высокоспецифичен (типо-, подтипо-, вариантоспецифичен). Микробиологическая диагностика.Диагноз «грипп» базируется на (1) выделении и идентификации вируса, (2) определении вирусных АГ в клетках больного, (3) поиске вирусоспецифических антител в сыворотке больного. При отборе материала для исследования важно получить пораженные вирусом клетки, так как именно в них происходит репликация вирусов. Материал для исследования — носоглоточное отделяемое. Для определения антител исследуют парные сыворотки крови больного. Экспресс-диагностика.Обнаруживают вирусные антигены в исследуемом материале с помощью РИФ (прямой и непрямой варианты) и ИФА. Можно обнаружить в материале геном вирусов при помощи ПЦР. Вирусологический метод.Оптимальная лабораторная модель для культивирования штаммов—куриный эмбрион. Индикацию вирусов проводят в зависимости от лабораторной модели (по гибели, по клиническим и патоморфологическим изменениям, ЦПД, образованию «бляшек», «цветной пробе», РГА и гемадсорбции). Идентифицируют вирусы по антигенной структуре. Применяют РСК, РТГА, ИФА, РБН (реакцию биологической нейтрализации) вирусов и др. Обычно тип вирусов гриппа определяют в РСК, подтип — в РТГА. Серологический метод.Диагноз ставят при четырехкратном увеличении титра антител в парных сыворотках от больного, полученных с интервалом в 10 дней. Применяют РТГА, РСК, ИФА, РБН вирусов. Лечение: симптоматическое/патогенетическое. А-интерферон – угнетает размножение вирусов. Препараты - индукторы эндогенного интерферона. Этиотропное лечение - ремантидин – препятствует репродукции вирусов, блокируя М-белки. Арбидол – действует на вирусы А и В. Препараты - ингибиторы нейраминидазы. Блокируют выход вирусных частиц из инфицированных клеток. При тяжелых формах – противогриппозный донорский иммуноглобулин и нормальный человеческий иммуноглобулин для в\в введения. Профилактика: Неспецифическая профилактика – противоэпидемические мероприятия, препараты а-интерферона и оксолина. Специфическая – вакцины. Живые аллантоисные интраназальная и подкожная, тривалентные инактивированные цельно- вирионные гриппозные интраназальная и парентеральная-подкожная (Грипповак), химические Агриппал, полимер- субъединичная «Гриппол». Живые вакцины создают наиболее полноценный, в том числе местный, иммунитет. 25 Коронавирусы: биологические свойства. Заболевания, вызываемые коронавирусами: SARS, MERS, COVID-19. Патогенез. Микробиологическая диагностика. Специфическая профилактика. Таксономия. Семейство Coronaviridae включает род Coronavirus и род Torovirus и содержит 24 вируса, вызывающих широко распространенные заболевания у человека и животных. На поверхности вирусной частицы расположено кольцо из специфических выступов, придающее вирусу характерный вид (от лат. corona - венец). Вирус впервые был выделен в 1965 г. D. Туrrellatas от больного острым ринитом. Коронавирусы вызывают поражения органов дыхания (в том числе SARS-синдром), желудочно-кишечного тракта, нервной системы. Четыре из пяти известных в настоящее время штаммов - 229E, NL63, OC43, NKUI - вызывают заболевания у человека. Морфология и антигенные свойства. Вирионы крупного размера - частицы диаметром 60-130 нм, сферической формы. Нуклеокапсид спиральной симметрии, содержит однонитевую РНК-плюс, покрыт липидной оболочкой - суперкапсидом. На суперкапсиле наблюдаются характерные булавовидные выступы в виде солнечной короны - пепломеры, на которых располагаются антигенные детерминанты. В месте прикрепления к вирусной оболочке пепло- меры образуют узкий перешеек. С геномом вируса связан основной фосфопротеин N, форми- рующий нуклеокапсидную структуру. В мембране обнаруживаются мультимембранный протеин М и гликопротеин S. в оболочке протеин Е. У некоторых коронавирусов отмечается наличие гемагглютининэстеразы. Гликопротеин S сигнальный протективный антиген при SARS, является индуктором вируснейтрализующих антител. При попадании коронавирусов в организм вырабатываются агглютинирующие, преципитирующие антитела. Культивирование. Коронавирусы репродуцируются в цитоплазме клеток человека и животных - их естественных хозяев. Возможно использование культур клеток эмбриона человека и первичных эпителиальных клеток. Оптимальная температура культивирова- ния 33-35 °С. Внутриклеточные включения не образуются. Резистентность. Вирусы относительно устойчивы, во внешней среде сохраняются до 3 ч. в моче и фекалиях - до 2 сут, чувствительны к нагреванию, действию жирорастворителей, детергентов, формальдегида, окислителей. Репродукция. Коронавирусы проникают в клетку путем эндоцитоза и репродуцируются в цитоплазме. В инфицированных клетках вирусы находятся в вакуолях вблизи мембран эндоплазматической цепи, где осуществляется сборка вириона. Выход вируса из инфицированных клеток происходит путем экзоцитоза. Эпидемиология. Коронавирусы вызывают у человека заболевания дыхательных путей, в том числе бронхиолит и пневмонию, а также диарейный синдром и, возможно, поражения нервной системы. Источником инфекции является больной человек, основной путь передачи аэрогенный. Заболевания чаще наблюдаются в зимне-весенный период. Клиническая картина. Инкубационный период 3-4 дня. Первичная репродукция вируса происходит в клетках слизистой оболочки носоглотки, при этом отмечаются насморк и чихание, как правило, без повышения температуры. Могут наблюдаться симптомы гастроэнтерита. В случае развития SARS повышается температура, появляются признаки поражения нижних дыхательных путей. Иммунитет. После перенесенного заболевания формируется гуморальный иммунитет. Микробиологическая диагностика. Материалом для исследования служит смыв из носоглотки. В качестве экспресс-диагностики С геномом вируса связан основной фосфопротеин N, формирующий нуклеокапсидную структуру. В мембране обнаруживаются мультимембранный протеин М и гликопротеин S, в оболочке протеин Е. У некоторых коронавирусов отмечается наличие гемаг-глютининэстеразы. Гликопротеин S - сигнальный протективный антиген при SARS, является индуктором вируснейтрализующих антител. При попадании коронавирусов в организм вырабатываются агглютинирующие, преципитирующие антитела. Лечение в основном симптоматическое. При лечении инфекции, вызванной коронавирусами SARS-CoV и MERS-CoV, используют комбинации таких препаратов, как рибавирин, лопинавир+ритонавир и препараты интерферонов. Профилактика. Важное значение в профилактике коронавирусной инфекции отводится следующим мероприятиям: - мероприятия в отношении источника инфекции: изоляция больных, использование масок, соблюдение больными кашлевой гигиены, использование одноразового медицинского инструментария; - мероприятия, направленные на механизмы передачи возбудителя: мытье рук, использование медицинских масок, проведение дезинфекционных мероприятий; - мероприятия, направленные на восприимчивый контингент: орошение слизистой оболочки носа изотоническим раствором хлорида натрия, своевременное обращение за медицинской помощью, использование спиртосодержащих антисептиков. Для специфической профилактики коронавирусной инфекции в России разработаны следующие вакцины против коронавируса SARSCoV-2: 1. Гам-Ковид-Вак (Спутник “V”). Разработчик – Национальный исследовательский центр эпидемиологии и микробиологии им. Н.Ф. Гамалеи Минздрава России. Вакцина готовится на основе аденовирусов (векторов) с геном, кодирующим шиповидный белок коронавируса. Препарат представляет собой векторную двухкомпонентную вакцину. Первый компонент – рекомбинантный репликативно-дефектный вектор на основе аденовируса человека 26 серотипа, несущий ген S- белка вируса SARS-CoV-2. Второй компонент – рекомбинантный репликативнодефектный вектор на основе аденовируса человека 5 серотипа, несущий ген S-белка вируса SARS-CoV-2. После первой прививки формируется гуморальный иммунитет, после второй – клеточный 2. ЭпиВакКорона – вакцина на основе пептидных антигенов. Разработчик – Федеральное бюджетное учреждение науки “Государственный научный центр вирусологии и биотехнологии ”Вектор” Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. Вакцина представляет собой химически синтезированные пептидные антигены белков вируса SARS-CoV-2, конъюгированные с белком-носителем и адсорбированные на алюминий-содержащем адъюванте (алюминия гидроксиде). 3. Вакцина Санкт-Петербургского НИИ вакцин и сывороток ФМБА России. Разработчик – Санкт-Петербургский НИИ вакцин и сывороток ФМБА России. Вакцина представляет собой рекомбинантный продукт, антигеном в котором выступают ферменты вируса SARS-CoV-2. 4. Вакцина Федерального научного центра исследований и разработки иммунобиологических препаратов им. М.П. Чумакова РАН 26 Вирус кори. Биологические свойства. Патогенез кори. Иммунитет. Специфическая профилактика Корь — острая инфекционная болезнь, характеризующаяся лихорадкой, катаральным воспалением слизистых оболочек верхних дыхательных путей и глаз, а также пятнисто-папулезной сыпью на коже. Таксономия. РНК-содержащий вирус. Семейства Paramyxoviridae. Род Morbillivirus. Структура и антигенные свойства. Вирион окружѐн оболочкой с гликопротеиновыми шипами. Под оболочкой находится спиральный нуклеокапсид. Геном вируса — однонитевая, нефрагменти-рованная минус РНК. Имеются следующие основные белки: NP — нуклеокапсидный; М — матриксный, а также поверхностные гли-козилированные белки липопротеиновой обо- лочки — гемагглютинин (Н) и белок слияния (F), гемолизин. Вирус обладает гемагглютинирующей и гемолитической активнос- тью. Нейраминидаза отсутствует. Имеет общие антигены с вирусом чумы собак и крупного рогатого скота. Культивирование. Культивируют на первично-трипсинизированных культурах клеток почек обезьян и человека, перевивае- мых культурах клеток HeLa, Vero. Возбудитель размножается с образованием гигантских многоядерных клеток — симпластов; появляются цитоплазматические и внутриядерные включения. Белок F вызывает слияние клеток. Резистентность. В окружающей среде нестоек, при комнатной температуре инактивируется через 3-4 ч. Быстро гибнет от солнечного света, УФ-лучей. Чувствителен к детергентам, дезинфектантам. Восприимчивость животных. Корь воспроизводится только на обезьянах, остальные животные маловосприимчивы. Эпидемиология. Корь — антропонозная инфекция, распространена повсеместно. Восприимчивость человека к вирусу кори чрезвычайно высока. Болеют люди разного возраста, но чаще дети 4—5 лет. Источник инфекции — больной человек. Основной путь инфицирования — воздушно-капельный, реже — контактный. Наибольшая заражаемость происходит в продромальном периоде и в 1-й день появления сыпи. Через 5 дней после появления сыпи больной не заразен. Патогенез. Возбудитель проникает через слизистые оболочки верхних дыхательных путей и глаз, откуда попадает в подслизистую оболочку, лимфатические узлы. После репродукции он поступает в кровь (вирусемия) и поражает эндотелий кровеносных капилляров, обуславливая тем самым появление сыпи. Развиваются отек и некротические изменения тканей. Клиника. Инкубационный период 8-15 дней. Вначале отмечаются острые респираторные проявления (ринит, фарингит, конъюнктивит, фотофобия, температура тела 39С). Затем, на 3—4-й день, на слизистых оболочках и коже появляется пятнисто- папулезная сыпь, распространяющаяся сверху вниз: сначала на лице, затем на туловище и конечностях. За сутки до появления сыпи на слизистой оболочке щек появляются мелкие пятна, окруженные красным ореолом. Заболевание длится 7—9 дней, сыпь исчезает, не оставляя следов. Возбудитель вызывает аллергию, подавляет активность Т-лимфоцитов и иммунные реакции, что способствует появлению осложнений в виде пневмоний, воспаления среднего уха и др. Редко развиваются энцефалит и ПСПЭ. Иммунитет. После перенесенной кори развивается гуморальный стойкий пожизненный иммунитет. Повторные заболевания редки. Пассивный иммунитет, передаваемый плоду через плаценту в виде IgG, защищает новорожденного в течение 6 месяцев после рождения. Микробиологическая диагностика. Исследуют смыв с носоглотки, соскобы с элементов сыпи, кровь, мочу. Вирус кори можно обнаружить в патологическом материале и в зараженных культурах клеток с помощью РИФ, РТГА и реакции нейтрализации. Характерно наличие многоядерных клеток и антигенов возбудителя в них. Для серологической диагностики применяют РСК, РТГА и реакцию нейтрализации. Лечение. Симптоматическое. Специфическая профилактика. Активную специфическую профилактику кори проводят подкожным введением детям первого года жизни или живой коревой вакцины из аттенуированных штаммов, или ассоциированной вакцины (против кори, паротита, краснухи). В очагах кори ослабленным детям вводят нормальный иммуноглобулин человека. Препарат эффективен при введении не позднее 7-го дня инкубационного периода. 27 Вирус бешенства. Биологические свойства. Механизм заражения человека бешенством. Патогенез заболевания. Микробиологическая диагностика. Антирабический иммуноглобулин, антирабическая вакцина, их назначение. Таксономия: РНК-содержащий вирус, семейство Rhabdoviride, род Lyssavirus. Морфология и антигенные свойства. Вирион имеет форму пули, состоит из сердцевины (РНП(рибонуклеопротеин) спи- рального типа и матриксного белка), окруженной липопротеиновой оболочкой с гликопротеиновыми шипами. Гликопротеин G отвечает за адсорбцию и внедрение вируса в клетку, обладает антигенными (типоспецифический антиген) и иммуногенными свойствами. Антитела к нему нейтрализуют вирус и выявляются в РН(рекция нейтрализации). РНП состоит из геномной однонитевой линейной минус-РНК и белков: N-белка, L-белка и NS-белка. РНП является группоспецифическим антигеном; выявляется в РСК, РИФ, РП. Различают два вируса бешенства:дикий вирус, циркулирующий среди животных, патогенный для человека; фиксированный – не патогенный для человека. Культивирование.Вирус культивируют путем внутримозгового заражения лабораторных животных (мышей, крыс) и в культуре клеток: фибробластов человека, куриного эмбриона. В нейронах головного мозга зараженных животных образуются цитоплазматические включения, содержащие антигены вируса (тела Бабеша-Негри – эозинофильные включения). Резистентность:Вирус бешенства неустойчив: быстро погибает под действием солнечных и УФ-лучей, а также при нагревании до 60С. Чувствителен к дезинфицирующим веществам, жирорастворителям, щелочам и протеолитическим ферментам. Эпидемиология. Источниками инфекции в природных очагах являются волки, грызуны. Вирус бешенства накапливается в слюнных железах больного животного и выделяется со слюной. Животное заразно в последние дни инкубационного периода (за 2—10 дней до клинических проявлений болезни). Механизм передачи возбудителя — контактный при укусах. Иногда заболевание развивается при употреблении мяса больных животных или при трансплантации инфицированных тканей (роговицы глаза). У собаки после инкубационного периода (14дн.) появляются возбуждение, обильное слюнотечение, рвота, водобоязнь. Она грызет место укуса, бросается на людей, животных. Через 1—3 дня наступают паралич и смерть животного. Патогенез и клиника. Вирус, попав со слюной больного животного в поврежденные наружные покровы, реплицируется и персистирует в месте внедрения. Затем возбудитель распространяется по аксонам периферических нервов, достигает клеток головного и спинного мозга, где размножается. Клетки претерпевают дистрофические, воспалительные и дегенеративные изменения. Размножившийся вирус попадает из мозга по центробежным нейронам в различные ткани, в том числе в слюнные железы. Инкубационный период у человека при бешенстве — от 10 дней до 3 месяцев. В начале заболевания появляются недомогание, страх, беспокойство, бессонница, затем развиваются рефлекторная возбудимость, спазматические сокращения мышц глотки и гортани. Иммунитет:Человек относительно устойчив к бешенству. Постинфекционный иммунитет не изучен, так как больной обычно погибает. Введение людям, укушенным бешеным животным, инактивированной антирабической вакцины вызывает выработку антител, интерферонов и активацию клеточного иммунитета. Микробиологическая диагностика: Постмортальная диагностика включает обнаружение телец Бабеша—Негри в мазках- отпечатках или срезах из ткани мозга, а также выделение вируса из мозга и подчелюстных слюнных желез. Тельца Бабеша— Негри выявляют методами окраски по Романовскому—Гимзе. Вирусные антигены в клетках обнаруживают с помощью РИФ. Выделяют вирус из патологического материала путем биопробы на мышах: заражают интрацеребрально. Идентификацию вирусов проводят с помощью ИФА, а также в РН на мышах, используя для нейтрализации вируса антирабический иммуноглобулин. Прижизненная диагностика основана на исследовании: отпечатков роговицы, биоптатов кожи с помощью РИФ; выделении вируса из слюны, цереброспинальной и слезной жидкости путем интрацеребрального инфицирования мышей. Возможно определение антител у больных с помощью РСК, ИФА. Лечение.Симптоматическое; эффективное лечение отсутствует. |