БАВ. Природные биологически активные вещества
Скачать 1.93 Mb.
|
АСКОРБИНОВАЯ КИСЛОТА 2,6-ДИХЛОРФЕНОЛИНДОФЕНОЛЯТ НАТРИЯ (синий цвет) + NaCl ДЕГИДРОАСКОРБИНОВАЯ К-ТА Л2,6-ДИХЛОРФЕНОЛИНДОФЕНОЛ (бесцветное) 2,6-дихлорфенолиндофенол в щелочной среде имеет синюю окраску, в кислой - красную, восстановленная форма - лейкооснование - бесцветное. Для обнаружения аскорбиновой кислоты в ЛРС используют тонкослойную хроматографию. Спиртовое извлечение из ЛРС наносят на пластинку "Silufol" рядом со свиделем (аскорбиновая кислота). Для разделения используют систему растворителей ЭТИЛАЦЕТАТ-ЛЕДЯНАЯ УКСУСНАЯ КИСЛОТА (8:2). Хроматографирование ведут 20 минут. После этого хроматограмму высушивают на воздухе и обрабатывают 0,04% водным раствором 2,6-дихлорфенолиндофенолята натрия. Аскорбиновая кислота обнаруживается в виде белого пятна на розовом фоне. Количественное определение Количественное определение аскорбиновой кислоты в плодах шиповника (ГФ ХI, вып. 2, ст. 38) (схема 1). Метод количественного определения аскорбиновой кислоты- титрометрический. Он основан на способности аскорбановой кислоты восстанавливать 2,6-дихлорфенолиндофенол, который в кислой среде имеет красное окрашивание. Схема 1 Схема методики количественного определения аскорбиновой кислоты в плодах шиповника Подготовка ЛРС (навеску грубоизмельченного сырья помещают в фарфоровую ступку, растирают со стеклянным порошком) Экстракция сырья водой (настаивают 10 минут) Окислительно-восстано- (титруют часть фильтрата из вительное титрование микробюретки в кислой среде раствором 2, 6-дихлорфенолиндо- фенолята натрия до розового окрашивания) Расчет результатов Жирорастворимые витамины Витамины алициклического ряда ВИТАМИН А Ретинолы. Витамин А содержится в основном в продуктах животного происхождения - сливочном масле, яичном желтке, в печени морских рыб (трески, морского окуня, камбалы, палтуса). Среди растений он не найден. Однако в растениях содержатся каротиноиды - провитамины ретинола. Каротин в растениях может быть в форме трех изомеров: икаротина. В растительном сырье чаще всего встречается активный -каротин. В организме человека (в кишечнике) из -каротина под действием фермента - каротиназы образуются 2 молекулы ретинола. Из и -каротинов образуется только по 1 молекуле витамина А. КАРОТИН В растениях каротины находятся в хромопластах - пластидах плодов, цветков и др. частях растений, а также вместе с хлорофиллом в хлоропластах зеленых частей растений в виде водорастворимых белковых комплексов или в капельках масла. В значительных количествах каротины накапливаются в корнеплодах моркови, плодах рябины обыкновенной, облепихи, томатов, абрикоса, тыквы, цветках календулы, листьях салата, петрушки. Каротин и витамин А отличаются по физико-химическим свойствам. Каротин имеет ярко-желтую или оранжевую окраску, витамин А лишен ее. Каротин легко образует пероксиды, поэтому может окислять различные вещества. Каротины нерастворимы в воде, растворимы в жирах, хлороформе, эфире, ацетоне, бензине и трудно растворимы в спирте. Неустойчивы на воздухе и свету. Ретинол способствует нормальному обмену веществ, росту и развитию организма, обеспечивает нормальную деятельность органа зрения, повышает устойчивость организма к инфекции. Суточная потребность человека в ретиноле составляет 1-1,5 мг. Обнаружение каротиноидов в ЛРС Для обнаружения каротиноидов в ЛРС готовят хлороформное извлечение из ЛРС. Наносят на пастинку "Silufol" рядом со свидетелем (-каротин). Для разделения используют систему растворителей ЦИКЛОГЕКСАН-ЭФИР (8:2). Хроматограмму обрабатывают 10% раствором фосфорно-молибденовой кислоты, после прогревания пластинки при температуре 60-80°С в сушильном шкафу каротиноиды проявляются в виде пятен синего цвета на желто-зеленом фоне. Количественное определение Используют колориметрический метод: 1. Подготовка ЛРС. 2. Экстракция каротина органическим растворителем. 3. Очистка от сопутствующих веществ методом хроматографии (колоночной или тонкослойной). 4. Количественное содержание каротина определяют колориметрически по интенсивности желтой окраски. В качестве раствора сравнения служит раствор бихромата калия. Витамины ароматического ряда Витамин К - под этим названием объединена группа антигеморрагических факторов, необходимых для нормального свертывания крови. Эта группа состоит из витамина К1 (филлохинона), К2 (менахинона) и К3 (менадиона).Синтезируется витамин К зелеными растениями, некоторыми микроорганизмами, у млекопитающих - микрофлорой кишечника. Филлохинон (К1) по своей структуре является производным нафтохинона, боковая цепь образована остатком высокомолекулярного алифатического спирта фитола. ФИЛЛОХИНОН (ВИТАМИН К1) Витамины группы К необходимы для нормального процесса свертывания крови, т.к. принимают участие в образовании протромбина и влияют на его содержание в крови. Витамины группы К широко распространены в продуктах растительного и животного происхождения. Лучшими источниками витамина К являются зеленые части растений: капуста, крапива, пастушья сумка, тысячелистник, томаты, кукурузные рыльца. У животных они накапливаются в печени. Недостаток витамина К вызывает нарушение свертываемости крови и развитие геморрагических диатезов, что может быть связано не только с недостаточным поступлением его с пищей, но и с нарушением всасывания в кишечнике. Суточная потребность в витамине К составляет 0,2-0,3 мг, лечебная доза - 10-15 мг. Наряду с растительными объектами в медицине в качестве антигеморрагического средства применяется синтетический аналог витамина К - викасол. Витамины гетероциклического ряда Токоферолы. Витамин Е является природным антиоксидантом. Он защищает различные вещества в организме от окислительных изменений. Установлено, что этот витамин является смесью четырех высокомолекулярных спиртов и токоферолов. Наиболее активным является токоферол. Витамин Е поступает в организм вместе с растительной пищей. Токоферолы содержатся в растительных маслах - кукурузном, подсолнечном, льняном, облепиховом, шиповниковом и др., также в зеленых частях растений, особенно в молодых проростках злаков. Токоферолы регулируют нормальное развитие и функцию эпителия половых желез, а также развитие зародыша, они играют важную роль в липоидном обмене, участвуют в биосинтезе белков, тканевом дыхании и других важнейших процессах клеточного метаболизма. Биологическая роль витаминов в жизни растений Витамины необходимы для нормальной жизнедеятельности не только человека и животных, но также высших растений и микроорганизмов. Аскорбиновая кислота выполняет роль промежуточного катализатора окислительно-восстановительных процессов, являясь переносчиком водорода в процессе тканевого дыхания. Исходя из химического строения каротиноидов, содержащих значительное количество двойных связей, можно предполагать, что они являются в растении переносчиками активного кислорода и принимают также участие в окислительно-восстановительных процессах. Аскорбиновая кислота, каротин принимают участие в процессе фотосинтеза. Каротин принимает участие в образовании хлорофилла. Каротиноиды принимают участие в процессах дыхания, роста, оплодотворения и укоренения. Корни растения не могут нормально развиваться без каротиноидов и витаминов группы В. Многие витамины, соединяясь со специфическим белком, образуют ферменты, которые принимают участие в обмене веществ (тиамин); в минеральном питании (токоферол, рибофлавин) и др. Факторы, влияющие на накопление аскорбиновой кислоты Накопление аскорбиновой кислоты в растениях зависит от температуры, освещенности и влажности почвы: - на севере и в горах плоды шиповника накапливают больше аскорбиновой кислоты, чем в южных регионах; - низкие температуры способствуют ее сохранности при хранении (плоды цитрусовых); -солнечная радиация и достаточное количество влаги в почве стимулируют синтез аскорбиновой кислоты. Отмечена суточная динамика: - в дневные часы аскорбиновой кислоты бывает больше, чем вечером и ночью. Наибольшее содержание витаминов можно обнаружить в часы, близкие к полудню; - снижается содержание аскорбиновой кислоты во время обильных дождей; - чем выше растения над уровнем моря, тем больше аcкорбиновой кислоты. Заготовка и сушка сырья, содержащего витамины Заготавливают сырье в период наибольшего содержания витаминов. Листья, травы заготавливают во время цветения (например, листья крапивы). Кукурузные столбики с рыльцами заготавливают во время созревания початков. Плоды заготавливают в период полной зрелости (плоды шиповника, смородины). Сушат сырье, содержащее водорастворимые витамины, быстро при температуре 80-90°С в сушилках. При медленной сушке идет разрушение аскорбиновой кислоты. Сырье, содержащее жирорастворимые витамины, сушат без доступа солнечных лучей при температуре 40-50°С. Например, листья крапивы, кукурузные столбики с рыльцами сушат при температуре не выше 40°С. Цветки календулы - не выше 45°С. Плоды калины - при 60 - 80°С. Кору калины - при 50 - 60°С. Использование ЛРС и применение в медицине Сырье, содержащее витамины, поступает в аптечную сеть Оно входит в ассортимент ручной продажи аптек и отпускается без рецепта врача. Сырьё широко используют для приготовления экстемпоральных лекарственных форм: настоев, отваров, сборов. Кроме того, оно поступает на химико-фармацевтические заводы для получения таких препаратов, как масло шиповника, облепихи,Каротолин, Холосас(из шиповника), настойка календулы, мазь Календула, Калефлон(из календулы), "Ротокан" (из ромашки, тысячелистника и календулы), жидкий экстракт крапивы и пастушьей сумки, "Аллохол" и др. Витаминные лекарственные средства и препараты применяются для профилактики и лечения гипо- и авитаминозов. Масло шиповника, облепихи, Каротолин применяются как ранозаживляющие и бактерицидные средства. Препараты: Холосас, Аллохол, жидкий экстракт кукурузных рылец используются как желчегонные средства. Настойка календулы, мазь Календула, Ротокан - все они являются противовоспалительными и бактерицидными средствами. Препарат Калефлон применяется как противоязвенное средство. Жидкий экстракт крапивы и пастушьей сумки обладает кровоостанавливающим действием. Кроме медицинского применения, витамины используются в пищевой промышленности (например, сок облепихи - ценный диетический продукт) и для витаминизации продуктов питания. Таблица 4 Химический состав, фармакологическая активность и использование ЛРС, содержащего витамины
|