|
Задачи по теме Частная вирусология. Решение Возбудители энтеровирусных инфекций входят в сем. Picornaviridae, который подразделяется на 8 родов, 5 из них патогенны для человека
Задача 1.
У девочки Тани, 5 лет, после возвращения из детского сада поднялась температура до 38,4˚С, ребёнок жаловался на головную боль. На следующее утро участковый педиатр на основании лихорадки и катаральных явлений в зеве поставил предварительный диагноз: ОРВИ. При повторном посещении ребёнка (через 3 дня) врач обнаружил на гиперемированной слизистой рта, зева и миндалин красные папулы и везикулы. К этому времени стало известно, что в группе детского сада, который посещает девочка, двое детей госпитализированы с диагнозом «серозный менингит», а у нескольких детей симптомы ОРВИ. Врач поставил диагноз: «Энтеровирусная инфекция в форме герпангины».
Решение:
Возбудители энтеровирусных инфекций входят в сем. Picornaviridae, который подразделяется на 8 родов, 5 из них патогенны для человека:
- Rhinovirus
- Cardiovirus
- Aphthovirus
- Hepatovirus
- Enterovirus
К патогенным для человека энтеровирусам относятся вирусы полиомиелита, вирусы Коксаки А и В, вирусы ECHO, а также энтеровирусы серотипов 68-71.
Вирион энтеровирусов имеет форму многогранника с d=22-30 нм. Это простой вирус. Капсид икосаэдрического типа состоит из 60 капсомеров, сгруппированных по 12 пентамеров. Каждый капсомер образован пептидами VP1, VP2, VP3, VP4 (контактирует с РНК). Геном представлен линейной, несегментированной, однонитевой +РНК. На 5’-конце – белок VP4, на 3’-конце – полиА. Изолированная РНК инфекционна.
Репродукция:
Адсорбция с помощью прикрепительных VP1 и VP4
Проникновение путем рецепторного эндоцитоза
Выход из эндосомы – разрушение капсида
В цитоплазме: +РНК на полисомах транслирует гигантский полипептид, который затем вирусными протеазами разделяется на зрелые структурные и неструктурные белки. На +РНК с помощью РНК-зависимой-РНК-полимеразы синтезируется –РНК, на которой образуется копия +РНК.
Самосборка. В клетке подавляется синтез собственных РНК и белков. Выявляются кристаллические образования – скопления плотно уложенных вирионов.
Выход сопровождается лизисом
Энтеровирусы обладают значительной устойчивостью к изменениям pH (2,5-11), действию многих дезинфектантов, жирорастворителей и ПАВ, замораживанию. Разрушаются УФ, при т-ре 50˚С через 30 мин, кипячением мгновенно, формалином, хлорсодержащими в-вами, окислителями, высушиванием.
Источник инфекции – больной или бессимптомный вирусоноситель. Механизм инфицирования – фекально-оральный. Пути заражения: контактно-бытовой, водный, алиментарный, возможно, через мух, реже воздушно-капельный. Девочка могла заразиться воздушно-капельным или контактно-бытовым путями.
Инкубационный период – 2-7 дней. Острое начало заболевание с резким повышением т-ры до 38-40˚С, головной болью, головокружением, общей слабостью, гиперемией лица, тошнотой, иногда рвотой. Входные ворота – слизистая носоглотки и ЖКТ. Вирусы репродуцируются в клетках эпителия, лимфоидной ткани (кольцо Пирогова, бляшки кишечника). При достаточной сопротивляемости – ограниченная репродукция. При низкой сопротивляемости – генерализация инфекции: вирусы проникают в кровь (первичная вирусемия).
С кровью вирусы заносятся в различные органы, вызывая их поражения в зависимости от тканевого тропизма возбудителя. Этим объясняется многообразие клинических форм:
Типичные
- Герпетическая ангина
- Серозные менингит
- Эпидемическая миалгия (плевродиния, болезнь Борнхольма)
- Энтеровирусная экзема
Атипичные (катаральная форма – ОРЗ, гастроэнтерит, эпидемический геморрагический конъюнктивит, поражения ЦНС, отдельных органов, энтеровирусная лихорадка.
Лабораторная диагностика:
По клиническим симптомам
Вирусологический метод; МИФ, латекс-агглютинация, ПЦР
материал – слизь, фекалии, ликвор, кровь.
Заражают культуры из почек обезьян. ЦПД – клетки округляются, сморщиваются, погибают, клеточный пласт разрушается. Метод бляшек, цветная проба Солка, РН.
Серологический метод (наличие IgM и парные сыворотки) РСК, РТГА, РП, РН.
Необходимо лабораторное подтверждение диагноза девочки с идентификацией возбудителя с целью исключить наличие коинфекции вируса Коксаки В (серозный менингит).
Специфической профилактики нет. Существует комплекс общесанитарных мероприятий. При респираторных формах требуется изоляция больного. Лечение проводится патогенетическое и симптоматическое. При тяжелом течении назначают ИФ, ИГ, ИМ.
Задача 2.
В Индию прибыла группа врачей по линии ВОЗ для выявления больных полиомиелитом и оказании помощи в проведении поголовной вакцинации против полиомиелита. В одной из обследованных деревень к врачам принесли из многодетной семьи мальчика, 6 лет, который заболел 5 дней назад. Внезапно повысилась температура, сильно заболела голова, была повторная рвота, боль в руках и ногах. В последующие дни состояние ребёнка ухудшилось. При обследовании у ребёнка высокая температура, резкая слабость, менингеальные симптомы, на правой ноге снижен мышечный тонус, резко ослаблены сухожильные рефлексы, стопа свисает. При пункции спинномозгового канала ЦСЖ вытекает под повышенным давлением, увеличено количество лимфоцитов, бактерии не обнаружены. Ребёнку поставлен предварительный диагноз «Паралитическая форма полиомиелита».
Решение:
Полиовирусы – представители сем. Picornaviridae, рода Enterovirus. Возбудители полиомиелита – полиовирусы 1 (85%), 2 и 3 серотипа.
Вирион всех энтеровирусов имеет форму многогранника с d=22-30 нм. Это простой вирус. Капсид икосаэдрического типа состоит из 60 капсомеров, сгруппированных по 12 пентамеров. Каждый капсомер образован пептидами VP1, VP2, VP3, VP4 (контактирует с РНК). Геном представлен линейной, несегментированной, однонитевой +РНК. На 5’-конце – белок VP4, на 3’-конце – полиА. Изолированная РНК инфекционна.
Репродукция:
Адсорбция с помощью прикрепительных VP1 и VP4
Проникновение путем рецепторного эндоцитоза
Выход из эндосомы – разрушение капсида
В цитоплазме: +РНК на полисомах транслирует гигантский полипептид, который затем вирусными протеазами разделяется на зрелые структурные и неструктурные белки. На +РНК с помощью РНК-зависимой-РНК-полимеразы синтезируется –РНК, на которой образуется копия +РНК.
Самосборка. В клетке подавляется синтез собственных РНК и белков. Выявляются кристаллические образования – скопления плотно уложенных вирионов.
Выход сопровождается лизисом
Имеется три АГ типа полиовируса. Растворимый комплементсвязывающий АГ дает перекрестные реакции и связывает комплемент в присутствии гетерологичных АТ к полиовирусу другого типа. Два типоспецифических АГ – АГ N (цельная вирусная частица с РНК) и АГ H («пустая» частица).
Источник – человек, больной полиомиелитом и вирусоноситель с бессимптомной формой инфекции. Механизм передачи – фекально-оральный, воздушно-капельный имеет небольшое значение Мальчик мог заразиться обоими способами при контакте с бессимптомным вирусоносителем.
Входные ворота – слизистые носоглотки, верхних дыхательных путей и ЖКТ. Первичная репродукция – в области входных ворот и подлежащих лимфоидных элементах. Это происходит в ИП (3-35 дней), вирусы выделяются со слизью и с фекалиями. Далее вирусы проникают в региональные лимфоузлы, где продолжают размножаться. Накопившиеся вирусы проникают в кровь – вирусемия и клинические симптомы. Полиовирусы обладают тропизмом к клеткам ЦНС, а также лимфатической системе, селезёнке, костному мозгу, скелетным мышцам и миокарду. В ЦНС проникают редко, преодолевая ГЭБ через эпителий мелких сосудов. Другой путь – вдоль аксонов и нервных волокон или периневральным пространствам. Наиболее часто поражают двигательные нейроны передних рогов, а также – ядра продолговатого мозга, моста, мозжечка, клетки подкорки и мозговых оболочек.
Развитие заболевания может быть приостановлено на 1 или 2 этапе при достаточной сопротивляемости организма и в присутствии специфических АТ, имевшихся ранее. Наличие sIgA во входных воротах может привести к бессимптомному течению.
Клинические формы:
- Бессимптомная (90%)
- абортивная («малая болезнь», 5%) – т-ра, симптомы ОРВИ и ГЭ, может перейти в более тяжёлую форму
- менингеальная (непаралитический полиомиелит) – синдром серозного менингита (регидность затылочных мышц, боли в спине, симптом Курнига), интоксикация, высокая т-ра, тошнота, рвота.
- паралитическая форма (большая болезнь) – спинальный, бульбарный, потинный варианты, высокая летальность.
Иммунитет стойкий, пожизненный, типоспецифический гуморального характера (вируснейтрализующие АТ и sIgA)
Активная профилактика полиомиелита проводится путем плановой вакцинации детей, начиная с 3 месяцев и далее. Основной препарат – живая полиомиелитная вакцина, содержащая аттенуированные штаммы Сэбина полиовирусов 1, 2 и 3 типов. Её достоинства:
- эффективность
- пожизненный иммунитет
- индуцирует образование sIgA
- усиливает коллективный иммунитет
- удобна, вводится через рот
- не требует ревакцинации
Также используются инактивированные вакцины: «Имовакс Полио», «Тетра кок».
Здоровье остальных детей в семье под угрозой, потому что когда в семье диагностируют первый случай полиомиелита, все остальные члены очень инфецированы, так как вирус диссеминирует очень быстро. Для предупреждения детям с повышенной т-рой должен быть назначен постельный режим. Противопоказаны тяжёлые физические цпражнения, отолорингологические операции или экстракции зубов. Следует избегать перевозок детей. Необходимо предупреждать контакты мух с пищевыми продуктами и фекалиями. Если определён тип полиовируса, нужно всех восприимчивых людей иммунизировать типоспецифической моновалентной пероральной вакциной против полиомиелита.
Задача 3.
Вечером, после прихода матери и девочки Иры, 3 лет, из десткого садика, мать обратила внимание на бледность ребёнка, вялость, высокую т-ру (38˚С). Вечером была два раза рвота, утром ребёнок стал жаловаться на боль в животе и появился неоднократный жидкий, водянистый стул. Педиатр, посетивший больного ребёнка, поставил диагноз «Ротавирусный гастроэнтерит»
Решение:
Ротавирусы включены в семейство Reoviridae, которое содержит 4 рода – Orthoreovirus, Orbivirus, Coltivirus, Rotavirus. В род входит большое количество вирусов, разделённых на группы A, B, C, D, E, F, G(?).
Простые вирусы, сферической формы, d=70нм. Имеют вид колеса с широкой «ступицей», 20 «спицами» и тонким «ободом». В состав входит геном и внутренний капсид (сердцевина) и наружный капсид (оба икосаэдрического типа). Сердцевина состоит из 4 белков – VP1, VP2, VP3, VP6. Внутренний капсид – 260 субъединиц, образован VP6. CСпицы – также VP6. VP1 (транскриптаза), VP2, VP3 – геномные белки. Наружный капсид – 780 капсомеров, образован гликопротеином VP7, в него встроены шипы VP4 (гемагглютинины, прикрепительные белки). Геном – 11 фрагментов двунитевой РНК.
VP6 – групповой АГ, основа для деления на серогруппы
VP7 (G-тип) и VP4 (P-тип) – типоспецифические АГ.
Обладают АГ изменчивостью (дрейф и шифт генов).
Репродукция:
В ЖКТ лизируются и преварщаются в инфекционные субвирусные частицы, которые легко путем пенетрации проникают в чувствительные эпителиоциты кишечника.
В цитоплазме освобождается сердцевина
–РНК транскрибирует +РНК (вирусная РНК-зависимая-РНК-полимераза).Одни из них работают ИРНК, другие матрицей для репликации –РНК. На рибосомах синтезируются белки – геномные и внутреннего капсида.
В мембрану ЭПС встраиваются VP7, VP4, NS28. Этот участок вокруг сердцевины формирует двухкапсидный вирион, временно покрытый суперкапсидом.
Выход сопровождается лизисом
Ротавирусы устойчивы к ультразвуку, эфиру, хлороформу, дезинфектантам, низкой pH. Чувствительны к 95% этанолу, р-рам фенола, УФ, высокой т-ре, формальдегиду, хлорамину, гипохлориду Na.
Источник инфекции – больные с манифестной или бессимптомной инфекцией и вирусоносители. Основные механизмы передачи – фекально-оральный, контактно-бытовой, воздушно-пылевой, воздушно-капельный.
ИП от нескольких часов до 5 дней. Начинается остро, длится 3-7 дней, наблюдается рвота, боли в животе, диарея, повышение т-ры, интоксикация и обезвоживание, иногда симптомы ОРВИ. Ротавирусы в ЖКТ поражают зрелые эпителиоцита кишечника. Это приводит к их массовой гибели. Они отторгаются от ворсинок, «оголяя» их верхушки (новые клетки структурно незрелые). Это ведёт к ферментативной и всасывательной недостаточности слизистой, вследствие чего в кишечнике не расщепляются дисахариды (лактоза). Они накапливаются и повышают осмотическое давление. В просвет поступает избыточное количество жидкости и электролитов, что вызывает диарею и обезвоживание. Выздоровление наступает после замены погибших зрелых эпителиоцитов молодыми, не чувствительными к ротавирусам.
Иммунитет прочный типоспецифический гуморальный и местный (sIgA и IgG)
Лабораторная диагностика:
Выявление вируса, его АГ или НК (1 нед)
- материал из фекалий изучают в электронном микроскопе или иммуноэлектронной микроскопией
- ИФА, РИФ, ко-агглютинация, РП по Оухтерлони
Серологический метод – выявление специфических АТ и нарастания их титра в сыворотках больных с помощью ИФА, РНГА, РСК, РН, РИФ
Задача 4.
Больная Р., 31 год, обратилась к врачу с жалобами на слабость, головную боль, тошноту, тяжесть в эпигастральной области, двукратную рвоту, отсутствие аппетита, высокую температуру (38˚С), тёмую окраску мочи. Считает себя больной 4-1 день. Из анамнеза известно, что больная работает продавцом на овощном рынке, правила гигиены соблюдает не всегда, иногда ест немытые фрукты. За последние полгода парентеральных вмешательств, посещений стоматолога, гинеколога не было. Замужем, внебрачные связи отрицает. Ранее гепатитом не болела. С предварительным диагнозом «Острый вирусный гепатит А» госпитализирована.
Решение:
1.Вирус гепатита А (ВГА, HAV) относится к сем. Picornaviridae, роду Hepatovirus.
Диаметр вириона равен 27 нм, капсид икосаэдического типа, содержит 60 капсомеров. Просто вирус. Каждый протомер построен из четырех полипептидов (VP1-4). Геном представлен линейной однонитевой +РНК, тесно связанной с VP4.
2. Репродукция:
1) Взаимодействие с рецепторами эпителиоцитов, гепатоцитов
2) Проникновение рецепторным эндоцитозом
3) Раздевание и освобождение вирусной РНК
4) Трансляция РНК на рибосомах с образованием белка-предшественника. Он нарезается протеазами на P1, P2, P3. P1 служит предшественником для структурных белков (VP1-4), из Р3 образуются неструктурные белки (протеаза, РНК-полимераза). РНК-полимераза обеспечивает синтез дочерних геномов, при этом +РНК транскрибируется в –РНК, которая и служит матрицей для синтеза дочерних геномов.
5) Самосборка дочерних вирионов
6) Выход путем экзоцитоза и при разрушении гепатоцитов Т-киллерами.
3. ВГА устойчив к низкой pH, низким т-рам, жирорастворителям, высушиванию.
Чувствителен к формалину, хлору, УФ. Теряет инфекционность при автоклавировании 120˚С 20 мин, при обработке сухим жаром 180˚С 1 час.
4. Основой путь передачи – фекально-оральный при тесным контакте людей. Заражение могло произойти при употреблении продуктов, воды, через грязные руки. Дифференцировать ВГА в данном случае позволяют гастроинтестинальные симптомы (характерно для вирусных гепатитов), отсутствие в анамнезе каких-либо парентеральных процедур (позволяет исключить парентеральные гепатиты)
5. Входные ворота – слизистые ротоглотки и тонкого кишечника, в эпителиоцитах которых происходит первичная репродукция. Затем вирус попадает в кровь и через портальную вену заносится в печень Поражение клеток печени обусловлено цитотоксическими иммунными реакциями: вирусные АГ появляются на мембране гепатоцитов в комплексе с HLA I типа. Эти клетки затем у знаются цитотоксическими Т-лимфоцитами и уничтожаются. Не исключено и прямое ЦПД на клетки. Гибель гепатоцитов ведёт к развитию воспалительных и некробиотических процессов и сижению дезинтоксикационной и барьерной функций печени. Основные признаки – дистрофические изменения клеток печени, набухание гепатоцитов, отёк портальных трактов, в тяжёлых случаях – некрозы. Это ведёт к возникновению цитолитического, мезенхимально-воспалительного и холестатического клинико-биохимических синдромов.
6. Иммунитет стойкий специфический гуморальный пожизненный, связанный с IgG ,и местный иммунитет слизистых, обусловленный sIgA.
7. Исследуемый материал – сыворотка крови, фекалии, реже моча и кровь.
Лабораторная диагностика:
для научных целей – вирусологические исследования
Иммунологические методы диагностики:
- на ранней стадии обнаруживают АГ/АТ класса IgM. ВГА-АГ обнаруживают в ИФА или РИА, реже применяется ИЭМ, также ПЦР. Антитела IgM обнаруживают с помощью ИФА, также РНГА и РИА.
Постановка этих реакций с парными сыворотками для определения периода болезни
Для ретроспективой диагностики и определения наличия постинфекционного иммунитета – обнаружение специфических IgG.
8. – «ГЕП-А-инВАК» (Россия) – вакцина культуральная концентрированная очищенная инактивированная адсорбированная жидкая. Содержит вирусы, выращенные в культуре перевиваемых клеток, очищенные и адсорбированные на Al(OH)3. Применяют по эпидемиологическим показаниям. Внутримышечно.
- «ГЕП-А-ин-ВАКПОЛ»(Россия) – вакцина культуральная очищенная концентрированная адсорбированная инактивированная с полиоксидонием (иммуномодулятор).
- донорский ИГ с высоким титром антител к ВГА – для экстренной профилактики
|
|
|
Скачать 246.5 Kb.