Лабораторный практикум с метод. указаниями по зоогигиене. Российской федерации фгоу впо ульяновская государственная сельскохозяйственная академия кафедра кормления сельскохозяйственных
 Скачать 4.84 Mb.
|
|
Характеристика диетических средств Ацидофильная бульонная культура (АБК) – живая культура ацидофильных бактерий в кровяно-сывороточном бульоне. Применяется для лечения и профилактики желудочно-кишечных заболеваний. Пропионово-ацидофильная бульонная культура (ПАБК) содержит витамины группы В и др. Назначают для профилактики гиповитаминозов группы В и желудочно-кишечных заболеваний. Искусственное молоко (ИМ) состоит из 1 л парного молока, 15 мл витаминизированного рыбьего жира, 10 г поваренной соли и 3 свежих диетических куриных яиц. Ацидофильная простокваша (АП) назначается новорожденным телятам с лечебной и профилактической целью за час до кормления. Лизоцим изготавливают из 1 части белка куриных яиц с добавлением 5 частей 0,5%-ного раствора поваренной соли и 1/20-й части 10%-ного раствора лимонной кислоты. После перемешивания и фильтрации раствор хранят не более 2 – 3 дней. Препарат обладает бактерицидным и стимулирующим действием. Хвойный настой изготавливают, измельчая мелкие ветки сосны или ели и заливая их горячей (70 – 80 оС) в соотношении 1 : 9, настаивают 5 – 6 ч. Назначают для лечения и профилактики гипоавитамин6озов. Отвар дубовой коры назначают при воспалении желудка и кишечника. Заливают 100 г тонко измельченной коры 3 л воды и доводят до кипения. Сенной настой. Сено доброкачественное разнотравное измельчается до 3 – 5 см, заливают горячей водой (70 – 80 оС) кипяченной водой в соотношении 1 : 6. Настаивать сутки Затем настой отжать, профильтровать и пропастеризовать на водяной бане при температуре 70 – 80 оС в течении 30 минут.. Можно добавить соль в количестве 5 г на 1 литр. Лечебное действие сенного настоя обуславливается минеральными солями, фитонцидами, витаминами, БЭВ. Силосный сок. Доброкачественный хороший силос измельчают, заливают кипяченной горячей водой (70 – 80 оС) в пропорции 4-2 : 1 (на 200 г резки 50-100 г воды.). Перемешать, настоять на водяной бане 30 минут, затем охладить, отжать через 3 слоя марли, разлить в бутылки, пропастеризовать, закупорить и залить сургучом. В 1 л его содержится 20 мг каротина, 20 г сырого протеина, 1% молочной кислоты, витамин С, минеральные соли. Овсяной кисель. Овсяную муку залить водой в соотношении 100 : 250, перемешать, отстаивать полчаса, процедить через марлю, подсолить (5 г на 1 л) и кипятить до загустения при помешивании. Овсяной кисель обладает обволакивающим и смягчающим действием, высокой питательностью и усвояемостью. Искусственное молоко, готовят по прописи: молоко снятое – 80%, растительный жир – 15%, отходы при рафинировании растительного масла – 5%, витамин А – 30 тыс.МЕ, витамин D – 10 тыс. МЕ, солянокислый биомицин – 50 мг (доза витаминов и биомицина рассчитана на 1 кг заменителя). Лабораторная работа № 25.ГРИБКОВОЕ ПОРАЖЕНИЕ КОРМОВ И МУЧНИСТЫХ ПРОДУКТОВ Цель работы: Ознакомиться с грибами, паразитирующими на убранных кормах и на живых растениях; Зарисовать мицелии некоторых грибов; Ознакомиться с методами определения токсичности кормов, пораженных грибами; Изучить методы обезвреживания и использования кормов, пораженных грибами и мерами профилактики грибкового поражения кормов. Корма при неправильном хранении и дождливой погоде часто подвергаются поражению микробной и грибной флорой. При этом важным является тот факт, что в процессе самонагревания замокшего или невысушенного корма количество бактерий постепенно уменьшается, а количество грибов, наоборот, увеличивается. Большинство грибов, обнаруживаемых на грубых кормах, особенно в сене, токсичны, а некоторые из них – патогенны. Такие корма нередко служат причиной тяжелых массовых заболеваний и падежа животных. Вредные свойства кормов, пораженных грибной и другой микрофлорой, связаны с образованием токсических веществ, выделяемых грибами, накоплением продуктов распада питательных веществ корма, а также со способностью некоторых видов грибов при поступлении в организм с кормом и воздухом паразитировать в тканях и органах животных. В зависимости от механизма действия вредных грибов на организм они разделяются на микозы и микотоксикозы. Микозы – это заболевания, при которых грибы, поступающие в организм животного, прорастают и размножаются в его тканях и органах, а также оказывают местное механическое и общее токсическое действие (актиномикоз, кандидомикоз, стригущий лишай). Микотоксикозы – это заболевания, возникающие в результате поедания животными кормов, пораженные различными видами токсических грибов. Они выделяют токсины, но сами не паразитируют в тканях. На кормах происходит накопление микотоксинов, которые при употреблении способны вызвать токсикоз у животных (эрготизм, фузариотоксикоз, стахиботриотоксикоз и т.д.). Отличительные свойства микозов и микотоксикзов смотрите в таблице. Очень часто грибы, встречающиеся на кормах, делят условно на две основные группы – полевые грибы и плесени хранения. В первую включают виды, способные проникать или развиваться на зерне ещё в период вегетации растений. Они отличаются высокой требовательностью к уровню влажности – 20-25%. Вторую группу составляют грибы преимущественно из родов Aspergillus и Penicillium, содержащиеся в почве, но только в некоторых случаях присутствующие на вегетирующих растениях, однако, характерные для хранящейся массы зерна. Эти грибы могут развиваться при более низкой влажности, чем влажность зерна в процессе хранения – 13-18%, хотя при этом значительно повышают влажность продукта. Споры плесневых грибов широко распространены в природе (почва, вода, воздух, корм) при благоприятных условиях (температура 5-150 С и влажность 18-30%) прорастают на кормах, образуя нитевидные, паутинообразные, ватообразные (белого, серого, черного, розового, зеленого и др.) налеты. Отличительные свойства микозов и микотоксикозов
Определение грибов, паразитирующих на живых растениях Ржавчинапоражает большинство злаков и ряд растений других семейств. Ржавчиной поражаются надземные части, на которых появляются красные, черные и желтые пятна и полосы, причем полоски в местах поражения ржавчиной кажутся изведенными и не целыми. Невооруженным глазом или с помощью лупы при осмотре кормовых растений, пораженных ржавчиной, можно увидеть точки и полоски. Ржавчинные грибы относятся к безусловно патогенным грибам, вызывающими у животных тяжелые заболевания. Отравления грибами, пораженными ржавчиной, наблюдаются при скармливании как зеленой массы, так и сена и соломы. Головняпоражает различные растения, на которых образуются почерневшие колоски или метелки. Семена с этих растений превращаются в черную массу с неприятным селедочным запахом. Определяют наличие головни следующим образом. Берут небольшой пучок сена и сильно растирают его ладонями. Появление черной пыли на ладонях свидетельствует о том, что сено заражено головней. Наличие головни в образце сена можно установить и с помощью микроскопа. Пробу сена встряхивают над листом глянцевой бумаги. Выпавшую пыль собирают, помещают небольшое количество ее на предметное стекло в каплю воды или глицерина, накрывают покровным стеклом и рассматривают под малым увеличением. В препарате можно обнаружить характерные споры головни. Допустимое содержание головни до 0,06%. Спорынья поражает чаще такие растения, как костер безостый, лисохвост, пшеницу, рожь, овес, мятлик и другие. Вместо семян в колосках этих растений вырастают большие рожки, которые имеют снаружи темно-фиолетовую, а внутри белую окраску. Спорынья содержит алкалиоды – эрготоксин, эрготамин, эргометрин. Грибковое поражение кормов на корню
Пробу или образец сена в лаборатории встряхивают над листом белой бумаги, выпавшие мелкие частицы перебирают скальпелем. Среди них можно встретить склеродии спорыньи темно-фиолетового цвета. В мучнистых кормах, в том числе в травяной муке, наличие спорыньи можно определить следующим образом. 10 г. исследуемого корма в колбочке емкостью 100 мл заливают смесью 70%-ного спирта с 5%-ной соляной кислотой, нагревают в течение получаса на водяной бане и дают корму остыть. При наличие спорыньи жидкость окрашивается в слабо-красный цвет. С помощью этой пробы можно обнаружить присутствие в корме спорынью в количестве 0,03-0,04%. Для профилактики отравления спорыньей следует иметь в виду, что мука или отруби с содержанием свыше 0,2% спорыньи являются уже опасными и могут допускаться в корм (но не беременным) в ограниченных количествах. Зерновые отходы и муку с содержанием больших количеств свежих маточных рожков скармливать животным нельзя. Допустимое содержание спорыньи в комбикормах до 0,05%. Определение грибов, паразитирующих на убранных кормах Пораженный грибами корм отличается более темным цветом, неприятным запахом, наличием склеившихся пучковых комков. Наиболее часто поражают корма грибы рода Aspergillus, Penicillium, Mucor, Furarium и др. вместе с грибами на кормах обычно размножаются разнообразные кислотоустойчивые бактерии и кокки, вызывающие разложение корма. При осмотре кормов обращают внимание на наличие грибов, паразитирующих на кормовых растениях в период вегетации, прежде всего спорыньи. В период хранения кормов развитие грибов отличается резко выраженной очаговастью. Очаги представляют собой слежавшиеся пласты, потемневшие, побуревшие гнезда или прослойки часто со специфическим запахом плесени, пылящие, с грибным (плесневым) налетом черного, зеленого, серого или другого цвета. Гриб из рода Fusarium. Они развиваются как вегетирующих, так и на не растущих зерновых злаках. Благоприятные условия для их роста создаются при плохом хранении невысушенных зерновых или на зимующих в поле растениях. Токсины грибы исключительно термостабильны и устойчивы к химическим веществам. Они сохраняют свою токсичность годами. Одним из наиболее токсичных грибов этого рода является Fusarium Sporotrichiella. Органолептически зерно, пораженное плесневыми грибами из рода Fusarium, выглядит более щуплым, матовым, покрытым белым, розовато-белым или красноватым налетом, иногда довольно высоким. При исследовании под микроскопом соскоба налета в капле дистиллированной воды находят цепочкоподобные нити мицелия, переходящие в разветвленные или простые конидиенисцы. На концах конидий и вокруг них размещены продолговатые, круглые, веретенообразные, серповидные и других форм макроконидии. Гриб Stachybotrisalternans. При исследовании на наличие этих грибов учитывают, что наиболее благоприятные условия для их развития на соломе, стерне, сене создаются при температуре 5-300 С и влажности 25-70%. Поэтому берут 10 проб по 20-30 г из потемневших участков, в местах затекания воды и упаковывают каждую пробу отдельно в бумагу. Этот гриб на соломе образует сплошной или только на узлах черный легко снимающийся налет. Однако черный налет часто образуется и при развитие других грибов, вполне безвредных для животных. При исследовании под микроскопом отбирают отдельные соломинки, покрытым серым сажистым налетом, который чаще встречается на узлах. Под лупой он виден в виде мелкого черного порошка, напоминающего копоть. Легко стирается рукой. Небольшое количество этого налета соскабливают скальпелем или иглой в каплю воды на предметное стекло, покрывают покровным стеклом и исследуют при малом и большом увеличении микроскопа. Видны бесцветные нити (гифы) сегментированного мицелия. Из мицелиальной массы выступают короткие, иногда окрашенные в зеленовато-оливковый цвет конидиеносцы. На концах их в виде розетки располагаются лепестковидные выросты – стеригмы, объединяющие от 6 до 8 созревших эллипсоидной формы темно-коричневых конидий размером 8-12 мкм в длину и 6-8 мкм в ширину. На месте отпавших созревших конидий развиваются новые, иногда можно увидеть конидиеносцы без стеригм. Гриб Dendrodochiumtoxicum. Это высокотоксичный гриб может не давать заметных признаков порчи соломы. Она кажется доброкачественной. Оптимальными условиями для развития гриба являются: температура 250 С, влажность 50%, субстрат солома, мякина пшеницы, ржи, ячменя и овса. При исследовании органолептически внешне солома может показаться нормальной в связи с тем, что гриб развивается чаще внутри стебля. Однако при разламывании соломинок или на пораженной грибом мякине обнаруживают белый, располагающийся отдельными участками налет. При исследовании под микроскопом в каплю воды на предметном стекле переносят полученную методом соскоба небольшую частичку налета (мицелия). Видны древовидно разветвленные, расположенные плотным слоем конидиеносцы и такие же бесцветные мелкие с заостренными кончиками конидии. Токсины, выделяемые грибом, устойчивы к высоким температурам и химическим веществам, поэтому пораженный корм обезвреживанию не подлежит, его выбраковывают. Грибы из рода Penicillium. Их насчитывается около 900 видов. Оптимальные условия для развития грибов этого рода – довольно высокая (22-350 С) температура и повышенная (18-30%) влажность кормов при недостаточном доступе кислорода. Среди них есть представители, обладающие токсическими и патогенными свойствами, хотя большинство грибов сапрофиты. На кормах грибы этого рода часто растут с аспергилловыми и мукоровыми грибами. Органолептически внешний вид роста пеницилловых грибов на кормах характеризуется низкосидящим плесневым налетом, имеющим голубовато-зеленоватый оттенок. При исследовании под микроскопом видны бесцветные или светлоокрашенные нити мицелия. От них отходят прямостоящие или поднимающиеся конидиеносцы, заканчивающиеся стеригмами. Последние имеют одно-, двух- или трехъярусное расположение, которое ведет к формированию своеобразно построенной кисточки. На конечных разветвлениях ее располагаются цепочки конидий. Встречаются кисточки разных типов. Конидии имеют круглую или овальную форму и в общей массе зеленоватый цвет. Грибы из рода Aspergillium, Penicillium, Mucor – сапрофиты, при прорастании на мертвом субстрате обладают токсическими свойствами и способны паразитировать в организме животных и птиц, т.е. являются патогенными (возбудителями микозов). Грибковые поражения кормов при хранении
Грибы из рода Aspergillium (чаще встречаются: Aspergillium fumigatus, Aspergillium flavus, Aspergillium niger). Органолептически на пораженных кормах видны дымчатые, черные с желтизной, пушистые или низко сидящие плесневые налеты. При микроскопировании соскобов этих налетов устанавливают многоклеточный перегородчатый мицелий. У некоторых видов гриба воздушный мицелий выглядит в виде толстостенных клеток-ножек. От них в перпендикулярном направлении отходят прямостоящие ответвления – будущие конидиеносцы, которые на конце образуют вздутия. У иных видов аспергилл конидиеносцы не имеют в основании опорной ножки. На поверхности расширений образуются выросты – стеригмы. В зависимости от вида аспергилл стеригмы могут быть расположены в один или два ряда. На заостренных вершинах стеригм образуются радиально расходящиеся длинные цепочки спор конидий. Вздутие со стеригмами и цепочками конидий носит название головки. Она по форме напоминает лейку с вытекающими из нее струйками воды. Отсюда и пошло такое название плесневых грибов рода Aspergillium, как “леечная плесень”. В массе своей конидии бесцветные или окрашенные, шаровидные, с тонкой или несколько утолщенной оболочкой. Грибы из рода Mucor. Органолептически на кормах, пораженных грибами из рода Mucor, обнаруживают пушистый темно-серый или черный налетов виде рыхлой войлочной массы, содержащей склеившиеся пучки или комки неприятного запаха. При исследовании под микроскопом препарата из кусочка плесени обнаруживают несептированный разветвленный мицелий, от которого отходят прямостоящие конидиеносцы (спорангиеносцы). На конце их размещены шаровидные спорангии. При разрыве оболочки спорангия высыпаются многочисленные шаровидные, гладкие, бесцветные или слабоокрашенные споры. Методы определения токсичности кормов Токсичность пораженных грибами кормов определяют путем их скармливания чувствительным лабораторным животным, постановкой кожной пробы и др. Метод кожной пробы проводится путем апликации эфирной или спиртовой вытяжки исследуемого корма на оголенную кожу взрослого кролика с непигментированной кожей. Сущность метода заключается в проведении исследований на коже кролика, основанных на дерманекротическом действии токсичных веществ микогенного происхождения. У кролика на участке кожи размером 6 х 6 см в области бедра, лопатки или бока в день постановки пробы тщательно выстригают волосяной покров (до полного оголения). Повреждение кожи не допускается. Пигментированная кожа, а также кожа с признаками шелушения непригодна для проведения испытаний. На одном кролике допускается ставить одновременно не более четырех проб. Повторные использование кроликов для постановки пробы допускается лишь при отрицательных результатах предыдущих исследований. На выстриженный участок кожи кролика стеклянной лопаткой наносят, слегка втирая, половину экстракта, вторую половину экстракта оставляют для повторного нанесения на следующий день. Небольшую часть оголенного участка кожи оставляют свободной от экстракта для контроля. Если экстракта недостаточно для двух нанесений, его предварительно разбавляют растительным маслом так, чтобы общее количество его было не менее 1 г. Для предупреждения слизывания экстракта, нанесенного на кожу, на шею кролика надевают воротник, который снимают не ранее чем через 3 суток. Наблюдение за реакцией начинают на следующий день после повторного нанесения экстракта и продолжают в течение 3-5 суток, в зависимости от степени токсичности корма. Токсичность исследуемых кормов определяют по наличию воспалительного процесса на участке нанесения экстракта. Реакцию, развивающуюся на коже кролика после нанесения экстрактов из кормов или культур грибов (S. alternans, F. sporotrichiella, D. toxicum, Aspergillus) по глубине и характеру процесса делят на четыре степени. I степень – покраснение, повышение чувствительности кожи, шелушение; вызывают очень слабо токсические корма и культуры грибов; II степень – покраснение кожи, болезненность, незначительное утолщение кожи, мелкие, одиночные, с просяное зерно или меньше, желтоватые пузырьки, шелушение (вызывают слабо токсические корма и культуры грибов); III степень – покраснение, сильное утолщение, болезненность, складчатость кожи, на всей поверхности обработанного очага желтоватые пузырьки, поверхностный сухой некроз, иногда язвы, сплошной тонкий струп (обуславливают токсические корма и культуры грибов); IV степень – покраснение, сильный отек, выступающий в виде массивного вала на нижней границе очага нанесения экстракта, глубокий сухой некроз, захватывающий и подкожную клетчатку, нередко образование долго незаживающих ран; струп толстый, сплошной. Нетоксичный корм – отсутствие воспалительной реакции. Допускается наличие гиперемии, сохраняющейся не более 2 суток после нанесения экстракта и не сопровождающейся шелушением кожи. Слаботоксичный корм – гиперемия, сохраняющаяся 2-3 суток после нанесения экстракта, заканчивающаяся шелушением кожи, или гиперемия, болезненность, отечность, проявляющиеся незначительным утолщением кожи с последующим образованием отдельных чешуек. Этот корм подлежит специальной обработке. Токсичный корм – резкая гиперемия, болезненность, складчатость, отек, проявляющиеся сильным утолщением кожи, по всей поверхности участка появляются язвы, затем сплошной струп. Такой корм использованию не подлежит. Дает положительную реакцию через 24-72 часа после повторного нанесения вытяжки. Определение токсичности биопробой на инфузориях тетрахимена пириформис. Метод основан на экстракции из испытуемой пробы токсических веществ, в основном микогенного происхождения, с последующим воздействием водных растворов этих фракций на инфузории тетрахимена пириформис. Исследование каждой пробы кормов проводят 3 раза. В трех флаконах для антибиотиков вносят по 1 см3 экстракта, приливают 0,1 см3 3-5 суточной культуры инфузорий тетрахимена пириформис и оставляют при комнатной температуре. Через 30 и 60 мин подсчитывают эффект биопробы в капле, взятой пастеровской пипеткой, на предметном стекле под микроскопом увеличение (х7 – х10) просматривают весь объем капли и всех слоев. В исследуемых пробах подсчитывают наличие живых и погибших инфузорий, что зависит от степени токсичности корма. Наблюдение проводят на фоне контроля – пептоновая среда, все инфузории в контроле должны быть живыми. В случае гибели инфузорий контроль повторяют на новой среде и культуре. Степень токсичности корма определяют по количеству живых инфузорий через 30 и 60 мин от начала испытаний: нетоксичный корм – гибели и никаких морфологических изменений в инфузориях не происходит в течение 60 мин наблюдений; слаботоксичный корм – морфологические изменения и частичная гибель (от 25 до 30%) гибель инфузорий в течение 60 мин наблюдений; токсичный корм – гибель всех инфузорий в течение 60 мин наблюдений. Проба на бородках кур. Готовят спиртово-эфирные экстракты в соотношении 1:2 или 1:3. После этого экстракт разбавляют: к 0,5 мл экстракта добавляют 4,5 мл стерильного нейтрального рыбьего жира или подсолнечного масла. Перемешанный масляный экстракт вводят в одну из бородок курицы в дозе 0,1-0,2 мл. в другую бородку вводят экстракт из заведомо доброкачественного корма или масло. На месте введения экстракта из токсического корма отмечают воспаление, отек, кровоизлияние или даже некроз. Толщину бородки можно замерить кутиметром. Оценку реакции проводят по наличию изменений. Если диффузный отек бородки наступил через 4-24 часа, толщина ее увеличилась до 8 мм и больше, на вторые сутки в центре отека возникло кровоизлияние с последующим развитием некроза – реакция считается резко положительной. Когда же диффузный отек бородки возникает через 24 часа ее толщина достигает 5-8 мм, а кровоизлияние и некроз не развиваются – реакция положительная. В случае, если через 24 часа появляется только ограниченная припухлость бородки, а ее толщина не более 4 мм, реакция считается отрицательной. Определение токсичности и токсигенности на цыплятах.Пробу корма растирают в ступке до размера частиц, свободно проходящих через толстую иглу шприца. Часть корма переносят в химический стакан и разводят водой до консистенции сметаны. Шприцом набирают 1-3 мл полученной суспензии и вводят внутрибрюшинно цыплятам недельного возраста (5 голов) опытной группы. Второй опытной группе цыплят (5 голов) вводят то же количество, охлажденной суспензии корма, но предварительно прокипяченной в течение 20-30 мин или автоклавированной. Цыплятам контрольной группы вводят аналогичное количество кипяченной воды. Каждого цыпленка помещают в отдельную клетку, обеспечивая свободный доступ к воде, но лишают корма на 1-2 суток, в течение которых отмечают общее состояние птиц. Случаи гибели выражают в процентах к общему числу цыплят, которым вводили исследуемый корм. Каждое 20% гибели оценивают по баллам: 100%-ая гибель (5 баллов) – корм очень высокотоксичен, 80% (4 балла) – корм высокотоксичен, 60% (3 балла) – корм токсичен, 40% (2 балла) – корм среднетоксичен, 20% (1 балл) – корм малотоксичен. Проба на лабораторных мышах. Определить токсичность кимбинированных и других кормов также путем введения 0,5 мл экстракта мышам подкожно или в желудок зондом или шприцем с тугой иглой. При этом контрольной группе мышей вводят 0,5 мл нейтрального жира (подсолнечное масло, рыбий жир). От экстрактов резко токсичных кормов мыши погибают через 6-48 часов. Экстракты слаботоксичных кормов гибели животных не вызывают, однако на месте их введения устанавливают воспалительную реакцию, некроз. Проба на рыбках гуппи. На рыбках можно определить токсичность зернофуражных (кроме комбикормов). Пробу зерна (50 г) тщательно измельчают на лабораторной мельнице, переносят в колбу (500 мл) с притертой пробкой и заливают 10 мл ацетона. Экстрагирование проводят при встряхивании на аппарате Сокслета в течение 2 часов, экстракт фильтруют через бумажный фильтр в фарфоровую чашку и выпаривают на водяной бане (50-600 С) под тягой. Сухой остаток растворяют в 5 мл ацетона и переносят в стеклянную колбу, доливая туда 500 мл воды из аквариума. В колбу помещают 5 рыбок гуппи и наблюдают за ними в течение 24 часов, регистрируя результаты через 1, 2, 4, 8, 12 и 24 часа. Если корм не токсичен, за одни сутки погибает не более одной рыбки (до 20%), очень слаботоксичен через 12-24 часа 2-3 рыбки (40-60%), слаботоксичен – через 4-8 часов 4 рыбки (80%), токсичен – через 2-4 часа 5 рыбок (100%), резкотоксичен через 1 час 5 рыбок (100%). Контролем служит 1%-ный раствор ацетона, в котором рыбки должны оставаться живыми в течение трех суток. Микотоксилогическое исследование. Для первичного выделения грибов из мучнистых, зерновых кормов используют обычно агаровую среду Чапека, а для выделения грибов из грубых кормов применяют метод посева во влажные камеры в чашки Петри на агар Чапека. Чашки Петри с посевами завертывают в стерильную бумагу, помещают в термостат, культивируют и выдерживают при температуре 22-250 С в течение 7-10 суток. Рост и спороношение грибов становится заметным уже через 3 суток, однако для идентификации грибов необходимо большее время культивирования 5-7 суток. В мучнистых кормах подсчет колоний после посева начинают на 2-3 сутки. Для облегчения подсчета дно чашки размягчают карандашом на секторы или используют счетную камеру Вольфюгеля. Микроскопическое исследование грибов, прежде всего непосредственно в чашках, пользуюсь только малым увеличением микроскопа. При этом выявляют наличие мицелиальных тяжей склероцитов плодовитых тел, строение и характер ветвления спорангиеносцев. Затем готовят препараты для детального изучения морфологии гриба. Частицы гриба в зависимости от вида берут из различных мест колоний, в старых частях колонии из центра, в более молодых – по краям. На предметное стекло наносят каплю фиксирующей жидкости. Затем иглой осторожно берут небольшое количество мицелия гриба, стараясь не повредить его, вносят в каплю жидкости, аккуратно снимая его другой иглой. Препарат накрывают покровным стеклом. С помощью малого (х8, х10), а затем большого (х40,х90) увеличения микроскопа изучают препараты, пользуясь специальными определителями с макроскопическими ключами, идентифицируют грибы. Биопроба.Ее применяют как единственный метод подтверждения диагноза, когда микологическими исследованиями установлено наличие грибов в кормах, среди которых один вид какого-то гриба токсичен, а лабораторные методы исследования не дают положительного результата. Для установления токсичности такого корма его скармливают наряду с доброкачественным кормом двум группам (не менее трех голов в группе) животных. При постановке биопробы группы животных содержат изолированно. Контрольной группе скармливают заведомо доброкачественный корм. Ежедневно учитывают количество съеденного корма и ведут клинические наблюдения. При постановке биопробы следует учесть, что токсикоз проявляется быстрее, если пораженный корм скармливать подопытным животным на голодной желудок, т.е. после 5-6-часовой голодной диеты. Дачу воды не ограничивают. Биопроба считается положительной, если животные, которым скармливают исследуемый корм, заболевают или отказываются от него в то время, как животные контрольной группы ведут себя нормально. Положительными показателями биопробы при отравлении токсическими грибами считают: пониженный аппетит, поражение центральной нервной системы, нарушение координации движений, дрожь, угнетение или возбуждение, аборты, расстройство желудочно-кишечного тракта, скрежет зубами, стоматит, рвота у свиней, а также повышение температуры. Резко токсические корма могут вызывать гибель подопытных животных без проявления клинических признаков. Степень токсичности корма можно оценить, сравнивая результаты биопробы с таблицей. Оценка степени токсичности исследуемого корма
Методы обезвреживания грубого корма Обработка корма едким натрия (каустической солью). На 100 кг резки расходуют 1,5 кг технического едкого натрия, разведенного в 300 л воды (получается 0,5% водный раствор едкого натрия). Раствор щелочи приготавливают в емкостях из черного железа (цветной металл, оцинкованное железо непригодно). Щелочь разводят сначала в небольшом количестве воды, затем доводят до нужного объема 300 мл (чтобы избежать ожогов, пользуются защитными средствами). Сечку помещают в емкость, заливают раствором, тщательно перемешивают, выдерживают полностью погруженной в растворе в течение суток, затем вынимают из раствора, раскладывают на деревянных щитах и выдерживают 24 часа. После этого солому можно скармливать без промывания. Коровам до 30 кг, молодняку старше 1 года – до 15 кг, овцам – до 3 кг. Обработку корма кальцинированной содой. На 100 кг грубого корма расходуют 15 кг соды, 1кг поваренной соли и 300 л воды. Раствор готовят в бочках, куда порциями закладывают корм, обработанный корм переносят в цементированную яму, выдерживают 24 часа после чего скармливают животным без промывания в тех же дозах (как и едкий натрий). Раствор можно использовать неоднократно. Обработка корма аммиаком. Техника обработки сжиженным аммиаком заключается в следующем: стог или скирду укрывают пологом из мелиоративной ткани или полиэтиленовой пленки. Края полотнища должны выступать на 1,5-2 см за пределы скирды: их присыпают слоем грунта, песка для создания герметичности. Обработку кормов сжиженным аммиаком проводят с помощью специальных автомашин-заварщиков: В-3502, 3БА-2 или АВА-0,5. Сжиженный аммиак вносят из расчета 30 кг на 1 т корма. Сжиженный аммиак вводят с подветренной стороны через гибкий шланг с металлической «иглой», изготовленной из трубы диаметром 30-50 мм, длиной 3,5 м. «Иглу» вводят в скирду через каждые 4-5 м на глубину 2-2,5 м, на высоте 1-1,5 м от основания. Аммиак выпускают медленно, 20-тонную скирду обрабатывают в течение 1-1,5 часов. По окончании введения аммиака полог опускают, окончательно герметизируют до 10 дней в холодное (при t до –250 С) – 12 дней. После этого снимают укрытие и в течение 3-5 дней корм проветривают от не прореагировавшего аммиака, после чего он готов к скармливанию. Обработка корма аммиачной водой. Требует тех же технических условий, что при обработке аммиаком. Для этого используют синтетическую аммиачную воду, содержащую 20-25% аммиака. Аммиачной воды 25%-ной концентрации надо внести 120 л, 20%-ной – 150 и 17,5%-ной – 170 л на 1 т корма. Укрыв пологом скирду и создав герметичность, нагнетают аммиачную воду при рабочем давлении в цистерне около 1 атм. Обработанные корма оставляют под покрытием в течение 10-15 дней. Затем снимают полог, проветривают скирду до удаления запаха аммиака и скармливают корм крупному рогатому скоту и молодняку старше 6-месячного возраста. Обработка негашенной известью. Негашенной известью обрабатывают солому и сено I и II степени токсичности, пораженные различными грибами, кроме грибов из рода Фузариум. На 100 кг грубого корма (резки) расходуют 3 кг негашенной извести или 9 кг известкового теста, содержащего до 50% воды или 4,5 кг извести, смешанной с 1 кг поваренной соли. Известь разводят в бочках небольшим количеством воды, затем при помешивании доливают ее до 250-300 л. полученное при этом известковое молоко выливают в чан, или плотно сбитый ящик и помещают туда резку так, чтобы она полностью и равномерно была увлажненной. Через 5-10 мин ее вынимают и складывают на деревянный щит. Затем обрабатывают последующую порцию резки и так до полного использования раствора. Увлажненную солому (сено) выдерживают 24 часа. Обработанную таким образом резку скармливают молодняку крупного рогатого скота – 4-6 кг, взрослым овцам – 1-2 кг в сутки. Методы обезвреживания концентрированного корма Обработку зерна кальцинированной содой. Заключается в следующем. Кальцинированную соду постепенно добавляют в теплую воду до полного растворения, концентрацию раствора доводят до 4%. Приготовленным раствором увлажняют зерно, которое выдерживают в емкостях или при их отсутствии на площадках в течение 24 часов, не допуская его замораживания. Затем зерно просушивают на сушильных агрегатах при температуре теплоносителя 180-2000 С. на 100 кг зерна расходуют 8 л 4%-ного раствора кальцинированной соды. Применяют при поражении грибами из рода Аспергилиус, Пеницилиум, Мукор, Альтернария, Ризонус и др., кроме Фузариума. Срок хранения неограничен. Обработка зерна 4% раствором пиросульфита натрия (калия). Готовят 4% раствор пиросульфита натрия (калия), которым увлажняют зерно из расчета 8 л на 100 кг с последующей выдержкой его в течение 48 часов при температуре, не вызывающей замораживания. Затем зерно сушат на сушильных агрегатах при температуре теплоносителя 180-2000 С. применяется при тех же грибах, что и при обработке кальцинированной содой. Работая с растворителями, необходимо соблюдать предосторожности (одевать противогаз и перчатки), так как при растворении пиросульфита в воде происходит образование сернистого газа, оказывающего сильное раздражающее действие на слизистые оболочки дыхательных путей и глаз. Хранить обработанное зерно более 30 дней запрещается. Обработка зерна 10% раствором пиросульфита натрия. Для зерна I и II степени пораженности грибами Фузариум на 100 кг зерна расходуется 8 л 10% раствора пиросульфита натрия, смоченное зерно выдерживают 48 часов, затем просушивают на АВМ при t до 180-2000 С. Обработка зерна порошком пиросульфита натрия. Пиросульфит натрия добавляют к зерну в количестве 1,5% по массе, тщательно перемешивают на механических смесителях, транспортных лентах или вручную лопатой. Обработанное зерно выдерживают в емкостях или на площадках в течение 30 дней, после чего допускают для скармливания животным в количестве 30% к концентрированным кормам. Длительность кормления таким зерном можно хранить не более 30 дней. Обработка зерна высокой температурой. Допускается слаботоксичный зернофураж, кроме поражения грибом из рода Фузариум. Обработку проводят на сушильных агрегатах марок АВМ, СБ, СЗПВ-2 при температуре теплоносителя 3000 С и экспозиции 10-12 мин. Обработка автоклавированием. Корм увлажняют водой в соотношении 1:1 и автоклавируют при 1,5 атм. В течение 1 часа. Обработка провариванием. Корма заливают водой в соотношении 1:4 и проваривают в котлах в течение 1 часа с момента закипания воды. Обработка пропариванием. Корма пропаривают в кормозапарниках или других емкостях при температуре 1000 С в течение 2 часов в 0,1%-ном растворе кальцинированной соды. Использование кормов, пораженных грибами В случае обнаружения пораженности кормовых средств изучаемых грибами устанавливают степень их пораженности и токсичности. Если корма более чем на 10% поражены плесневыми грибами (плесневелые, потемневшие участки с гнилостным запахом), они не подлежат замачиванию и запариванию, так как при этом еще более бурно развиваются токсические грибы и накапливаются ядовитые вещества. Грубые корма, пораженные токсическими фузариями, аспергиллами и другими грибами, токсичные и резко токсичные по биопробе (III и IV степень воспалительной реакции на коже кролика) для фуражных целей непригодны. Грубые корма первой и второй степени токсичности, пораженные грибами (кроме фузариума) можно обрабатывать негашенной известью, а пораженные грибами из рода Fusarium – кальцинированной содой. Нетоксичные или слаботоксичные по биопробе подвергают тщательной сортировке. После уничтожению пораженных грибами участков корм дают откормочным группам крупного рогатого скота в смеси с доброкачественным, но не менее 25% к рациону грубых кормов, при исключении кислых кормов или их подщелачивание (раскисление). Такие корма хранить запрещается. Грубые корма, пораженные токсическими грибами Dendrodochium toxicum и Fusarium, запрещается использовать для фуражных целей, их уничтожают в качестве корма и на подстилку. Корма, пораженные грибом рода Stachylobotrus alternaus, разрешается применять только после их обезвреживания при условии отрицательного результата в повторных исследованиях на токсичность. Инфицированные грибами из родов Aspergillus, Penicillium, Mucor, Rhisopus корма скармливают крупному и мелкому рогатому скоту, кроме лактирующих и беременных маток, в количестве 25% нормы грубых кормов после обработки и просушивания. После обезвреживания скармливают без ограничений. Запрещается использовать в качестве подстилки молодняку животных и птице сено и солому, пораженные грибом Aspergillius fumigatus. Запрещается использовать зерно третий и четвертой степени токсичности, независимо каким видом гриба оно поражено на кормовые цели. Зерно третий степени порчи направляют на технические цели (для производства шрота), четвертая степень порчи – уничтожают (сжигают или закапывают в землю). Слаботоксичное зерно (первая и вторая степень воспалительной реакции на коже кролика), пораженное токсическими грибами из рода Фузариум, за исключением представителей секции Споротрихинелла и Фузариум гравинерум, скармливают откормочному крупному рогатому скоту в смеси с доброкачественным в количестве, не превышающим 25% от нормы концентратов, с периодическими 10-дневными перерывами. Скармливать такое зерно одновременно с кислыми кормами не разрешается. Для свиней, лошадей и птиц можно использовать зерно первой и второй степени токсичности только после обеззараживания и просушки. Зерно после обезвреживания нельзя включать в рацион племенных, высокопродуктивных, беременных животных, дают только на откорме. Категорически запрещается использовать в хозяйствах промышленного типа зерно любой степени порчи и токсичности. Зерно I и II степени порчи можно употреблять на кормовые цели только после заключения ветеринарной лаборатории о его безвредности для животных. Нетоксичное зерно I степени порчи можно использовать для производства комбикормов. Из зерна, пораженного грибом Aspergillius fumigatus, запрещается готовить птичий комбикорм. Меры предосторожности грибкового поражения кормов Предупреждение поражения грубых кормов грибами. Правильная уборка, заготовка и хранение грубых кормов – гарантия их высокого санитарного качества. Грубые корма убираются в сухую погоду и в возможно более сжатые сроки с незначительными промежутками между скашиванием и скармливанием (2-3 дня). Сено, убранное в дождливую погоду и непросушенное, довольно быстро самонагревается и портится. Поэтому, если нет условий для сушки, зеленую массу силосуют или сенажируют. Нельзя перевозить сено и солому волоком, т.к. вместе с пылью на них попадают споры грибов, в том числе токсических. Хранить грубые корма в скирдах. Они должны быть плотно, равномерно уложены на возвышенном месте, выравнены с боков, без провалов в верхней части и покрыты полиэтиленовой пленкой. Лучший способ хранения – в сараях или под навесом. Наиболее рациональный способ заготовки сена и соломы – прессование в тюки. Если в период хранения обнаруживаются очаги поражения или самосогревания кормов, необходимо их переработать, просушить и уничтожить испорченные участки. Предохранение концентрированного корма от поражения грибами. Зерно хранят в складах с налаженной вентиляцией при температуре 100 С. Чтобы не было порчи, зерно необходимо хранить с влажностью 13-14%. Зернохранилище перед засыпкой дезинфицируют и проветривают, для дезинфекции применяют аэрозольный метод обработки формалином в расчете 15-20 мл на 1 м3 помещения. Контрольные вопросы: 1.Гигиеническое значение грубых кормов в кормлении животных. 2. Какие причины приводят к недоброкачественности грубых кормов? 3. Как предохранить грубые корма от порчи и потери питательных веществ? 4. Требования ГОСТа к сену. 5. Причины отравления грубыми кормами и меры их профилактики. 6. Гигиеническое значение сочных кормов в кормлении животных. 7. Признаки недоброкачественности сочных кормов и их причины. 8. Механизм отравления животных картофелем, картофельной ботвой, картофельной бардой. Меры предупреждения этих отравлений. 9. Причины отравления свиней вареной свеклой, свекольной ботвой. Меры профилактики. 10. Требования ГОСТа к силосу, сенажу. 10. Как обезвредить корма, пораженные плесенями в слабой степени? 11. Гигиеническая роль концентрированных кормов в кормлении животных. 12. Требования ГОСТа к зерновым кормам. 13.Требования ГОСТа к жмыхам и шротам. 14. Требования ГОСТа к кормам животного происхождения. 13. Какие причины приводят к недоброкачественности зерновых кормов? 14. Амбарные вредители, поражающие зерновые корма. 15. Грибковые поражения зерновых кормов на корню и при хранении. 16. Гигиеническая роль мучнистых кормов в кормлении с. - х. животных. 17. Требования ГОСТа к мучнистым кормам (отрубям и комбикормам). 18. Какие причины приводят к недоброкачественности мучнистых кормов? 19. Амбарные вредители поражающие мучнистые корма. 20. Грибковые поражения мучнистых кормов. 21. Какие грибы паразитируют на убранных кормах? 22. Какие грибы паразитируют на живых растениях (на корню)? 23. Какие корма более подвержены микробному загрязнению? 24. Методы определения токсичности кормов, пораженных грибами. 25. Что такое микозы и микотоксикозы? Привести примеры. 26. Обезвреживание кормов, пораженных грибами. 27. Действие кормов, пораженных грибами на организм животных. 28. Использование кормов, пораженных грибами. 29. Требования, предъявляемые к кормам при уборке, хранении, транспортировке. 30. Меры профилактики грибковой и микробной загрязненности. Раздел 6. САНИТАРНО-ГИГИЕНИЧЕСКАЯ ОЦЕНКА ПРОИЗВОДСТВА ПРОДУКТОВ ЖИВОТНОВОДСТВА Молоко, мясо и продукты из них – традиционная и одновременно уникальная составная часть пищевых рационов. При этом к качеству продуктов животного происхождения должны предъявляться особые требования, так как при малейшем нарушении санитарно-гигиенических правил, они могут стать благоприятной средой для развития патогенных микроорганизмов, возбудителей инфекционных заболеваний. В связи с этим необходимо осуществлять комплекс санитарно-гигиенических мероприятий при получении, переработке и реализации этих продуктов, постоянно следить за их качественными характеристиками, которые в полной мере отражают правильность санитарии на участках производства. Лабораторная работа № 26 ОПРЕДЕЛЕНИЕ ФИЗИЧЕСКИХ СВОЙСТВ МОЛОКА Цель работы: Ознакомиться с методами оценки физических свойств молока; провести органолептический анализ различных проб молока. Отбор средней пробы молока для анализа Состав молока изменяется в широких пределах, поэтому необходимо правильно отбирать и составлять средние пробы. Для химического и бактериологического анализа методика отбора проб различна. При изучении состава молока отдельных животных пробу берут непосредственно в стойле или в летнем лагере. Для характеристики молока в целом по стаду пробу берут непосредственно из емкостей на скотном дворе или в молочной. Пробу молока на молочном заводе берут непосредственно из емкостей автомобилей в пунктах приемки до его взвешивания. Техника взятия средней пробы: Необходимо иметь чистые сухие бутылочки с этикетками и пробками. Объем пробы для определения основных показателей должен составлять 250-300 мл. При отборе проб из партии молока находящегося в разных емкостях (фляги, ванны, цистерны), из каждого сосуда берут пропорциональное количество молока. При отборе проб молока от отдельных коров среднюю пробу составляют из пропорциональных порций всех суточных удоев (утро, полдень, вечер). Перед взятием пробы, молоко необходимо тщательно перемешать мутовкой, погружая ее сверху вниз 8 – 10 раз. Пробы молока берут при помощи металлических или пластмассовых трубок диаметром 9 мм. Трубку ополаскивают молоком (не закрывая трубку, опускают в молоко, затем вынимают). После перемешивания молока трубку медленно погружают до дна емкости, так, чтобы уровень молока в трубке и емкости все время был одинаковым. Трубка заполняется молоком на высоту, соответствующую его уровню в сосуде. Зажав верхнее отверстие трубки большим пальцем и держа ее строго вертикально, пробу переносят в чистую сухую бутылочку с пробкой. При отборе образцов из разных партии молока трубку каждый раз ополаскивают молоком, из которого отбирают пробу.  Р  ис.15. Отбор средней пробы молока трубкой: 1 – мутовка для размешивания молока; 2 – размешивание молока; 3 – погружение трубки в молоко; 4 – молоко в трубке переносится в бутылочку; 5 – молоко из трубки выливается в бутылочку; 6 – перемешивание молока перед анализом.Рис. 16. Черпаки (1) и мутовка (2) для отбора проб молока При отсутствии трубок средние пробы составляют путем отмеривания определенного количества молока из каждой емкости черпаками или градуированными цилиндрами или кружками снабженными длинными ручками. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||