Лабораторный практикум с метод. указаниями по зоогигиене. Российской федерации фгоу впо ульяновская государственная сельскохозяйственная академия кафедра кормления сельскохозяйственных
 Скачать 4.84 Mb.
|
|
Лабораторный анализ Материалы, реактивы и оборудование. Колбы конические вместимостью 150-200 мл с притертыми пробками; фарфоровые ступки с пестиком; стеклянные палочки; пробирки химические; весы лабораторные; водяная баня; часы с секундной стрелкой; нейтрализованная эфирно-спиртовая смесь в соотношении 2 : 1 (одну часть этанола смешивают двумя частями этилового эфира и нейтрализуют 0,1-н раствором гидроксида калия (или натрия) до бледно-розовой окраски по фенолфталеину); 1% спиртовой раствор фенолфталеина; 0,1-н раствор гидроксида калия (натрия); 0,01% раствор нейтрального красного; хлороформ; ледяная уксусная кислота; насыщенный свежеприготовленный раствор йодида калия; 1% раствор крахмала; 0,01-н раствор гипосульфита натрия. Определение кислотного числа Порядок проведения анализа. В конической колбе вместимостью 150-200 мл взвешивают 3-5 г исследуемого жира. Жир расплавляют на водяной бане, приливают 50 мл нейтрализованной эфирно-спиртовой смеси (ее объем не менее чем в 10 раз должен превышать навеску жира) и взбалтывают. Добавляют 3-5 капель спиртового раствора фенолфталеина. Полученный раствор при постоянном встряхивании быстро титруют раствором гидроксида калия до появления отчетливой розовой окраски, не исчезающей в течение 1 мин. Если при титровании жидкость мутнеет, то в колбу добавляют 5-10 мл эфирно-спиртовой смеси и взбалтывают до исчезновения мути или же колбу с содержимым слегка нагревают на водяной бане, затем охлаждают до комнатной температуры и заканчивают титрование. Кислотное число (мг КОН) вычисляют по формуле: Х = (V · K · 5,61) / m где: V – объем раствора гидроксида калия израсходованный на титрование, мл; K – поправка к раствору щелочи; 5,61 – количество миллиграммов гидроксида калия, содержащегося в 1 мл раствора; m – масса навески жира, г. Определение перекисного числа В коническую колбу с притертой пробкой вносят около 0,8 – 1,0 г жира, расплавляют на водяной бане и по стенке колбы, смывая остатки жира, приливают 10 мл хлороформа и ледяной уксусной кислоты. Быстро добавляют 0,5 мл насыщенного свежеприготовленного раствора йодида калия. Закрывают колбу пробкой, смешивают содержимое колбы вращательными движениями и ставят в темное место на 3 мин. Затем в колбу вливают 100 мл дистиллированной воды, в которую заранее добавляют 1 мл 1% раствора крахмала. Титруют 0,01-н раствором гипосульфита натрия до исчезновения синей окраски. Для проверки чистоты реактивов проводят контрольное определение (без жира). Реактивы считают пригодными для анализа, если на контрольное определение пошло не более 0,07 мл раствора гипосульфита натрия. Перекисное число (%I2) вычисляют по формуле: Х = ((V – V1) · K · 0,00127 · 100) / m где: V – объем раствора гипосульфита натрия израсходованный на титрование опытной пробы; V1 – объем раствора гипосульфита натрия израсходованный на титрование контрольной пробы; K – поправочный коэффициент раствора гипосульфита натрия; 0,00127 – количество граммов йода, эквивалентное 1 мл раствора гипосульфита натрия; m – масса навески исследуемого жира, г. Степень окислительной порчи жира в зависимости от перекисного числа определяют по таблице:
Реакция на окислительную порчу жира с нейтральным красным В фарфоровую ступку помещают 0,5-1,0 г исследуемого жира, заливают 0,01% раствором нейтрального красного, растирают пестиком в течение 1 мин. Раствор нейтрального красного сливают, а его остатки смывают водопроводной водой. Оценивают окраску жира. Степень окислительной порчи жира определяют по таблице:
Запись результатов исследований
Лабораторная работа № 30. ОПРЕДЕЛЕНИЕ МИКРОБНЫХ КОНТАМИНАНТОВ В МЯСЕ Цель работы: Освоение практических методов определения микробных контаминантов в мясе на основе бактериологического анализа. Подготовка проб. Отбор проб для анализа ведут в соответствии с действующей нормативной документацией в производственных условиях. При анализе в учебной лаборатории в образцах мяса устанавливают патологические и органолептические характеристики. После этого проводят бактериоскопию мазков-отпечатков из глубоких слоев и посев на среды, спектр которых зависит от конкретного задания. Для этого каждый образец перед посевом освобождают от видимых жировой и соединительной тканей, погружают на 2-3 мин. В этанол и два раза обжигают с поверхности. Затем стерильными ножницами из глубины различных мест образца вырезают кусочки размером не менее 2,0 х 1,5 х 2,5 см. Затем все вырезанные кусочки измельчают стерильными ножницами. Для посева готовят две пробы по 15 г каждая, одна из которых состоит из кусочков мышц и лимфатических узлов, другая – из кусочков паренхиматозных органов (печень, почки, селезенка). Порядок проведения анализа. Посев производят путем нанесения отпечатков разными сторонами кусочков пробы на поверхности питательной среды в чашках Петри с предварительно подсушенным мясо-пептонным агаром или элективной средой Эндо. Посевы помещают в термостат при температуре 37 оС. Через 18 – 24 часа чашки с посевами извлекают и просматривают визуально, при необходимости через лупу или под малым увеличением микроскопа. На мясо-пептонном агаре отыскивают колонии, характерные для сибирской язвы, рожи, пастереллеза, листериоза, кокковых инфекций и др., а на чашках с элективной средой Эндо – колонии, характерные для бактерий группы кишечных палочек. Запись результатов исследований
Лабораторная работа № 31. МЕТОДЫ ОЦЕНКИ САНИТАРНОГО СОСТОЯНИЯ ПОМЕЩЕНИЙ И ОБОРУДОВАНИЯ Цель работы: Ознакомление с методами определения микроорганизмов на поверхностях помещений и оборудования на основе бактериологического анализа. Для оценки санитарного состояния помещений рекомендуется бактериологическое исследование различных объектов, с которыми могут соприкасаться животные и продукция – стены, перегородки, инвентарь, посуда. Для этого используют метод смывов с поверхности исследуемых объектов. В смывах определяют общую бактериальную обсемененность (микробное число) в расчете на 1 см2 поверхности объекта и наличие кишечной палочки. Подготовка пробы. Взятие смыва производится стерильным ватным тампоном или стерильной марлевой салфеткой размером 5 х 5 см. Тампоны заготавливают в пробирках с 2 мл стерильной воды (не опуская в нее), Перед взятием смыва тампон (салфетку) стерильным пинцетом смачивают 2 мл стерильной воды. После тщательного протирания исследуемого объекта смоченным тампоном, его помещают в туже пробирку. Смыв производят с поверхности 100 см2, для чего используют специальные проволочные трафаретки, которые стерилизуют перед взятием смывов, путем прокаливания и накладывают на исследуемую поверхность. В пробирку после взятия смыва добавляют 8 мл стерильной воды, в которой тщательно прополаскивают тампон. Порядок проведения анализа. Из исходного смыва в зависимости от предполагаемой степени бактериального загрязнения приготавливают ряд десятикратных разведений:
По одному мл каждого разведения высевают заливкой на чашку Петри с агаром или средой Эндо. Подсчет выросших колоний после инкубации при температуре 37 оС в течение 24 – 48 часов ведется обычным методом. Расчет производится на 1 см2 поверхности. Контроль эффективности дезинфекции При проверке эффективности дезинфекции смывы производятся с изучаемых поверхностей в том же порядке, но сначала ополаскивают тампоны в стерильной нейтрализующей жидкости (по отношению к испытуемому дезсредству). Тампон, которым снимали пробу, сразу же погружают на 5 – 10 мл в следующие растворы, взятые в количестве 30 мл: 0,1% раствор гипосульфита – при дезинфекции хлорной известью; 0,01 % раствор уксусной кислоты – при дезинфекции щелочами; 1 – 2 % раствор нашатырного спирта – при дезинфекции формалином; стерильная вода – при дезинфекции креолином, лизолом, сернокарболовой смесью. Через 5 – 10 минут тампоны отжимают пинцетом, извлекают для промывания в стерильную воду, из которой делают разведение и посев. Уменьшение микрофлоры после дезинфекции выражают в процентах с оценкой: отличная дезинфекция – количество естественной микрофлоры понизилось на 80 – 90%. Удовлетворительная – на 60 – 70%, неудовлетворительная – менее чем на 60%. Контроль за санитарным состоянием молочной посуды и оборудования Санитарный контроль можно проводить методом исследования смывов на бактериальную загрязненность (пробой с метиленовой синькой). Подготовка пробы. Смывы с отдельных узлов доильных установок, танков и оборудования для хранения и обработки молока, молочной посуды берут 2-3 раза в месяц. Влажным ватным или марлевым тампоном протирают 100 см2 поверхности молочного оборудования (по одному и тому же месту проводят дважды). Смывы берут минимум 5 точек оборудования. В смыве определяется микробное число на МПА по обычной методике представленной ранее, можно определить коли-титр или провести редуктазную или резазуриновую пробу. Порядок проведения анализа. Для определения микробного числа высевают 1 мл смыва в разных разведениях на мясопептонном агаре. Санитарная оценка оборудования устанавливается по количеству микроорганизмов на 1 см2 исследуемой поверхности.
Редуктазная проба с метиленовой синькой. В пробирку вливают 10 мл пастеризованного или кипяченного молока. Стерильным тампоном обтирают 100 см2 исследуемой поверхности, тампон помещают в пробирку с молоком, добавляют 1 мл 0,005% раствора метиленовой синьки, пробирку закрывают пробкой и термостатируют при температуре 35 – 38 оС. После выдерживания в течение 20 минут или 1 часа определяют окраску. Голубой цвет – хорошее санитарное состояние оборудования, сиреневый или фиолетовый – удовлетворительное, розовый или белый – неудовлетворительное. Контрольные вопросы 1.Каков химический состав молока коровы? 2.Как отобрать для анализа среднюю пробу молока у отдельных коров и молока, находящегося в разных емкостях? 3.Как сохранить пробы молока в течении 2-10 суток? 4.Как подготовить пробу молока для анализа? 5.Как проводится органолептическая оценка молока? 6.Каково практическое значение плотности молока? 7.По каким показателям делают заключение о санитарно-гигиеническом состоянии молока? 8.В каких пределах колеблется кислотность свежевыдоенного молока и чем она обуславливается? 9.Какие методы используются для установления фальсификации молока? 10.Какие методы используются для пастеризации молока и их сущность? 11.Как установить примесь анормального молока в сборном молоке? 12.Перечислить способы контроля молока в процессе его выдаивания? 13.Что такое доброкачественное молоко? 14.В каких случаях возникает необходимость в пастеризации молока? 15.Опишите санитарно-гигиенические условия получения молока хорошего качества? 16.Каковы главные функции прифермских молочных? 17.Каковы основные критерии оценки биологической ценности пищевых продуктов? 18.Охарактеризуйте систему показателей качества продуктов. Какие из них наиболее важны и почему? 19.Что относится к органолептическим показателям качества и каковы подходы к их оценке? 20.Как определить свежесть мяса методом органолептической оценки? 21.Какие факторы влияют на качество мяса и мясных продуктов? 22.По каким показателям оценивают качество пищевых жиров? 23.Каков механизм окислительной порчи жиров и какими методами можно определить продукты окисления жира? 24.Каковы критерии оценки биологической ценности жиров? 25.Каковы источники загрязнений токсикантами мяса и мясных продуктов? 26.Что относится к основным контаминантам мяса и мясных продуктов? 27.Как проводится бактериологический контроль мяса и мясных продуктов? 28.Какова роль насекомых в снижении качества продуктов животноводства? 29.Как проводится дезинфекция, дезинвазия и дератизация животноводческих и перерабатывающих объектов? 30.Как проводится контроль качества дезинфекции? | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||