Микробиология. билеты все (копия). Строение бактериальной клетки. Споры и капсулы структура, расположение в клетке. Значение для бактериальной клетки. Методы обнаружения спор и капсул. Методы обеззараживания спороносной культуры
 Скачать 382.85 Kb.
|
|
Возбудители с внутриклеточным паразитизмом. Риккетсии – характеристика биологических свойств. Заболевания. Методы микробиологической диагностики сыпного (эпидемического и эндемического) тифа. Риккетсии относятся к семейству Rickettsiaceae, роду Rickettsia – представляют особую форму полиморфных бактерий, которые являются внутриклеточными паразитами. По особенностям эпидемиологии риккетсиозы делят на: 1. эпидемический тиф – циркуляция возбудителя между больным человеком и переносчиком (вошь) 2. эндемические риккетсиозы – природная циркуляция возбудителя, который попадает в организм переносчика (блохи, клещи, комары) По П. Ф. Здродовскому, риккетсиозы человека делятся на 5 групп: Группа сыпного тифа, Группа клещевых пятнистых лихорадок, Группа цуцугамуши, Группа Ку-лихорадки, Группа параксизмальных риккетсиозов. Морфология:Мелкие полиморфные палочки (0,8 – 2,0 мкм х 0,3 – 0,6 мкм);.Грамотрицательные; Неподвижные; спор и капсул не образуют; .по Романовскому-Гимзе окрашиваются в розовый цвет; .по Здродовскому – в красный цвет. Культуральные свойства: Аэробы Хемоорганотрофы .На искусственных питательных средах не растут. Размножаются внутри клетки хозяина (являются энергетическими паразитами клеток). Ферментативные свойства не выражены. Риккетсии образуют термолабильный эндотоксин. Антигенная структура представлена 2-мя антигенами: Групповой термостабильный и специфический термолабильный . М/б диагностика: Серологический: РСК-реакция связывания комплемента, РНГА- реакция непрямой гемагглютинации , РИФ- реакция иммунолюминисценции, РА- реакция агглютинации, реакция нейтрализации токсина. ИФА – основной метод Микроскопический метод – окраска по Р-Г, Здродовскому Биологический Экспресс диагностика – ПЦР (молекулярно-генетический метод) Серологическая диагностика Сыворотка крови больного:Реакция связывания комплемента. а) Полученную сыворотку больного испытывают параллельно двумяантигенами: из риккетсий Провацека и риккетсийМузера - для дифференциации эпидемического сыпного тифа от эндемического (риккетсиозные антигенывыпускают сухие и жидкие). Реакцию ставят пообщепринятой схеме. Сыворотку разводят от 1:10 до 1:640. Диагностическим титром считаютреакцию при задержке гемолиза в разведении сыворотки 1:100 и выше. При положительной реакции вболее низких разведениях сыворотки реакцию ставятповторно, для выявления динамики нарастания антител. Сыворотка крови больного с 11 дня заболевания : б) Для дифференциации сыпного тифа от болезниБрилла ставят параллельно реакцию агтлютинации сантигеном из риккетсий Провацека и культуры ОX19(обычно пользуются убитой культурой ОХ 19-диагностикумом). При болезни Брилла реакция Вейля-Феликса с убитой культурой протея отрицательная. Сыворотка крови больного ( 11-30 день заболевания): в) Реакция непрямой гемагглютинации (РНГА). (Реакцию ставят толькодля дифференциации межгрупповых риккетсиозов. Для внутригрупповой дифференциации эпидемическогосыпного тифа от эндемического она непригодна). Диагностическим титром считают разведение сыворотки 1:100 при условиях нарастания титра приповторных анализах. г) Высокой чувствительностью обладает реакциянейтрализации токсина риккетсий. Реакцию эту ставятна мышах, но ввиду сложности постановки в практических лабораториях она не используется. д) Люминесцентно-серологический метод (высокочувствительный). Биологическая проба Для дифференциальной диагностики эпидемического и эндемического сыпного тифа заражают морских свинок (самцов). Возбудители эпидемического сыпного тифа вызывают у них лихорадку.При введении возбудителей эндемического сыпноготифа у морских свинок развивается периорхит (скротальный феномен) 3. В полдень 11 сентября к врачу обратились 2 студента, занятых перевозом молока с молочнотоварной фермы с жалобами на слабость, недомогание, боли в животе, 1) Следует думать о S.aureus. 2,3) Молоко(ЖСА), моча(ЖСА, кров агар), промывные воды желудка( ЖСА, кров агар), кровь(сахарный бульон), гной(ЖСА, агар с 3-5% кровью). 4 ) 1- делают посевы на среды, 2-подозрит колонии на скош агар, и учитывают наличие лецитиназы, чашки ост-ют еще на 2- днядля выя-ия пигмента., просматривают посевы на чашках с кров агаром при наличии четкой зоны гемолиза выделяют на скошен агар.- 3 день -р-я плазмакоагуляции, ДНК-за, гемолит-ие св-ва, маннит в анаэробных условиях, чув-ть к новобиоцину. 4- учет рез-ов 25 билет. 1.Классификация микроорганизмов. Бактерии – величина, форма, размеры, строение бактериальной клетки (основные и дополнительные органоиды). Для м.о. принята единая международная классификация, по которой они делятся на царства: бактерии, грибы, вирусы. Бактерии-это одноклеточные организмы, лишенные хлорофилла. Размеры 2-6 мкм. По форме клетки бактерий делятся на 3 группы: шаровидные, палочковидные и извитые. • Шаровидные (кокки)по взаиморасположения после деления выделяют: микрококки- клетки делятся в разных плоскостях и располагаются по одиночке; диплококки- делятся в дно плоскости и затем располагаются попарно (ланцетовидные пневмококки, бобовидные гоно- и менингококки); стрептококки- кл. делятся в одной плоскости и не расходятся, образуя цепочку; стафилококки- кл. делятся в различных плоскостях, образую скопления в виде грозди винограда; тетрококки-кл. делятся в двух взаимноперпендикулярных плоскостях и располагаются по 4; сарцины-кл. делятся в 3-х взаимноперпенликулярных плоскостях и располагаются в виде тюков по 8 или 16 клеток в каждом. • Палочковидные-имеют цилиндрическую форму, различаются по величине собственно по форме клетке и виду концов, а также по взаиморасположению парами, либо цепочками, чаще хаотично, либо под углом друг к другу. Бывают 2- видов: -спорообразующие(бациллы); не спорообразующие (собственно бактерии) • Извитые делятся на спириллы и спирохеты. Спирохеты-тонкие, извитые, подвижные одноклеточные оргазмы. Характер спирохет различен: поступательные, вращательные, сгибательные, волнообразные. Некоторые спирохеты слабоокрашиваются анилиновыми красителями. Они делятся на роды по количеству и форме завитков нити и ее окончаний. Строение бактериальной клетки: Бактериальная клетка состоит из следующих частей: трехслойной оболочки, цитоплазмы с различными включениями и ядерного вещества (нуклеоида). Дополнительными структурными образованиями являются капсулы, споры, жгутики, пили. Оболочка-3-х слойная: 1) наружная (внешний, капсульный, слизистый)- полисахаридной природысостоит из гомо- и гетерополисахаридов у некоторого капсульного вещества может быть представлено полипептидом. Различают микро- и макрокапсулы. Микрокапсула обнаруживается только при электронной микроскопии состоящая из мукополисахаридов которая тесно прикрепляется КС. Макрокапсула выраженный слизистый слой покрывающий КС образуется при попадании клетки в неблагоприятные условия. У некоторых микроорганизмов с капсулой связаны патогенетические свойства и АГ-структура. КС- поддерживает форм у клетки, отделяет от окружающей среды, сохраняет постоянное осмотическое давление. Участвует в регуляции роста и деления, обеспечивает коммуникацию с внешней средой через поры и каналы. Цитоплазма-плотно прилегает к КС с внутренней стороны. Она очень тонкая и сост. Из белков и фосфолипидов. Это полупрозрачный пограничный слой, через который осуществляется питание клетки. Нуклеоид ее наслед аппарат . Ядерное вещество прокариотов от эукариотов не имеет собственной мембраны. Нуклеоид зрелой клетки представляет собой двойную нить днк. Рибосомы находятся в цитоплазме клетки и выполняют функцию синтеза белка. В состав рибосомы входит 60% и 40% белка. Количество рибосом в клетке достигает 10 000. Соединяясь, образуют полисомы. Включения- гранулы, соднржащие различные запасные питательные вещества: крахмал, гликоген,жир, волютин. Они расположены в цитоплазме. Капсула- внешнийй уплотненный слизистый слой, примыкающий к клеточной стенке. Это защитный орган, который появляется при попадании их в организм человека и животных. Споры-встречаются только у палочковидных бактерий. Образуются при попадании м.о. в неблагоприятные условия внешней среды. Они находятся внутри бактериальной клетки. Споры отл. по форме, размерам и расположению в клетке. Могут располагаться центрально, субтерминально и терминально. Жгутики-органы движения, характерны для палочковидных бактерий. Это тонкие нитевидные фибриллы. Длина их превышает размеры бактериальной клетки. По расположению жгутиков бактерии делят на группы: монотрихи-с одним жгутиком (возбудитель холеры), амфитрихи – с пучками или единичными жгутиками на обоих концах клетки (спириллы), лофотрихи- с пучком жгутиков на одном конце клетки , перетрихи-жгутики расположены по всей поверхности клетки (кишечные бактерии). Пили-ворсинки, расположены на поверхности бактериальной клетке. Они короче и тоньше жгутиков. Состоят из белка –пилина. Одни пили служат для прикрепления бактерий к клеткам животных и человека, с другими связана передача генетического материала из клетки в клетку. 2.Патогенные спирохеты. Род Боррелия. Характеристика биологических свойств боррелей. Заболевания. Методы микробиологической диагностики борреллиозов. ВОЗБУДИТЕЛИВОЗВРАТНОГО ТИФА Возбудители возвратного тифа относятся к семейству Spirochaetaceae, роду Borrelia. По характеру переносчика возвратный тиф подразделяют на эпидемический, передающийся вшами, и эндемический, переносчиками которого являются клещи. Боррелии возвратных тифов отличаются от других спирохет тем, что имеют крупные, неравномерные завитки и хорошо окрашиваются анилиновыми красками, в том числе по Романовскому- Гимзе в фиолетовый цвет. Эпидемический возвратный тиф Возбудители эпидемического (вшивого) возвратного тифа описаны были О. Обермайером в 1868г. Морфология. Боррелии Обермайера представляют собой спиралевидную нить с 5-8 неодинаковыми завитками и заостренными концами. Размеры их 10-18×0,3-0,5 мкм. Они обладают всеми четырьмя видами движения, присущими спирохетам. Культивирование. На искусственных питательных средах растут только в присутствии сыворотки или асцитической жидкости, тканей или органов животных. Растут они медленно, 7-12 дней, в анаэробных условиях при температуре 30-35°С и рН среды 7,2-7,4. В жидких средах, даже при обильном размножении, видимого роста нет. В последние годы боррелии культивируют в курином эмбрионе. Ферментативными свойствами боррелии не обладают. Токсинообразование. Образуют эндотоксин (мало- изучен). Антигенная структура.Мало изучена. Эндемический возвратный тиф Возбудителями эндемического возвратного тифа являются несколько видов боррелий: B. persica, B. duttonii и др. B. duttonii были обнаружены в крови больного Ф. Россом в 1904 г. Морфология.Боррелии клещевого возвратного тифа сходны с возбудителями эпидемического возвратного тифа. Культивирование. В. duttonii можно культивировать на специальных средах. Выращивают их при температуре 30-35°С и рН среды 7,2-7,4 в анаэробных условиях. Ферментативные свойства. Не обнаружены. Антигенная структура. Существуют несколько вариантов боррелий, которые можно отдифференцировать, исиспользуя биологический метод. Материал для исследования: кровь больного. Основные методы исследования: Микроскопический. Иммобилизация боррелий. Реакция «нагрузки» боррелий тромбоцитами (используется редко). Люминесцентная микроскопия. Микроскопический метод. На высохшую не фиксированную каплю наливают0,5 мл краски Гимзы. Через несколько минут в каплепоявляется облачко гемоглобина, краску сливают иналивают новую порцию ее. Окраску производят втечение 20-30 мин, после чего осторожно промывают водой и микроскопируют. Боррелии окрашиваются в фиолетовый цвет. Внимание! Следует помнить, что капля не фиксирована! Каплю можноокрашивать водным фуксином (1:2). Боррелии окрашиваются в розовый цвет.Нативные препараты можно изучать в темномполе. Биологическая проба Берут 2-3 мл крови больного и заражаютморских свинок. Вводят подкожно либо наносят на слизистую оболочку носа или глаз.При эндемическом возвратном тифе животные заболевают на 5-8-й день. В крови у нихобнаруживают боррелии.К возбудителю эпидемического возвратного тифаморские свинки не чувствительны. 3. К участковому терапевту обратился за медицинской помощью больной А., 21 год, студент 5 курса медицинского института, с жалобами на повышенную температуру в течение последних 7 дней, 1) Взятую кровь пересевают на ст Раппапорт , во флаконы со средой помещают попловок( в него газ), что позволяет предположить накопление в среде паратифов. Посевы ставят в термостат. При роста паратифов набл-ся помутнение и покраснение ср и появ-ся пузырьки газа в поплавке. Из среды Раппапорт делают мазки и препараты « висячая капля» . если культура чистая, Гр-, подвижна, то делают предварит ответ и пересевают со ср Раппапорт на ср Левина и Эндо. 2) Из крови и мочи высокая. 3) ЭМС, Плоскирева, ВС. 4) Для исключения других заболеваний и инфекций 26 билет. Аллергия, определение понятия. Виды аллергических реакций. Гиперчувствительность немедленного типа, механизм развития (привести пример). Аллергия (от лат. allos-иной, ergon--действие)-это состояние измененной, повышенной чувствительности организма к различным чужеродным веществам (антигенам). Вещества, вызывающие состояние повышенной чувствительности (гиперчувствительности) организма, называют аллергенами. Аллергенами могут быть: микроорганизмы (бактерии, вирусы, грибы), продукты распада микробных клеток; белки животного происхождения (яйца, молоко и др.); белки растительного происхождения (земляника, грибы и пр.); лечебные гетерологичные сыворотки и пр. Все эти вещества являются полноценными антигенами. Кроме того, аллергию могут вызвать гаптены-- вещества, которые становятся аллергенами после соединения с белками организма: производственные аллергены (красители, лаки, мыла и пр.); бытовые аллергены (пыль, шерсть собак и кошек, пух подушек и пр.); растительные аллергены (пыльца растений во время цветения и пр.); лекарственные вещества (антибиотики, аспирин и пр.). Аллергия-специфическая гиперчувствительность организма к различным агентам. B ее основе лежит реакция антиген - антитело. Впервые попадая в организм, одни аллергены образуют антитела, другие аллергены сенсибилизируют Т-лимфоциты. В том и другом случае организм приобретает повышенную чувствительность к повторной встрече с антигеном, который вызвал эти изменения. Эта повторная встреча может проявиться по-разному в зависимости от аллергена, характера иммунной перестройки организма. Все аллергические реакции делятся на две группы: реакции гиперчувствительности немедленного типа (ГНТ) и реакции гиперчувствительности замедленного типа (ГЗТ). В зависимости от формы аллергии проявляется реакция гиперчувствительности того или иного типа. Реакции гиперчувствительности: Немедленного типа (ГНТ): 1.Анафилаксия 2.Феномен Артюса - Сахарова 3.Сывороточная болезнь 4.Атопии (поллиноз, бронхиаль-ная астма, крапивница) Замедленного типа (ГЗТ): 1.Инфекционная аллергия 2.Контактные дерматиты 3.Лекарственная аллергия Анафилаксия (от лат. ana - против, phylaxis - защита) - это гиперчувствительность, проявляющаяся немедленно после повторного введения чужеродного антигена в виде шока или близких к нему состояний. Вещества, вызывающие анафилаксию, называют анафилактогенами. К ним относят чужеродные белки, бактериальные токсины, полисахариды микробной клетки, различные лекарственные вещества, т. е. и полноценные антигены и гаптены. Механизм анафилаксии. Первое введение анафилактогена (например, сыворотки лошади в организм морской свинки) вызывает специфическую сенсибилизацию. Возникают антитела (IgE), которые накапливаются в максимальном титре через 10-12 дней. Циркулируя в крови, эти антитела частично адсорбируются на клетках тела. Первая доза чужеродного белка, вызывающая сенсибилизацию, называется сенсибилизирующей. Обычно это очень небольшая доза (0,01-0,0001 мл лошадиной сыворотки для морской свинки). Сенсибилизация происходит при парентеральном введении антигена. Однако она может наступить и при прохождении антигенов через слизистую оболочку кишечника или легких. Развившееся состояние аллергии может сохраняться долго - несколько месяцев и даже лет. Повторное введение того же анафилактогена вызывает реакцию немедленного типа - анафилактический шок, от которого животное погибает. Условиями развития анафилактического шока являются: 1) повторная доза (разрешающая) должна превышать сенсибилизирующую в 10-100 раз; 2) разрешающая доза должна быть введена непосредственно в кровь. |