СОП МОЧА. Моча.СОП.текст. Традиционные и современные подходы к исследованию мочи
 Скачать 123.35 Kb.
|
|
лабораторными (ОАК, биохимический анализ крови, ОАМ, проба Нечипоренко, посев мочи), инструментальными методами исследования (УЗИ, ЭУГ); согласие пациента на участие в исследовании. Критерии исключения пациентов из исследования: наличие обструкции мочевыводящих путей, доказанный врожденный или приобретенный иммунодефицит, наличие онкоурологических заболеваний любой локализации, отказ пациента от участия в исследовании. Всем пациентам проведена антибактериальная терапия. Использовали препараты: амикацин, метрогил, ципринол, цефтриаксон. При бактериологическом анализе мочи были выявлены преимущественно такие возбудители, как Escherichia coli, Enterococcus. Исследование уровня экскреции маркеров воспалительного процесса с мочой проводили при Традиционные и современные подходы к исследованию мочи. Общий анализ и оценка цитокинового профиля поступлении пациента в стационар, до начала антибактериальной терапии (1-я точка) и на 6–7-е сутки после начала лечения (2-я точка), перед выпиской пациентов из стационара. У всех пациентов отмечена положительная клиническая картина в течении заболевания, подтвержденная стандартными инструментальными и лабораторными методами обследования (отсутствие воспалительных изменений в общеклинических анализах крови и мочи, нормализация показателей сКр и восстановление рСКФ). Уровень биомаркеров в моче определяли методом твердофазного иммуноферментного анализа с использованием реактивов АО «Вектор-Бест». Различия в клинических данных и клинические переменные сравнивали с помощью ранговых корреляций Спирмена и t-критерия. Использовали 1-ю порцию утренней мочи, собранную в специальные стаканы с крышками, в которые предварительно было внесено 20 мкл раствора ProClin 300 (SUPELCO, США). Как видно из полученных данных, до начала лечения концентрация IL-8, VEGF, MCP-1 в моче больных острым ПН была значительно выше по сравнению с контрольной группой условно здоровых лиц (таблица). Цитокиновый профиль мочи у больных острым пиелонефритом Показатель Контрольная группа, n = 30 Концентрация цитокинов (M ± m), пг/мл Пациенты с острым ПН. Лабораторные признаки ОПП не выявлены, n = 22 выявлены, n = 18 1-я точка 2-я точка 1-я точка 2-я точка IL-18 38,9 ± 2,8 42 ± 2,5 26,8 ± 2,1 95,8 ± 7,8* 52,0 ± 4,5* IL-8 9,8 ± 0,3 152,4 ± 2,1* 80,5 ± 2,3* 144,9 ± 3,8* 72,4 ± 4,2* MCP-1 228,8 ± 5,8 1071,3 ± 21,6* 663,3 ± 28,7* 1242,8 ± 9,5* 795,4 ± 7,8* VEGF 32,2 ± 1,7 212,8 ± 5,9* 71,5 ± 4,2* 372 ± 6,4* 169,8 ± 5,4* Примечание. * – р . 0,05. После завершения терапии (2-я точка) отмечено снижение уровней всех 4 биомаркеров. Однако при этом у пациентов с ПН и лабораторными признаками ОПП концентрация IL-8, VEGF, MCP-1 и IL-18 в моче осталась выше нормальных значений в 7,4, 5,3, 3,4 и 1,3 раза соответственно. Повышенная продукция MCP-1 играет важную роль в формировании ин Традиционные и современные подходы к исследованию мочи. Общий анализ и оценка цитокинового профиля фильтратов в почечной паренхиме, ремоделировании почечного кровотока и развитии тканевой гипоксии – главного индуктора выработки VEGF. Сохранение повышенных уровней провоспалительных цитокинов IL-8 и IL-18 (продуцируемого эпителиальными клетками дистальных канальцев) после острого ПН без и с лабораторными признаками ОПП, очевидно, является одним из признаков дальнейшего развития хронических форм тубулоинтерстициального воспаления. Особое диагностическое значение при определении тяжести поражения почечной паренхимы и дальнейшего формирования хронической болезни почек приобретает нарастание уровня IL-18. Данный интерлейкин считается провоспалительным цитокином, структурно подобным IL-1, экспрессируемым эпителиальными клетками дистальных канальцев. Эти клетки содержат основные компоненты, необходимые для высвобождения активной формы IL-18, а именно про-IL-18 и внутриклеточные протеазы цистеин каспазы-1. Последние преобразуют проформу IL-18 в его активную форму, которая затем выходит из клеток и может экскретироваться с мочой при острой почечной недостаточности. При анализе по методу Спирмена нами выявлена достоверная прямая корреляция концентрации IL-18 в моче и СКФ у больных ПН с лабораторными признаками ОПП после завершения лечения. Повышенное содержание в моче IL-18 у больных ПН через 5–6 дней от начала лечения (2-я точка) на этапе выписки пациентов из стационара может быть использован для количественной оценки степени острого ишемического и/или канальцевого повреждения почек или начала развития ОПП. Мониторинг концентрации хемокинов, VEGF и IL-18 в моче – неинвазивный и доступный для применения метод исследования. Изучение цитокинового профиля мочи у больных ПН позволяет дать оценку выраженности воспалительного процесса, тяжести поражения почечной паренхимы и дальнейшего формирования хронической болезни почек у больных ПН на этапе амбулаторного наблюдения после выписки из стационара. Данные маркеры можно считать маркерами-кандидатами, определение которых в дальнейшем позволит верифицировать тяжесть тубулоинтерстициального повреждения почечной паренхимы, расширив возможности неинвазивной диагностики начальных стадий хронической болезни почек. Традиционные и современные подходы к исследованию мочи. Общий анализ и оценка цитокинового профиля Список использованной литературы 1. Алексеев А.В., Гильманов А.Ж., Гатиятуллина Р.С. и др. Современные биомаркеры острого повреждения почек // Вестник Татарстана. 2014. Т. 7 (583). С. 22–27. 2. Аполихин О.И., Сивков А.В., Москалева Н.Г. и др. Анализ уронефрологической заболеваемости и смертности в Российской Федерации за десятилетний период (2002–2012), по данным официальной статистики // Экспериментальная и клиническая урология. 2014. № 2. С. 3–12. 3. Белохвостикова Т.С., Орлова Г.М., Фатахова О.А. и др. Липокаин, ассоциированный с желатиназой нейтрофилов, у больных с хронической болезнью почек: клинико-лабораторные взаимосвязи // Нефрология и диализ. 2011. № 3. С. 268–269. 4. Бобкова И.Н. Клиническое значение определения в моче маркеров эндотелиальной дисфункции и факторов ангиогенеза в оценке тубулоинтерстициального фиброза при хроническом гломерулонефрите // Терапевтический архив. 2007. № 6. С. 10– 15. 5. Вараксин Н.А., Захарова Н.Б., Понукалин А.Н. и др. Цитокины и С-реактивный белок при первичном пиелонефрите: сравнение диагностической значимости концентрации в моче и сыворотке крови // Новости «Вектор-Бест». 2012. № 64. С. 3–9. 6. Вельков В.В., Резникова О.И. Новые возможности для лабораторной диагностики хронической и острой ренальной дисфункции // Клинико-лабораторный консилиум. 2011. № 3. С. 26–30. 7. Глыбочко П.В., Захарова Н.Б., Россоловский А.Н. и др. Диагностическое значение подъема уровня провоспалительных цитокинов в моче при обострении хронического калькулезного пиелонефрита // Саратовский научно-медицинский журнал. 2011. № 2. прил. С. 143–144. 8. Захарова Н.Б., Долгов А.Б., Иноземцева Н.Д., Блюмберг Б.И. Биомаркеры инфекционно-воспалительных заболеваний почек и мочевыводящих путей // Справочник заведующего КДЛ. 2013. № 2. С. 48–59. 9. Земченков А.Ю., Томилина Н.А. «К/ДОКИ» обращается к истокам хронической почечной недостаточности (О новом разделе Рекомендаций K/DOQI по диагностике, классификации и оценке тяжести хронических заболеваний почек) // Нефрология и диализ. 2004. № 6. С. 204–220. Традиционные и современные подходы к исследованию мочи. Общий анализ и оценка цитокинового профиля 10. Крайдашенко О.В., Долинная М.А. Роль биомаркеров в оценке характера повреждений почек у больных с гипертонической болезнью // Клиническая нефрология. 2014. № 3. С. 23–25. 11. Морозов Д.А., Морозова О.Л., Захарова Н.Б., Лакомова Д.Ю. Патогенетические основы и современные проблемы диагностики хронического обструктивного пиелонефрита у детей // Урология. 2013. № 2. С. 129–134. 12. Новоселова О.В., Волынчик Е.П., Кононова С.В. и др. Клиническое значение качественного и количественного анализа белкового состава мочи // Лаборатория. 2006. № 1. С. 7–9. 13. Попков В.М., Долгов А.Б., Захарова Н.Б. и др. Мочевые биомаркеры при остром пиелонефрите // Саратовский научно-медицинский журнал. 2013. № 1. С. 110–115. 14. Пролетов Я.Ю., Саганова Е.С., Галкина О.В. Роль некоторых биомаркеров в оценке характера хронического повреждения почек у пациентов с первичными гломерулопатиями // Нефрология. 2013. № 1. С. 60–69. 15. Ребров А.П., Захарова Н.Б., Оксеньчук А.Н. и др. Диагностическое значение определения биомаркеров в сыворотке крови и моче больных системной красной волчанкой // Клиническая нефрология. 2014. Т. 1. С. 10–14. 16. Сереженков А.В., Горелов А.И. Цитокиновый профиль крови пациентов с хроническим пиелонефритом // Здоровье – основа человеческого потенциала: проблемы и пути их решения. 2013. № 1. С. 510–512. 17. Смирнов А.В., Добронравов В.А., Каюков И.Г. и др. Рекомендации Научно-исследовательского института нефрологии СанктПетербургского государственного медицинского университета им. акад. И.П. Павлова: определение, классификация, диагностика и основные направления профилактики хронической болезни почек у взрослых. СПб.: Левша, 2008. С. 51. 18. Смирнов А.В., Добронравов В.А., Каюков И.Г. Кардиоренальный континуум: патогенетические основы превентивной нефрологии // Нефрология. 2005. № 9. С. 7–15. 19. Томилина Н.А., Бикбов Б.Т. Эпидемиология хронической почечной недостаточности и новые подходы к классификации и оценке тяжести хронических прогрессирующих заболеваний почек. Тер. арх. 2005. № 77. С. 87–921. 20. Чеботарева Н.В., Бобкова И.Н., Козловская Л.В. Молекулярные механизмы интерстициального фиброза при прогрес Традиционные и современные подходы к исследованию мочи. Общий анализ и оценка цитокинового профиля сирующих заболеваниях почек // Нефрология и диализ. 2006. № 1. С. 26–35. 21. Damman K., Masson S., Hillege H.L. et al. Tubular damage and worsening renal function in chronic heart failure // JACC Heart Fail. 2013. Vol. 1. Р. 417–424. 22. Jungbauer C.G., Birner C., Jung B. et al. Kidney injury molecule-1 and N-acetyl-.-D-glucosaminidase in chronic heart failure: possible biomarkers of cardiorenal syndrome // Eur. J. Heart Fail. 2011. Vol. 13. Р. 1104–1110. 23. Ko G.J., Grigoryev D.N., Linfert D. et al. Transcriptional analysis of kidneys during repair from AKI reveals possible roles for NGAL and KIM-1 as biomarkers of AKI to CKD transition // Am J Physiol Renal Physiol. 2010. Vol. 298. P. 1472–1483. 24. Nejat M., Pickering J.W., Walker R.J. et al. Rapid detection of acute kidney injury by plasma cystatin C in the intensive care unit // Nephrol Dial Transplant. 2010. Vol. 25. P. 3283–3289. 25. Otu H., Merchant M.L., Klein J.B. Proteomics and diabetic nephropathy // Semin Nephrol. 2007. Vol. 27. P. 627–636. 26. Schiepati A., Remuzzi G. Chronic renal disease as a public health problem: Epidemiology, social and economic implications // Kidney Int. 2005. Vol. 68. P. S7–S10. 27. Shen S.J., Hu Z.X., Li Q.H. Implications of the changes in serum neutrophil gelatinase-associated lipocalin and cystatin C in patients with chronic kidney disease // Nephrology (Carlton). 2014. Vol. 19. Р. 29–35. 28. Zubowska M., Wyka K., Fendler W. et al. Interleukin-18 as a Marker of Chronic Nephropathy in Children after Anticancer Treatment // Disease Markers. 2013. Vol. 35. P. 811–818. Традиционные и современные подходы к исследованию мочи. Общий анализ и оценка цитокинового профиля Традиционные и современные подходы к исследованию мочи. Общий анализ и оценка цитокинового профиля Диагностическое значение цитокинов мочи в процессе дренирования больных с обструктивной уропатией Анастасия Игоревна Хотько аспирант кафедры урологии, Наталья Борисовна Захарова профессор кафедры клинической лабораторной диагностики, д. м. н., Александр Борисович Полозов профессор кафедры урологии, д. м. н., Дмитрий Николаевич Хотько заведующий урологическим отделением, к. м. н. ФГБОУ ВО «Саратовский государственный медицинский университет им. В.И. Разумовского» Минздрава России, Саратов Для оценки диагностического значения цитокинового профиля мочи у больных уролитиазом с явлениями обструктивной уропатии в процессе дренирования почки обследовано 66 пациентов с мочекаменной болезнью, проходивших лечение в отделении урологии Клинической больницы им. С.Р. Миротворцева ФГБОУ ВО «Саратовский ГМУ им. В.И. Разумовского » Минздрава России в период с 2015 по 2017 годы. В моче 66 пациентов методом твердофазного иммуноферментного анализа определяли концентрации интерлейкина-8, фактора роста эндотелия сосудов, моноцитарного хемоаттрактантного пептида-1, гранулоцитарного колонистимулирующего фактора. Полученные данные позволяют полагать, что у больных с обструктивной уропатией в развитии заболевания значительную роль играет хронический воспалительный процесс, сопровождающийся повреждением клеток канальцев с привлечением большого количества макрофагов и выработкой соответствующих хемокинов. Традиционные и современные подходы к исследованию мочи. Общий анализ и оценка цитокинового профиля Одним из направлений совершенствования методов персонализированной медицины является клиническая протеомика. Прежде всего – исследование белкового состава крови и жидкостей тела человека, в том числе мочи как одной из наиболее доступных для анализа [1, 2]. Установлено, что традиционные лабораторные показатели при заболеваниях почек и мочевыводящих путей, такие как повышение мочевины, креатинина, изменения концентрации электролитов, снижение скорости клубочковой фильтрации (СКФ), параметры анализов мочи (мочевой синдром) могут меняться в зависимости от целого ряда внеренальных факторов (возраст, пол, мышечная масса, статус обезвоживания и др.). Показано, что до 50 процентов нарушений ренальных функций может иметь место еще до повышения уровня креатинина [3, 4]. Белки, выявляемые в моче, имеют различное происхождение: одни фильтруются из плазмы крови, другие поступают из мочевого тракта. Полагают, что белки мочи неплазменного происхождения составляют примерно 50 процентов от всех белков мочи [5]. К ним относятся белки, поступающие из мочеточника, мочевого пузыря, мочеиспускательного канала, добавочных половых желез и почек [6]. Сейчас протеомными методами в моче обнаруживают более 3 тыс. различных белков [7]. Результаты исследований способствовали появлению целой группы надежных, специфичных, доступных лабораторных маркеров, рекомендованных к использованию в клинической практике на ранних стадиях поражения паренхимы почек или мочеполового тракта [8, 9, 10, 11, 12, 13]. Большинство биомаркеров представляют собой соединения и белки, экскретируемые канальцевым аппаратом почки при его повреждении различными агентами (бактериальными и т. д.) [14]. Повышенные концентрации в моче интерлейкинов IL-1., IL-6, IL-8, рецепторного антагониста IL-1 (IL-1RA), фактора некроза опухолей (TNF-.), фактора роста эндотелия сосудов (VEGF), моноцитарного хемоаттрактантного белка-1 (МСР-1) и С-реактивного белка (СRP) отнесены к показателям активности воспалительного процесса и фиброзной трансформации тубулоинтерстициальной ткани почек при пиелонефритах [15]. Количественный анализ IL-6, IL-8, МСР-1, IL-1RA и СRP в моче больных первичным пиелонефритом позволяет диагностировать на ранних стадиях развитие воспаления, а VEGF – определить степень ишемии почечной паренхимы и прогнозировать |