|
Биохим_15. Учебное пособие Хабаровск 2015 методические указания составили поступаев валерий Васильевич, д м. н., профессор
2 НАДФ
?
2 АТФ
2 АДФ
МЕВАЛОНИЛПИРОФОСФАТ
СО 2
ДИМЕТИЛАЛЛИЛПИРОФОСФАТ (С5) (или изопентенилпирофосфат)
(С5) (С10) (С30) (С30) ХОЛЕСТЕРИН (С27)
Сквален Ланостерин
Рис. 18. Основные этапы биосинтеза холестерина и его роль
в образовании стероидов
Ориентировочная карта действия №
| Вопросы, подлежащие изучению | Последовательность работы
и способ оформления результатов
| 1.
| Количественное определение холестерина в сыворотке крови ферментативным методом
| Принцип: Свободный холестерин и эфиры холестерина после ферментативного гидролиза холестеролэстеразой окисляются при помощи холестеролоксидазы. Индикаторной является реакция окислительного азосочетания образовавшейся перекиси водорода, 4-аминоантипирина и фенола в присутствии пероксидазы. Интенсивность окраски пропорциональна содержанию общего холестерина.
Ход работы: 1. Приготовить пробы согласно таблице:
Компоненты
| Объём компонента, мл
| Опытная проба
| Калибровочная
проба
| Холостая
проба
| Рабочий раствор ферментов
| 2,0
| 2,0
| 2,0
| Выдержать 5 мин
при температуре 370С
| Сыворотка
| 0,02
| -
| -
| Калибратор
| -
| 0,02
| -
| Вода дистилл.
| -
| -
| 0,02
| 2. Перемешать, инкубировать в течение 10 мин при температуре 370С.
3. Измерить оптическую плотность растворов опытной и калибровочной проб относительно холостой пробы
|
|
| при длине волны 500 нм в кювете с толщиной поглощающего слоя 1,0 см.
4. Содержание общего холестерина (ммоль/л) рассчитать по формуле:
С = (Ео : Ек) · 5,0
где: Ео – оптическая плотность раствора исследуемой пробы;
Ек – оптическая плотность раствора калибратора;
5,0 – содержание холестерина в калибровочном растворе, ммоль/л.
Нормальные величины содержания общего холестерина в сыворотке крови составляют 3,9 – 5,2 ммоль/л.
Сравнить содержание холестерина в исследуемой пробе с нормой, сделать вывод. Обозначить термином уровень холестерина в исследуемом образце сыворотки.
|
Тестовые задания
Содержание холестерина в крови взрослого человека колеблется в пределах (ммоль/л):
1) 2,2-2,9;
| 2) 3,9-5,2;
| 3) 0,5-1,0;
| 4) 9,0-11,0;
| 5) 2,0-4,0.
| В организме человека холестерин превращается в
-
провитамин D; тестостерон; ситостерин;
| желчные кислоты; ацетил-КоА.
| 3. В реакции образования мевалоновой кислоты необходим кофермент
-
1) НАД;
| 2) ФАД;
| 3) Коэнзим А;
| 4) НАДН2;
| 5) НАДФН2.
| 4. Регуляторным ферментом синтеза холестерина является
-
липопротеинлипаза; холестеринэстераза; ГМГ-КоА-редуктаза;
| ГМГ-КоА-синтаза; цитохром Р450.
| Содержание холестерина в плазме крови 8,4 ммоль/л характеризуется термином……………………………….
6. Основным способом удаления холестерина из организма является
-
окисление в желчные кислоты; расщепление в лизосомах; превращение в витамин D;
| экскреция с мочой; образование эфиров
с жирными кислотами.
|
7. Кетоновые тела синтезируются в
-
мышцах; почках; печени;
| надпочечниках; поджелудочной железе.
| 8. Общим метаболитом в синтезе холестерина и кетоновых тел яв-
ляется…………………..
Кетонемия и кетонурия наблюдаются при заболевании…………….
10. Орган, не использующий кетоновые тела…………………
Занятие 20. Обмен фосфолипидов. Биохимия мембран
Мотивация: Знание физико-химических фосфолипидов, путей их образования является важным для понимания их значения в организме, в формировании и функционировании биологических мембран в норме и при патологии.
Цель занятия: Закрепить представления о химической природе, особенностях метаболизма, синтеза и роли фосфолипидов. Изучить химический состав, биохимическую организацию и функцию мембран, механизмы мембранного транспорта, процессы перекисного окисления липидов и антиоксидантной защиты. Познакомиться с некоторыми заболеваниями, обусловленными мембранной патологией.
Студент должен: Знать
| Уметь
| Химическую природу фосфо-липидов, их биологическое значение, строение липидного бислоя, мицеллы, липосом. Пути биосинтеза фосфолипидов. Липотропные вещества. Виды биологических мембран и их строение, свойства и функции. Виды транспорта через мембраны. Причины нарушения структуры и функции мембран. Пероксидное окисление липидов. Механизмы антиоксидантной защиты.
| Объяснять биологическую роль фосфолипидов. Объяснять причины нарушения синтеза фосфолипидов. Объяснить особенности хи-мического состава и биологические функции биомембран. Объяснить изменения, функций мембран возникающие вследствие усиления процессов перекисного окисления липидов. Обосновать использование антиоксидантных препаратов, стабилизирующих мембраны.
| Вопросы,_изученные_ранее_и_необходимые_для_данного_занятия'>Вопросы, изученные ранее и необходимые для данного занятия:
| Вопросы
| Где изучались
| 1.
| Химия фосфолипидов
| Кафедра биоорганической
химии
| 2.
| Строение клетки, субклеточных структур | Кафедра гистологии
| 3.
| Состав гликопротеинов
| Кафедра биохимии (предыдущие темы)
| |
|
|