Билет 1 Элективные среды, их назначение
 Скачать 310.5 Kb.
|
|
БИЛЕТ №1 1. Элективные среды, их назначение. Элективные среды предназначены для избирательного выделения и накопления микробов определенного вида из материалов,содержащих разнообразную микрофлору.Принцип действия элективных сред основывается на: 1)опережении роста определенного вида микроба по сравнению с сопутсвующей флорой.Например на срееде Ру(свернутая лошадинная сыворотка) и среде Леффлера (1 часть лошадинной сыворотки и 3 части сахарного бульона) возбудитель дифтерии образует видимый рост через 4-6 часов,а остальные бактерии через 18-24 часа. 2) Добавлении веществ,ингибирующих рост сопуствующей микрофлоры.Например на среде ЖСА,содержащей до 9 % хлорида натрия культивируют стафилококки,рост других бактерий соль будет подаблять.Пептонная вода рН=8.4 используется для выращивания холерного вибриона,сдвиг рН в щелочную среду не влияет на рост данной бактерии. 2. Микрофлора кожи. На кожных покровах микроооганизмы подвержены действию бактерицидных факторов сального секрета, повышающих кислотность. В подобных условиях живут преимущественно staphylococcus epidermidis, микрококки, сарцины, аэроб и анаэроб дифтероиди. Другие виды: staphylococcus aureus, стрептококки-транзиторные Основная зона локализации - эпидермис, кожные железы, верхние отделы волосяных фолликулов. Микрофлора волосяного покрова идентична микрофлоре кожи. Первичная колонизация кожных покровов плода происходит при родах, но в теч. Недели замещается вышеуказанными бактериями. Подвержены бактерицидному действию .сального секрета уменьшение рН на исследования берут волосы, ногти, смывы с кожи, кусок кожи при травме 3. Что такое антисептики Антисептические вещества. Антисептика – комплекс лечебно - профилактических мероприятий, направленных на уничтожение микроорганизмов, способных вызвать индукционный процесс на поврежденных или интактных участках кожи и слизистых оболочек. Антисептические в-ва- соед-я, обладающие противомикробным действием, исп-ые для уничтожения микроорганизмов в ране, патологическом образовании или организме в целом.в кач-ве антисепт-х в-в исп-т в-ва биолог. и химич. происхожднеия. Биолог.: антибиотики, бактериофаги, антитоксины Используются различные химические соединения, этиловый спирт, 5% - спиртовой раствор йода, 0,5-2% р-р хлорамина, 0,1 р-р KMnO4 , 0,5-1% формалина 1-2% СП. Р-ры метиленового синего или бриллиантового зеленого, детергенты. 4.Формы взаимодействия микро-и макроорганизма: комменсализм, мутуализм, паразитизм. Мутуализм- взаимовыгодные симбиотические отношения. Микробактерии вырабатывают БАВ необходимые организму хозяина, а макроорганизм защищает их от неблагоприятных условий среды + пища. Отношения между партнерами харся взаимовыгодностью и ни один из них не может сущ-ть без другого. Комменсализм- форма симбиоза, при кот-ой один из партнеров системы (комменсал) возлагает на другого (хозяина) регуляцию своих отношений с внешней средой, но не вступает с ним в тесные отношения, т.е. получается, что выгода только для одного: комменсал извлекает из этого одностороннюю пользу, присутствие его для хозяина остается обычно безразличным. Микробы колонизируют кожные покровы и полости, не причиняя видимого вреда (нормальная микрофлора) Это кишечная палочка, стафиллококки, бифидобактеры. Паразитизм- форма взаимоотношений 2-х разл-х организмов, принадлежащих к различным видам и носящая антагонистический хар-р, когда один из них(паразит) использует другого(хозяина) в кач-ве среды обитания или источника отношений с внейней средой. . Микробы живут за счет живых тканей. Они вызывают заболевания, потому они патогенны ЗАДАЧА. В бактериологическую лабораторию направлены на исследование испражнения больного с диагнозом «острое кишечное заболевание». На какие питательные среды необходимо посеять материал для выделения возбудителя и уточнения диагноза Какие свойства микроорганизма необходимо изучить Все патогенные энтеробактерии могут вызывать у человека острые кишечные инфекции, условно-патогенные – гнойно-воспалительные заболевания и пищевые токсикоинфекции. Энтеробактерии – грамотрицательные палочки средней величины с закругленными концами, располагающиеся беспорядочно. Одни из них подвижны за счет жгутиков, другие неподвижны. Являются факультативными анаэробами. Они нетребовательны к питательным средам. На мясопептонном агаре образуют однотипные колонии. Средней величины, круглые, гладкие, выпуклые, блестящие, бесцветные. В мясопептонном бульоне растут, давая равномерное помутнение. Необходимо изучить биологические, биохимические, Морфологические и серологические свойства св-ва микроорганизмов. БИЛЕТ №2 1. Этапы выделения чистых культур анаэробов. Выделение чистой культуры аэробных бактерий используется в лабораторной практике для микробиологической диагностики инфекционных заболеваний.Чистой культурой называется популяция бактерий одного вида ,выращенная на питательной среде.Выделение чистой культуры аэробных бактерий достигается механичсеким разобщением исследуемого материала при посеве на питательные среды в присутствии кислорода.Для выделения чистых культур аэробов используется метод Дригальского ,Шукевича и биологический метод. Метод Дригальского включает три этапа.Первый этап:из исследуемого материала готовят мазок,окрашивают его по Граму и др. методом и микроскопируют.Материал наносят петлей на всю поверхность питательной среды.После посева петлю стерилизуют,чашку подписывают на донышке и ставят вверх дном в термостат при температуре 37 на 18-24 часа.Второй этап:на следующий день посевы изучают на изолированные колонии и описывают характер роста.Изучают морфологию бактерий путем приготовления мазка,окрашенного поГраму.Далее для выделения чистой культуры производят пересев колонии в пробирку со скошенным МПА.Пробирки помещают термостат при температуре 37 на 18-24 часа.Третий этап:отмечаюют рост выделенной чистой культуры.При микроскопическом исследовании мазка из чистой культуры в нем обнаруживаются морфологически и тинкториально однородные клетки. Метод Шукевича осуществляется путем засеявания исследуемого материала в конденсационную воду со скошенным МПА.Бактерии ,обладающие ползучим ростом из конденсационной воды выползают на поверхность агара.На следующий день проверяют на чистоту выделенной культуры.Из верхнего налета делают мазок,окрашивают его по Граму и микроскопируют. Для выделения чистой культуры микробов с трудом культивируемых на питательных средах используют биологический метод-заражение наиболее восприимчивых к данному виду возбудителя животных.После гибели или появления признаков заболевания животных забивают и производят посев крови и органов на питательные среды.Далее исследование проводят по методу Дригальского. 2. Микрофлора мочеполовой системы. Верхние отделы мочевыводящих путей– стерильны. В нижних отделах доминируют - staphylococcus epidermidis, негемолитические стрептококки, дифтероидиы, candida. В наружных отделах- mycobacterium smegmatis. У 15-20 % беременных из влагалища выд-т strepcoccus agalactiae группы В, кот-ый представляет серьезную опасность для новорожденных в плане развития пневмоний и гнойно-септических поражений. На исследования берут мочу, мазки из наружных половых органов. 3. Дератизация это комплекс мероприятий по уничтожению грызунов.- механический: ловушки -биологический: когда заражают мышей заболеванием, не передающихся людям. Эта мышь заражает своих -химический: когда они умирают под влиянием химических веществ 4. Факультативный и облигатный внеклеточный и внутриклеточный паразитизм бактерий, риккетсий, хламидий, микоплазм, грибов и простейших. Облигатный внутриклеточный паразитизм вирусов. Паразитические микроорганизмы разделяют на внутри- и внеклеточные. Внутриклеточные п. – вирусы, риккетсии, хламидии. Внеклеточные п. – больш-во бактерий, простейших. Паразитов подразделяют на облигатных(обязательных) и факультативных (необязательных). Факультативные паразиты. В зависимости от внешних условий, некоторые микроорганизмы могут вести себя как паразиты, либо как сапрофиты. К ним относят бол-во условно-патогенных бактерий. Облигатные п. полностью утратили собственные метаболические возможности и живут, разрушая ткани хозяина. ЗАДАЧА. Во время практических занятий по микробиологии студент А. разбил пробирку, вследствие чего на его руки попала взвесь микробных клеток содержащая S. aureus. Какие мероприятия должен провести студент для обеззараживания рук Как провести обеззараживание рук и стола, на которые попал патогенный материал Необходимо провести дезинфекцию рук, обеззараживание ее антисептическими ср-вами этиловый спирт, хлорамин, пав, промывание перманганатом калия стола БИЛЕТ №3 1. Методы культивирования анаэробов. Культивирование всех видов бактерий производят в анаэробных условиях. Анаэробные условия моно создать при культивировании в анаэростате (на дно устанавливается свеча илиналивается щелочной раствор пирагола, поглощающий кислород) и биологическим методом по Фортнеру или Малкиной. М-д по Фортнеру. Чашку Петри с толстым слоем питательного агара делят по полам, вырезанной полоской. На одну половину сеют культуру аэроба, на другую анаэроба. Чашку заливают парафином и помещают в термостат. Сначала растут аэробы. Когда они исчерпают весь кислород начинается рост анаэробов. При посеве по Малкиной используют 2 пробирки со скошенным МПА соединенных трубкой. В одну сеют культуру аэробов, в другую – анаэробов. Сначала растут аэробы. Когда они исчерпают весь кислород начинается рост анаэробов. Посевы анаэробов производят на среде Китта- Тароцци. Которая состоит из МПБ. 0,5% глюкозы и кусочков печени или мясного фарша. Перед посевом среду прогревают на водяной бане 10-15 минут. Для удаления воздуха остужают. После посева среду заливают слоем вазелинового масла или парафином, с целью изоляции от атмосферного воздуха 2.Микрофлора коньюктивы глаза. видовой и количественный состав постоянной микрофлоры конъюнктивы и роговицы беден. Из конъюнктивального мешка в небольших количествах выделяются непатогенные коринебактерии и нейссерии, эпидермальный стафилококк, сарцины. Как временные обитатели встречаются золотистый стафилококк, пневмококк, зеленящий стрептококк, микоплазмы, энтеробактерии. Присутствие названных бактерий в больших количествах и относительно долгое время указывает на снижение самоочищающей функции конъюнктивы, к-рое может быть вызвано заболеванием или действием бытовых и профессиональных вредностей. Слезные пути содержат микрофлору, характерную для конъюнктивы и носовых ходов. Передняя камера глаза, глазница и внутренняя среда глазного яблока стерильны. 3. Дезинсекция- комплекс мероприятий по уничтожению насекомых под влиянием химических веществ.. Медицинская Д. включает средства и методы уничтожения членистоногих, имеющих эпидемиологическое (клещи, блохи, вши, москиты, комары, мухи, мошки, мокрецы, слепни и др.) и санитарно-гигиеническое (тараканы, постельные клопы, рыжие домовые муравьи и др.) значение. В комплекс дезинсекционных мероприятий входят профилактические и истребительные мероприятия. Профилактические меры направлены на предупреждение развития и распространения членистоногих, например соблюдение правил личной гигиены (регулярное мытье тела, смена нательного и постельного белья), своевременное удаление и обезвреживание нечистот и отходов, соблюдение чистоты в помещениях и на территории населенных пунктов, рациональные мелиоративные мероприятия, очистка водоемов со стоячей водой от растительности и др. Для истребления членистоногих используют физические, химические и биологические методы. Физическими агентами являются сухой и увлажненный горячий воздух (например, дезинсекция в дезинфекционных камерах), горячая вода, пар, низкие температуры (см. Обмывочно-дезинфекционная техника). В качестве механических средств Д. применяют различного типа ловушки, липкую бумагу, очищают объекты и предметы от грязи и пыли. Кроме того, защиту людей от нападения кровососущих членистоногих позволяет обеспечить засетчивание окон и дверей, использование защитных костюмов, сеток. При химическом методе Д. используют различные химические средства дезинсекции (см. Ядохимикаты сельскохозяйственные). Вещества, предназначенные для уничтожения насекомых, называют инсектицидами, клещей — акарицидами (часто эти две группы веществ объединяют термином «инсектициды»), для уничтожения личинок — ларвицидами, яиц — овицидами 4. Патогенность и вирулентность бактерий. Определение. Патогенность определяет специфичность патологических процессов, вызываемых конкретным возбудителем, что проявляется развитием соотвествующего типа заболевания. Условнопатогенные микроорганизмы способны вызвать заболевания лишь при значительных нарушениях функциональных свойств. Свойствами патогенности является специфичность (способность вызвать определенную инф. болезнь) и органотропность (способность предпочтительно поражать определенные органы и ткани) Вирулентность отражает степень патогенности различных изолятов и штаммов конкретного патогенного вида. За единицу измерения вирулентности принята летальная доза- это наименьшее количество патогенных микроорганизмов или токсина, способное вызвать гибель определенного количества лабораторных животных. На практике применяют величины DL. DCL- количество микробов или токсина, вызывающие гибель 100% лабораторынх животных. LD50 - количество патогенных микроорганизмов, способное вызвать гибель 50% экспериментально зараженных лабораторных животных. Применяют так же величины 70, 75, 90 и тд. ЗАДАЧА Для проведения ряда медицинских исследований были необходимы стерильные халаты, стерильные пробирки, стерильные колбы, резиновые пробки и питательные белковые среды. Какие способы Вы изберёте для стерилизации указанных предметов Укажите режим стерилизации. Чем обусловлен выбор того или иного метода стерилизации Для стерильных халатов- 2атм. 138градусов на 25мин., питательных сред- 1атм. 120 градусов 20 мин. – автоклавирование, для пробирок, колбочек- Стерилизация сухим жаром или суховоздушная стерилизация в сушильном шкафу БИЛЕТ №4 1. Этапы выделения чистых культур аэробов. Выделение чистой культуры аэробных бактерий используется в лабораторной практике для микробиологической диагностики инфекционных заболеваний.Чистой культурой называется популяция бактерий одного вида ,выращенная на питательной среде.Выделение чистой культуры аэробных бактерий достигается механичсеким разобщением исследуемого материала при посеве на питательные среды в присутствии кислорода.Для выделения чистых культур аэробов используется метод Дригальского ,Шукевича и биологический метод. Метод Дригальского включает три этапа.Первый этап:из исследуемого материала готовят мазок,окрашивают его по Граму и др. методом и микроскопируют.Материал наносят петлей на всю поверхность питательной среды.После посева петлю стерилизуют,чашку подписывают на донышке и ставят вверх дном в термостат при температуре 37 на 18-24 часа.Второй этап:на следующий день посевы изучают на изолированные колонии и описывают характер роста.Изучают морфологию бактерий путем приготовления мазка,окрашенного поГраму.Далее для выделения чистой культуры производят пересев колонии в пробирку со скошенным МПА.Пробирки помещают термостат при температуре 37 на 18-24 часа.Третий этап:отмечаюют рост выделенной чистой культуры.При микроскопическом исследовании мазка из чистой культуры в нем обнаруживаются морфологически и тинкториально однородные клетки. Метод Шукевича осуществляется путем засеявания исследуемого материала в конденсационную воду со скошенным МПА.Бактерии ,обладающие ползучим ростом из конденсационной воды выползают на поверхность агара.На следующий день проверяют на чистоту выделенной культуры.Из верхнего налета делают мазок,окрашивают его по Граму и микроскопируют. Для выделения чистой культуры микробов с трудом культивируемых на питательных средах используют биологический метод-заражение наиболее восприимчивых к данному виду возбудителя животных.После гибели или появления признаков заболевания животных забивают и производят посев крови и органов на питательные среды.Далее исследование проводят по методу Дригальского. 2.Гнотобиология, её значение в медицинской микробиологии. Гнотобиология – это наука изучающая организмы, которые не содержат микробактерии (стерильны). У них недоразвитые иммунокомпетентные органы (тимус, лимфоидная ткань кишечника), Т.к. нормальная микрофлора вызывает образование АТ в низких титрах (Ig A). Он составляет основу невосприимчивости к проникающим возбудителям. Их используют для изучения инфекций, иммунитета, т.к они высоковосприимчивы к инфекционным агентам. 3.Дезинфекция. Вещества. Применяемые при дезинфекции. Механизм их действия. Дезинфекция – обеззараживание объектов окружающей среды: уничтожение патогенных для человека и животных микроорганизмов , с помощью химических веществ, обладающих антимикробным свойством. Относятся хлорная известь (0,1-10%), хлорамин (0,5-5% р-р), фенол или карболовая кислота (3-5%р-р), мезол(3-5%р-р), двутреть основная соль гипохлората кальция (0,1-10%р-р). Выбор дезинфицирующего вещества и его концентрации зависит от материала, подлежащего дезинфекции. Дезинфицирующие средства- это физические агенты и химические вещества, используемы для уничтожения возбудителей инфекционных заболеваний в окружающей среде. К физическим относят: пастеризация, тиндализация, кипячение, автоклавирование, горячий воздух, солнечные лучи, ультразвук, обжигание. К химическим: галоиды, фенолы и их производные, кислоты, щелочи, спирты и тд. Эти вещества должны непосредственно воздействовать на возбудителей. Диз средства можно разделить на 2 группы. 1. Дезинфектанты (для обработки неодушевленных преметов) и 2. Гермизиды ( для обработки как живых, так и неодушевленных предметов) По механизму действия: Окислители. Включает хлор, бром йодсодержащие соединения +КМнО4, Н2О2, озон. Ех: хлорсодержащие соединения обусловлены воздействием на микробную клетку кислорода и хлора. Активаторы увеличивают скорость химических процессов, что позволяет уменьшить концентрацию. Йодофоры – однохлористый йод, трихлоридиод, йодоформ. Основан на способности йода проникать в клеточную стенку М.о, нарушать структуру и синтез протеинов и нуклеиновых кислот, применяют для дезинфекции флаконов, предметов медицинского назначения. Бромантил – бром содержащий препарат, используется для обеззараживания воды в бассейнах Перекисные соединения, перекись водорода. Образование безгидроксильных радикалов, которые разрушают линиды мембраны, ДНК.. Группа дезинфицирующих средств, свертывающих белок. Фенолы- тимол, салол. Действуют как общий протоплазматический яд, разрушая стенку клетки, проникая внутрь клетки, вызывают осаждение клеточных белков. Крезолы – лизол. Используют для дезинфекции предметов обстановки, белья, туалетов Соли тяжелых ме – ртути, серебра меди, свинца цинка Соляная кислота – для дезинфекции вымытой фарфоровой посуды, питьевой воды. Спирты- проникают в микробную клетку, обезвоживают ее, свертывают белок. Для обработки рук, некоторых поверхностей. Дезинфицирующие средства, вызывающие набухание и растворение белка. Едкие щелочи- едкий натр- бактерицидное, противовирусное действие. Карбонат натрия – слабое бактерицидное действие. Для посуды, белья. Гидроксид аммония – слабое бактерицидное действие Негашеная известь – для обеззараживания поверхностей, выделений почвы Формалин. Используют как в жидком так и в газообразном состоянии. Обладает бактерицидными, противогрибковыми и противовирусными действиями. Механизм действия: инактивация микроорганизмов путем алкилирования амино- и сульфгидрильных групп протеинов и колец атомов азота в гетероцикле пуриновых оснований. Поверхностно – активные вещества ПАВ.- жирные кислоты, мыла, детергенты. Механизм их действия: высокая поверхностная активность, способность к растворению белков, липоидов, каротиноидов, диссоциация белковых комплексов. ПАВ используют для дезинфекции тканей, посуды, хирургических инструментов, кожи при хирургических манипуляциях. |