45 Противогангренозная сыворотка Лечебнопрофилактическая, антитоксическа
 Скачать 184.64 Kb.
|
|
4. Фаготипирование 5. Определение чувствительности к антибиотикам методом дисков Серологический метод: 1. РПГА – парные сыворотки для определения нарастания титра антител с О- и Vi диагностикумами – 4х кратное увеличение титра АТ 2. ИФА для определения АТ/О- и Н-АГ возбудителя. 1-к19 В инфекционное отделение поступил ребенок с клиническим диагнозом «острый гастроэнтерит». В бактериологической лаборатории из испражнений и рвотных масс больного выделен возбудитель Escherichia coli (O111: K55). Перечислите группы диареегенных эшерихий и определите, к какой из них относится выделенный возбудитель. Составьте схему микробиологического исследования, которое позволило определить указанный серовар кишечных палочек. Ответ обоснуйте. ОТВЕТ:ЭПКП(Энтеропатогенные), ЭТКП(Энтеротоксигенные), ЭИКП(Энтероинвазивные), ЭГКП(Энтерогеморрагические), ЭАКП(энтероадгезивные). Наша эшерихия-ЭПКП(серогруппа по О-антигену.+ ЭПКП вызывает диарею у детей). Лаб.диагностику проводят бактериологическим методом. Материал(испражнения, рвотные массы) засевают на дифференциальные лактозосодержащие среды(ср. Эндо), после 18 ч инкибуции при t=37гр отбирают те колонии, которые агглютинируются поливалентной агглютинирующей ОВ-сывороткой. Затем дифференцируют до вида по биохимическим свойствам. Определяют серогруппу и серовар с помощью РА на стекле с адсорбированными монорецепторными сыворотками. I-p7 Больному ребенку, с подозрением на коклюш, врач назначил проведение бактериологического исследования. На основе знаний о возбудители коколюша обоснуйте забора и доставки метериала для исследования в лабораторию, ответив на вопросы:1. что такое метод «кашлевых пластинок»? 2. Какую среду надо выбрать для посева? 3. В каких условиях доставить материал в лабораторию? ОТВЕТ:1. Материал для исследования-слизь с задней стенки глотки. Во время приступа кашля перед лицом пациента держат чашку Петре с питательной средой, в результате чего осуществляется посев. Мазки делают редко так как микроб быстро погибает на тампоне при высушивании. 2. Сложные питательные среды с добавлением сорбентов (уголь, крахмал), так как бактерии выделяют ненасыщенные жирные кислоты, сульфиды и перекиси, ингибирующие их рост. Среда Борде-Жангу (картофельно-глицериновый агар с добавлением 20% крови и пенициллина).3. Материал доставить в лабораторию при температуре 37С. I-p8 В хирургическом отделении клиники, снабженной кондиционерами, у 5 пожилых пациентов возникло воспаление легких. Рутинный бактериологический анализ не смог выявить возбудителя. Эпидемиолог клиники предположил, что пневмония вызвана бактериями рода Legionella. На основании знаний о свойствах легионелл обоснуйте предположение эпидемиолога, ответив на вопросы: 1. Какой метод микробиологического исследования подтвердит этиологическую роль легионелл?2. Каким образом произошло заражение пациентов.3. Следует ли изолировать заболевших пневмонией пациентов от других больных? ОТВЕТ: 1. Серологический метод: определяемое четырехкратное нарастание титра антител в парных сыворотках, реакции ИФА, РИФ непрямой. На 2-10 сутки можно выявить растворимый антиген в моче методом ИФА. 2. Аспирационный механизм передачи возбудителя. Легионеллы колонизировали кондиционеры в больничных палатах, которые образовали мелкодисперсный аэрозоль с микробом, вдыхаемый пациентами.3. Нет, так как от человека к человеку болезнь не передаётся. Задача 1к-8 В городскую инфекционную больницу поступило несколько больных, с симптомами холеры. Из испражнений всех этих больных был выделен холерный вибрион серогруппы О1. Все заболевшие венулись из Индии, где проводили отпуск. Метод микробиологического исследования, который подтвердит, что все больные заразились от одного источника. ОТВЕТ:Внутри серогруппы О1 идет подразделение на серовары Огава (АВ), Инаба (АС), Гикошима (АВС), в зависимости от сочетания субъединиц А, В и С. Серологическим методом с помощью агглютинирующих сывороток для отдельных сероваров (реакция агглютинации с сывотками Огава и инаба) можно выявить аналогичный ли возбудитель (принадлажит к одному серовару) вызвал заболевания во всех случаях. КИ 8) В детском санатории на протяжении 3 недель заболело 16 детей. Заболевание характеризовалось болями в горле, гиперемией лица, высыпаниями на туловище, тошнотой, рвотой, болями в правой половине живота. В меню санаторных обедов ежедневно был включён салат из сырой капусты и моркови. Овощи хранились в чулане, расположенном на подсобном дворе. Какие лабораторные исследования следует провести, чтобы поставить диагноз? ОТВЕТ:Иерсиниоз (кишечный иерсиниоз?). Бактериологический метод. 1) Посев на фосфатный буферный раствор (для обогащения) 2) Холодовое обогащение(психрофил).всего 3 недели, каждые 3 дня происходит высев на лактозосодержащюю среду Эндо. 3) Отбор лактозоотрицательных колоний, пересев на МПА 4) Идентификация по биохимическим свойствам, антигенной структуре Серологический метод. 1) ИФА для определения специфических IgM и G. Наличие IgM свидетельствует об острой инфекции. 2) РПГА/РА (со 2й недели) 1-р2 При оформлении на работу в детский сад гражданка М. прошла медицинское обследование. Из материала со слизистой носоглотки у неё была выделена дифтерийная палочка. Однако гражданка М. была принята на работу. На основании знаний свойствах возбудителей респираторных инфекций обоснуйте возможность принятия М. на работу, ответив на вопросы: 1. Какая питательная среда была использована для выделения дифтерийной палочки? 2. Установление какого свойства выделенного микроба позволило принять гражданку М. на работу? 3. Какими методами было проведено исследование свойства дифтерийной палочки, позволившее принять гражданку М. на работу в детский сад? ОТВЕТ:1) Растет на сложных питательных средах. Для первичного посева использована среда Клауберга (содержит теллурит калия – подавляет рост сопутствующей микрофлоры). *Для накопления чистой культуры: · элективная среда Ру (или Ру-Леффлера) 2) Токсигенного свойства 3) постановка РПГА, ИФА, двойной (встречной) иммунодиффузии в агаре по Оухтерлони, дополнительные пробы на цистиназу (проба Пизу), уреазу (проба Закса) и реакцию агглютинации с агглютинирующей дифтерийной сывороткой. 1к16 В детском санатории на протяжении 2 недель заболело 16 детей. Заболевание характеризовалось появлением тошноты, рвоты, болей в правой половине живота, напоминающих приступ острого аппендицита. Осмотр детей хирургом исключил острый аппендицит, а врач-инфекционист предположил, что у детей инфекция, вызванная энтеропатогенными бактериями. · Назовите заболевания, вызываемые энтеропатогенными иерсиниями и их возбудителей. · Назовите методы микробиологической диагностики этих заболеваний. ОТВЕТ:1)Псевдотуберкулез (Yersinia pseudotuberculosis), кишечный иерсиниоз (Y. Enterocolotocа). Бактериологический метод. 1) Посев на фосфатный буферный раствор (для обогащения) 2) Холодовое обогащение(психрофил). всего 3 недели, каждые 3 дня происходит высев на лактозосодержащюю среду Эндо. 3) Отбор лактозоотрицательных колоний, пересев на МПА 4) Идентификация по биохимическим свойствам, антигенной структуре. Серологический метод. 1) ИФА для определения специфических IgM и G. Наличие IgM свидетельствует об острой инфекции. 1) РПГА/РА (со 2й недели) 1-p14 При исследовании мазков из зёва больного ребёнка, окрашенных по Нейссеру, обнаружили мелкие палочки, расположенные под углом друг к другу, с зёрнами волютина на полюсах клеток. Назовите предполагаемого возбудителя. Перечислите свойства, по которым можно дифференцировать дифтерийную палочку от коринеформных бактерий. Назовите методы определения токсигенности дифтерийной палочки. ОТВЕТ:1. Возбудитель – Corynebacterium diphtheriae 2. Отсутствие способности ферментировать сахарозу и разлагать мочевину(отрицательная проба Закса, цвет бульона с мочевиной и феноловым красным не изменяется) является важным диагностическим признаком, отличающим C. Diphtheriae от других коринобактерий. + В отличие от коринеформных бактери, C. Diphtheriae на простых питательных средах не растёт. C. Diphtheriae относится к факультативным анаэробам, коринеформные- к облигатным. 3. ПЦР (на наличие tox-гена) полоску бумаги, пропитанную антитоксином наносят на чашку, а исследуемые культуры засевают бляшками по обе стороны бумажной полоски. Контролем служит заведомо токсигеннаякультура, также посеянная «бляшкой». В результате встречной диффузии токсина и антитоксина в месте их контакта выпадает линия преципитации, сливающаяся с линией преципитации токсигенного штамма. 1к-10 Из испражнений больного с острой кишечной инфекцией неясной этиологии выделена чистая культура грамотрицательных лактозонегативных палочек. Обоснуйте с микробиологической позиции выбор материала для исследования и назовите методы диагностики острых бактериальных кишечных инфекций. Перечислите этапы бактериологического исследования, которые были проведены в данном случае. Предложите схему дальнейшего исследования. ОТВЕТ:: Возбудитель локализуется в эпителиальных клетках толстой кишки- материалом для исследования служат испражнения. Методы диагностики ОКИ- бактериологический, серологический. Были проведены этапы посева на среды обогащения (селентиновый бульон) и на элективно-дифференциальные среды (лактозосодержащие среды Эндо, Плоскирева,Левина) Дальнейшее исследование: -посев колоний на среду Клиглера, чтобы провести предварительную дифф-ию до рода -окончательная идентификация до рода и вида- проведение биохимической идентификации с помощью дифференциально-диагностических сред; определение антигенной структуры возбудителя -внутривидовая идентификация ОКИ для обнаружения источника инфекции Серологический метод - РПГА Задача1. В двух группах детских яслей трое детей почти одновременно (20-24 сентября) заболели шигеллёзом. Больные госпитализированы, от всех выделены штаммы вида Shigella sonnei. Важно выяснить, произошло ли заражение детей от одного источника, или одновременное возникновение заболевания является случайным совпадением и источник заражения следует искать вне яслей. Каким образом врач-бактериолог может решить эту задачу? ОТВЕТ:1. Благоприятной средой для шигелл служат пищевые продукты. Shigella sonnei в молоке и молочных продуктах способны не только жить, но и размножаться. Разумно предположить, что дети отравились некачественными молочными продуктами. Стоит проверить качество данных продуктов. Задача2. В сельскую больницу из дальнего поселка соседи привезли лесника в очень тяжелом состоянии: сознание спутанно, временами бредит, температура 40, но при этом отмечается брадикардия, кожные покровы бледные, на коже живота и груди-розеолезная сыпь, печень и селезенка увеличены. При расспросе соседей удалось выяснить, что, вероятно, лесник болен около двух недель. В районной СЭС сообщили, что данная местность считается неблагополучной по брюшному тифу. Врач предположил у больного брюшной тиф. Какой материал ля исследования следует взять у больного, чтобы подтвердить диагноз? Какие методы диагностики надо применить? Перечислите необходимые питательные среды. ОТВЕТ:1) У больного следует взять мочу, испражнения и желчь (болеет около 2 недель). 2) Методы диагностики определяются стадией течения болезни. С конца второй недели производят выделение копро-, урино- и биликультур. Начиная со второй недели, проводят серологическое исследование в целях определения наличия антител в РНГА. Положительный титр не менее 1:200. Также используют постановку ИФА. 3) На 1 неделе заболевания посев крови в желчный бульон с пересевом на дифференциально-элективные среды (Эндо, Плоскирева, висмут-сульфитный агар). Задача3. В хирургическое отделение доставлен больной больной с диагнозом "острый аппендицит". Для дифференциальной диагностики аппендицита от токсикоинфекции в баклабораторию больницы были направлены фекалии больного. При бактериологическом исследовании фекалий обнаружили граммотрицальные средних размеров палочки с округленными концами, беспорядочно расположенные в мазке, не ферментирующие лактозу. Какие микробы, вызывающие пищевые токсикоинфекции, могут иметь такие признаки? Почему на основании полученных результатов нельзя назвать возбудителя? Какие исследования надо ещё провести? ОТВЕТ:1)Возбудитель-сальмонелла. 2)По биохимическим свойствам они идентичны, поэтому производят дифференцировку на серогруппы (общность строения О-антигена) и на серовары (различия в строении Н-антигена). (????) 4)В инфекционную больницу доставлен пациент в тяжелом состоянии с клиническим диагнозом: «холера, алгидный период». При сборе анамнеза установлено, что накануне больной прилетел из Дагестана. В эпидемиологических целях важно определить биовар возбудителя. Какие исследования нужно провести для этого? ОТВЕТ:1) бактериологический метод 2)экспресс-диагностика -риф и пцр 5)В одной из московских гостиниц заболел турист, накануне прилетевший из Индии. У больного повысилась температура, появилась рвота, боли в животе, частый жидкий стул. Больной госпитализирован с подозрением на холеру. Для проведения противоэпидемических мероприятий необходимо срочно подтвердить диагноз микробиологически. Как провести экспресс-диагностику заболевания? ОТВЕТ:РИФ и ПЦР 6)Персонал детского летнего санатория обследуют на носительство шигелл. Назовите, как и какой материал следует взять от обследуемых. Какие методы исследования будут применяться? Какие питательные среды при этом используют? ОТВЕТ: 1. для посева отбирают гнойно -слизистые - кровяные образования из средней порции кала ,которые непосредственно высевают на ряд разных лактозосодержащих и других дифференциально-элективных плотных питательных сред . 2. Бактериологический метод, серологический с постановкой рнга 3. Селенитовый бульон. Плотные Дифференциально-элективные питательные среды 7)В гостинице «Космос» поселился турист, прилетевший из Индонезии. На следующий день после приезда он обратился к врачу с жалобами на слабость, рвоту, боли в животе, частый жидкий стул типа «рисового отвара». При микроскопии в рвотных массах больного были обнаружены грам-отрицательные слегка изогнутые палочки. Врач заподозрил холеру. Обоснована ли постановка данного диагноза при таких результатах микроскопии? Какие микробиологические исследования необходимо провести, чтобы подтвердить диагноз? Как определить чувствительность возбудителя к антибиотикам? ОТВЕТ::1)Не обосновано, микроскопия не показательная при диагностике кишечных инфекций. 2)Диагностика проводится по бактериологическим, серологическим медотам. Этапы: Посев рвотных масс на среду обогащения- щелочную пептонную воду. Пересев на чашки с плотными элективными средами для получения роста колоний - TCBS среда – рост желтых колоний (ферментация сахарозы 3. Посев на диф-диагностические среды с сахарозой, маннозой, арабиозой, среду Клингера, оксидазная активность -Манноза + -Сахароза + -Арабиоза – -Оксидаза + 4. Постановка РА с сыворотками О1 и О139 – Положительная реакция с одной из сывороток 5. Определение чувствительности культуры к антибиотиком методом дисков 8)При посеве на среду Эндо испражнений пациента, переболевшего брюшным тифом, был получен рост крупных красных и мелких бесцветных колоний. Какие колонии и почему характерны для возбудителя брюшного тифа? Какие исследования нужно провести для идентификации возбудителя? ОТВЕТ::1)Для Salmonella typhi характерны бесцветные колонии – не ферментируют лактозу 2)Для идентификации необходимы бактериологический и серологический методы. Этапы бактериологического исследования: Посев исследуемого материала на желчный бульон (кровь) или селентиновый бульон для накопления Пересев на плотные питательные среды: Эндо, Плоскирева, Левина, висмут-сульфитный агар: - Бесцветные лактозонегативные колонии на средах Плоскирева, Эндо, Левина - Черные колонии на ВСА 3. Пересев на среды Клингера, цитратный агар Симмонса и другие диф. Среды для определения спектра биохимической активности: - На среде Клингера: столбик желтый – цвет изменился(Глюкоза+), скошенная часть розового цвета – цвет не изменился(Лактоза -), образование H2S – почернение нижней части среды 4. Постановка РА на стекле с адсорбированными сальмонеллезными сыворотками (поливалентными и моновалентными к О- и H-АГ) (поливалентные – для определения серогруппы, моно – для опр серовара) 5. Определение чувствительности к антибиотикам Серологический метод начиная со второй недели: РПГА для определения титра антител в парных сыворотках с О- и Vi-эритроцитарными диагностикумами – положительный результат, 4х кратное нарастание титра АТ (АТ к О-АГ – острый период болезни, АТ к Vi – бактерионосительство) ИФА |