45 Противогангренозная сыворотка Лечебнопрофилактическая, антитоксическа
 Скачать 184.64 Kb.
|
|
4в37 От больного с диагнозом ОРВИ взят смыв из носоглотки. На одном из этапов исследования была поставлена РГА, результат +. Объясните механизм РГА, укажите цели ее постановки и интерпретируйте полученный результат. Назовите метод микробиологической диагностики и его основные этапы. ОТВЕТ: РГА – реакция гемадсорбции. Мех. действия: культура клеток, зараженная вирусом с гемадсорбирующими свойтвами, адсорбирует на своей поверхности эритроциты. Цель постановки: индикация вируса по способности к гемадсорбции без выраженного ЦПД в культуре клеток. Результат +, соответственно вирус облагает гемадсорб. св-ми (напр, вирус гриппа) Вирусологический метод. Этапы: 1. Заражение культуры клеток исследуемым материалом 2. Идентификация вируса по характеру РГА (+/-) У пациента через месяц после отпуска, проведенного на заимке у лесника, появились признаки энцефалита. Пациент отрицает имевшиеся у него клещевые укусы. Следует ли данному больному проводить анализы на клещевой энцефалит? Если да, то каким образом могла произойти передача возбудителя. Какой материал следует направить на исследование? ОТВЕТ: Следует, тк передача возбудителя может происходить не только трансмиссивным путем. Проникновение вируса возможно контактным путем через мелкие поражения кожи. Доказан и алиментарный путь заражения при употреблении сырого молока коз и овец. Материал для исследования – кровь и цереброспинальная жидкость(наиболее целесообразно выделять вирус из крови, взятой на первой неделе заболевания) Исследуемым материалом от больного с клинической картиной энцефалита было произведено внутричерепное заражение мышей-сосунков, у которых развился паралич с последующей гибелью животных. Какой исследуемый материал был взят от больного? Как доказать наличие в нем вируса клещевого энцефалита? ОТВЕТ: 1.Материал для исследования – кровь и цереброспинальная жидкость(наиболее целесообразно выделять вирус из крови, взятой на первой неделе заболевания). 2. Проводят заражение культур клеток. Идентификация: в культуре клеток ПЭС вирус обнаруживают по характерному цитопатическому действию, идентифицируют прямым или непрямым методом флюоресцирующих антител. В культуре клеток ФЭК или Vero- методом флюор.антител. Серологическая диагностика : РСК (4х кратное и более нарастание титра антител), РТГА, РН, и методы ускоренной диагностики –РИФ, ИФА, РНГА, РТНГА. С целью идентификации вируса гриппа поставлена реакция РСК. При учёте результатов установлено, что при РСК с антигеном гриппа А наблюдается гемолиз, с антигеном гриппа В – отсутствие гемолиза. Интерпретируйте полученный результат. Объясните механизм РСК и цели постановки. ОТВЕТ: 1. Положительный результат – вирус гриппа В. 2. Проводят в 3 этапа : 1й- в пробирку помещают антитела и антигены. В случае их комплиментарности образуется иммунный комплекс антиген-антитело. 2й –добавляют комплемент. Он связывается с иммунным комплексом. 3й – добавляют гемолитическую систему (эритроциты барана и антитела к ним) => если комплемент связался с и.к., гемолиза нет ; если антиген и антитело некомплементарны, комплемент остается свободным и разрушает эритроциты барана ( гемолиз есть). С помощью данной р-ии можно искать антитела в сыворотке больного и неизвестные антигены. Для выделения вирусов из патологического материала использовали культуру клеток. Назовите виды культур клеток и методы индикации вирусов на этой модели. ОТВЕТ: 1. Культуры клеток разделяют на:первичные , размножающиеся только в первых генерациях( выдерживают 5-10 пассажей) перевиваемые (стабильные), способные размножаться в лабораторных условиях длительное время полуперевиваемые, имеющие определённую продолжительность жизни (40-50 пассажей) 2. Индикацию вирусов в культуре клеток проводят по Цитопатическому действию ; Бляшкообразованию (блящки – ограниченные участки, состоящие из дегенеративных клеток, которые вирусы способны образовывать в монослое клеток под агаровым покрытием, содержащим витальный краситель, окрашиваюший только живые клетки; видны как светлые пятна на фоне красного слоя клеток); Цветной пробе ( незараженные вирусом культуры клеток выделяют продукты метаболизма, которые подкисляют питательную среду и окрашивают добавляемый в среду индикатор феноловый красный в жёлтый цвет. Если исследуемый материал содержит вирусы, то метаболизм клеток нарушается => среда сохраняет красный цвет) Гемадсорбции (способность культур клеток, инфицированных вирусами, адсорбировать на своей поверхности эритроциты определённых видов животных и птиц) Назовите вакцину от натуральной оспы. Кем была открыта эта вакцина? ОТВЕТ: Применяют живую оспенную вакцину (Э. Дженнер), которую готовят из соскобов сыпи телят или при культивировании вируса вакцины (осповакцины) на куриных эмбрионах. Вакцину вводят скарификационным способом тли накожно с помощью безыгольного инжектора. Разработано также оральная таблетированная вакцина, не уступающая по эффективности накожной, но менее реактивная (Воробьев) Врач Э. Дженнер, который привил против оспы мальчика (ввёл вирус коровьей оспы, поражающий кожу пальцев рук после доениям инфицированных коров), а затем показал его невосприимчивость к вирусу натуральной оспы. 4в29 При проведении диспансеризации в крови пациента были обнаружены IgG против HBc-антигена и антитела к HB-s-антигену. Интерпретируйте результаты анализа, используя знания об антигенный структуре вируса гепатита В и в особенностях иммунного ответа против этого вируса. Ответ обоснуйте. ОТВЕТ: Наличие в крови IgGHBs-антигена (протективные антитела к поверхностному антигену) говорит о выздоровлении и формировании иммунитета к ВГВ, , IgG HBc-антигена – обнаруживаются в крови долгое время после разрешения болезни. Перенесённый гепатит(или пациент находится в стадии выздоровления) Какой из ниже приведённых анализов принадлежит лицу, перенесшему вирусный гепатит В с последующим формированием иммунитета, а какой принадлежит лицу, иммунизированному против гепатита В: 1 анализ: НВs-AГ - IgM HBс -АГ - IgG HBc—АГ + Ig HBs – АГ + 2 анализ: НВs-AГ - IgM HBс -АГ - IgG HBc—АГ - Ig HBs – АГ + ОТВЕТ:1 анализ – перенёсший гепатит В с формированием иммунитета: HBs отрицательный – нет носительства, IgM HBc отрицательный – не происходит активного процесса в печени, IgG HBc положительный – указывает на перенесенную инфекцию, Ig HBs положительный – выздоровление и формирование иммунитета. . 2 анализ – иммунизированный: HBs отрицательный – нет носительства, IgM HBc отрицательный – не происходит активного процесса в печени, IgG HBc отрицательный – указывает на то,что инфецирования не было,, Ig HBs положительный – иммунизирован (сформирован иммунитет) По результатам двух анализов, проведённых с недельным интервалом, оцените состояние больного 1 анализ: НВs-AГ + IgM HBс -АГ - IgG HBc - АГ + HBe-АГ + Ig HBe- АГ - 2 анализ: НВs-AГ + IgM HBс -АГ - IgG HBc -АГ + HBe-АГ - Ig HBe- АГ + ОТВЕТ: 1 анализ - HBs положительный – носительство, IgM HBc отрицательный – не происходит активного процесса в печени, IgG HBc положительный – указывает на перенесенную инфекцию, HBe- АГ положительный – активная репликация вируса и высокая инфекционность крови, Ig HBe – АГ отрицательный – не выздоровление. Ответ: Острый гепатит 2 анализ - HBs положительный – носительство, IgM HBc отрицательный – не происходит активного процесса в печени, IgG HBc положительный – указывает на перенесенную инфекцию, HBe- АГ отрицательный – нет репликации вируса,, Ig HBe – АГ положительный – благоприятный прогноз, размножение вируса снизилось. . Ответ: Стадия выздоровления При обследовании у больного методом ПЦР обнаружена HCV РНК. Достаточно ли этого анализа для постановки диагноза гепатитаС? ОТВЕТ: РНК HCV (вируса гепатита С)- является показателем активной репликации вируса в организме и определяется уже на 1-2 неделе после заражения. Поэтому ПЦР для обнаружения РНК- является первичной диагностикой и методом выбора при диагностики гепатита С. Для уточнения диагноза определяют титр антител: IgM k Hcc-Аг (структурный Аг)-текущая инфекция, IgG k Hcc-Аг- перенесенная инфекция. Антитела к неструктурным белкам-хроническая стадия. !Важно: для вируса гепатита С существует серологическое окно (12 недель), в течении которого АТ в крови НЕТ, несмотря на заражение. 4.Используя знания об иммунитете против гепатита В, ответьте: почему вакцины, содержащие НВs-антиген неэффективны для лечения хронической формы гепатита В? ОТВЕТ: HBs-антиген неэффективен, т.к. хроническая форма характеризуется нарушением Т-клеточного иммунитета, в формировании которого основная роль принадлежит НВс-антигену 2. В крови пациента с гепатитом В зафиксирована сероконверсия (смена) НВе-аг на антитела к НВе антигену. Какой прогноз можно сделать? ОТВЕТ: Наличие в крови HBe - аг свидетельствует о размножении в организме возбудителя, протекании активной формы гепатита. Сероконверсия наблюдается после исчезновения в крови HBe-аг, при выздоровлении, прогноз благоприятный. После перенесенного гепатита анти-HBe-аг могут выявляться до 5-6 лет 4в22 В вирусологической лаборатории проводят выделение вирусов из патологического материала, взятого от больного. Назовите модели (объекты), которые могут быть использованы для культивирования вирусов. Охарактеризуйте универсальную вирусологическую модель. Назовите признаки, по которым можно судить о репродукции вирусов в этой модели. ОТВЕТ: Вирусы культивируют на трех биологических моделях: чувствительных лабораторных животных, эмбрионах птиц и культурах клеток (тканей). Культуры клеток (КК), полученные из эмбриональных и опухолевых клеток, способны к быстрому росту. КК могут быть одно- и многослойными. Культуры клеток разделяют на: · Первичные, размножающиеся только в первых генерациях (выдерживают только 5-10 пассажей); · Перевиваемые (стабильные), способные размножаться в лаб. Условиях длительное время; · Полуперевиваемые, имеющие определенную продолжительность жизни (40-50 пассажей). Для культивирования клеток необходимы питательные среды, содержащие все необходимые элементы для жизнедеятельности и роста клеток (белки, липиды, углеводы, мин. соли, витамины и др.), а также индикатор для контроля за пригодностью пит. среды и размножения вирусов (цветная проба). Индикацию вирусов в КК проводят по следующим признакам: цитопатическому действию (деструкция клеток, вакуоляризация цитоплазмы, образование цитоплазматических и внутриядерных включений), бляшкообразованию, гемадсорбции, цветной пробе (сейчас практически не используется) Задача С целью идентификации вируса гриппа поставлена реакция РТГА. При учёте результатов установлено, что при РТГА с антигеном гриппа А1 наблюдается пуговка, а с антигеном А3 - зонтик. Интерпретируйте полученный результат. Объясните механизм РТГА и цели постановки. ОТВЕТ: Грипп вызывают ортомиковирусы. В данном случае реакция положительная с вирусом с антигеном гриппа А1. РТГА ставится с целью ретроспективной диагностики для идентификации вирусов, определения их специфичности и нарастания титра специфических антител. РТГА заключается в блокировании антителами вирусных антигенов, в результате чего они теряют способность агглютинировать эритроциты. При положительной реакции, если антитела и вирусы комплементарны друг другу, вирус инактивируется, агглютинации не происходит и образуется осадок в виде пуговки. Если антитела и вирус не комплементарны, вирус не инактивируется и вызывает гемагглютинацию, образуется осадок в виде зонтика - реакция отрицательна У больного 65 лет после обширной полостной операции,осложненной раневой инфекцией, после лечения антибиотиками в области поясницы болезненные высыпания. Гистология соскоба клеток с основания высыпаний показала наличие многоядерных клеток, с внутриядерными включениями. Какой вирус мог вызвать данное осложнение ОТВЕТ: Потому что после курса антибиотиков снизился иммунитет и произошла реактивация вируса герпеса Вирус ветряной оспы(опоясывающий лишай). ГВЧ-3 типа |