цитологические исследования в кдл. цитологические исследования. Цитологические исследования Цитология
 Скачать 168.52 Kb.
|
|
ЛЕКЦИЯ: Мейоз Мейоз – способ созревания гамет. В нем происходит редукция (уменьшение числа) хромосом, и переход клеток из диплоидного состояния в гаплоидное. Мейоз – универсальный способ созревания гамет. Выделяют зиготный мейоз (аскомицеты, базидиомицеты, водоросли, споровики). У них в жизненном цикле преобладает гаплоидная фаза, гаметы сливаются, образуют зиготу с двойным набором хромосом; и споровый мейоз. В органах размножения формируются гаплоидные клетки, которые затем делятся митозом, формируя споры; гаметный тип. Происходит во время созревания гамет. После G2 периода, наступает профаза I. В клетки наблюдается рост объема половых клеток, которые накапливают запасные питательные вещества (обеспечивание ранние стадии развития будущего зародыша). Отличается от профазы митоза следующими позициями: 1) Занимает много времени (от суток до годов). 2) Состоит из нескольких структурных функциональных фаз (лептотена, зиготена, пахитена, диплотена, диакинез). 3) Происходят коньюгация (объединение гомологичных хромосом, с образованием бивалента = тетрады). Тетрада – хромосомный комплекс из 4 хроматид, которые соединяются вместе за счет структуры – синаптонемный комплекс. 4) В профазе I происходит обмен участками между хроматидами гомологичных хромосом (НО, не между сестринскими хроматидами одной хромосомы). Кроссинговер. 5) Происходит синтез 1.5% хромосомной ДНК, хромосомы сохраняют ряд функциональных нагрузок, они участвуют в процессе транскрипции, репликации и упаковки. Профаза I это еще активная стадия при созревании. Лептотена – стадия тонких нитей. Зиготена – стадия объединяющихся нитей. Пахитена – стадия толстых нитей (самая длинная, 50% времени). Диплотена – стадия двойных нитей. Диакинез - стадия расходящихся нитей. Напоминает профазу митоза, но хромосомы очень тонкие и длинные. Степень компактизации крайне низка (в 30 раз менее компактны). Расположение хромосом в лептотене напоминает телофазную полиризацию ядра в животных клетках. Хромосомы имеют фигуру «букета», дугообразные изогнутые, сближенные хромосомы, которые связаны своими теломерами с ядерной оболочкой. А у растений другая ситуация, у них хромосомы собираются в клубок (синезис). Характерным для лептотены является расположение на тонких хромосомах сгустков хроматинов (хромомеров). Число их характерно для каждой хромосомы. По ним составляют карты хромосом. В конце лептотемы хромосомы начинают сближаться. Зиготена. Стадия коньюгации гомологичных хромосом. Синапсис. Гомологичные хромосомы узнают друг друга по участкам хроматины, сближаются и образуют новый хромосомный ансамбль или бивалент (парные соединенные, удвоенные хромосомы). Каждый бивалент состоит из 4 хроматид. Число бивалентов равно гаплоидному числу хромосом. На этой стадии синтезируется примерно 0,3% от всей ДНК. (zДНК), специфические по своему строению участки этой ДНК на гомологичных хромосомах еще на G2 стадии интерфазы делящихся клеток приближаются друг к другу, узнают друг друга и на некоторое время образуют стабильные связи, необходимые для закрепления хромосом одна вдоль другой. Позднее эта связь осуществляется с помощью синаптонемального комплекса. Имеется этот комплекс почти у всех эукариот, обладающих половыми процессами. Он имеет вид трехслойной ленты, состоящей из 2 боковых компанентов – тяжей. Они имеют толщину 30-60нм, а центральный осевой элемент 10-40 нм. Это комплекс белков. Полное сближение бивалентов происходит на следующей стадии. Пахитена. За счет полной коньюгации профазные хромосомы увеличиваются по толщине и хроматиды вступают во взаимный обмен идентичными участками (кроссинговер). Итог кроссинговера- рекомбинация генов. Морфологически этот процесс почти не улавливается, но в следующей стадии (диплотеме), биваленты расходятся, но остаются связанными в точках перехода (хиазма), это и есть места обмена генами. Синтезируется около 1% ДНК. Происходит амплификация рибосомных генов (повышенная выработка дополнительных ядрышек). Активация хрономерных участков, изменяется структура хромосом. Диплотема. Отталкивание гомологов друг от друга, в зоне центромеры. Пары сестренских хроматид остаются соединенными между собой. Укорачивание и конденсация хромосом. Вид ламповых щеток. Синтез РНК: преимущественно иРНК (для обеспечения биосинтеза запасных питательных белков, для ранней стадии развития зародыша). Продолжается активная амплификация. Диокинез. Уменьшение числа хиазм, укорочение бивалентов, распад ядрышек на составные, хромасомы теряют связь с ядерной оболочкой. Диакинез – переходная стадия к делению. Метафаза I Биваленты выстраиваются в экваториальной области, формируется метафазная пластинка. Процессы аналогичные митозу. Анафаза I Начинается расхождение хромосом. Расходятся гомологичные хромосомы, состоящие из 2 сестренских хроматид. Выстраиваются независимо друг от друга, и расходятся независимо друг от друга. Результат – образование двух новых ядер, содержащих уменьшенное число хромосом, каждое из которых состоит из 2 сестренских хроматид. Клетки переходят к делению, который, по морфологии, не отличается от митоза. Сестренские хроматиды связанные в районе центромеры, проходят метафазу, и профазу, а анафазе отделяются и расходятся по одной к дочернему ядру. В результате двух последовательных делений мейоза из одной диплоидной клетки образуется 4 гаплоидных, причем каждая клетка неизбежно отличается по своей генетической конституции. Случайное распределение хромосом по дочерним клеткам создает генетическое разнообразие. И число вариантов определяется по формуле 2n, где n – число пар хромосом. Для мужских и женских гамет мейоз различен. При мейозе сперматогониев возникает 4 одинаковых по размеру сперматоцита, которые затем дифференциируются в подвижные сперматозоиды. При мейозе ооцитов, отделяется первое направительное тело (потом оно делится еще один раз). При следующем делении возникает второе направительное тело. В результате всего деления возникает одна целая яйцеклетка и 3 направительных клетки. Статья Клиническая лабораторная диагностика сердечно-сосудистых заболеваний В условиях высокой коморбидности неотложные состояния в кардиологии требуют дополнительных методов диагностики. Использование современных биомаркеров некроза миокарда (тропонина 1, миоглобина и МВ КФК), сердечной недостаточности (B-натрийуретического пептида), в ряде случаев Д-димера, позволяют своевременно назначить лечение и определить тактику ведения кардиологических пациентов. В нашем исследовании у пациентов с болевым синдромом в грудной клетке и/или одышкой с предварительным диагнозом ОКС (острый коронарный синдром) была использована мультимерная стратегия экспресс-диагностики Triage,что позволило на 3,6 часа быстрее установить клинический диагноз, уменьшить количество койко-дней непрофильных больных в КРО. Ухудшение функции сердца часто приводит к повреждению почек и развитию острой почечной недостаточности, мультимаркерная стратегия совместно с определением маркера острой почечной недостаточности NGAL позволяет в кратчайшие сроки определить характер повреждения почек и миокарда и приводит к раннему адекватному лечению и улучшению исходов у кардиологических больных. Динамика и прогностическое значение мозгового натрий- уретического пептида и C-реактивного белка при остром инфаркте миокарда в зависимости от тактики лечения. 1ГБОУ ДПО Российская медицинская академия последипломного образования, Москва; ГУЗ ГКБ № 81, ДЗ г. Москвы C-реактивный белок (CРБ) и мозговой натрийурети- ческий пептид (NBP) и его фрагмент – N-концевой неактивный фрагмент мозгового натрийуретического пептида (NT-proBNP) занимают особое место в стратификации риска развития осложнений острого инфаркта миокарда (ОИМ). Цель исследования – сравнить динамику изменений концентрации NT-proBNP, CРБ и диастолической функции ЛЖ у больных ОИМ после эндоваскулярного вмешательства, тромболитической терапии и их комбинации. Исследование проведено с участием 102 больных ОИМ с подъемом сегмента ST (ОИМпST) до 6 ч от начала заболевания. Средний возраст составил 48,5 ± 6,9 лет (от 25 до 60 лет). Все больные разделены на 3 группы: в I группу включены 40 больных ОИМпST с первичным стентированием, во II группу – 32 больных ОИМпST с отсроченным стентированием в течение 24 ч после эффективной тромболитической терапии (ТЛТ), в III группу – 30 больных ОИМпST с эффективной ТЛТ без эндоваскулярного вмешательства. Всем больным проведено доплер-эхокардиографическое (доплер-ЭХОКГ) исследование с оценкой диастолической функции ЛЖ на 1-е и 7-е сутки ОИМ. Для ее оценки использовалось соотношение максимальных скоростей раннего и позднего наполнения ЛЖ (E/A). В каждой группе у 20 больных (всего 60) на 1-е, 3-и и 7-е сутки ИМ осуществляли взятие крови в стерильных условиях для последующего определения уровня CРБ и NT-proBNP в динамике. По данным сравнительного анализа доплер-ЭХОКГ на 1 сут ИМ в I группе пациентов развивался наиболее благо- приятный – I тип диастолической дисфункции – замедление релаксации ЛЖ (E/A = 0,9 ± 0,04). Тогда, как во II (E/A = 1,1 ±0,05) и III (E/A = 1,1 ± 0,06) группах уже к концу первых суток ИМ, несмотря на эффективную ТЛТ, формировался «псевдонормальный» тип диастолического наполнения ЛЖ. На 7 сут исследования в I (E/A = 1,17 ± 0,04, (p < 0,01)) и во II(E/A = 1,22 ± 0,09 (p > 0,05)) группах пациентов также регистрировался «псевдонормальный» тип диастолического наполнения ЛЖ. В III группе больных к 7 сут течения ИМ выявлено нарушение диастолической функции миокарда ЛЖ по прогностически неблагоприятному – рестриктивному типу (E/A = 1,5 ± 0,1, (p < 0,001)). У пациентов I группы значения NT-proBNP в 1-е сутки составили 284 ± 86 пг/мл, на 3-и сутки – 341 ± 136 пг/мл, на 7 сут – 254 ± 134 пг/мл (p> 0,05). Во II группе значения NT- proBNP в 1-е сутки соответствовали 493,5 ± 133 пг/мл, на 3-и сутки 567 ± 110 пг/мл, на 7 сут 511 ± 87 пг/мл (p> 0,05). В III группе значения NT-proBNP в 1-е сутки составили 475 ± 96,4 пг/мл, на 3-и сутки 450 ± 11,9 пг/мл, на 7-е сутки 926 ± 306 пг/мл (p> 0,05). Динамика NT-proBNP находится в зависимости от способа восстановления коронарного кровотока и соответствует типам диастолической дисфункции ЛЖ. Превышение NT- proBNP более 500 пг/мл может служить критерием появления первых признаков раннего постинфарктного ремоделирования ЛЖ у больных ОИМпST. Высокие значения CРБ и замедленное его снижение у больных с отсроченным стентированием в течение суток мо- гут быть связаны, как с длительной резидуальной ишемией, так и с поддержанием воспалительного ответа из-за механического повреждения атеросклеротической бляшки. В.В. Дорофейков, Ю.П. Милютина, Л.В. Прокопова, М.Ю. Ситникова, Е.В. Щляхто. Современные предикторы оценки тяжести систолической сердечной недостаточности ST2 и BNP у пациентов, жителей Северо-Западного региона России. ФГБУ «ФМНЦ им. В.А. Алмазова» Минздрава России, НИИ акушерства и гинекологии им. Д.О. Отта СЗО РАМН, Санкт-Петербург В каждодневной клинической практике для врача- клинициста одной из основных задач является максимально точная оценка тяжести состояния пациента и дальнейшее своевременное оказание высокотехнологичной медицинской помощи. Выявление достоверно значимых маркеров тяжести течения систолической сердечной недостаточности предшествует разработке региональных шкал прогнозирования. Цель – оценить вклад современных прогностических показателей в структуре портрета пациента с хронической сердечной недостаточностью (ХСН) – жителя Северо-Западного региона России. Проспективное исследование 83 пациентов, наблюдающихся кардиологом, специалистом по сердечной недостаточности в Центре им. В.А. Алмазова. Критерии включения – пациенты с ХСН II–IV функционального класса (ФК) с фракцией выброса менее 40%, в возрасте до 65 лет, подписавшие добровольное согласие на участие в исследовании. В ходе обследования проанализирована прогностическая значимость 130 параметров, в том числе концентрация NT-proBNP (Roche, Швейцария), ST2 (Critical Diagnostics, США) в плазме крови, показатели кардиореспираторного теста. Данные о реальной выживаемости пациентов получены в ходе телефонного опроса спустя 1 год после включения в исследование. Полученные данные обработаны с помощью программы STATISTICA 6. 76% (n = 63) составили мужчины, 24% – женщины. Функциональный класс ХСН в среднем достигал 2,7 ± 0,7, распределение по шкале ФК ХСН (I:III:IV) – 34%:55%:13%. Ишемическая этиология ХСН диагностирована у 55% (n= 46) пациентов. Показатели эхокардиографии: фракция вы- броса по Simpson 25 ± 8,5%, индекс конечно-диастолического объема левого желудочка 126,9 ± 39,4 мл/м2, индекс конечно- систолического объема левого желудочка 91,9 ± 39,4 мл/м2. В течение 1 года летальные исходы зафиксированы у 10% больных (n = 8). Трансплантация сердца выполнена 4 пациентам, двум пациентам имплантирована система EXCOR. Группа умерших пациентов отличалась большей частотой дыхательных движений (p = 0,009), меньшей концентрацией альбумина (p= 0,04), высоким содержанием NT-proBNP (p = 0,03), ST2 (p = 0,005) в крови, более высоким индексом массы миокарда (p = 0,02), низким потреблением кислорода на пике нагрузки (VO2 peak) (p= 0,00001), ST2 коррелировал с уровнем мочевой кислоты, r = 0,38 (p = 0,05), креатинина (r = 0,34, p = 0,05), скоростью клубочковой фильтрации (r= -0,3, p = 0,05), альбумина (r = -0,3, p = 0,05); концентрацией BNP (r = 0,48, p = 0,05); VO2 peak (r = -0,56, p = 0,05). ST2 – мощный предиктор оценки тяжести систолической сердечной недостаточности у пациентов Северо-Западного региона России, сопоставимый по значимости с уже доказанными предикторами: концентрацией мозгового натрийуретического пропептида и показателем максимального потребления кислорода (VO2 peak). Е.А. Павловская, А.Г. Автандилов, М.М. Федорова, А.П. Ройтман, В.В. Долгов. Изменение гемодинамики и марке- ров системного воспаления при восстановлении ритма у пациентов с пароксизмальной формой фибрилляции предсердий. ГБОУ ДПО Российская медицинская академия последипломного образования, Москва Фибрилляция предсердий наиболее распространенное нарушение ритма. При фибрилляции предсердий значительно ухудшается качество жизни пациентов, повышается риск развития тромбоэмболических осложнений, снижается толерантность к физической нагрузке. Считается, что возникновению и поддержанию данного нарушения ритма сердца способствует воспаление, оксидативный стресс, эндотелиально-эндокардиальная дисфункция, ишемия. В не- которых исследованиях показано, что уровень C-реактивного белка (CРБ) тесно коррелирует с объемом левого предсердия, что позволяет предположить связь между воспалением и ремоделированием левого предсердия. Была предложена теория о том, что воспаление влияет на ремоделирование за счет активных форм кислорода. Установлено, что CРБ может способствовать образованию активных форм кислорода за счет изменения гомеостаза антиокислительных ферментов в клетках эндотелия. Свободные кислородные радикалы активируют матриксные металлопротеиназы, что приводит к нарушению баланса между накоплением и разрушением внеклеточного матрикса. Это, в свою очередь, увеличивает фиброз левого предсердия с последующей дилатацией и потерей функции. Цель работы – оценить изменения гемодинамики и значений маркера системного воспаления после восстановления синусового ритма у пациентов с пароксизмальной формой фибрилляции предсердий. В исследование были включены 50 пациентов с пароксизмальной формой фибрилляции предсердий на фоне ИБС без признаков ХСН. Из исследования были исключены пациенты с заболеваниями, которые могли повлиять на уровень лабораторных маркеров (пневмония, обострение хронических инфекций). Средний возраст составил 65 ± 2 года. Всем пациентам проводилось ЭКГ, эхокардиографическое исследование и суточное мониторирование ЭКГ, динамическое исследование hsCRP и NT-proBNP в момент поступления в стационар с пароксизмом фибрилляции предсердий и после проведенного лечения. После курса проведенного лечения амиодароном (по стандартной схеме) и триметазидином (35 мг 2 раза в день) через 8 нед пациенты были разделены на 2 под- группы. В подгруппу «а» вошли пациенты, у которых пароксизмы не регистрировались при повторном суточном мониторировании ЭКГ (n= 44), а в подгруппу «б» были включены пациенты с продолжающимися пароксизмами фибрилляции предсердий (n = 6). Исходно среднее значение диаметра левого предсердия составило 43,6 мм. Отмечалось повышение систолического давления в ЛА до 30,5 мм рт. ст. Фракция выброса составила 61,1%. Отмечалось повышение уровня hsCRP до 2,7 мг/л и NT-proBNP до 721 пг/мл. После проведенного курса терапии амиодароном и триметазидином в подгруппе «а» произошло достоверное уменьшение размеров ЛП до 41,7 мм (p < 0,05), давления в ЛА до 23,8 мм рт. ст. (p< 0,001), выросла фракция выброса (ФВ) до 62% (p< 0,05), при этом уровень NT-proBNP составил 124 пг/мл. Уровень hsCRP снизился до 2,1 мг/л (p < 0,001). У пациентов подгруппы «б» наблюдалась тенденция к уменьшению диаметра ЛП 42 мм, отмечено незначительное снижение давления в ЛА до 28 мм рт. ст., ФВ не изменилась и составила 61%, при этом уровень NT-proBNP снизился до 86 пг/мл (p < 0,05), а hsCRP имел тенденцию к снижению и составил 2,3 мг/л. Восстановление синусового ритма сопровождается снижением уровня hsCRP, что косвенно может свидетельствовать о снижении уровня воспаления в сосудистой стенке и миокарде ЛП и позволяет судить о более благоприятном прогнозе. Восстановление синусового ритма сопровождается снижением перегрузки левых отделов сердца и снижением давления в ЛА, что приводит к улучшению инотропной функции сердца и нормализации уровня NT-proBNP. Л.Б. Гайковая, Т.В. Вавилова, А.Т. Бурбелло. Разработка компьютерной программы для мультимаркерной оценки эффективности и безопасности лекарственных препаратов с множественным действием. ГБОУ ВПО СЗГМУ им. И.И. Мечникова Минздрава РФ, Санкт-Петербург В современных стандартах лечения нередко рекомендуется одновременное назначение нескольких лекарственных средств, которое приводит к потенцированию действия различных лекарственных препаратов и, следовательно, требует лабораторного контроля. В настоящее время количество лабораторных исследований прогрессивно возрастает и, одновременно, увеличивается перечень требований к под- готовке пациентов к сдаче анализов, срокам забора крови, транспортировки и хранения биологического материала, что важно для качества лабораторного анализа. В связи с этим создание компьютерных программ для оптимизации взаимодействий между клиницистами и лабораторией является актуальной проблемой. С помощью компьютерной программы, в которую включены требования по преаналитическому этапу, «напоминания» для клиницистов по срокам выполнения лабораторных исследований для оценки эффективности и безопасности лекарственных препаратов, интерпретация полученных результатов и дальнейшие рекомендации по тактике лечения, достигается снижение ошибок на преаналитическом этапе и улучшение качества лабораторного анализа и лечения. Стратегии лабораторных исследований с комбинацией большого количества биомаркеров являются перспективным направлением лабораторной диагностики не только в оценке состояния больного и прогноза течения болезни, но и для определения эффективности и безопасности препаратов с многофакторным действием. Цель – разработка компьютерной программы мульти- маркерной стратегии по оценке различных действий омега-3 полиненасыщенных жирных кислот (ПНЖК) у пациентов, перенесших инфаркт миокарда (ИМ), и ее внедрение в клиническую практику. В исследование было включено 123 пациента (возраст 55,7 ± 7,5 лет), перенесших ИМ. Все пациенты получали стандартную терапию (β-адреноблокаторы, ингибиторы АПФ, антиагреганты, статины), из них 64 человека – дополнительно омега-3 ПНЖК. Определяли различные маркеры, характеризующие механизмы действия омега-3 ПНЖК, для выявления наиболее оптимальных сроков их действия: воспаления, апоптоза, окислительно-восстановительного равновесия, функциональной активности тромбоцитов, показатели липидного обмена на 3 сут, 14 сут, через 1, 2, 6 и 12 мес после ИМ. Для практического использования была создана компьютерная программа на основе Access с фиксированным заданием пользователю – исследовать лабораторные показатели в определенной последовательности и заданные сроки. Программа способна формировать базу данных с последующим доступом к выборкам по любым заданным параметрам и характеристикам больных. Внедрение компьютерной программы включало несколько этапов. 1 этап – введение паспортных данных пациента, диагноза и даты начала терапии омега-3 ПНЖК и напоминание по датам о проведении лабораторных исследований. 2 этап – введение результатов, полученных через определенные сроки терапии. Программа позволяет оценить эффективность и безопасность действия омега-3 ПНЖК и дает рекомендации по дальнейшему мониторингу применения препарата (коррекция дозы, дополнительные исследования, напоминание о следующем лабораторном исследовании). 3-й этап – это коррекция терапии по результатам исследований, полученным через 1 мес терапии, 4-й этап – через 2 мес и 5-й этап – через 6 мес терапии. Мультимаркерная стратегия по лабораторному контролю, реализованная в компьютерной программе, позволит улучшить качество терапии, облегчить организацию работы врачей (своевременность выполнения комплекса исследований, оценки результатов и рекомендаций по дальнейшей тактике лечения), снизить экономические затраты на неэффективную терапию и лишние дорогостоящие лабораторные исследования. [i] |