мех. Кптлпклми п д вс кожн нли меха значительная часть исходного сырья переходит в отхол

• Название: Кптлпклми п д вс кожн нли меха значительная часть исходного сырья переходит в отхол
• Дата: 25.03.2022
• Размер: 0.66 Mb.
• Имя файла: Untitled.FR12.docx
• Тип: Документы; #415502
• страница: 15 из 74

■К. Выполнение работы Целью работы является освоение методики получения кислотного желатина. Исходное сырье - некондиционное кожевенно-меховое сырье (КРС, овчина, лапы оле т.д.). Предварительно с поверхности лицевого слоя кожевенно-мехового сырья следует улЧе** 11 волосяной покров с использованием ножниц, после чего сырье следует измельчить на кус размером 0,5x0,5 см. Дальнейшую обработку образцов следует проводить согласно технолог ^ ской карте, представленной в таблице 11. Таблица 11 - Технологическая карта получения кислотного желатина №	Технологический процесс	Параметры обработки	Расход^^\
1	Щелочная обработка в содовом растворе. Кусочек дермы шкуры, массой 15-20 г (навеску взвесить на технических весах) переносят в хими­ческий стакан с содовым раствором и кипятят.	ЖК *= 5; температура - 100°С; продолжительность обработки (устанавливает преподаватель) - 60,45 или 30 мин	Расх°Д<едыЬ\ массы сыри по вариантам (см. табл. Ю)
2	Стив отработанного раствора	-
3	Промывка сырья	ЖК=3; температура - 20°С; продолжительность -1 ч	водопроводная^}^
4	Замораживание и хранение сырья до следующего занятия в растворе кислоты (по вариантам). Хране­ние проводится в холодильнике. Сырье должно быть полностью погружено в соот­ветствующий раствор кислоты.	ЖК=5; температура - 4°С	ХОЛОДИЛЬНИК §
5	Размораживание - промывка Замороженные образцы вынимают из раствора кислоты и помещают в водопроводную воду с тем- пературой 18-20°С.	ЖК=3; температура - 18-20°С; продолжительность - 30 мин	водопроводная вод^- - смена воды каж­дые 10 мин
6	Выплавление желатина на водяной бане:
6.1	1 фракция Образцы после размораживания и промывки слегка отжимают, взвешивают и помещают в химический стакан объемом 250 см3, куда заливают расчетное количество дистиллированной воды, нагретой до температуры 60°С. Вода должна закрывать поверх­ность загруженного сырья. Стакан ставят в предварительно нагретую водяную баню и поддерживают рабочую температуру в течение всего периода обработки (1 ч) в диапазоне 60-65°С при переменном механическом воздей­ствие. По окончании обработки полученную первую фракцию сливают в чистый химический стакан и в растворе определяют концентрацию белка (см. приложение Б). Рассчитывают выход белка по I фракции.	ЖК=2; температура - 60-65°С; продолжительность -1ч	дистиллированная^ вода
|| 6.2	II фракция На варочный остаток после первой фракции зали­вают дистиллированную воду с температурой 80°С до уровня поверхности сырья. Выплавление прово­дят при температуре 80-85°С в течение 1 ч, при переменном механическом воздействие. По окончании обработки вторую фракцию сливают в чистый химический стакан и в растворе опреде­ляют концентрацию белка (см. приложение Б). Рассчитывают выход белка по II фракции.	ЖК=1,0; температура - 80-85°С; продолжительность -1 ч	дистиллированная вода
| 7	Определение выхода варочного остатка. Отработанный-раствор второй фракции сливают. Варочный остаток промачивают фильтровальной бумагой и определяют его вес на технических весах. Разница между массами до и после выплавления и есть варочный остаток.

⁴ **таб900 Ш1\1\\тп\\\\\1\\



На основании полученных данных делают выводы.

Вопросы для самоконтроля

1. 
   Как называются растворимые фракции коллагена?
   
2. 
   Какие химические соединения необходимо использовать для их экстракции?
   
3. 
   Каким способом можно увеличить количество растворимого коллагена при экстракции?
   
4. 
   Что происходит в структуре коллагена в процессе его обработки щелочью?
   
5. 
   Как влияет концентрация гидроксида натрия на растворимость коллагена в кислоте?
   
6. 
   С какой целью проводится промывка щелочного коллагена в воде?
   
7. 
   Какие продукты образуются в результате термического воздействия на коллаген?
   
8. 
   Какие стадии превращения в желатин проходит коллаген?
   
9. 
   В чем заключается принцип фракционного выплавления?
   
10. 
    Какие методы выплавления клея Вы знаете?
    

Лабораторная работа 5

ОПРЕДЕЛЕНИЕ СТЕПЕНИ КИСЛОТНОГО ГИДРОЛИЗА ЖЕЛАТИНА
ИЛИ МЕЗДРОВОГО КЛЕЯ ПО ИЗМЕНЕНИЮ СОДЕРЖАНИЯ АМИННОГО АЗОТА

Цель работы — экспериментально выявить влияние продолжительности кислотного гидро­лиза на изменение содержания амминого азота в коллагене.

Известно, что при обработке коллагена в разбавленных органических кислотах происходит его набухание, которое сопровождается растворением небольшой части коллагена (не более 5°/о). Большие работы по изучению коллагена начались после открытия В.Н. Ореховичем с сотрудника­ми растворимой фракции коллагена, экстрагируемой цитратным буфером при рН4 из дермы шку­ры. Придавая особую биологическую роль белку, выделяемому при экстракции, в образовании соединительной ткани, это фракция была названа ПРОКОЛЛАГЕН. Американские исследователи установили, что из дермы парной шкуры при экстракции фосфатным буфером выделяется раство­римая фракция коллагена, которая при диализе образует аморфный осадок. Эта растворимая фракция была названа ТРОПОКОЛЛАГЕНом. Содержание этих экстрагируемых фракций в со­единительной ткани невелико и уменьшается с возрастом животного.

При изучении растворимости коллагена ряд исследователей указывает на наличие кислото­устойчивых и кислотолабильных поперечных связей. Более высокая растворимость коллагена дермы парной шкуры в кислой среде по сравнению со щелочной обусловливается водородными ионами, расщепляющими определенные виды связей в коллагене. На растворимость коллагена оказывают влияние не только рН раствора, но и вид и концентрация растворителя — кислоты.

Количество растворимого коллагена увеличивается после предварительной обработки ис­ходного сырья 5%-ным раствором гидроксида натрия, насыщенным сульфатом натрия или в ре­зультате ферментативной обработки. Увеличение продолжительности обработки ферментами при­водит к повышению содержания а-компонентов в денатурированных продуктах растворения, а это возможно лишь в случае одновременного разрушения как межмолекулярных, так и внутримолеку­лярных связей.

При кислотном гидролизе полипептидных цепей в растворе желатина или клея происходит увеличение содержания карбоксильных и аминных групп в эквивалентных количествах. Непо­средственно определять карбоксильные группы титрованием щелочью невозможно, так как ме­шают аминногруппы. Для определения амино- и карбоксильных групп применяется метод потен­циометрического титрования при помощи потенциометра ЭСК-10601 со стеклянными электрода­ми. Для титрования используют 0,1 н. раствор едкого натра и 0,1 н. раствор соляной кислоты.

Определение содержания аминного азота следует проводить методом Кьельдаля основанно­го на минерализации органических веществ серной кислотой с последующей отгонкой и количе­ственным учетом минерализованного азота.

Необходимые материалы, реактивы и оборудование

1. 
   Исходные растворы желатина и клея с концентрацией 25 г/дм³ (по сухому продукту).
   
2. 
   Рабочие растворы желатина и клея по вариантам (выдаются преподавателем).
   
3. 
   5%-ный раствор ЫаОН.
   
4. 
   Биуретовый реактив.
   

"5. Мочевина.- -

Вариант	Исходный раствор желатина, см3	Вариант	Исходный раствор клея, см3
1	20	5	20
2	25	6	25
3	40	7	40
4	50	8	50

Выполнение работы

Кислотный гидролиз желатина или клея

Из мерной колбы с рабочим раствором пипеткой отбирают 50 см³ исходного раствора и пе­реносят в колбу Эрленмейера на 200-250 см³, куда добавляют 25 см³ 0,05 н. раствора кислоты (со­ляной, серной или уксусной по индивидуальному заданию) и 2-3 мельчайших кусочка битого фарфора для интенсификации процесса кипения. Остальную часть раствора, оставшуюся в мерной колбе, анализируют на содержание белковых веществ и аминного азота, а также вычисляют моле­кулярную массу продукта гидролиза и количество свободных амино- и карбоксильных групп . (прил. Б, В, Г и Д).

Колбу Эрленмейера устанавливают на электроплитку и закрывают пробкой с шариковым холодильником. Отсчет времени гидролиза начинают после закипания раствора. Через 20 мин | после начала гидролиза колбу снимают с электроплитки и охлаждают до 50-55°С. После охлажде­ния из нее отбирают 15 см³ раствора и переносят в коническую колбу на 100-150 см³ (1 проба) для : определения содержания аминного азота (прил. 3).

■^держание аминного азота (N0*,) в пробах гидролизата вычисляют по формулам (17) и (18):

=а^]х 0,00014x1,5x1000/10, г/дм³; (17)

/У^хО,00014x1,5x100/™,%, (18)

где а¹ - объем 0,01 н. шаствора ИаОН, пошедшего на титрование 1-й пробы гидролизата, см³; $,00014 - количество азота, эквивалентное 1 см³ 0,01 н. раствора едкого натра, г; 1,5 - коэффици-

№	Показатели	Продолжительность гидролиза, мин
		0	20	20+15= 35	35+15= 50
1	Расход 0,01 н. раствора едкого натра, см3
2	Содержание белковых в в в 10 см3 рабочего раствора, г
3	Содержание аминного азота, в: г/дм3 °/о
4	Молекулярная масса белковых веществ по аминному азоту