Микробиология Борисов Л.В. Микробиология Борисов Л. Литература для студентов медицинских вузов
 Скачать 27.52 Mb.
|
|
Иерсинии энтероколита Морфология и физиология. Мелкие коккобактерии, имеющие жгутики, пили и микрокапсулу. Спор не образуют. Для них характерна биполярная окраска. J. enterocolitica хорошо растет на ос- монных питательных средах в широких диапазонах температур. Их можно отнести к умеренным психрофилам. Ферментативные свой- fr»a указаны в таблице Антигены. Y. enterocolitica имеет О-соматический и Н-жгутико- мые антигены. Для серологической дифференцировки используют их І*ииіичия по О-антигенам. При заболеваниях человека чаще других ■» гречаются серовары 03, 05, 06 и Патогенность и патогенез. Вирулентность данных иерсиний нЛусловлена их адгезией на энтероцитах, в которой участвуют пили, соединяющиеся с фибронектином, белки наружной мембраны, взаимодействующие с рецепторами макрофагов и тромбоцитов. Это присвоит к нарушению цитоскелета. Иерсинии, попавшие в макрофаги, імножаются в них. Вместе стем продуцируют фос- 1 зтап Бактериоскопическое исследование I Бактериологическое исследование Серологическое исследование для обнаружения антигена) Мазок окраска по Граму и метиленовым синим Иммумо- флюорес- цектное исследование О твет Г Посев на агар Мартена. Хоттингерв или др среды Инкубация посевов при 28°С I Р П ГА РТ П ГА ятап Характер колоний Мазок окраска по Граму О твет Реакция агтлютииации с противочумной сывороткой Посевы нате же среды (чистая культуре этап [ Посев на "пестрый ряд** I Определение чувствитегн ности к фагу Биопроба Заключэние Биопроба Заражение морской свинки Вскрытие животного Мазки-отпвчатки из органов Ответ С хе м а 20.9 Микробиологические исследования при чуме батазу и протеинкиназу, которые нарушают функции макрофагов. Токсическое действие этих бактерий связано с ЛПС и с выделением термостабильного энтеротоксина. Кишечный иерсиниоз проявляется в развитии острого гастроэнтерита, а также тяжелых и септических форм, которые чаще возникают у пожилых лиц, страдающих хроническими заболеваниями. Экология и эпидемиология. Кишечный иерсиниоз антропонозо- юонозная инфекция. Источниками инфекции являются больные люди и животные, а также бактерионосители. Передача инфекции происходит алиментарным путем с зараженными пищевыми продуктами фруктами, овощами, мороженым. Особенностью кишечных иерсиний является их способность размножаться в пищевых продуктах, хранящихся в холодильниках. Лабораторная диагностика. Основным методом является бактериологическое исследование. Выделенную культуру дифференцируют от других иерсиний по биохимическим (см. табл. 20.10) и серологическим признакам. Для серодиагностики используют РНГА и другие реакции. Профилактика и лечение. Специфическая профилактика отсутствует. Для лечения применяют антибиотики широкого спектра действия. Иерсинии псевдотуберкулеза Открыты Малассе и Виньялем в 1983 г. Морфология и физиология. pseudotubereulosis представляют собой грамотрицательныеные кокковидные палочки. Они имеют жгутики и образуют капсулу (рис. 20.18). Неприхотливы к питательным средам. Размножаются в широком диапазоне температур. На плотных средах образуют S- и формы колоний. Являются факультативными анаэробами. Биохимические свойства представлены в табл. 20.10. Антигены. Бактерии псевдотуберку- пеза имеют Ни О-антигены. О-антиген отличается от подобных антигенов других энтеробактерий структурой повторяющихся звеньев полисахаридной цепи ПС. Различают 10 сероваров этих бактерий, которые отличаются друг от друга ио О-антигенной специфичности. Наибольшее значение в патологии человека имеют I, III и IV серовары. Патогенез. Вирулентность обуслов- мена способностью подавлять фагоцитоз, их пенетрационными и инвазивными внойствами. Токсичность связана с эндо L U I t V l i C K U Рис. 20.18. J. Pseudo tuberculosis. ЭМ токсином (ЛПС), а также продукцией белкового экзотоксина. После проникновения возбудителя в желудочно-кишечный тракт поражается лимфоидная ткань кишечника и возникает мезентериальный лим- фоаденит. Бактерии размножаются в лимфоцитах, а затем проникают в кровь, вызывая бактериемию. В патогенезе псевдотуберкулеза существенное значение имеет аллергизация организма. Иммунитет. При псевдотуберкулезе имеет место гуморальный и клеточный иммунный ответ. Последний выражен в аллергизации организма и формировании ГЗТ. Антитела не обладают протективными свойствами, что приводит к возникновению повторных заболеваний. Экология и эпидемиология. Псевдотуберкулез является зооноз ной инфекцией. Основной резервуар инфекции в природе — грызуны (полевки, домовая мышь, крысы и др. Люди заражаются алиментарным путем при употреблении главным образом овощей и фруктов. Способность иерсиний размножаться при температуре С приводит к накоплению их в пищевых продуктах хранящихся в холодильниках. В РФ в 1959 г. на Дальнем Востоке была зарегистрирована вспышка заболеваний, получившая название скарлатиноподобной лихорадки, вследствие появления на коже мелкоточечной скарлати ноподобной сыпи. Лабораторная диагностика. Бактериологическое исследование является наиболее надежным методом диагностики псевдотуберкулеза. Широко применяется иммунофлюоресцентный метод. Серодиагностика проводится в РИГА и других серологических реакциях. Профилактика и лечение. Специфическая профилактика не разработана. Для лечения используют антибиотики широкого спектра действия. Возбудители пищевых отравлений микробной природы К пищевым отравлениям микробной природы относят острые системные заболевания, возникающие в результате употребления пищевых продуктов, массивно обсемененных некоторыми микроос ганизмами или зараженных микробными экзотоксинами. Это определение позволило подразделить все пищевые отравления, связанные с микроорганизмами, на пищевые токсикоинфекции и интоксикации Первые вызывают преимущественно грамотрицательные бактерии среди которых энтеробактерии занимают первое место. При этом название токсикоинфекции определяется поступлением в кровь бактериального эндотоксина (ЛПС), освобождающегося в большом количестве после массивного разрушения бактерий. Пищевые продукты, содержащие экзотоксины бактерий, вызывают пищевые интоксикации, а токсины грибов — микотоксикозы. 20.2.2.1. Возбудители пищевых токсикоинфекций Возбудителями пищевых токсикоинфекций являются прежде всего сальмонеллы, вызывающие заболевания у людей и животных (серогруппы А, В, С, D по Кауфману и Уайту, см. табл. 20.7), а также другие энтеробактерии (Shygella sonne, Е. coli, Proteus sp., Klebsiella enterocolytica, Enterobacter sp., Serratia sp. и др.). Патогенность и патогенез Упомянутые бактерии, также как и сальмонеллы, могут размножаться в пищевых продуктах и вызывать токсикоинфекции при массивных поступлениях в организм алиментарным путем, выделяя после разрушения эндотоксин (ЛПС). Пищевые токсикоинфекции протекают по типу острейшего гастроэнтерита с общетоксическими явлениями. Заболевание возникает при поступлении с пищей в желудочно-кишечный тракт большого количества бактерий, их бурным размножением в тонкой кишке, проникновением в лимфоидную ткань и массовой гибелью с освобождением эндотоксина. При этом независимо от вида возбудителя механизм действия эндотоксина (ЛПС клеточных стенок грамотрицательных бактерий) одинаков. Он характеризуется поражением интрамурального нервного аппарата кишечника, мелких сосудов и клеток ЦНС, атак же общетоксическим синдромом вплоть до коллапса. Возбудители пищевых интоксикаций Пищевые интоксикации возникают при приеме пищи, зараженной токсинами, либо бактериями и их токсинами, а также токсинами грибов, как указывалось выше. К ним относятся белковые экзотоксины С. botulinum, С. perfringens, С. difficile, Staphylococcus Токсичность. Патогенез. Clostridium botulinum в отличие от других возбудителей токсикозов продуцирует не энтеротоксин, а нейро токсин, который образуется возбудителем в пищевых продуктах в анаэробных условиях. Различают 7 сероваров ботулинистического токсина. Ботулотоксин, поступая с пищей в желудочно-кишечный тракт, всасывается через кишечную стенку в лимфу и кровь. Механизм действия состоит в ингибиции Са-зависимого освобождения аце- гилхолина и блокаде передачи импульсов через нервно-мышечные і инапсы. В результате поражения бульбарных нервных центров продолговатого мозга появляется расстройство аккомодации, двоение в глазах и другие симптомы perfringens, попадая в пищевые продукты, в анаэробных условиях продуцирует энтеротоксин, относящийся к группе цитотокси нов, вызывающий диффузный понос. Кроме того, Clostridium perfrin- Rens вызывает клостридиальные гастроэнтериты и некротические эн териты, обусловленные действием энтеротоксина, выделяемого возбудителем при его размножении в тонкой кишке. При этом развивается п.-моррагическое воспаление и общая интоксикация организма Энтеротоксин Clostridium difficile, попадая в желудочно-кишеч ный тракт, всасывается через кишечную стенку в кровь, воздействуя также, как холероген и термолабильный энтеротоксин на аценилатциклазную систему, что приводит к накоплению цАМФ, следствием которого является обезвоживание организма и диарея. Энтеротоксин этих бактерий относится к группе функциональных блокаторов. Кроме того, они, по-видимому, также как C.perfringens, секретируют энтеротоксин, относящийся к цитотоксинам, вызывающий диффузный понос. Некоторые штаммы Staphylococcus aureus, при размножении в определенных продуктах выделяют энтеротоксин, что приводит к пищевой интоксикации и диффузному поносу. Стафилококковый энтеротоксин, попадая с пищей в желудочно-кишечный тракт, всасывается через кишечную стенку в кровь, воздействуя через парасимпатическую систему на сердечную мышцу и систему кровообращения. Это приводит к гипотензивному эффекту. Стафилококковый энтеротоксин относится к группе цитотоксинов, также как и энтеротоксин С. perfringens. Угнетение нормальной микрофлоры кишечника способствует размножению бактерий и секреции этих токсинов. Экология и эпидемиология Источником инфекции являются люди и животные (больные и носители, выделяющие микроорганизмы во внешнюю среду. Передача инфекции всегда происходи і с пищевыми продуктами (мясо, молоко, рыба и изделия из них — фарш, студень, паштет, салаты и др, которые инфицируются и процессе изготовления, транспортировки, хранения и реализации готовой продукции. Многие бактерии размножаются и продуцируют экзотоксины не только в пищевых продуктах, но ив кишечнике. Через питьевую воду возбудители пищевых отравлений не ПС редаются, поскольку вводе они не размножаются и не секретиру ют экзотоксины. Лабораторная диагностика Основным методом является баюч. риологическое исследование, которое заключается в выделении и идентификации бактерий из двух источников подозреваемых пищевых продуктов и организма человека. В качестве исследуемого материала используют испражнения, рвотные массы, а также кровь дли обнаружения экзотоксина. Материал сеют на серию питательных сред обеспечивающих размножение возможных возбудителей. Выделен иг одного итого же микроорганизма из пищевого продукта и организма человека позволяет поставить диагноз заболевания. В случае выделения условно-патогенных бактерий проводят количественные посенм чтобы исключить присутствие нормальной микрофлоры. Наличие экзотоксина в исследуемом материале и его тип устанни ливают в реакции на белых мышах или в РНГА. Серодиагностика не проводится, поскольку за короткий срок течения заболевания антитела не успевают синтезироваться. Аллергические пробы также не ставятся, так как при этих заболеваниях ал* лергизации организма не происходит. СЕМЕЙСТВО ВИБРИОНОВ К семейству Vibrionaceae относятся несколько родов, из которых род Vibrio включает патогенные и условно-патогенные для человека виды. К патогенным относятся возбудитель холеры — V. cholerae и V. eltor, к условно-патогенным — Aeromonas hydrophilia и Plesiomonas. 20.3.1. Холерный вибрион. cholerae был выделен Р. Кохом в 1882 га на карантинной станции Ель-Тор также в Египте. Другие роды данного семейства содержат условно-патогенные виды (V. proteus, вибрион Мечникова, V. plesiomonas, светящийся вибрион, которые могут вызнать гастроэнтериты. Морфология и физиология Слегка изогнутая грамотрицательная полиморфная палочка. Монотрих. Спори капсул не образует см. рис 20 19, 20.20 на цв. вкладке Вибрионы относятся к хемоорганотро- фам с окислительными бродильным типами метаболизма. Ферментируют многие углеводы глюкозу, мальтозу, сахарозу и другие с образованием кислоты. Разжижают желатин, образуют индол, восстанавливают нитраты в нитриты. Продуцируют такие ферменты как нецитиназа, лизиндекарбоксилаза, орнитиндекарбоксилаза, нейрами- нидаза. Способность восстанавливать нитраты и образовывать индол нежит в основе положительной нитрозо-индоловой пробы — реакции холера-рот. Вибрионы хорошо растут на простых средах при щелочной реакции pH = 8,5-9,0. На плотных средах образуют небольшие прозрачные круглые колонии, на жидких — пленку слег ким помутнением среды. Вибрионы — факультативные анаэробы, образуют цитохромоксидазу. Антигены. Холерные вибрионы имеют два антигена О-антиген шноспецифический термолабильный и Н-антиген жгутиковый видос- мсцифический термостабильный. Возбудители холеры имеют ан- гш'ен. Вибрионы, относящиеся к серогруппам 02, 03, 04 могут выз- имгь энтериты и гастроэнтериты. антиген состоит из трех компонентов — А, В, С, разные сочетания которых образуют серовары О гава ЛИ, Инаба (АС, Гикошима(АВС). Часто выделяются вибрионы, не агглютинирующиеся 01 антисывороткой. Их называют неагглютини рующимися НАГ-вибрионами. Патогенность и патогенез Холерный вибрион с помощью жгутика и фермента муциназы проникает в слизистую оболочку тонкой кишки и прикрепляется к энтероцитам. Адгезия происходит за счет филаментоподобного вещества, находящегося на клеточной стенке вибриона. Затем начинается колонизация слизистой кишки. При этом вибрионы не проникают в энтероциты, а находятся на их поверхности. Основным фактором патогенности вибриона является секреция белковых токсинов. Это прежде всего холероген, который относится к функциональным блокаторам. Он, как и многие другие экзотоксины, состоит из двух субъединиц Аи В. Последняя не ядовита. Она обеспечивает прикрепление специфического рецептора мембраны энтероцитов тонкой кишки — моносиалоганглиозида — к клеткам кишечного эпителия, способствующего трансмембранно му переносу А-субъединицы в цитоплазму. Субъединица А обеспечивает токсичность, вызывая активацию аденилатциклазы. Это приводит к увеличению количества цАМФ (циклический монофосфат) и соответственно — к нарушению водно-солевого обмена, обусловленного выделением ионов натрия и хлора и обезвоживанию организма характерного синдрома холеры. При этом организм теряет дол 'жидкости в сутки. Одновременно блокируется АТФ-аза, что приводит к нарушению внутриклеточного транспорта и потере воды, а также нарушению межклеточных контактов. Холерный вибрион, также как и другие грамотрицательные бактерии, образует эндотоксин (ЛПС в составе клеточной стенки, который защищает возбудителя от фагоцитоза и обладает другими функциями, описар ными в разделе «Инфектология». Иммунитет. При холере наблюдается гуморальный иммунный ответ, который характеризуется появлением антитоксических (к холе рогену) и антибактериальных иммуноглобулинов. При этом существенную роль играют секреторные иммуноглобулины (SIgA), препятствующие адгезии вибриона. Экология и эпидемиология Единственным источником инфекции в природе является больной человек и бактерионосители. При холере Тог отмечается длительное бактерионосительство и многочисленные атипические формы болезни, что способствует распространению возбудителя. Заражение человека происходит через воду или продукты. Возможно заражение контактным путем. Холера является древнейшей инфекцией, которая периодически распространялась на многие страны и континенты, унося миллионы жизней. До сих пор эндемическим очагом холеры считаются бассейны рек Ганга и Брахмапутры в Индии 1 зтап 2 з З зтап Бактериосколическое исследование Бактериологическое исследование Экспресс-методы Мазок, окраска по Граму и фуксином Препарат 'висячая капля" Ответ Посев на щелочную пегггонную воду Посев на чашки с щелочным питательным агаром Иммобилизация вибрионов холерными сыворотками и фагами Иммуно- флюоресцентное исследование Ответ Пересев пленки ка чашки с щелочным Мазок. Агглютинация питательным агаром и вторично окраска на стекле на щелочную лептонную воду по Г раму с О-сывороткой Пересев колоний на скошенный щелочной питательный агар Характер колоний Ответ Мазок. Реакция агглютинации окраска на стекле с О-сывороткой по Граму и сыворотками Инаба и Огава Пересев на скошенный щелочной питательный агар. Изучение выделенной чистой культуры по схеме 3-4 этапов Око нчетельныО ответ Подвижность Развернутая реакция агглютинации с О-сывороткой Чувствитель ность к специфическим фагам Характер колоний Мазок, окраска по Граму — Гемолиз Посев на "пестрый" РЯД С хе м а 2 0 .1 0 . Микробиологические исследования при холере Меди цинская бактериология Лабораторная диагностика. Имеет исключительно важное значение для своевременного предотвращения эпидемий холеры. Используют бактериоскопический, иммунофлюоресцентный методы. Бактериологическое исследование с выделением чистой культуры возбудителя и его идентификацией по комплексу признаков и дифференциацией от бактерий родов Aeromonas и Plesiomonas. Для эпидемиологического анализа устанавливают фаговар выделенной культуры. В настоящее время для диагностики холеры применяют ДНК-зонды и ЦПР (цепная полимеразная реакция) (схема 20.10, рис. 4.4, Профилактика и лечение. Основные средства борьбы с холерой — раннее выявление больных и вибрионосителей, а также лиц, контактировавших сними с последующей их изоляцией. Для вакци- нопрофилактики используют несколько видов вакцин корпускулярная убитая, холероген-анатоксин, живая для перорального применения. В нашей стране массовая вакцинация не проводится. Для поздней профилактики и лечения чаще всего применяют тетрациклин. АЭРОБНЫЕ, МИКРОАЭРОФИЛЬНЫЕ, ПОДВИЖНЫЕ, СПИРАЛЬНО-ИЗОГНУТЫЕ ГРАМОТРИЦАТЕЛЬНЫЕ БАКТЕРИИ |