ГЛАВА-1. Методы фармакогностического анализа. Основные понятия, термины и определения
 Скачать 1.03 Mb.
|
|
Коры. Диагностическими признаками кор являются расположение и характер механических элементов: лубяных волокон (стереид) и каменистых клеток (склереид). Механические элементы располагаются одиночно или группами, рассеянно или поясами; иногда лубяные волокна окружены кристаллоносной обкладкой. Обращают внимание на строение пробки. В коре некоторых растений имеются млечники или вместилища с эфирным маслом, включения оксалата кальция. Для некоторых кор характерны микросублимация и микрохимические реакции (главным образом на механические элементы) и др. 1.4. ТОВАРОВЕДЧЕСКИЙ АНАЛИЗ. Цель товароведческого анализа лекарственного растительного сырья – дать объективное заключение о возможности использования сырья в медицинской практике. Для достижения этой цели необходимо решить две задачи: установить подлинность и доброкачественность лекарственного растительного сырья. Результаты товароведческого анализа оформляются документами установленного образца (протокол и сертификат), которые имеют государственную юридическую силу. Использование лекарственного растительного сырья, не имеющего заключения о качестве, попадает под юрисдикцию Законодательства РФ. Основными нормативными документами, регламентирующими товароведческий анализ, являются: 1. Общая методическая статья ГФ РФ XIV «Правила приемки лекарственного растительного сырья и методы отбора проб для анализа». 2. Общие фармакопейные статьи ГФ РФ XIV, касающиеся методик определения отдельных показателей качества лекарственного растительного сырья (ОФС.1.1.0015.15 «Ситовой анализ», ОФС.1.1.0025.18 «Упаковка, маркировка и транспортирование лекарственных средств», ОФС.1.2.1.0009.15 «Оптическая микроскопия»). 3. Частные фармакопейные статьи на лекарственное растительное сырье. Выделяют два уровня товароведческого анализа ЛРС: I. Анализ на соответствие требований нормативным документам на аптечных складах, базах, и промышленных предприятиях (фармацевтические фабрики, заводы по переработке ЛРС и т.п.); II. Товароведческий анализ в аптеках. 1.4.1. Анализ лекарственного растительного сырья на соответствие требований нормативных документов на аптечных складах, базах и промышленных предприятиях. На аптечные склады, базы и промышленные фармацевтические предприятия лекарственное растительное сырье, как правило, поступает в больших количествах. При этом, в зависимости от характера предварительной переработки и дальнейшего назначения, разделяют партии («ангро») и серии лекарственного сырья. Партия лекарственного сырья («ангро») – определенное количество цельного, обмолоченного, прессованного сырья, однородное по способу подготовки и показателям качества, одного наименования и оформленного одним документом, удостоверяющим его качество, предназначенное для производства промышленных серий фасованной продукции в упаковке «ангро» и в потребительской упаковке. Серия лекарственного растительного сырья – определенное количество однородного по всем показателям фасованного сырья (цельное, измельченное, порошок), произведенное в течение одного технологического цикла, оформленного одним документом качества. Серия формируется из одной или нескольких (не более трех) партий лекарственного сырья. Фасованная продукция – определенное количество (масса) лекарственного растительного сырья цельного, измельченного или порошка, помещенного в потребительскую упаковку, предназначенное для приготовления настоев и отваров, или в упаковку «ангро», предназначенную для изготовления лекарственных средств (настоек, экстрактов и др.). Товароведческий анализ партий и серий лекарственного растительного сырья проводит контрольно-аналитическая лаборатория фармацевтического предприятия или лаборатория регионального Центра сертификации и контроля качества лекарственных средств. Товароведческий анализ лекарственного сырья состоит из следующих этапов: - отбор проб; - испытание (анализ) отобранных проб на соответствие требованиям нормативным документам; - составление заключения о качестве лекарственного растительного сырья. Отбор проб лекарственного сырья для проведения анализа проводится в соответствии с требованиями ГФ РФ XIV. При этом, необходимо соблюдать действующие санитарно-гигиенические правила и условия, исключающие загрязнение сырья и обеспечивающие безопасность людей. Отбор проб представляет собой совокупность ряда операций для взятия определенного количества образцов лекарственного растительного сырья: - приемка сырья; - выборка единиц продукции; - непосредственный отбор проб сырья. - маркировка образцов и документальное оформление отбора проб. Приемка лекарственного растительного сырья Лекарственное растительное сырье, как «ангро», так и фасованное, поступает на аптечный склад, базу или промышленное предприятие в упакованном виде. При этом, различают два вида упаковки: 1. Транспортная упаковка – упаковка, представляющая один из видов транспортной тары, указанных в частных фармакопейных статьях (мешки тканевые и бумажные, пакеты бумажные, тюки, кипы, ящики фанерные и картонные и т.д.). 2. Потребительская упаковка – упаковка лекарственного средства, поступающая к потребителю, обеспечивающая его сохранность и неизменность свойств в течение установленного срока годности. Каждая партия (серия) лекарственного сырья сопровождается документомустановленного образца (накладной). Сопровождающий документ, как правило, содержит следующие данные: - номер и дата выдачи документа; - наименование и адрес поставщика; - наименование сырья; - номер партии (серии); - масса партии (серии); - год и месяц заготовки; - район заготовки (для дикорастущих видов) - результаты испытаний (аналитический паспорт) - нормативные документы на сырье - подпись лица, ответственного за качество сырья с указанием фамилии и должности. При приемке партии или серии лекарственного сырья, проводят внешний осмотр поступивших единиц продукции. При этом, обращают внимание на качество и целостность тары (отсутствие подмочки, подтеков и других повреждений) и правильность ее маркировки. Если при внешнем осмотре обнаружены повреждения тары, то дальнейшую проверку качества сырья, содержащегося в поврежденных единицах продукции, производят отдельно. При этом, вскрывают каждую единицу продукции и дают отдельное заключение о качестве сырья. Выборка единиц продукции и отбор проб ЛРС. Выборка – совокупность единиц продукции (транспортных упаковок или упаковок «ангро»), отобранных для проведения анализа из партии лекарственного сырья или серии фасованной продукции. Каждую партию (серию) лекарственного растительного сырья рассматривают как отдельную в отношении отбора проб. Пробы отбирают в количестве, необходимом для проведения трех анализов, включая арбитражный. Каждая из отобранных проб оформляется этикеткой установленного образца. При получении сомнительных результатов анализа допускается дополнительный отбор проб для повторного анализа. Процедура отбора проб документально оформляется записью в специальном журнале и актом отбора проб. Арбитражные образцы сырья хранят в специально отведенном помещении в течение всего срока годности. Выборку поступивших неповрежденных единиц продукции, производят методом случайного или систематического отбора, в необходимом количестве, в соответствии с ГФ РФ XIV (таблица 1). Все единицы продукции, попавшие в выборку вскрывают и проводят внешний осмотр лекарственного сырья невооруженным глазом или с помощью лупы 5-10×. При этом проверяют: однородность сырья по способу подготовки (цельное, обмолоченное, прессованное), однородность по цвету и запаху, засоренность посторонними примесями и наличие амбарных вредителей (определяют при помощи лупы 5-10 ×). В результате внешнего осмотра возможны три варианта: 1. В лекарственном сырье обнаружены затхлый, устойчивый посторонний запах, не исчезающий при проветривании, примесь ядовитых растений или их частей, помет грызунов и птиц, стекло, а также установлено наличие амбарныхвредителей в количествах, соответствующих II и III степеням зараженности. В этом случае партия сырье бракуется полностью и дальнейшей приемке и анализу не подлежит. Создается специальная комиссия и составляется Акт забраковки сырья, о чем сообщается поставщику. 2. Установлено, что лекарственное сырье неоднородно, присутствуют плесень и гниль, имеется засоренность посторонними неядовитыми растениями в количествах, явно превышающих допустимые нормы. В этом случае партия ЛРС рассортировывается и каждая ее часть принимается повторно. Если результаты внешнего осмотра части рассортированной партии совпадут с первичными результатами, данная часть партии бракуется и дальнейшей приемке не подлежит. 3. Лекарственное сырье однородно по способу подготовки, цвету и запаху, посторонние примеси и амбарные вредители отсутствуют или имеются в небольших количествах. В этом случае сырье из единиц продукции, попавших в выборку, используется для дальнейшего отбора проб. Лекарственное сырье, удовлетворяющее всем требованиям, которые предъявляются к нему при внешнем осмотре вскрытых единиц продукции, используют для отбора проб. При этом из каждой единицы продукции, попавшей в выборку, берут по 3 точечные пробы. Точечная проба – минимальное количество пробы, отобранное из каждой единицы продукции в установленном порядке за один прием для составления объединенной пробы. Масса точечных проб не регламентируются, но, по возможности, они должны быть одинаковыми. В зависимости от вида тары точечные пробы отбирают по-разному. Из мешков, тюков и кип – точечные пробы отбирают на глубине не менее 10 см. Вначале сверху, затем распарывают по шву и берут пробы из середины и снизу. Распоротую тару зашивают. Из ящиков – первую точечную пробу берут из верхнего слоя, затем сырье выкладывают до половины и из середины берут вторую точечную пробу, после чего сырье выкладывают полностью и со дна ящика берут третью точечную пробу. Все отобранные точечные пробы осторожно перемешивают и получают объединенную пробу. Объединенная проба – совокупность точечных проб, предназначенная для выделения средней пробы. Масса объединенной пробы не регламентируется нормативными документами и зависит от количества поступивших единиц продукции (партии сырья). Если масса объединенной пробы недостаточна для проведения требуемых испытаний, отбор точечных проб повторяют. Из объединенной пробы в установленной последовательности отбирают 4 специальные пробы: 1. Проба для установления степени зараженности сырья амбарными вредителями. Масса этой пробы составляет 500 г для мелких видов лекарственного сырья и 1000 г – для крупных. Пробу герметично упаковывают в стеклянную банку. 2. Средняя проба. Используется для последующего отбора аналитических проб. Масса средней пробы регламентируется ГФ РФ XIV (таблица 2) и зависит от морфологической группы (травы, листья, цветки, корни и т.д.), способу подготовки (свежее или высушенное, цельное или резаное и т.п.). В ряде случаев, как исключение, масса средней пробы зависит от вида сырья (например, листья сенны, цветки ромашки аптечной, плоды шиповника, корневища лапчатки и т.д.). Пробу упаковывают в полиэтиленовый или многослойный бумажный пакет. 3. Проба для определения микробиологической чистоты. Масса пробы составляет 50 – 200 г. Пробу упаковывают в полиэтиленовый или многослойный бумажный пакет. 4. Проба для определения радионуклидов. Масса пробы составляет, в соответствии с ГФ РФ XIV (таблица 4), 600 г (для листьев, трав, цветков и сборов) или 1000 г (для плодов, семян, кор, корней, корневищ и прочих видов сырья). Пробу упаковывают в полиэтиленовый или многослойный бумажный пакет. Анализ лекарственного сырья на содержание радионуклидов проводят в соответствии с требованиями ГФ РФ XIV. Для отбора перечисленных проб из объединенной пробы используют метод квартования (рис. 24), который заключается в следующем. Сырье осторожно перемешивают, раскладывают ровным слоем в форме квадрата на гладкой чистой ровной поверхности. Делят на 4 треугольника по диагонали, 2 противоположных треугольника отбрасывают, остальные два, объединяют, осторожно перемешивают и повторяют эти операции до тех пор, пока масса отбираемой пробы не будет соответствовать требуемой величине.  Рис. 24. Отбор проб методом квартования. Каждая из проб, отбираемая из объединенной пробы, может иметь отклонение по массе ±10% и оформляется двумя этикетками (одна из которых прикрепляется снаружи, другая - вкладывается внутрь упаковки). На этикетках указывают наименование сырья, наименование поставщика, номер партии, массу партии, дату отбора пробы, а также координаты лица, отобравшего пробу (ФИО, должность и подпись). Лекарственное сырье, которое осталось от объединенной пробы после отбора рассмотренных проб, присоединяют к партии. Из средней пробы методом квартования выделяют 3 аналитические пробы. Каждая из аналитических проб имеет свое строгое назначение: Аналитическая проба № 1 используется для определения подлинности, измельченности и содержания примесей. Аналитическая проба № 2 используется для определения влажности. Эту пробу упаковывают герметично. Аналитическая проба № 3 используется для определения содержания золы и действующих веществ. При отборе аналитических проб необходимо учитывать особенности морфологической группы и способа подготовки лекарственного растительного сырья. Так, если на анализ поступает измельченное сырье или оно представлено плодами и семенами, то сначала выделяют вторую аналитическую пробу для определения влажности сырья и только после этого – аналитические пробы №№ 1 и 3. Если сырье представлено цельной травой, корнями, корневищами, клубнями, то сначала выделяют аналитическую пробу № 1, затем сырье измельчают ножницами или секаторами и отбирают аналитические пробы №№ 2 и 3. Массы аналитических проб, как и масса средней пробы, регламентированы нормативными документами (таблица 3) и зависят от морфологической группы лекарственного сырья, способу его подготовки, и, в ряде случаев, от вида сырья. Массы аналитических проб не равны. Самой большой является аналитическая проба № 1. При взвешивании аналитических проб допускаются погрешность, которая зависит от массы пробы: Таблица №1. Объем выборки в зависимости от объема партии
Если при выделении аналитических проб масса в двух противоположных треугольников окажется меньше или больше, указанной в нормативной документации, то допускается добавлять или убирать лекарственное сырье из двух других треугольников, отделяя его по всей толщине слоя. Исключениеиз общих правил составляют корни женьшеня, для которых отбор проб осуществляется в соответствии с частной фармакопейной статьей (ГФ РФ XIV). Приемка фасованного лекарственного сырья и сборов Лекарственное растительное сырье и сборы, независимо от способа подготовки (цельное, измельченное, порошок, резано-прессованное, брикеты, сигареты), поступают в обращение в потребительских упаковках. При этом, лекарственное сырье расфасовывают в различные потребительские упаковки: картонные пачки; полиэтиленовые пакеты; фильтр-пакеты и др. Фасованное лекарственное сырье принимают сериями. Приемка серии фасованного сырья в целом аналогична приемке партии лекарственного растительного сырья, поступающего «ангро» и состоит из тех же стадий. Отбор проб фасованного сырья представляет собой совокупность двух операций для взятия определенного количества образцов лекарственного сырья: выборку единиц продукции и непосредственный отбор проб лекарственного сырья. Выборка единиц продукции и отбор проб для фасованного сырья имеет ряд отличий от лекарственного растительного сырья, поступающего «ангро». Сырье, расфасованное в потребительские упаковки, поступает в транспортных единицах (единицах продукции), чаще всего ящиках. Выборку поступивших неповрежденных единиц продукции, производят методом случайного или систематического отбора. Объем выборки единиц продукции при приемке фасованного ЛРС регламентируется ГФ РФ XIV (таблица 5) и зависит от количества поступивших транспортных упаковок. Так, если: - количество единиц продукции в партии составляет от 1 до 5, то в выборку попадают все поступившие транспортные упаковки; - количество единиц продукции в партии составляет от 6 до 150, то объем выборки составляет 5 транспортных упаковок; - количество единиц продукции в партии – от 151 до 500, объем выборки составляет 10 транспортных упаковок; - количество единиц продукции в партии более 501 транспортной упаковки, объем выборки рассчитывают по формуле: Х = 0,4×п, где п – количество транспортных упаковок. Полученное дробное число округляют в сторону увеличения до целого числа. При этом, количество упаковочных единиц в одной серии должно находиться в переделах от 3 до 30. АНАЛИЗ АНАЛИТИЧЕСКОЙ ПРОБЫ № 1 Аналитическая проба № 1 используется для установления (подтверждения) подлинности лекарственного растительного сырья, а также определения его измельченности и содержания примесей. Определение (подтверждение) подлинности. Под подлинностью понимают соответствие сырья своему наименованию. Подлинность ЛРС устанавливают (подтверждают) приемами макро- и микроскопического анализа по методикам, изложенным в общих статьях ГФ XI-XIV, а также при помощи качественных реакций. Определение измельченности. У цельного сырья измельченность определяют просеиванием аналитической пробы № 1 сквозь сито с диаметром отверстий, указанным в частном нормативном документе. Просеивают осторожно, обязательно закрывают сито крышкой. Просеивание считают законченным, если при дополнительном просеве в течение 1 минуты масса, прошедшего сквозь сито сырья, составляет менее 1% массы сырья, оставшегося на сите. Сырье, прошедшее сквозь сито взвешивают и вычисляют в процентах к массе аналитической пробы. Если нормативный документ не требует просеивания сырья, то измельченность сырья не определяют. Для некоторых видов сырья, например, подземные органы и коры нормативно-техническая документация, требует определить кусочки сырья определенных размеров. В этом случае и отбирают вручную, взвешивают и рассчитывают в процентах. Для измельченного сырья берут два сита, так как определяют и содержание измельченных частиц, но и частиц больших размеров, так называемых частиц, не проходящих сквозь сито. Сырье просеивают сквозь второе сита, диаметр которых указан в нормативном документе, взвешивают на ручных весах сырье с верхнего сита и сырье прошедшее сквозь нижнее сито, и рассчитывают в процентах к массе аналитической пробы. Определение содержания примесей. Для цельного сырья после определения измельченности, оставшуюся на сите часть аналитической пробы № 1 вручную на чистой гладкой поверхности лопаточкой или пинцетом разбирают на посторонние примеси, указанные в ФС в разделе «Числовые показатели». Обычно это: - части сырья, утратившие нормальную окраску (побуревшие, почерневшие); - части производящего лекарственного растения, не являющиеся сырьем; - органическая примесь (части посторонних неядовитые растения); - минеральная примесь (земля, песок и камни, которые можно отобрать вручную). Каждую примесь взвешивают отдельно и рассчитывают в процентах к массе 1-ой аналитической пробы. Одновременно обращают внимание на наличие амбарных вредителей. АНАЛИЗ АНАЛИТИЧЕСКОЙ ПРОБЫ № 2 Аналитическую пробу № 2 используют для установления влажности лекарственного растительного сырья. Влажность – один из важнейших показателей доброкачественности лекарственного растительного сырья, влияющий как на состояние самого сырья, так и на содержание действующих веществ. Под влажностью понимают потерю в массе за счет гигроскопической влаги и летучих веществ, которую определяют в сырье при высушивании до постоянной массы. Летучие вещества представлены преимущественно компонентами эфирных масел, а также некоторыми другими соединениями, которые при температуре определения (100-105°С) переходят в газообразное состояние и улетучиваются из сырья. Методика определения влажности лекарственного сырья изложена в ГФ XIV. Для установления влажности аналитическую пробу сырья измельчают до размера частиц 10 мм и берут две навески. Каждую из навесок лекарственного сырья помещают в стеклянные или алюминиевые бюксы, предварительно высушенные и взвешенные. Бюксы с навеской взвешивают и помещают (с открытой крышкой) в сушильный шкаф, предварительно нагретый до температуры 100-105°С. Время высушивания отсчитывают с момента, когда температура в сушильном шкафу снова достигнет 100 – 105оС. После высушивания бюксы с сырьем вынимают из сушильного шкафа, закрывают крышкой и помещают в эксикатор, где выдерживают в течение 30 мин. Обычно этого времени бывает достаточно, чтобы бюксы и их содержимое остыли до комнатной температуры. После этого бюксы с навеской взвешивают, снова помещают в сушильный шкаф и высушивают в течение 30 мин, после чего охлаждают в эксикаторе и взвешивают. Указанные операции повторяют до тех пор, пока масса сырья не станет постоянной. Масса считается постоянной, если разница между двумя последующими взвешиваниями после 30 мин. высушивания и 30 мин. охлаждения не превышает 0,01 г. Время первого высушивания зависит от морфологической группы сырья. Так, для листьев, трав и цветков первое взвешивание проводят через 2 часа, а плодов, семян, коры, корней, корневищ и т.п. – через 3 часа. В зависимости от точности определения выделяют влажность «товароведческую» и «аналитическую». «Товароведческую» влажность используют для установления доброкачественности сырья и соответствия его требованиям нормативных документов по рассматриваемому показателю (раздел «Числовые показатели» частной ФС на данный вид лекарственного растительного сырья). Для определения «товароведческой» влажности берут навеску сырья массой 3-5 г, взвешивание проводят с точностью ±0,01 г. «Аналитическую» влажность используют при пересчете содержания действующих веществ и золы на абсолютно сухое сырье. Для определения «Аналитической» влажности берут навеску сырья массой 1-2 г (точная навеска), взвешивание проводят с точностью ±0,0001 г. Влажность ЛРС (X) в процентах рассчитывают по формуле: (m – m1) × 100 х= m , где m - масса сырья до высушивания, г; m1 - масса сырья после высушивания, г. Окончательный результат рассчитывают как среднее арифметическое двух параллельных определений, вычисленных с точностью до 0,1%. Между результатами двух параллельных определений допускается расхождение не более 0,5%. АНАЛИЗ АНАЛИТИЧЕСКОЙ ПРОБЫ № 3 Аналитическую пробу № 3 используют для установления содержания золы и действующих веществ. Зола – один из основных показателей доброкачественности лекарственного сырья, под которым понимают несгораемый остаток минеральных веществ после сжигания навески сырья и последующего прокаливания остатка до постоянной массы. Методика определения золы изложена в ГФ XIV. Параллельно проводят два определения. При этом, все взвешивания проводят с точностью до 0,0001 г, расчеты – на абсолютно-сухое сырье (с учетом «аналитической» влажности). Содержание золы (X) в процентах рассчитывают по формуле; X= (m-m1)×100×100 , m×(100 – W) где m – масса сырья, г; m1 – масса золы в тигле, г; W - влажность ЛРС, %. Окончательный результат рассчитывают как среднее арифметическое двух параллельных определений, вычисленных с точностью до 0,1%. Между результатами двух параллельных определений допускается расхождение не более 0,5%. Разделяют два вида золы: 1.Зола общая – это сумма минеральных веществ, которые первоначально содержались в производящем растении, и минеральных веществ которые попали в сырье из окружающей среды (пыль, песок, земля и т.д.). Навеску измельченного лекарственного сырья (3-5 г) помещают в предварительно прокаленный и точно взвешенный фарфоровый (кварцевый, платиновый) тигель. Сырье в тигле осторожно сжигают («озоляют») на слабом огне, после чего помещают в муфельную печь и прокаливают до постоянной массы при температуре около 500°С. Взвешивание тигля с золой проводят после предварительной охлаждения сначала на воздухе (около 5 мин.), а затем – в эксикаторе в течение 30 мин. 2. Зола, нерастворимая в 10% растворе хлористоводородной кислоты – это, как правило, кремния оксид, который образовался из минеральных веществ, свойственных как производящему растению, так и попавших в ЛРС из окружающей среды (пыль). Для определения содержания золы, нерастворимой в хлористоводородной кислоте, навеску лекарственного сырья сжигают («озоляют»), после чего обрабатывают раствором 10% НС1 при нагревании на водяной бане. Жидкость фильтруют через беззольный фильтр. Фильтр с остатком высушивают, сжигают, прокаливают и взвешивают, далее аналогично методике определения золы общей. Содержание действующих веществ устанавливают по методикам, изложенным в общих методических статьях ГФ XI-XIV (экстрактивные вещества, эфирные масла, дубильные вещества) или частных статьях на отдельные виды сырья (алкалоиды, флавоноиды, производные антрацена, витамины и другие). Определение степени зараженности сырья амбарными вредителями. Исследования на наличие амбарных вредителей проводят в обязательном порядке при приемке лекарственного растительного сырья, а также ежегодно при хранении.Сырье проверяют на наличие живых и мертвых вредителей невооруженным глазом или с помощью лупы 5-10× при внешнем осмотре, а также при определении измельченности и содержания примесей.Если были обнаружены вредители, то в специальной пробе устанавливают степень заражения.Для этого пробу сырья просеивают сквозь сито с диаметром отверстий 0,5 мм и в отсеве проверяют наличие клещей. Различают 3 степени заражения клещами и другими амбарными вредителями в пересчете на 1 кг ЛРС. |