Микробиология как наука. Медицинская микробиология как научная дисциплина, ее задачи и практическое применение в стомат практике
 Скачать 379.13 Kb.
|
|
Лабораторная диагностика метод микроскопический (риноцитоскопии)- в мазках - отпечатках слизистой носовой полости выявление феномена гемадсорбции. Цитопатологический эффект (ЦПД) выражен слабо. метод вирусологический - заражение 10-11-суточных куриных эмбрионов в амниотическую полость и культур клеток. Идентификация - реакция торможения гемагглютинации (РТГА), реакция связывания комплемента (РСК). метод серологический - определение антител в парных сыворотках в реакциях РТГА, РСК,РН. ИФА. метод аллергический не применяют. метод биологический - заражают белых мышей. Лечение и профилактика Экстренная неспецифическая профилактика - интерферон. Специфическая - противогриппозная сыворотка, донорский иммуноглобулин. Лечение - интерферон, арбидол, ремантадин. Профилактика Живая аттенуированная вакцина. 107. ВИЧ-инфекция Вирус иммунодефицита (ВИЧ) вызывает у человека инфекцию, сопровождающуюся поражением лимфоидных клеток, в частности Т-хелперов. Характеризуется медленным течением, прогрессирующим дефектом иммунной системы, полиморфизмом клинических проявлений и высокой летальностью. В результате поражения иммунной системы происходит гибель больного от вторичных поражений, описанных как синдром приобретенного иммудефицита (СПИД), который и является терминальной стадией ВИЧ-инфекции. Эпидемиология Источник инфекции - человек в любой стадии заболевания. Вирус обнаруживается в крови, семенной жидкости, влагалищном секрете, грудном молоке. Пути передачи - половой, а также любое инфицирование кровью, возможна передача вируса от матери к плоду. Передача вируса другими путями (воздушно-капельным, трансмиссивным, алиментарным) - не установлена. Инкубационный период от нескольких недель до нескольких месяцев. Классификация По классификации относится к РНК-содержащим вирусам, семейство Retroviridae, род Lentivirus. Синдром приобретенного иммунодефицита может быть вызван и вирусами других семейств (Герпесвирусами, Онковирусами), поэтому во избежание путаницы международная комиссия присвоила ему название HIV (Human Immunodeficiency Virus) и признала, что данный вирус является возбудителем СПИДа. Патогенез Главным моментом патогенеза является прямое повреждающее действие вирусом клеток иммунной системы. Основными инфицируемыми клетками являются Т- хелперы (СД4), моноциты, макрофаги, а также клетки микроглии.Поэтому основным резервуаром вируса ВИЧ в организме зараженного человека является лимфоидная ткань, где вирус репродуцируется-постоянно, даже на ранних стадиях бессимптомного начала заболевания. Особенностью репликативного цикла ретровирусов является то, что он включает предварительный перенос наследственной РНК на синтезирующую молекулу ДНК. То есть с однонитевой вирусной РНК информация переписывается на ДНК, а не наоборот. Этот процесс происходит с участием вирусного фермента РНК-зависимой ДНК-полимеразы, в результате образуется ДНК-провирус, интегрирующийся в геном пораженной клетки. Обратная транкриптаза (фермент) изначально входит в состав каждого ретровируса. Клетки млекопитающих подобного фермента не содержат. Строение вируса Вирус ВИЧ имеет сферическую форму. Геном - однонитевая несегментированная РНК плюс фермент обратная транкриптаза. Белки сердцевины р 7, р 9. Сердцевина окружена капсидом, белок р 24. Суперкапсид образован двумя липидными слоями с пронизывающими его гликопротеиновыми шипамы на поверхности. Это белок Gp 120 и внутри этого слоя белок Gp 41. Клиника Условно клинику можно разделить на несколько периодов. Период начала инфекционного процесса. Связывание белков вируса Gp 120 с молекулами СД 4 на клетках. Первое воздействие вируса на организм связано с иммуносупрессией. Лабораторно отмечается вирусемия, при отсутствии антител. Клиническая картина не имеет характерных проявлений. Лабораторно - снижение СД 4. Продолжительность - несколько месяцев. Инкубационный период - несколько недель до нескольких месяцев. Стадия первичных проявлений продолжается от нескольких дней до 1-2 месяцев. Для этой стадии характерны симптомы банальной простуды, возможна лимфаденопатия. Стадия вторичных проявлений - от нескольких месяцев до 8-10 лет.Характеризуются генерализованной лимфаденопатией, повышением температуры, сомптома- ми простудных заболеваний и ангины.В сыворотке определяют антитела и снижение СД4 клеток. Поздняя ВИЧ-стадия - развитие оппортунистических инфекций: пневмоцистная пневмония, токсоплазмоз.кандидоз , поражение нервной системы ( ВИЧ энцефалоп атия,полиневропатии др).Затем развивается СПИД - как терминальная стадия ВИЧ -инфекции. Лабораторная диагностика Исследуемый материал: кровь. Вирусоскопический не используется. Вирусологический- вирус не культивируется на питательных средах. Для обнаружения антигена вируса в крови в инкубационном и раннем клиническом периоде, а также в поздней стадии ВИЧ - используют цепную полимеразную реакцию (ПЦР). Серологический-определение противовирусных антител ко всем антигенам вируса gp 41, gp120, р 24 в вестерн-блот (иммуноблот) тесте. Иммуноферментный метод (ИФА) - определение антител к вирусу, но не ранее 2-5 месяцев от начала заболевания. Лечение и профилактика Для подавления репродукции вируса - препараты, ингибирующие обратную транскриптазу: азидотимидин, тимазид, ретровир. Специфической профилактики (вакцины) не разработано. 108. Вирусный гепатит С. Вирусный гепатит В Вирусные гепатиты - группа полиэтиологичных антропонозных вирусных поражений печени с различными механизмами и путями передачи возбудителей. Клинико-морфологическая картина заболеваний характеризуется развитием воспалительного процесса в печеночной ткани, которая сопровождается желтухой, общетоксическими проявлениями, гепато- и спленомегалией. Причиной вирусного поражения печени могут быть разные вирусы (герпесвирусы, вирус коревой краснухи), но к возбудителям вирусных гепатитов относят только те вирусы, которые вызывают специфическое повреждение клеток печени, хотя они относятся к разным семействам и группам. Классификация возбудителей вирусных гепатитов. В настоящее время выделяют 8 типов возбудителей вирусного гепатита, обозначаемых от А до G и вирус TTV (transfussion transmitted virus). Наличие вирусного ге- патита F признают не все, а полная характеристика TTV-вируса, (предположительно парвовируса) открытого в 1997 году, отсутствует. Вред, наносимый здоровью человека вирусными гепатитами, огромен. Ежегодно заболевают около 1 млн человек. Эпидемиология. Выделяют 2 типа гепатитов. Вирусные гепатиты с парентеральным (кровяно-контактным) механизмом передачи (В,С,D.G.TTV). Вирусные гепатиты с энтеральным (фекально-оральным) механизмом (А,Е). Гепатит А. Эпидемиология. Источник инфекции - больной человек,начиная со второй половины инкубационного периода и в начале клинических проявлений. Инкубационный период до 1,5 месяца. Факторами распространения инфекции служат инфицированные фекалиями больных пищевые продукты и вода. Патогенез Первичная репликация вируса HAV происходит в эпителии слизистой тонкого кишечника и регионарных лимфатических узлах. Затем вирус попадает в кровь, и развивается кратковременная вирусемия. Далее через систему воротной вены он оседает в гепатоцитах, где и размножается. Это соответствует концу инкубационного периода. В начале преджелтушного периода возбудитель размножается в цитоплазме гепатоцитов, приводя к нарушению метаболических процессов и гибели клеток. Клиника Начало заболевания острое. Клинически резко выражены симптомы интоксикации - это соответствует преджелтушному периоду. Желтушная стадия. Развивается клеточный иммунный ответ, приводящий к гибели гепатоцитов с участием NK-клеток. Гуморальный - связан с синтезом Jg М - показателем остроты воспалительного процесса, затем синтезируются и IgG. Длительность заболевания 2-3 недели. Иммунитет пожизненный. Вирусоносительства и хронического гепатита не наблюдается. Лабораторная диагностика. Исследуемый материал: сыворотка крови и фекалии больного. 1) Вирусоскопический метод. Не применяется. 2) Вирусологический метод. Выявление АГ вируса в фекалиях имеет ограниченное значение, так как его можно обнаружить только в инкубационном и начале желтушного периодов. Для этого используют молекулярно-генетический метод ПЦР. Заражение культуры клеток лейкоцитов, для выделения вируса, используют в основном для эпидемиологического обследования контактных лиц. Вирус дает слабцй эффект цитопатологического действия. (ЦПД+) 3) Серологический метод. Выявление антител (IgM и IgG) в иммуноферментной реакции (ИФА) 4) Аллергический и 5) Биологический методы не используются. Лечение и профилактика. Специфическая этиотропная терапия не разработана.Лечение симптоматическое. Экстренная профилактика - сывороточный донорский человеческий иммуноглобулин. Плановая -убитая и рекомбинантная вакцины. Гепатит В Эпидемиология Вирусный гепатит В - инфекционное заболевание, характеризующееся особой передачей инфекции, связанной с контактом с кровью и тяжелым воспалительным поражением печени. Формы болезни - от носительства вируса до острой печеночной недостаточности, цирроза и рака печени. Исход заболевания определяется особенностями иммунного статуса и возрастом заболевшего. Вирус передается через кровь, от матери к ребенку во время беременности и контактным ( половым) путем. Вирус высокоустойчив во внешней среде. При комнатной температуре сохраняется 3 месяца, в холодильнике -6 месяцев, в замороженном виде -15-20 лет. Вирус теряет инфекционность при автокпавировании при температуре 120 через 45 минут. Патогенез Инкубационный период - от 40 до 180 дней. Вирус проникает в кровь, затем достигает гепатоцитов, в которых размножается. Размножение происходит только через 2 недели после инфицирования. Место первичной локализации вируса неизвестно. Клетки печени при этом не погибают. Во второй половине инкубационного периода вирус выделяется из различного исследуемого материала ( кровь, слюна, моча,фека лии,грудное молоко) В патогенезе имеется связь между началом клинических проявлений и появлением специфических антител. Учитывая отсутствие цитопатогенного действия вируса на клетки печени, патологический процесс начинается после распознавания его на мембранах гепатоцитов иммунокомпетентными клетками, то есть он обусловлен иммунными механизмами. Лабораторная диагностика Основной принцип лабораторной диагностики сводится к обнаружению антигенных маркеров вируса или антител к ним. Исследуемый материал: кровь. Антигенные маркеры вируса Основной антиген - частица Дейна, проявляющая выраженную инфекционность. Этот антиген включает HBsAg - самый поверхностный белок вируса, он связан с клеточной мембраной, постоянно циркулирует в сыворотке инфицированных лиц, появляется в крови через месяц после заражения, лишен инфекционных свойств, обладает выраженными иммуногенными свойствами (входит в состав вакцин). Антитела к HBsАg выявляют только через несколько недель от начала заболевания, титр которых в первые дни растет, а затем снижается. У людей без клинических проявлений наличие антител в сыворотке крови против него связано с невосприимчивостью к инфекции (постинфекционный или поствакцинальный иммунитет). Сердцевинный НВсог Аg - представлен единственным антигенным типом, в свободном виде в крови его не определяют, а только в составе частицы Дейна. Антитела к нему -важный ранний диагностический маркер инфицирования,особенно при отрицательном результате на наличие HBs Аg. Антитела к этому антигену также выявляются при хроническом гепатите. НВеАg- не входит в состав частиц Дейна, но связан с ними. Появляется в сыворотке сразу после появления HBsAg. Появление этого антигена в сыворотке крови расценивается как показатель активной инфекции или активации процесса при хроническом гепатите. Антитела к НВеАg в комплексе с lg G к НВсАд и HBsAg могут также свидетельствовать и о завершении инфекционного процесса. НВхАg - наименее изученный. Предположительно опосредует злокачественную трансформацию клеток печени. ДНК вируса появляется одновременно с другими АГ-вируса. метод вирусоскопический не используется. Для определения HBcorAg используют гистохимический метод, позволяющий при биопсии печени выявить его в ядрах пораженных гепатоцитов. метод вирусологический - определение вируса в исследуемом материале. HB×Ag определяют иммуноферментным (ИФА), методом флюоресцирующих антител (ИЛ), реакцией связывания комплемента (РСК), реакцией преципитации в геле. Этот антиген является основным серологическим маркером гепатита. При динамическом наблюдении позволяет прогнозировать течение болезни. ДНК вируса определяют, используя цепную полимеразную реакцию (ПЦР). 3. метод серологический. Определение антител ко всем антигенам вируса. Серологические реакции- ИФА, РСК, РИГА Основные маркеры течения вирусного гепатита в зависимости от клинических проявлений
Лечение и профилактика Средств специфической этиотропной терапии не разработано. Среди средств патогенетической терапии используют: ингибиторы ДНК полимеразы (ламивудин), альфа-интерфероны (реаферон, роферон), индукторы альфа интерферона ( циклоферон, амиксин и др.) Симптоматическое лечение. Плановая профилактика - вакцинация для создания активного иммунитета. Используют рекомбинантные вакцины ( Engerix В, Recombivax В), полученные методом генной инженерии на культурах пекарских дрожжей и инактивированные, содержащие инактивированный вирус гепатита В. Для пассивной иммунизации - специфический иммуноглобулин. Гепатит С Эпидемиология. Источник инфекции - больной человек с острым или хроническим течением болезни, носитель или реконвалесцент. Путь передачи - через кровь, реже половым путем. Инкубационный период - в среднем 50 дней. Патогенез Репродукция вируса в цитоплазме гепатоцита. Вирионы почкуются через мембрану эндоплазматического ретикулума или при лизисе клетки. Особенностью вируса гепатита С является высокая гетерогенность его генома, что обуславливает изменение состава антигенов вируса и «ускользание» вируса из-под иммунологического контроля организма. Иммунитет не формируется. Возможно повторное инфицирование. | ||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||||