Микробиология как наука. Медицинская микробиология как научная дисциплина, ее задачи и практическое применение в стомат практике
 Скачать 379.13 Kb.
|
|
Диагностика По своей морфологии спирохета Венсана практически неотличима от сапрофитов полости рта (Spirochaeta macrodenjtium). Она имеет в длину 8—20 мк и в ширину 0,3—0,4 мк. В окрашенных мазках завитки (4—5) представляются неправильными. Что касается Bact. fusiforme, то морфология ее такова. Это слегка изогнутая палочка, имеющая в длину 5—10 мк и в толщину около 1 мк, слегка утолщена в средней части и постепенно заостряющаяся к концам. Для Bact. fusiforme характерным является то, что ее цитоплазма неравномерно окрашивается. В центре эта палочка окрашивается слабее, в силу чего при микроскопировании создается впечатление двойной палочки. Оба микроба окрашиваются по Граму отрицательно. Спор не образуют. Чистые культуры Bact. fusiforme получаются при строго анаэробных условиях и среде, содержащей кровяную сыворотку или асцитическую жидкость. При посеве следует предварительно нагреть питательную среду до 37°. Культура имеет гнилостный запах. Лабораторная диагностика при язвенно-некротических процессах в полости рта основана на бактериоскопическом исследовании материала. Из присланного в лабораторию материала готовят препараты и окрашивают их водным фуксином или по Граму. При окраске по Романовскому в телах Bact. fusiforme хорошо видна зернистость. Сальварсанотерапия при фузоспирохетозах оказывается эффективной. Лечение Большое значение в терапии язвенно-некротического стоматита должно придаваться местному обезболиванию, которое достигается использованием мазей, примочек растворов анестетиков. В комплекс лечения должны входить ополаскивания полости рта антисептическими растворами - перекисью водорода, марганцовкой, антибиотиками (трихополом, пенициллином). Хороший результат даёт обработка повреждённой слизистой оболочки растворами протеолитических ферментов (трипсином, химотрипсином). При хирургической обработке операционного поля крючком или скальпелем удаляют некротизированные ткани. Желательно по возможности удалить раздражающие факторы (исключая корни разрушенных зубов). В комплексной терапии язвенно-некротического стоматита должно быть предусмотрено использование стимуляторов репаративных процессов – солкосерила, масла облепихи, витамина А. Патогенетическая терапия заключается в назначении противовоспалительных (диклофенака, аспирина) и гипосенсибилизирующих (димедрола, фенкарола, тавегила) препаратов. 101. Эпидемический сыпной тиф Риккетсиозы группа трансмиссивных острых инфекционных болезней, вызываемых риккетсиями; характеризуются лихорадкой, интоксикацией, поражением эндотелия мелких сосудов, сыпью и выраженными изменениями центральной нервной системы. Риккетсии - прокариоты, относятся к эубактериям ( имеют тонкую клеточную стенку), классу Proteobacteria. Наиболее важное медицинское значение имеют представители следующих родов: Rickettsia, Onentia, Ehrlichia, Coxiella, Bartonella (Rochalimaea). Риккетсии - грамотрицательные, мелкие, полиморфные микроорганизмы (кокковидные, палочковидные, нитевидные формы); являются облигатными внутриклеточными паразитами (паразитируют в цитоплазме и ядре клеток хозяина), ферментозависимы, на питательных средах не культивируются; обладают эндотоксином и гемолизинами Классификация риккетсий Группа сыпного тифа - эпидемический (вшивый) сыпной тиф (Rickettsia prowazekii), болезнь Брилла эндемический крысиный сыпной тиф (Rickettsia typhi) Группа клещевых риккетсиозов - клещевые пятнистые лихорадки, эрлихиозы; Группа лихорадок цуцугамуши (Orientia tsutsugamushi); Группа пневмотропных риккетсиозов - Q-лихорадка (Coxiella burnetii); Группа других риккетсиозов - траншейная (волынская) лихорадка (Bartonella quintana), болезнь кошачьих царапин (Bartonella henselae) и другие. Эпидемиология. Риккетсиозы подразделяются на антропонозы (эпидемический сыпной тиф, болезнь Брилла, траншейная лихорадка) и зоонозы (эндемический крысиный сыпной тиф, Q-лихорадка, лихорадка цуцугамуши, болезнь кошачьих царапин). Пути передачи: грансмиссивный (при разных риккетсиозах через укусы вшей, крысиных блох, клещей), при Q-лихорадке еще и воздушно-пылевой, контактный, алиментарный. Патогенез. Риккетсии внедряются в клетки крови, эндотелия кровеносных сосудов кожи, мозга и других органов. Под влиянием возбудителя (эндотоксина) происходит закупорка кровеносных сосудов из-за образования тромбов, вследствие воспаления, деструкция мелких сосудов, кровоизлияния, сыпь. Клиника. Жалобы на сильные головные боли, миалгии, лихорадку; при осмотре - наличие розеолезно-петехиальной сыпи, одутловатость и (иперемин лица, «кроличьи» глаза положительные симптомы щипка и жгутд. Для Q-лихорадки характерно поражение легких Лабораторная диагностика Исследуемый материал кровь, ликвор, моча, мокрота (в зависимости от поражений). Микроскопический метод. Возможна окраска риккетсий по методу Здродовского (аналог окраски по Цилю-Нильсену) - окрашиваются в красный цвет (обусловлено повышенным содержанием липидов в клеточной стенке), но не используется в диагностике риккетсиозов из-за трудности микроскопии исследуемого материала. Микробиологический метод не используют. Выделение чистой культуры проводят на живых обьектах: организм платяной вши, на культуре клеток, в курином эмбрионе, но не имеет диагностической ценности. Серологический метод Является основным методом диагностики риккетсиозов - выявляет антитела у больных в реакциях связывания комплемента (РСК), непрямой гемагглютинации (РИГА), реакции агглютинации риккетсий (реакция Вейгля), реакция Вейля-Феликса (неспецифическая, с антигеном Proteus vulgaris). Ig М - выявляют в разгар заболевания,lg G - при реконвалесценции или с первых дней болезни Брилла) Биологический метод. Заражение морских свинок для дифференциации анропонозов и зоонозов. Аллергический метод. Кожно-аллергическая проба со специфическим аллергеном в диагностике Q-лихорадки. Молекулярно-генетический метод (ПЦР). Лечение и профилактика. Этиотропная терапия - антибиотики тетрациклинового ряда. Специфическая профилактика сыпных тифов и Q-лихорадки проводится по эпидемиологическим показаниям живыми, убитыми или химическими вакцинами Неспецифическая профилактика заключается в проведении мероприятий по уничтожению вшей (борьба с педикулезом), блох, клещей, грызунов. Простейшие'>102. Простейшие Особенности размножения и строения органов движения позволили объединить патогенные для человека виды в 4 класса: класс I -Ffogellata (жгутиковые); класс II - Sporozoa (споровики); класс Ш - Sarcodina(саркодовые); класс IV - Infusoria (инфузории). Простейшие, или протисты, состоят из единственной эукариотической клетки. Снаружи тело простейших покрывает ригидная мембрана — пелликула. К ней прилегает внешний более плотный и гомогенный слой цитоплазмы —эктоплазма. У некоторых видов пелликула может содержать опорные фибриллы и даже минеральный скелет. Набор органелл, расположенных в более жидкой эндоплазме, идентичен клеткам многоклеточных животных организмов; исключением может быть наличие у некоторых видов нескольких ядер. Многие простейшие способны активно передвигаться за счёт псевдоподий(выростов цитоплазмы), жгутиков или ресничек. В неблагоприятных условиях жизненные процессы у простейших резко замедляются, они теряют органеллы и покрываются толстой и прочной оболочкой, образуя цисты. Патогенные простейшие представляют крайний случай паразитизма эукариотов в отношении организма-хозяина. Их паразитические свойства в основных чертах аналогичны таковым у паразитических прокариот — паразит использует хозяина как источник питания. У человека они способны вызывать различные острые (например, африканская сонная болезнь) и хронические (например, гиардиоз) заболевания. Жизненный цикл паразитических простейших нередко включает образование промежуточных форм в теле различных хозяев, что дает им возможность более эффективно инфицировать восприимчивые организмы. Для идентификации с помощью световой микроскопии простейших красят по методу Романовского-Гимзы или Райта (цитоплазма окрашивается в синий, а ядро — в красный цвет). МЕТОДЫ ОБНАРУЖЕНИЯ ПРОСТЕЙШИХ Выявление патогенных простейших основано на идентификации морфологических особенностей возбудителя и в значительной степени зависит от правильного взятия клинического материала и адекватной фиксации. Ошибки при проведении этих мероприятий могут привести к получению ошибочных результатов. МИКРОСКОПИЯ Поиск патогенных простейших обычно проводят в субстратах, являющихся средой их обитания -- испражнениях, крови. Испражнения Дли адекватного выявлении паразитов в ЖКТ необходимо исследовать не менее трёх проб, полученных в течение 10 суток. Для диагностики амебиаза этого может оказаться недостаточно, и при подозрении на это заболевание необходимо исследовать шесть проб, полученных в течение 14 суток. Следует избегать попадания в материал воды или мочи, губительно действующих на простейших. Если больному в диагностических целях вводили внутрь сульфат бария, минеральное масло, препараты висмута или проводили специфическую терапию, то за-бор испражнений следует проводить не ранее 8-х суток после последнего введения. Для выявления трофозоитов (подвижных форм) жидкие испражнения необходимо исследовать в течение 30 мин после получения; при более оформленном стуле эти исследования можно провести в течение часа; на более поздних сроках трофозоиты обычно разрушаются. При невозможности своевременного обследования в образцы вносят фиксирующие растворы, сохраняющие морфологию взрослых особей. Макроскопическое исследованиеможет выявить примесь крови и слизи (частый диагностический признак амебиаза). Выявление же самих паразитов проводят при светооптической микроскопии влажных нативных препаратов либо в окрашенных мазках. Микроскопия нативных препаратов. Небольшое количество испражнений наносят на предметное стекло, диспергируют в капле физиологического раствора, накладывают покровное стекло и исследуют под микроскопом на наличие трофозоитов (в жидкие испражнения физиологический раствор не вносят). Нативные препараты можно слегка докрашивать раствором Люголя, что облегчает выявление цист. Особенно внимательно необходимо исследовать кровь и слизь; желательно готовить отдельные препараты, не контаминированные (по возможности) фекальными массами. Методы накопления. Для выявления паразитов, присутствующих в незначительных количествах, применяют различные методы накопления. При исследовании кала наиболее часто используют седиментационный метод. Для исследования забирают каплю надосадочной жидкости, наносят на предметное стекло, где смешивают с равным объёмом физиологического раствора, накрывают покровным стеклом и микроскопируют. Смесь на предметном стекле можно подкрашивать раствором Люголя, раствор разрушает трофозоиты, но позволяет хорошо визуализировать ядра и включения гликогена в цистах. Микроскопия окрашенных мазков позволяет не только выявлять, но и дифференцировать простейших; окраску наиболее часто проводят гематоксилином и эозином по Хайденхайну. Кровь Капиллярную или венозную кровь помещают в пробирку с антикоагулянтом (например, с этилендиаминтетрауксусной кислотой); исследования необходимо проводить по возможности быстро. Обнаружение простейших проводят микроскопией толстых и тонких мазков. Толстые мазки готовят из больших объёмов крови, нанесённых на предметное стекло; их обычно окрашивают по Романовскому-Гимзе, чего обычно бывает вполне достаточно для выявления паразитов. Тонкие мазки готовят для облегчения морфологической дифференцировки паразитов крови, мазки обычно окрашивают по Романовскому-Гимзе или Райту. Образцы различных тканей Образцы различных тканей отбирают, учитывая биологию паразита и его типичную локализацию. Образцы кожных покровов окрашивают обычными гистологическими красителями и микроскопируют. Биоптаты лимфатических узлов, селезёнки, печени, аспираты костного мозга и СМЖ забирают при подозрении на трипаносомозы или лейшманиозы. Часть образцов микро-скопируют в виде нативных мазков, часть окрашивают по Романовскому-Гимзе или Райту. Также возможно окрашивание образцов различными гистологическими красителями, наиболее употребляемыми для изготовления препаратов из исследуемых тканей. ВЫДЕЛЕНИЕ ВОЗБУДИТЕЛЕЙ Выделение возбудителей проводят только в специализированных лабораториях, институтах и центрах; проводить эти мероприятия в обычных бактериологических лабораториях недопустимо. На специальных средах и культурах тканей можно выделять и культивировать практически все патогенные простейшие. СЕРОЛОГИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ Серологические исследования -- наиболее распространённые и доступные диагностические методы. Их часто проводят при подозрении на токсоплазмоз, амебиаз (РИГА, латекс-агглютинация), лейшманиозы (РИГА), трипаносомозы (РИГА, РСК) ,а также ИФА,РИА. Проводят также кожно- аллергические пробы для выявления ПЧЗТ. 1. Плазмодии малярии Относятся к роду Plasmodium. Паразитами человека являются четыре вида: P. vivax – возбудитель трехдневной малярии, P. malariae – возбудитель четырехдневной малярии, P. falciparum – возбудитель тропической малярии, P. ovale – возбудитель малярии-овале. Морфология и физиология. Различают две фазы развития малярийных плазмодиев. 1. Фаза полового размножения. Происходит в организме окончательно хозяина – комара рода Anopheles. Завершается образованием большого количества спорозоитов – длинных тонких одноядерных клеток, которые концентрируются в слюнных железах. При укусе комара спорозоиты попадают в кровь позвоночного хозяина. 2. Фаза бесполого размножения – шизогония. Осуществляется в организме промежуточного хозяина – человека. Протекает в две стадии: 1) экзоэритроцитарной шизогонии. Спорозоиты с током крови заносятся в печень, инвазируют ее клетки, в которых трансформируются в тканевые трофозоиты, а затем в тканевые шизонты. В результате деления тканевых шизонтов образуются тканевые мерозоиты, которые выходят в кровь; 2) эритроцитарной шизогонии. Мерозоиты внедряются в эритроциты. После разрушения эритроцитов мерозоиты выходят в кровяное русло. Часть паразитов подвергается фагоцитозу, другая заражает новые эритроциты, и цикл повторяется. Патогенез заболевания: выход в кровь эритроцитарных мерозоитов, малярийного пигмента, продуктов метаболизма паразитов и структурных компонентов эритроцитов приводит к развитию лихорадочной реакции. Она характеризуется цикличностью, соответствующей цикличности эритроцитарной шизогонии. Чужеродные белки плазмодиев вызывают анафилактическую реакцию. При этом происходят: 1) повышение проницаемости капилляров; 2) гиперплазия ретикулоэндотелиальных элементов селезенки; 3) угнетение гемопоэза; 4) появление аллергических симптомов (бронхита, бронхиальной астмы). В крови накапливаются IgM и IgG. Характерна смена антигенов плазмодиев в процессе инфекции. Отмечена низкая восприимчивость к тропической малярии у лиц с аномальным S-гемоглобином, поскольку эритроциты, содержащие такой гемоглобин, непригодны для развития этого паразита. Для малярии свойственна сезонность. Распространенность связана с наличием специфических переносчиков – комаров рода Anopheles. Диагностика: 1) микроскопия мазков крови больного, окрашенных методом Романовского—Гимза; 2) серодиагностика – реакции иммунофлюоресценции, пассивной гемагглютинации, иммуноферментный анализ. Этиотропная терапия: шизоцидным действием обладают хлорохин, амодиахин; гамонтоцидным действием – пириметамин, прогуанил, хиноцид, примахин. 2. Токсоплазмы Возбудителем токсоплазмоза является единственный вид – Toxoplasma gondii. Морфология и физиология. Размножение со сменой хозяев. Основной хозяин – кошка (в ее кишечнике образуются ооцисты), промежуточные хозяева – птицы, млекопитающие, человек. Путь заражения алиментарный (при употреблении термически плохо обработанного мяса зараженных животных). Стадии жизненного цикла: 1) эндозоиты (трофозоиты) и цистозоиты – вне– и внутриклеточные стадии, во время которых паразит находится в разных органах и тканях промежуточных хозяев (включая человека) и размножается бесполым путем; 2) мерозоиты – внутри– и внеклеточные формы, паразитирующие в эпителиальных клетках кишечника основного хозяина – кошки; размножаются посредством шизогонии; 3) микро– и макрогаметы – половые стадии развития, образующиеся в основном в хозяине-кошке; при слиянии мужских и женских гамет (соответственно микро– и макрогамет) возникает зигота, которая затем превращается в покоящуюся стадию – ооцисту; ооцисты выводятся во внешнюю среду с фекалиями кошки; 4) спорозоиты – инвазивная стадия, образующаяся в результате спорогонии внутри ооцисты вне организма основного хозяина. Эндозоиты – клетки размером 4–7 на 1,5–2 мкм, имеющие форму полумесяца со слабо структурированной цитоплазмой. В задней стенке клетки расположено ядро. Цистозоиты токсоплазм локализуются в цистах, что обеспечивает паразиту возможность длительной персистенции в организме промежуточного хозяина. Цисты располагаются внутриклеточно в головном мозге, поперечно-полосатой мускулатуре и других органах промежуточного хозяина. Эндоцисты быстро гибнут во внешней среде, сохраняются непродолжительное время в трупах и экскрементах носителей. Цисты более устойчивы. Патогенез: токсоплазмы обладают цитопатическим действием. Они способны проникать в ядро клетки и паразитировать в нем. Токсоплазмы поражают клетки соединительной, эпителиальной, нервной и мышечной тканей. Продуцируют токсин, который участвует в формировании микроочагов некроза. При размножении эндозоитов возникает воспалительный процесс. Различают: 1) врожденный токсоплазмоз (от матери плоду) – поражаются ЦНС, глаза; 2) приобретенный токсоплазмоз – различные клинические формы. В крови – IgM и IgG. Характерно формирование реакции гиперчувствительности замедленного типа. Диагностика: 1) серологические методы – РСК, РПГА, непрямой флюоресценции, иммуноферментного анализа; 2) выделение на лабораторных животных. Лечение: шизоцидным действием обладают хлорохин, амодиахин, гамонтоцидным – пириметамин, прогуанил, хиноцид, примахин. 3. Лямблии Относятся к роду Lamblia (жгутиковые), включающему в себя более 100 видов. Специфичным паразитом человека является вид L. intestinalis, обитающий в верхних отделах тонкого кишечника. Морфология и физиология. Длина паразита – 15 мкм, ширина – 7–8 мкм. Форма клетки грушевидная, заостренная к заднему концу. В передней части имеется присасывательный диск, при помощи которого лямблии плотно прикрепляются к эпителиальным клеткам тонкой кишки. В нижних отделах кишечника вегетативные стадии лямблии могут переходить в стадию цисты. Лямблии культивируются на питательных средах, содержащих экстракты дрожжеподобных грибов. Патогенез. Умеренная инвазия тонкого кишечника обычно не вызывает болезненных ощущений. Более выраженное заражение этими паразитами может приводить к тяжелым кишечным расстройствам. Проникая через желчный проток из двенадцатиперстной кишки в желчный пузырь, лямблии могут явиться причиной хронического холецистита. Патологические явления обычно проявляются при массивном заражении лямблиями лиц с ослабленной сопротивляемостью организма. У детей они наблюдаются чаще, чем у взрослых. Диагностика. Микроскопическое исследование нативных и обработанных раствором люголя препаратов, приготовленных из испражнений и дуоденального содержимого. Лечение: применяют акрихин и аминохинол. В полости рта: |